Koterizasyona Bağlı Oküler Hipertansiyon Sonrası Retinal Ganglion Hücreli Somaların Miktar Tayini

0 görüntüleme3:06 dk • April 28th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bir farenin gözünden izole edilmiş, kimyasal olarak sabitlenmiş bir retina alın.

Göz, korneayı çevreleyen bir kan damarı ağı olan limbal vasküler pleksusa ısıya bağlı hasar gösterir.

Bu hasar sıvı drenajını bloke ederek göz içi basıncını (GİB) artırır ve retinal ganglion hücresi (RGC) dejenerasyonuna neden olur.

Hücre ve nükleer zarları geçirgen hale getirmek için retinayı bir geçirgenleştirme solüsyonu ile tedavi edin.

Spesifik olmayan antikor bağlanmasını önlemek için bir engelleme solüsyonu uygulayın.

Engelleme çözümünü kaldırın.

Ağırlıklı olarak RGC'lerde eksprese edilen bir transkripsiyon faktörünü hedefleyen primer antikorları tanıtın.

Bağlanmamış antikorları çıkarmak için yıkayın.

Primer antikorlara bağlanan florofor konjuge sekonje sekonder antikorları tanıtın.

Bağlanmamış antikorları çıkarmak için yıkayın.

Çekirdekleri DNA bağlayıcı bir boya ile boyayın.

Retinayı yıkayın ve uygun bir montaj ortamı kullanarak bir cam slayt üzerine monte edin.

Retinayı epifloresan mikroskobu altında görselleştirin.

Hasarlı gözde kontrole kıyasla azalmış hücre yoğunluğu, artmış GİB'ye bağlı RGC dejenerasyonunu doğrular.

Retinaları izole ettikten sonra, iç retinayı yukarı bakacak şekilde 1 mililitre PBS içeren 24 oyuklu bir kültür plakasına aktarın. PBS içinde seyreltilmiş% 0.5 iyonik olmayan bir yüzey aktif madde ile yıkayarak dokuyu geçirgen hale getirin. Daha sonra, dokuyu hafifçe çalkalayarak oda sıcaklığında bir saat boyunca bloke edici çözelti içinde inkübe edin. İnkübasyon sırasında, BRM 3A birincil antikor çözeltisini hazırlayın ve 4 santigrat derecede saklayın.

Doku blokajından sonra, retinaları 200 mikrolitre primer antikor solüsyonunda 4 santigrat derecede 72 saat boyunca hafifçe çalkalayarak inkübe edin. Ardından, dokuyu PBS ile yıkayın. Dokuyu 200 mikrolitre ikincil antikor çözeltisi içinde oda sıcaklığında iki saat boyunca inkübe edin ve daha sonra floresan çekirdek boyama için 10 dakika boyunca nükleer karşı leke çözeltisi ile inkübe edin.

Üç PBS yıkamadan sonra, retinayı iki küçük fırça kullanarak, vitreus tarafı yukarı bakacak şekilde bir cam mikroskop lamına aktarın. Dorsal retinal kadranı mikroskop lamı üzerine yerleştirin. Son olarak, bir cam lamel üzerine 200 mikrolitre solmaya karşı önleyici montaj ortamı uygulayın ve mikroskobik analiz için düz monte edilmiş retina üzerine yerleştirin. 40 kat büyütücü objektif kullanan bir konfokal epi-floresan mikroskobu altında, retinal ganglion hücrelerini tahmin etmek için düz bağlantıları inceleyin.

06:35

Deneysel Glokom Manyetik Mikrokürelerin Göz Enjeksiyon Bağlı

İlgili videolar

0 Görüntüler

09:26

Bir Manyetik microbead Oklüzyon Modeli Farelerde Glokom Oküler Hipertansiyon Bağımlı tetikleyebilecek

İlgili videolar

0 Görüntüler

07:00

Manken Circumlimbal dikiş sıçanlar ve fareler tarafından indüklenen glokom

İlgili videolar

0 Görüntüler

12:06

Optik Sinir transeksiyonu: Santral Sinir Sistemi Yetişkin Nöron Apoptoz Bir Model

İlgili videolar

0 Görüntüler

09:07

Retina Ganglion Hücre Survival Eğitim Bir Optik Sinir Crush Yaralanma murin Modeli

İlgili videolar

0 Görüntüler

03:04

Bir Sıçan Modelinde Yüksek Göz İçi Basıncının İndüksiyonu

İlgili videolar

0 Görüntüler

08:30

Glokom uyaran bir de Prosedürü İn Vivo Rat Modeli ve Tüm montaj Retina Hazırlık

İlgili videolar

0 Görüntüler

13:12

Kısmi optik sinir transeksiyon Sıçanlarda: ikincil dejenerasyonu retina Ganglion hücrelerinin değerlendirmek için yeni bir operatif yaklaşım ile kurulan bir Model

İlgili videolar

0 Görüntüler

09:03

Farelerde Geri Dönüşümlü Silikon YağA Bağlı Oküler Hipertansiyon Modeli

İlgili videolar

0 Görüntüler

12:28

Proliferatif Olmayan ve Proliferatif Retinopatilerle Farelerin Tüm Mount Retinalarında Vasküler Parametrelerin Nicelemesi

İlgili videolar

0 Görüntüler

Son güncelleme: 22 Ağustos 2026