Lazer Kaynaklı Beyin Hasarı Sıçan Modelinde Kan-Beyin Bariyeri Bütünlüğünün Değerlendirilmesi

Anestezi uygulanmış bir kontrol faresi ve lazerle indüklenen beyin hasarı faresi modelini ele alalım.

Sağ hemisfere yapılan lazer uygulaması, hücrelere ve kan-beyin bariyerine veya kanı beyin dokusundan ayıran BBB'ye zarar verdi.

Beyne ulaşmak için sistemik dolaşımdan geçen kanüllü kuyruk damarına bir izleme boyası enjekte edin.

Boya plazma proteinlerine bağlanır ve hasarlı BBB yoluyla beyin dokusuna sızar.

Farelere ötenazi yapın.

Boyayı dolaşımdan temizlemek için fareleri kalbin içinden geçirin.

Beyni ayıklayın ve dilimleyin, dilimleri yaralı yarımküreden ayırın ve homojenize edin.

Proteinleri denatüre etmek için asidik bir çözelti ile muamele edin ve proteine bağlı boyayı serbest bırakın.

Boya içeren süpernatantı santrifüjleyin ve izole edin. Boya floresansını arttırmak için alkol ekleyin.

Solüsyonu bir mikro plakaya aktarın. Uyarılma üzerine, yaralı beyinde daha yüksek bir floresan yoğunluğu, lazerin neden olduğu BBB hasarını gösterir.

Kan-beyin bariyeri kırılma insidansını değerlendirmek için, lazerin neden olduğu yaralanmadan 24 saat sonra, kilogram salin çözeltisi başına 4 mililitre içinde seyreltilmiş% 2 Evans mavisi boya içeren bir şırınga yükleyin ve çözeltiyi kanüllü kuyruk damar