Nöral kök hücre aktivasyonu ve göçünü incelemek için minimal bir omurilik yaralanması modeli

Anestezi uygulanmış bir fare alın ve sırtını tıraş edin.

Torasik omurgayı destekleyecek şekilde konumlandırılmış rulo gazlı bez ile stereotaksik bir cihaza sabitleyin.

Cildi dezenfekte edin, dikey bir orta hat kesisi yapın ve cildi geri çekin.

Kas tendonlarını torasik omurgadan ayırın ve geri çekin.

Hedef omuru belirleyin, ardından çıkarmak için intervertebral eklemleri kesin.

Omuriliği açığa çıkarın ve orta hattın her iki tarafına bükülmüş bir iğne sokun.

İğne yerleştirilmesi, merkezi kanalı sağlam bırakırken, akson demetleri içeren dış omurilik tabakası olan beyaz cevherde yüzeysel yaralanmalar oluşturur.

İğneyi çıkarın, ardından kasları ve cildi dikin.

Hasarlı hücreler, dokuda yerleşik bağışıklık hücrelerini aktive eden sinyalleri serbest bırakır ve bu da merkezi kanalı çevreleyen nöral kök hücreleri veya NSC'leri aktive eder.

Aktive edilmiş NSC'ler yaralanma bölgesine göç ederek doku onarımına yardımcı olur.

Prosedüre başlamadan önce, anestezi uygulanmış bir farenin sırtından sırtın ortasından boynuna ve kulaklarına kadar kürkü çıkarmak için saç kesme makinesi kullanın. Fareyi stereotaksik bir cihaza sabitledikten sonra, vücudu ve omurgayı düzeltmek için kuyruğun tabanını hafifçe çekerken karnın altına dört ila beş parça rulo gazlı bez yerleştirin.

Torasik omurgayı desteklemek için torasik gazlı bez rulosunu fare karnından rostral olarak üst toraksa doğru itin. Ve kuyruğu ve uzuvları yıldız benzeri bir yönde sabitlemek için laboratuvar bandı kullanın. Maruz kalan cildi sıralı% 70 etanol ve povidon iyot çubukları ile dezenfekte ettikten sonra, her iki kürek kemiğinin orta noktasından torasik omurganın eğriliğine kadar hayvanın uzunlamasına eksenine paralel dikey bir kesi yapmak için 10 numaralı bir neşter bıçağı kullanın.

Yumuşak dokuyu ve omurga konturunu ortaya çıkarmak için cildi geri çekin ve supraskapular yağ yastığının alt sınırını belirleyin. Ardından, sırt kası tendonlarını omurgadan ayırmak için vertebral T5 ila T8 ve 9 kemiğin her iki tarafını dikkatlice ama zorla kesmek için neşteri kullanın. Ekartörleri, ekartörlerin dişleri omurganın her iki tarafındaki insizyon bölgesine yerleştirilecek şekilde yeniden konumlandırın ve geri çekilen kas katmanlarına çok fazla baskı uygulamadan, omurga yeterince yükselene kadar pozlamayı ayarlamak için her bir ekartörü genişletin.

Cerrahi mikroskop altında, omur kemiğini ortaya çıkarmak için omurganın üzerindeki artık kasları ve diğer yumuşak dokuları dikkatlice temizleyin, omurların dikenli sürecini dişli forsepslerle sıkıştırın ve çıkarılacak omurları belirlemek için forsepsleri hafifçe yukarı ve aşağı hareket ettirin. Daha sonra, bir çift kavisli, körelmiş makasın bir ucunu, açıkta kalan intervertebral foramenin her iki tarafına, eksize edilecek vertebral laminaya kaudal olarak yerleştirin ve bağlantı intervertebral eklemlerini iki taraflı olarak kesin. Daha sonra laminayı yukarı doğru kaldırın ve kemiği izole etmek ve çıkarmak için laminanın üst ekini kesin.

Vertebra laminasını keserken ve çıkarırken, alttaki omuriliğe zarar vermemek için makası her zaman yukarı doğru açılı tutmaya dikkat edin.

Dorsal orta hat damarı bir dönüm noktası görevi görürken, 30 gauge iğne ucunun 45 derecelik bükülmüş şaftını eğimli tarafı yukarı bakacak şekilde, omuriliğin dorsolateral yüzeyine 1 milimetre derinliğinde ve orta hattın her iki tarafına yaklaşık 0,5 milimetre yanal olarak yerleştirin. İğneyi kaudaldan rostral yöne yaklaşık iki milimetre hareket ettirin, böylece eğimin tüm uzunluğu kordona yerleştirilir. Ardından, iğneyi çıkarmak için girişin yolunu yeniden izleyin.

Yarayı kapatmak için ekartörü çıkarın ve orta hat boyunca yaralanmanın her iki tarafındaki sırt kaslarını birleştirmek için 6-0 emilebilir bir sütür kullanın ve üstteki cildi kapatmak için 4-0 ipek sütür kullanın.