JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 3:01 dk. • April 28th, 2025
Tümör mikroçevresinin matrisini taklit eden hücre dışı polimer ve adezyon proteinleri içeren bir bazal membran matrisi ile kaplanmış düz tabanlı çok kuyulu bir plaka ile başlayın.
Pediatrik bir beyin tümöründen türetilen glioma hücrelerinin nörosferini içeren bir ortam tanıtın ve kuyuda merkezi olarak konumlandırıldığından emin olun.
Matris, nörosferin kuyuya bağlanmasını destekler.
Spesifik olmayan floresansı en aza indirmek için bir arka plan baskılayıcı reaktifi ekleyin.
Ardından, yeşil florofor konjuge anti-CD44 antikorlarını tanıtın.
Plakayı, hücrenin fizyolojik koşullarını koruyan bir inkübatör içinde bulunan canlı hücre görüntüleme sistemine aktarın.
Zamanla, glioma hücreleri adezyon proteinleri ile etkileşime giren hücre adezyon proteini CD44'ü eksprese eder.
Bu, hücre sinyal yolunu aktive eder ve nörosferden hücre göçünü kolaylaştırır.
Florofor konjuge anti-CD44 antikorları, glioma hücreleri üzerinde eksprese edilen CD44'e bağlanarak onları floresan yapar.
Nörosferden uzaklaşan yeşil floresan hücrelerin görünümü, glioma hücre göçünü doğrular.
Kuyular BMM ile kaplandıktan sonra bir P200 ucu kesin. Seçilen her kuyucuktan 50 mikrolitre hücre ortamı ve NS alın ve kaplı, düz, dipli bir
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin