Name: Çok Renkli Sinir Devre Topografya Revealing (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-11-14T12:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 11 s
Description: Öğrenin, WGA-Alexa izleyicileri kullanarak farelerde sinir devrelerini canlı izleme yöntemini. Bu teknik, serebellum, korteks ve omurilikteki topografik projeksiyonların hızlı, çift yönlü görüntülenmesini sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma, başlangıç ​​fonu Yeshiva Üniversitesi Albert Einstein College of Medicine RVS için yeni bir araştırmacı tarafından desteklenmiştir.

<ol><li>Apps, R., Hawkes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebellar+cortical+organization%3A+a+one-map+hypothesis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Cerebellar cortical organization: a one-map hypothesis.</a> Nat. Rev. Neurosci. 10, 670-681 (2009).</li>
<li>Grishkat, H. L., Eisenman, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+the+spinocerebellar+projection+in+the+prenatal+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Development of the spinocerebellar projection in the prenatal mouse.</a> J. Comp. Neurol. 363, 93-108 (1995).</li>
<li>Mesulam, M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMesulam%2C+M+%22Tracing+neural+connections+with+horseradish+peroxidase%22">Tracing neural connections with horseradish peroxidase</a>. , Wiley. New York. (1982).</li>
<li>Reeber, S. L., Sillitoe, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patterned+expression+of+a+cocaine-+and+amphetamine+regulated+transcript+%28CART%29+peptide+reveals+complex+circuit+topography+in+the+rodent+cerebellar+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Neurology%22%5BJournal%5D)">Patterned expression of a cocaine- and amphetamine regulated transcript (CART) peptide reveals complex circuit topography in the rodent cerebellar cortex.</a> Journal of Comparative Neurology. , (2011).</li>
<li>Reeber, S. L., Gebre, S. A., Sillitoe, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescence+mapping+of+afferent+topography+in+three+dimensions%5BTitle%5D)+AND+%22Brain.+Struct.+Funct%22%5BJournal%5D)">Fluorescence mapping of afferent topography in three dimensions.</a> Brain. Struct. Funct. , (2011).</li>
<li>Sillitoe, R. V., Stephen, D., Lao, Z., Joyner, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engrailed+homeobox+genes+determine+the+organization+of+Purkinje+cell+sagittal+stripe+gene+expression+in+the+adult+cerebellum%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Engrailed homeobox genes determine the organization of Purkinje cell sagittal stripe gene expression in the adult cerebellum.</a> J. Neurosci. 28, 12150-12162 (2008).</li>
<li>Sillitoe, R. V., Vogel, M. W., Joyner, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engrailed+homeobox+genes+regulate+establishment+of+the+cerebellar+afferent+circuit+map%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Engrailed homeobox genes regulate establishment of the cerebellar afferent circuit map.</a> J. Neurosci. 30, 10015-10024 (2010).</li>
<li>Vig, J., Goldowitz, D., Steindler, D. A., Eisenman, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compartmentation+of+the+reeler+cerebellum%3A+segregation+and+overlap+of+spinocerebellar+and+secondary+vestibulocerebellar+fibers+and+their+target+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Compartmentation of the reeler cerebellum: segregation and overlap of spinocerebellar and secondary vestibulocerebellar fibers and their target cells.</a> Neuroscience. 130, 735-744 (2005).</li>
<li>Vogel, M. W., Prittie, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topographic+spinocerebellar+mossy+fiber+projections+are+maintained+in+the+lurcher+mutant%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Topographic spinocerebellar mossy fiber projections are maintained in the lurcher mutant.</a> J. Comp. Neurol. 343, 341-351 (1994).</li>
<li>Voogd, J., Broere, G., van Rossum, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+medio-lateral+distribution+of+the+spinocerebellar+projection+in+the+anterior+lobe+and+the+simple+lobule+in+the+cat+and+a+comparison+with+some+other+afferent+fibre+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Psychiatr.+Neurol.+Neurochir%22%5BJournal%5D)">The medio-lateral distribution of the spinocerebellar projection in the anterior lobe and the simple lobule in the cat and a comparison with some other afferent fibre systems.</a> Psychiatr. Neurol. Neurochir. 72, 137-151 (1969).</li>
<li>Wu, H. S., Sugihara, I., Shinoda, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Projection+patterns+of+single+mossy+fibers+originating+from+the+lateral+reticular+nucleus+in+the+rat+cerebellar+cortex+and+nuclei%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Comp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Projection patterns of single mossy fibers originating from the lateral reticular nucleus in the rat cerebellar cortex and nuclei.</a> J. Comp. Neurol. 411, 97-118 (1999).</li>
</ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

Biz başarılı bir akson ve dendrit, hızla gelişmekte olan ve erişkin farelerde sinir projeksiyonları etiketleme için bir roman floresan dayalı bir yaklaşım kullanarak izleme için gerekli cerrahi ve teknik detayları tarif var. WGA-Alexa kullanarak izleyiciler ve işaretleri, yüksek çözünürlükte desenli devre topoğrafyası ve üç boyutlu olarak analiz etmek için nasıl kullanılabileceğini gösteriyor. Birçok izleyiciler kolera toksin altbirim B Biocytin, Neurobiotin, Phaseolus vulgaris leucoagglutin...

<table border="1"><tbody><tr><td> Donanım / Reaktifler </td><td> Model / Katalog numarası </td><td> Şirket </td></tr><tr><td> Boncuk sterilizatör </td><td> Model 250 Kedi Steri. # 18.000-45 </td><td> Güzel Bilim Araçları </td></tr><tr><td> Cauterizer </td><td> Cat. # 18.000-00 </td><td> Güzel Bilim Araçları </td></tr><tr><td> Borosilikat cam kapilerleri </td><td> Cat. # 300.056 </td><td> Harvard Apparatus </td></tr><tr><td> Çift sahne Cam Mikropipet Çektirme </td><td> Model 001-PC-10 </td><td> Narishige </td></tr><tr><td> Mikrometre şırınga </td><td> Cat. # GS-1100 </td><td> Gilmont Aletleri </td></tr><tr><td> Küçük Hayvan Stereotaksik Enstrüman </td><td> Model 940-A </td><td> Kopf Enstrümantasyon </td></tr><tr><td> Elektrot Manipulator </td><td> Model 960 </td><td> Kopf Enstrümantasyon </td></tr><tr><td> Vetcare kamara </td><td> Cat. #340508 </td><td> Harvard Apparatus </td></tr><tr><td> Isıtma Pedi </td><td> Cat. # 341.241 </td><td> Harvard Apparatus </td></tr><tr><td> Leica DFC360 FX kamera </td><td> DFC360 FX </td><td> Leica </td></tr><tr><td> Leica DFC490 kamera </td><td> DFC490 </td><td> Leica </td></tr><tr><td> Leica DM5500 mikroskop </td><td> DM5500 </td><td> Leica </td></tr><tr><td> Leica DFC3000 FX kamera </td><td> DFC3000 FX </td><td> Leica </td></tr><tr><td> Leica MZ16 FA mikroskop </td><td> MZ16 FA </td><td> Leica </td></tr><tr><td> CY3 Filtre </td><td> Model # 11600231 </td><td> Leica </td></tr><tr><td> FITC Filtre </td><td> Model # 11513880 </td><td> Leica </td></tr><tr><td> A4 DAPI / UV filtresi </td><td> Model # 11504162 </td><td> Leica </td></tr><tr><td> Buğday agglutinin, Alexa Fluor 488 konjuge </td><td> Cat. # W11261 </td><td> Invitrogen </td></tr><tr><td> Buğday germ agglutinin, Alexa Fluor 555 konjuge </td><td> Cat. # W32464 </td><td> Invitrogen </td></tr></tbody></table>

Çok renkli sinir devre topografya revealing

Revealing Neural Circuit Topography in Multi-Color

Nöral devrelerin fonksiyonel topoğrafik haritalar halinde düzenlenmiştir. Karmaşık devre mimarisi görselleştirmek için, güvenilir bir şekilde birden fazla topografik projeksiyonlar küresel desenlendirme etiket bir yaklaşım geliştirdi. Beyincik nöral devrelerin düzenli düzenlemeyi incelemek için ideal bir model. Örneğin, spinoserebellar yosun tutmuş liflerinin bölmeli örgütü yosun tutmuş fiber desenlendirme eğitim için vazgeçilmez bir sistem olduğu kanıtlanmıştır. Yakın zamanda 555 ve 488 Alexa konjuge buğday tohumu agglutinin (WGA), gelişmekte olan ve erişkin farelerde spinoserebellar yosun tutmuş lif projeksiyonları izleme için kullanılabilir gösterdi (Reeber ark 2011). Biz sinir projeksiyonları etiketleme yapmak için WGA-Alexa tracerlerin arzu araçları üç ana özellikleri bulundu. İlk olarak, Alexa fluorophores yoğun ve parlaklık doğrudan izleme sonra wholemount görüntüleme için izin verir. İkincisi, WGA-Alexa tracerlerin geliştirilmesi ve yetişkin nöral projectio tüm yörünge etiketins. Üçüncüsü, WGA-Alexa izleyiciler, retrograd ve anterograd her iki yönde hızla taşınır. Burada, biz izleyiciler ve diğer gerekli araçlar, spinoserebellar izleme için ameliyat gerçekleştirmek için nasıl ve ne kadar iyi takip projeksiyonları üç boyutlu görüntü nasıl hazırlanacağını detaylı olarak açıklanmaktadır. Özet olarak, biz sadece beyincik değil, aynı zamanda, korteks, beyin sapı ve omurilik fonksiyonel haritaların kurum ve bağlantı deşifre için faydalı olacak bir adım-adım izleme protokolü sağlar.

Biz teslim izleyiciler için pratik bir rehber<em&gt; In vivo</em&gt; Ve farelerde başarılı nöronal devre analizi için gerekli adımları göstermek için bir model sistem olarak spinoserebellar yolu kullanabilirsiniz. Biz Alexa fluorophores konjuge buğday tohumu agglutinin (WGA) yararlanan çok yönlü izleme protokolü ayrıntılı olarak açıklanmaktadır.

Çok Renkli Sinir Devre Topografya Revealing

Sinir devreleri, fonksiyonel topografik haritalar şeklinde organize edilmiştir. Karmaşık devre mimarisini görselleştirebilmek için, güvenilir bir şekilde ... yapmak üzere bir yaklaşım geliştirdik.

