Preparation of Viral DNA from Nucleocapsids

Moriah L. Szpara; Yolanda R. Tafuri; L. W. Enquist

doi:10.3791/3151

Nucleocapsids gelen Viral DNA hazırlanması

JoVE Journal
Immunology and Infection

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Immunology and Infection

Preparation of Viral DNA from Nucleocapsids

Nucleocapsids gelen Viral DNA hazırlanması

Full Text

21,646 Views

12:45 min

August 16, 2011

DOI: 10.3791/3151-v

Moriah L. Szpara¹, Yolanda R. Tafuri¹, L. W. Enquist¹

¹Department of Molecular Biology,Princeton University

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Biz enfekte hücrelerden yüksek saflıkta herpesvirus nucleocapsid DNA izole süreci tanımlamak. Çözüm yakalanan son DNA ideal, yüksek verimlilik sıralama, yüksek sadakat PCR reaksiyonlar, ve yeni virüs rekombinantlar üretmek için transfections için uygun, yüksek konsantrasyon ve saflık.

Bu video, enfekte hücrelerden yüksek saflıkta viral nükleo kapsid, DNA izole etmek için bir prosedürü göstermektedir. İlk olarak, lipid membranlar, ekstraksiyonda ikili serbest kullanılarak denatüre edilir. Numune daha sonra viral nükleo kapsidleri peletlemek ve bunları daha hafif hücresel ve viral bileşenlerden ayırmak için ultrasantrifüj edilir.

Peletlenmiş nükleo kapsidlerden viral DNA'yı serbest bırakmak için deterjanlar ve proteinaz K eklenir. Daha sonra kalan tüm proteinleri uzaklaştırmak için ikili fenil kloroform ekstraksiyonları gerçekleştirilir. Son olarak, viral DNA çözelti içinde çökeltilir.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos