JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 2:36 dk. • April 28th, 2025
Anestezi uygulanmış bir sıçan alın.
Saç derisini tıraş et. Ardından, kornea hidrasyonunu korumak için göz jeli uygulayın.
Hayvanı stereotaktik bir çerçeveye sabitleyin ve cerrahi bölgeyi dezenfekte edin. Orta hat kesisi yapın ve kafatasını ortaya çıkarmak için geri çekin.
Prefrontal kortekse erişmek için sağ frontal hemisferde bir delik açın.
Delinmiş bölgenin üzerine glioblastoma veya beyin tümörü hücrelerinin süspansiyonunu içeren stereotaktik olarak yönlendirilmiş bir şırınga yerleştirin.
Bir pompa kontrolörü kullanarak, hücre süspansiyonunu prefrontal kortekse enjekte edin.
Enjekte edilen hücrelerin geri akışını önlemek için iğneyi yavaşça çekin. Ardından, delinmiş bölgeyi kemik mumu ile kapatın.
Cerrahi kesiyi dikin ve bölgeyi dezenfekte edin.
Fareyi kafesine geri koyun ve vücut ısısını korumak için kırmızı bir lamba kullanın.
Enjeksiyonu takiben, beyin tümörü hücreleri çoğalır, çevre dokuya sızar ve anjiyogenezi indükleyerek normal beyin fonksiyonunu bozar ve bir glioblastoma modeli oluşturur.
Anestezi uygulanmış 170 gramlık bir dişi, fisher F344 sıçanın beynini glioma hücreleri ile aşılamak için, önce ayak parmağı sıkışmaya yanıt vermeyerek sedasyonu onaylayın. Saçları göz hizasından kafatasının arkasına kadar çıkarın ve hayvanların gözlerine merhem sürün. Hayvanı stereotaktik bir cihazda hareketsiz hale getirin. Maruz kalan cildi povidon iyot ile dezenfekte edin ve kafatasını 2 santimetre orta hat kafa derisi kesisi ile ortaya çıkarın. Elmas matkap kullanarak, sağ frontal hemisferde bregmaya 1 milimetre, 2 milimetre arka ve 2 buçuk milimetre lateral delik açın.
Ardından, 29 gauge insülin şırıngasının iğnesini 5 mikro litre hücre süspansiyonu ile yükleyin. Ve hücreleri stereotaktik rehberlik altında kafatasının üç milimetre derinliğine enjekte etmek için bir mikro şırınga pompası kontrolörü kullanın ve iğneyi yavaşça çekin. Kesiği kemik mumu ile kapatın. Daha sonra cildi daha fazla povidon iyot ile dikin ve dezenfekte edin. Ve ameliyat sonrası hayvanın vücut ısısını stabilize etmek için kırmızı bir lamba kullanın ve tam iyileşmeye kadar izleyin.