JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 4:42 dk. • April 28th, 2025
Bir arka bacağı traş edilmiş, anestezi uygulanmış bir sıçan alın. Baldırın ortasından ayak bileğine kadar kesinti, kasları açığa çıkarır.
Tibial siniri ortaya çıkarmak için bağ dokusu tabakasını inceleyin.
Derinin altında deri altı bir tünel oluşturun. Yaralanmaya neden olmak için siniri kesin.
Kopan sinirin proksimal ucunu tünelden geçirin ve siniri deri altına yerleştirerek tünelin distal ucuna dikin.
Kesi kapatın, alanı temizleyin ve farenin iyileşmesine izin verin.
Transeksiyonu takiben, aksonlar ve miyelin kılıfları parçalandıkça sinir dejenere olur.
Denerve edilmiş Schwann hücreleri, enkaz temizliği için makrofajları çekmek için sinyal molekülleri salgılar, ardından kopmuş sinir, rejenerasyonu teşvik etmek için aksonal büyümeler gönderir.
Reinnerve etmek için uygun hedef yapılar olmadan, düzensiz aksonlar bir nöroma, bir akson kütlesi, Schwann hücreleri, kollajen lifleri ve kan damarları oluşturur.
Yenileyici aksonlar, yakındaki nosiseptörleri, ağrı sinyali veren duyusal nöronları uyaran molekülleri serbest bırakır ve nöroma ile ilişkili ağrı sinyallerine yol açar.
Dizini bulun ve bir neşter kullanarak arka pençenin orta kısmından ayak bileğine kadar arka pençenin medial tarafı üzerinde 2 ila üç santimetrelik uzunlamasına bir kesi yapın. Gerekirse, kas katmanları görünene kadar cildi ve deri altını mikro makasla daha fazla açın. Yüzeysel nörovasküler demeti, kas katmanları üzerinde serbestçe hareket edebilen iki ila üç beyaz, mor veya kırmızı çizgi olarak tanımlayın. Nörovasküler demeti sağlam tutun. Bu demetten posterioru inceleyin.
Ardından, gastroknemius kasları arasındaki fasyayı açmak için diseksiyon yapın. Kasların fasyası arasında, yüzeysel nörovasküler demetin yaklaşık üç katı büyüklüğünde olan tibial sinir ile daha derin nörovasküler demet bulunabilir. Tibial sinir tibial kemiğin hemen arkasında yer aldığından, tibial kemiği ek bir yer işareti olarak kullanın. Tibial siniri çevredeki vasküler demetlerden arındırmak için, tibial siniri künt bir şekilde hareket ettirin ve tibial siniri hareket ettirirken bir miktar gerilme gösteren açıkta kalan dokuyu kesin.
Tüm tibial sinir açığa çıktığında, pretibial cildin deri altı kastan diseksiyonuna kadar sinirin dehidrasyonunu önlemek için kas katmanlarını geriye yerleştirin. Pretibia cildini cilt altı kas tabakasından ayırmak ve cilt altı tüneli yapmak için cildi yukarıda tutun ve künt ucu künt bir mikrocerrahi aleti kullanarak cilde paralel dokuya doğru itin. Nöromanın test edileceği alanın kolay erişilebilirliği için tünelin ucunun ön veya yan olarak yerleştirildiğinden emin olun.
Ayak bileğine yakın distal uçta tibial siniri kestikten sonra, mikroskop büyütmesini 10x veya 16x olarak değiştirin ve ayak bileğine yakın yapılan kesiğe proksimal tibial sinirin epinöryumunu tanımlayın veya tibial sinirin daha proksimal bir çatallanması durumunda, ayak bileğine yakın yapılan kesiğe proksimalde hem medial hem de lateral plantar dalların epinöryumunu tanımlayın. Dikkatlice 8-0 Proksimal sinir ucunun epinöryumundan naylon süpürme işlemi yapılarak epinöryum cımbızla tutulur ve iğne sinir ile epinöryum arasına yaklaşık 0,5 milimetrelik bir ısırıkla sokulur.
Deri altı tünelin sonunda iğne ile deri altından bir ısırık alın ve siniri lateral olarak deri altı tünele transpoze etmek için dikişi çekin. Bir düğüm yaparak dikişi sabitleyin. Cilde nüfuz etmeden fiksasyonlu sinir ucuna koyu renkli 4-0 kalınlığında bir dikiş yerleştirin. Sütürün cilt dışında görünür olduğundan emin olun.
Pençeyi ve kasları hareket ettirdikten sonra sinirin yerinde kalıp kalmadığını kontrol edin. Sütür uçlarını, karık üzerinde 8-0'dan biraz daha uzun bir dikiş ucu ile kesin Dikiş. Mikroskobun büyütme oranını tekrar 6x'e değiştirin ve 8-0 kullanarak cildi intraepidermal dikişlerle kapatın. Dikiş. Pamuklu bir bez kullanarak cildi% 0.9 sodyum klorür ile nazikçe temizleyin.
Oda soğuksa, temiz bir kafesin bir kısmının altına bir ısıtma yastığı yerleştirin ve fareyi rahat bir pozisyonda bir kağıt havlunun altına kafese yerleştirin. Yiyecek ve suya kolay erişim sağlayın.