$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Nemli gazlı bez üzerine yerleştirilmiş fetüsleri içeren dıştan uterus boynuzları olan anestezi uygulanmış hamile bir sıçan alın.
Kan akışını kısıtlamak için açıkta kalan uterus arterlerine anevrizma klipsleri yerleştirin, bu da uterus damarlarının kararmasıyla kanıtlanmıştır.
Bu kısıtlama, fetüsleri oksijen ve besinlerden mahrum bırakarak hipoksik-iskemik durumlara neden olur ve merkezi sinir sistemi hasarına yol açar.
Rahim boynuzlarını düzenli olarak steril tuzlu suyla nemlendirin.
Oklüzyon döneminden sonra rahim boynuzlarını durulayın ve kan akışını yeniden sağlamak için anevrizma klipslerini çıkarın.
Her amniyotik kesenin amniyotik sıvısına bir lipopolisakkarit veya LPS ve boya karışımı enjekte edin, enjeksiyonu görsel olarak doğrulamak için boyayı kullanın.
Rahim boynuzlarını durulayın, periton boşluğuna geri koyun ve kesiyi kapatın.
Amniyotik sıvıda LPS, bağışıklık hücresi reseptörlerine bağlanarak proinflamatuar sitokinlerin salınımını tetikler.
Bu sitokinler fetal beyne ulaşır, mikroglial hücreleri aktive eder ve nöroinflamasyona neden olarak beyin hasarı ve fetal ensefalopati ile sonuçlanır.
Arterler izole edildiğinde, her damara 30 gauge sıçan anevrizması klipsi yerleştirin.
Klipsleri uygulamadan önce, çevredeki tüm dokunun tamamen temiz olduğundan emin olmak önemlidir. Klipsleri yerleştirirken künt forseps ile sabitleyin ve ardından paralel olarak yerleştirin. Nabzın durmasını gözlemlemek, tam hipoksi iskemisini sağlamak için kritik öneme sahiptir.
Tüm klipsler yerleştirildiğinde, proksimal ve distal nabızların durduğunu ve tek tek plasentalar da dahil olmak üzere uterus damarlarının koyulaştığını onaylayın. Daha sonra tüm cerrahi alanı gazlı bezle örtün ve dokuyu bir saat boyunca her 10 dakikada bir steril tuzlu su ile yıkayın. 60 dakika sonra gazlı bezi çıkarın ve tarlayı tekrar sulayın. Rahim boynuzları ve damarları yeterince nemlendiğinde, her bir anevrizma klipsini nazikçe çıkarmak için forseps kullanın, damarda travma oluşturmamaya ve doku bütünlüğünü korumaya özen gösterin.
Fetüsleri LPS ile tedavi etmek için, her bir amniyotik kesenin tabanı görünecek şekilde her bir amniyotik kesesi stabilize etmek ve döndürmek için künt forseps kullanın. Daha sonra, bir ultra ince 0.3 mililitre insülin şırıngasını LPS çözeltisi ile bağlı sekiz milimetre 31 gauge iğne ile yükleyin ve her plasental plakanın hemen önüne 100 mikrolitre çözelti enjekte edin. İğne çıkarılırken, herhangi bir sıvı sızıntısını durdurmak için amniyotik keseye doğrudan basınç uygulayın.
Amniyotik kesenin tabanına ultra ince 31 gauge iğnenin yerleştirilmesi, herhangi bir amniyotik sıvının kaçmasına izin vermeden uygun LPS iletimi için kritik öneme sahiptir.
Rahim boynuzlarını steril tuzlu su ile üç kez suladıktan sonra, boynuzları periton boşluğuna geri döndürmek için forseps kullanın. Daha sonra, bir kese içine veya içinden dikiş atmadan kaskulo fasyal tabaka kenarlarını yeniden yaklaştırmak için çalışan bir 3/0 ipek sütür kullanın ve ardından cildi başka bir çalışan 3/0 ipek sütür ile kapatın.