JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 3:56 dk. • April 28th, 2025
Kimyasal olarak sabitlenmiş bir insan olmayan primat beyin bölümü ile başlayın.
Aldehit bazlı fiksatif, doku yapısını koruyarak proteinleri çapraz bağlar, ancak bazı reaktif aldehit kalıntıları bırakır.
Doku bölümünü çevreleyen kriyoprotektan tabakayı çıkarmak için yıkayın.
Reaktif aldehit gruplarını nötralize etmek için bir indirgeyici ajan ekleyin ve reaksiyon yan ürünleri üretin.
Bu yan ürünleri ve fazla azaltıcı maddeleri çıkarmak için yıkayın.
Spesifik olmayan antikor bağlanmasını önlemek için bir bloke edici solüsyon uygulayın.
Nöronal membran üzerindeki belirli bölgelerde eksprese edilen bir proteini hedefleyen birincil antikorları ekleyin.
Bağlanmamış antikorları çıkarmak için yıkayın.
Birincil antikorları hedef alan biyotinile ikincil antikorlar ekleyin.
Bağlanmamış antikorları çıkarmak için yıkayın.
İkincil antikorlara bağlanan avidin-biotin-peroksidaz kompleksleri ile kaplama.
Bağlanmamış kompleksleri çıkarmak için tekrar yıkayın.
Hidrojen peroksit ile birlikte kromojenik bir substrat ekleyin. Hidrojen peroksit varlığında, peroksidaz enzimi substratı oksitleyerek kahverengi çökeltiler oluşturur.
İlgilenilen bölgeyi içeren 50 mikron kalınlığındaki akrolein sabit insan olmayan prim
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin