Akut Fare Beyin Dilimlerinde Oksijen Tüketim Hızının Ölçülmesi

Sağlıklı ve nörodejeneratif farelerden alınan beyin dilimi zımbalarını örnek tutma ekranlarına yerleştirin.

Ekranları çevirin ve bir doku plakasına yerleştirin.

Sensör probları ile önceden kalibre edilmiş bir sensör kartuşu alın. Bileşikleri (piruvat, oligomisin, FCCP ve antimisin A) enjeksiyon portlarına yükleyin.

Kartuşu doku plakasına yerleştirin. Çalıştırmayı hücre dışı bir akı analizöründe başlatın.

Problar, dilimin oksijen tüketim oranını veya (OCR) ölçer.

İlk enjeksiyonla piruvat mitokondriye girerek elektron taşıyıcıları oluşturur.

Bu taşıyıcılar, elektron taşıma zincirinin veya (ETC) Kompleks I ve II'ye elektron bağışlayarak oksijen tüketimini ve OCR'yi artıran bir elektron transfer reaksiyonu başlatır.

Oligomisin, Kompleks V'yi inhibe eder, ATP sentezini durdurur ve OCR'yi azaltır.

Bir protonofor olan FCCP, proton gradyanını bozarak oksijen tüketimini ve OCR'yi artırır.

Antimisin A, Kompleks III'e bağlanır ve OCR'yi en aza indirerek ETC'yi durdurur.

OCR profillerini karşılaştırın.

Nörodejeneratif dilimlerde azalmış bir OCR, mitokondriyal bozukluğu gösterir.

Bir parça delinmiş beyin dokusunu emdirin ve dokuyu dikkatlice yakalama ekranının ağ tarafına yerleştirin. Ağ bir tarafa bağlı