Bu prosedür, nöronal devreleri izlemek için Alexa floroforlarına konjuge edilmiş buğday germen glutenini kullanan çok yönlü bir in vivo izleme protokolünü açıklamaktadır. İlk olarak, alt toraks bölgesine ve üst lomber bölgeye bir insizyon yapılır; fasya ve yüzeysel spinal kaslar kesilir. İkinci adım, dorsal laminektomi gerçekleştirmektir.Ardından, mikro elektrot hazırlanır ve mikro manipülatöre bağlanır. Bunu, sinirsel izleyicilerin omuriliğe basınçla enjekte edilmesi takip eder. Bu prosedürün son adımı, iyileşme sürecinde uygun ameliyat sonrası bakım sağlamak ve izleyicilerin hedeflenen traktuslar boyunca taşınması için yeterli süre tanımaktır.Sonuç olarak, immunofloresan mikroskopi aracılığıyla serebellum korteksi, beyin sapı ve spinal korddaki topografik haritaların organizasyonu ve bağlantılılığını gösteren sonuçlar elde edilebilir. Bu izleyicinin BDA veya W-G-A-H-R-P gibi mevcut izleyicilere göre temel avantajı, WGA Alexa izleyicilerin izleme işleminden hemen sonra tüm mount görüntüleme için yeterince parlak olmasıdır. Bu yöntem, kortikal, serebellum, beyin sapı ve spinal sistemlerin içindeki ve arasındaki çoklu topografik projeksiyonların küresel örüntüsünün altında yatan mantığın ne olduğu gibi, sistem nörobilimi alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. İşleme başlamadan önce.Tüm işlemlerin iacuc kılavuzlarına uygun olduğundan, cerrahi işlem için steril bir alanın bulunduğundan ve kullanılacak tüm aletlerin sterilize edildiğinden emin olun. Hayvana onaylanmış bir anestezik uygulandıktan sonra cerrahi operasyon boyunca steril cerrahi teknikler uygulanmalıdır; parmak sıkıştırma testi yaparak uygun bir anestezi düzeyine ulaşıldığından emin olun. Hayvan tamamen anestezi altına girdiğinde pedal refleks ortadan kalkmış olmalıdır.Operasyon yapılacak bölgenin üzerindeki tüyleri tüy tıraş makinesi ile tıraş edin. Ardından, hayvanı steril bir gazlı bez üzerine, içeriden dışarıya doğru dairesel bir hareket kullanarak sırt üstü yatırın. Tıraş edilen bölgeyi iki set alkollü mendil, ardından %70 alkollü Betadine ile silin.Ardından alkollü mendillerle bir kez daha temizleyin ve hayvan uygun şekilde hazırlandıktan sonra, üzerine küçük bir delik açılmış steril bir gazlı bezi yerleştirerek cerrahi alanı net bir şekilde belirleyin. Bu şekilde cerrahi işleme geçin ve uygun steril cerrahi tekniği uygulayın. Pens kullanarak cildi kaldırın ve alt torasik üst lomber bölgenin hemen üzerindeki orta hattan makasla bir insizyon yapın.Gerekiyorsa fasyayı ve yüzeysel spinal kasları kesin, kan damarlarını koterize ederek herhangi bir kanamayı durdurun. Ardından, artiküler çıkıntı ile dorsal spinal çıkıntı arasındaki orta noktayı belirleyin ve vertebra kolonunun her iki tarafındaki laminayı buradan kesin. Sonrasında, alt torakal veya üst lomber spinal kordun bir veya iki segmentindeki spinöz çıkıntıları kaldırarak dorsal laminektomi gerçekleştirin.Bir mikrometre şırınga kullanarak, havuzlanmış cam pipeti izleyici ile doldurun. Ardından cam mikro elektrodu bir mikro manipülatör üzerinde yerine sabitleyin. Sonrasında iğneyi reaktiflerle doldurun.Havuzlanmış pipeti, omuriliğin alt torasik üst lomber bölgesine 0,1 ila 0,5 milimetre derinliğinde yerleştirin. Omuriliğin orta hattı ile lateral kenarının tam ortasına, %0,5 fast green ile desteklenmiş PBS içerisinde %2'lik buğday aglutinin LOR konjugatı, buğday germ aglutinin, yaban turpu peroksidaz konjugatı veya %10 biotinillenmiş dekstran amin'den yaklaşık 0,5 mikrolitreyi üç ila beş dakikalık bir süre boyunca basınçla enjekte edin. İzleyici madde pipetten kolayca çıkmıyorsa, dokuda küçük bir cep oluşturmak için ucu yavaşça geri çekin.Ardından, mikroenjeksiyon tamamlandıktan sonra tekrar enjekte etmeyi deneyin. Cildi yara klipsleri ve doku yapıştırıcısı ile nazikçe kapatın. Sonra hayvanı, ısıtma pedinin olduğu bir iyileşme haznesine yerleştirin.Solunum hızını izleyin ve hayvanın hareket etmeye çalıştığına