JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 3:59 dk. • April 28th, 2025
Sabit ve geçirgen sıçan koronal doku kriyokesitleri içeren bir slayt alın.
Kontrollü bir boyama ortamı oluşturmak için bölümleri hidrofobik bir kalemle çizin.
Sonraki adımlarda reaktiflerin ve dokunun kurumasını önlemek için bölümleri bir nem odasına aktarın.
Spesifik olmayan bağlanma bölgelerini bloke etmek için bölümleri serum proteinleri ile tedavi edin.
Fazla serum proteinlerini çıkarmak için tampon ile durulayın.
Mikroglia ve nöronlar üzerindeki spesifik proteinleri hedef alan birincil antikorlarla inkübe edin.
Bağlanmamış primer antikorları çıkarmak için tampon ile yıkayın.
Primer antikorlara bağlanan florofor konjuge sekonje sekonder antikorlarla inkübe edin.
Bağlanmamış ikincil antikorları çıkarmak için tampon ile yıkayın. Ardından çift damıtılmış su ile durulayın.
Floresan sinyalini korumak için sulu montaj ortamı uygulayın, bir lamel yerleştirin ve kapatın.
İmmün etiketli mikroglia ve nöronları görselleştirmek için bölümleri bir floresan mikroskobu altında görüntüleyin.
Slaytların kenarlarını kurutun ve sıvının eşit bir şekilde kaplanmasını sağlamak ve kenar etkilerini azaltmak için slaytın kenarına pap kalemle sıvı itici bir kenarlık yapın. Ardından, her slayta PBS'de 300 mikrolit
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin