JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 3:36 dk. • April 28th, 2025
Beyin tümörü nörosferlerinin parafine gömülü bölümleri, tümöre özgü nükleer protein biyobelirteçleri sergileyen nöral kök hücre kümeleri ile bir slayt alın.
Parafini eritmek için ısıtın, ksilen kullanarak çıkarın ve azalan alkol konsantrasyonlarını kullanarak dokuyu yeniden sulandırın.
Biyobelirteçler üzerindeki epitopları maskelemek ve hücresel zarları geçirgen hale getirmek için deterjan içeren asidik bir tamponda ısıtın.
Durulayın, ardından endojen peroksidaz enzimlerini etkisiz hale getirmek için oksitleyici bir ajanla işlemden geçirin ve spesifik olmayan sinyalleri önleyin.
Spesifik olmayan bağlanma bölgelerini maskelemek için bir engelleme çözümü uygulayın.
Biyobelirteç epitoplarını hedef alan primer antikorlarla inkübe edin.
Durulayın, ardından birincil antikorlara bağlanan biyotin konjuge ikincil antikorlarla tedavi edin.
Biotin'e bağlanan peroksidaz enzimi ile konjuge avidin ile durulayın ve inkübe edin.
Bir kromojenik substrat ve bir oksitleyici ajan ekleyin.
Peroksidaz, substratı renkli çökeltilere dönüştürmek için ajanı kullanır ve biyobelirteç konumunu etiketler.
Çekirdekleri karşı boyayın, dokuyu alkolde kurutun ve biyobelirteç dağılımını görüntülemek için slaydı monte edin.
İ
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin