$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Minimal invazivlik ile beyin görselleştirmesini sağlamak için ince bir kafatası tabakasına sahip bir kafatası penceresine sahip anestezi uygulanmış bir fareyi ele alalım.
Mikroskop altında, daha büyük damarlardan daha küçük damarlara kan akışına dayalı olarak bir arter tanımlayın.
Dolaşım yoluyla beyne ulaşan kuyruk damarına ışığa duyarlı bir boya enjekte edin.
Floresan yaymak için boyayı ışıkla uyararak kan akışının izlenmesini sağlar.
Fototromboz olarak bilinen pıhtı oluşumunu indüklemek için ışık yoğunluğunu artırın.
Boya, yüksek yoğunluklu ışığı emer, oksijenle reaksiyona girer ve endotel hücrelerine zarar veren reaktif oksijen türleri üretir.
Hasarlı hücreler, trombositlerin yapışmasına neden olan ve pıhtı oluşumunu başlatan aracıları serbest bırakır. Kandaki fibrin, ek kan hücrelerini hapsetmeye yardımcı olarak bir pıhtı oluşturur.
Kendisinden önce boya birikimi ile tespit edilen pıhtı, beyne giden kan akışını engeller.
Kesiği kapatın, enfeksiyonu önlemek için antibiyotik uygulayın ve ağrıyı azaltmak ve iyileşmeyi sağlamak için analjezikler uygulayın.
Fare mikroskopta kurulduktan sonra, mililitre başına 20 miligram yapay BOS'ta taze gül Bengal hazırlayın. Filtre karışımı sterilize edin ve deney tamamlandıktan sonra atın. Her zaman taze kullanılmalıdır.
Şimdi, kafatası penceresini 561 nanometrelik bir lazerle tararken, karışımın 0.1'ini kuyruk damarı yoluyla enjekte edin. 5 saniye içinde, boya kraniyal vaskülatürde kolayca görülmelidir. Yeterli boya enjekte edildikten sonra, tromboz için 40 ila 80 mikronluk bir damar seçin. Arterler, daha büyük damarların daha küçük damarlara akışına bağlı olarak damarlardan ayırt edilebilir ve bunun tersi de geçerlidir.
Şimdi, seçilen damarı lazerle çalıştırmaya hazırlanın. Bekleme süresini, kullanılan sistem için uygun olan her şeye yükseltin. Lazer gücünü %100'e yükseltin ve maksimum tarama hızıyla görüntü koleksiyonunu saniyede bir kareye ayarlayın. Zımba pıhtısı oluşana kadar fareyi tarayın. Genellikle bu yaklaşık beş dakika sürer. İdeal olarak, pıhtıyı oluşturmak için yalnızca bir görüş alanı taranmalıdır. Reklam verme amacını buna göre seçin. Pıhtı oluşmazsa, daha fazla boya kullanmayı deneyin.
Pıhtı oluştuktan sonra, fareyi görüntüleme alanından çıkarın ve diseksiyon mikroskobu altında ameliyatı tamamlamaya hazırlanın. İlk olarak, kanama olup olmadığını kontrol ederken halkayı dikkatlice çıkarın. Herhangi bir kanama meydana gelirse, deney sonlandırılmalıdır.
Ardından, 6-0 dikiş kullanarak insizyonu kapatın. Ardından, kesi hattına bir antibiyotik uygulayın. Ağrıyı hafifletmek için, üç gün boyunca deri altı buprenex enjeksiyonları sağlayın. İlk buprenex enjeksiyonunu uyguladıktan sonra, fareyi bir kurtarma odasına yerleştirin ve yürüyene kadar izleyin. Ardından, temizlenmesi gereken ev kafesine geri koyun. Boyuna görüntüleme metin protokolünde detaylandırılmıştır.