dair belirtileri kontrol edin. Hayvan anesteziden ayıldıktan sonra onu ana kafesine geri yerleştirin; ad libitum su ve gıda ile gerektiğinde analjezikler sağlayın. Ağrı, rahatsızlık veya enfeksiyon belirtilerinin yanı sıra hayvanların yeterli düzeyde beslenip beslenmediğini ve su içip içmediğini düzenli olarak kontrol edin; buğday gluteni ve konjugat izleyiciler enjekte edilen hayvanlar sakrifiye edilir.Mikroenjeksiyondan 24 saat sonra. BDA, nöral projeksiyonları tam olarak izlemek ve dolayısıyla spinoserebellar projeksiyonların eksiksiz haritalanmasını sağlamak için genellikle daha uzun hayatta kalma süreleri gerektirir. Bu hayvanlar yaklaşık 11 gün sonra sakrifiye edilir.Buğday ruşeymi glutenin Alexa izleyicileri alt torasik üst lomber spinal korda enjekte edildi. Bu şema, buğday ruşeymi glutenininin başlangıç ve bitiş noktalarını göstermektedir. Alexa 555 ile işaretlenmiş spinoserebellar nöronlar.Bu şekil, yetişkin spinal kordun alt torasik üst lomber bölgesine wheat germ agglutinin Alexa 555 verilmesinden sonraki enjeksiyon bölgesini göstermektedir. Bu bütün montaj görüntüsü, wheat germ agglutinin enjeksiyonu sonrası anterior lobları göstermektedir.Alexa 555, spinal kordun alt torakal üst lomber bölgesine enjekte edilmiştir. Lomber seviyeler Roma rakamlarıyla belirtilmiştir. Burada, bu koronal doku kesitinde görüldüğü üzere, buğday germen gluteninin Alexa 555 antegrard izlemesinin spinoserebellar traktusta tanımlanmış yosunsu lif bantlarını ortaya çıkardığını görmekteyiz.Fare serebelluminin bu şeması, spinal serebellumun genel paternini özetlemektedir. Mossy fiber bantları; lumbar spinal kordun sağ tarafına Alexa 555 ile işaretlenmiş wheatgermagluten ve posterior LOE'ler üzerinden kesilen koronal bir doku kesitinde görüldüğü üzere, sol taraftaki aynı segmente Alexa 488 ile işaretlenmiş wheatgermagluten enjekte edilerek oluşturulmuştur.Her iki Weger aglutinin Alexa izleyicisi de serebelluma taşınmış ve temel olarak granül hücre tabakası (GCL olarak etiketlenmiştir) içinde yer alan yosunsu lif terminallerinin belirgin alt kümelerini başarıyla etiketlemiştir. Weger aglutinin Alexa izleyicileri, nöronların ve projeksiyonların üçlü etiketlemesi için immünohistokimya ve histoloji ile kombinasyon halinde kullanılabilir. Burada, Weger Aglutinin Alexa 5 55, labial üçteki yosunsu lif terminallerine çökmüştür. Kutulu bölgenin bu yüksek büyütmeli görüntüsü, yosunsu lif terminallerinin net etiketlemesini göstermektedir.Zein two boyamasının bu görüntüsü, Lole üçte bir dizi bikini hücresi şeridini ortaya çıkarmaktadır. Kutulu bölgenin bu yüksek büyütmeli görüntüsü, bikini hücresi tabakasındaki ve moleküler tabakadaki bikini hücrelerinin net olarak işaretlendiğini göstermektedir. Burada DPI boyaması nöronal ve glial çekirdekleri ortaya çıkarmaktadır.Kutulu bölgenin bu yüksek büyütmeli görüntüsü, çekirdek bakımından zengin granüler hücre tabakasının ve basket hücre tabakasının yoğun şekilde işaretlendiğini ve moleküler tabakada daha seyrek işaretleme olduğunu göstermektedir. Buradaki görüntü, aferent bantların, basket hücre çizgilerinin ve genel sitomimarinin Wheatgerm Agglutinin, Alexa 555 serin iki ve DPI ile üçlü işaretlemesini göstermektedir. Son olarak, kutulu bölgenin bu yüksek büyütmeli görüntüsü, bu tekniğin beyin yapılarının sitomimarisini ortaya çıkarma gücünü açıkça göstermektedir.Bu teknik yeterince öğrenildiğinde, düzgün bir şekilde uygulandığında hayvan başına 20 dakikada gerçekleştirilebilir. Bu prosedürü uygularken, dokunun kesimden hemen sonra görüntülenmesinin önemli olduğunu unutmamak gerekir. Kesimden sonraki iki gün içinde görüntüleme yapmak da bu prosedürün ardından işaretlenmiş fiberlerin ve terminallerin başarıyla görüntülenmesine olanak tanır.Genetik olarak tanımlanmış hücre popülasyonlarının projeksiyon ve sonlanma modelleri nelerdir gibi ek soruları yanıtlamak için genetik soy takibi gibi diğer yöntemler uygulanabilir.

revealing-neural-circuit-topography-in-multi-color

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Farklı kortikal tabaka halinde ağlar, duyusal bilgileri kodlamak nasıl kortikal devre anlayışımızın temel bir konudur. Burada, kortikal katmanları belirlemek için tek birimler ve yerel alan potansiyelleri ve mevcut analizleri kaydetmek için multi-contact laminer elektrotlar kullanan elektrofizyolojik teknikler açıklanmaktadır.

Multi-contact kullanarak Yerel Ağ İşleme incelenmesi Laminer Elektrot Kayıt

Bu kağıt sınırlı inhibitör nöron toplulukları GFP ifade transgenik farelerin tüm hücre kayıtları ile photostimulation lazer tarama birleştiren bir yaklaşım getirmektedir. Tekniği spesifik inhibitör kortikal nöronların yerel sinaptik devrelerin kapsamlı haritalama ve kantitatif analiz için izin verir.

Lazer Tarama Photostimulation tarafından inhibitör nöronal devreler Haritalama

Nöral devreler topografik spesifik moleküler profilleri ile fonksiyonel bölme halinde düzenlenmiştir. Burada, çok yönlü bir wholemount immünohistokimyasal yaklaşımını kullanarak global beyin topoğrafya ortaya çıkarılması için pratik ve teknik adımları sağlar. Bu iyi anlaşılmış cytoarchitecture ve beyincik devre kullanarak yöntemin yardımcı göstermektedir.

Revealing Kompleksi Beyin Topografya Wholemount İmmünohistokimya

Bir yöntem olup, önceden belirlenmiş neokorteks fonksiyonel mikro etki floresan boyalar ile nöronlar etiketleme için açıklanmıştır. İlk olarak, iç sinyal optik görüntüleme fonksiyonel bir harita elde etmek için kullanılır. Sonra iki foton mikroskopi haritanın bir mikro-etki alanı içindeki etiket ve resim nöronlar için kullanılır.

Belirli Fonksiyonel İçsel Sinyal birleştiren tarafından neokorteks Mikro-etki ve İki foton Görüntüleme nöronlar Hedefli Etiketleme

Bu protokol değiştirilmiş kuduz virüsü floresan işaretlerini ifade ve bağımsız, tarafsız küme farklı nöronal alt sınıfları arasında morfolojik metrik kapsamlı karakterizasyonu olanak analizleri ile retrograd enfeksiyonu takiben etiketli seçici nöronal popülasyonlarının büyük ölçekli rekonstrüksiyon açıklar.

Morfolojik Ölçümler dayanarak büyük ölçekli yeniden düzenlemesi ve Bağımsız, Unbiased Kümelenme Seçici Populasyonlarında Nöronlar Sınıflandıran

Burada, serbest hareket eden farelerde çoklu korteks tabakaları boyunca hücresel çözünürlük ile büyük ölçekli Ca 2+ görüntülemenin gerçekleştirilmesi için bir prosedür sunuyoruz. Yüzlerce aktif hücre, implante edilmiş bir prizma probu ile birleştirilmiş minyatür, başa monte mikroskop kullanarak eş zamanlı olarak gözlemlenebilir.

Çok Katlı Kortikal Ca<sup&gt; 2+</sup&gt; Prizmatik Problar ve Minyatür Floresan Mikroskopi ile Serbestçe Hareketli Fare Görüntüleme

Bir kafa plakası ve hem tek hem de iki fotonlu mikroskoplarla uyumlu bir optik tasarımla entegre edildiğinde, mikroprizma mercek, kafa sabit durumlarda iyi kontrol edilen deneyler veya serbestçe hareket eden hayvanlarda doğal davranışsal görevler dahil olmak üzere çeşitli koşullar altında dikey bir sütundaki nöral tepkileri ölçmede önemli bir avantaj sunar.

Serbest Hareket Eden ve Kafası Sabit Hayvanlarda Mikroprizmalar Kullanılarak Tanımlanmış Nöral Popülasyonların Uzun Süreli Görüntülenmesi

Neokorteksteki birincil duyusal alanlar, gelişim sırasında benzersiz spontan aktiviteler sergiler. Bu makale, yenidoğan farelerde alana özgü senkron aktiviteleri in vivo olarak analiz etmek için bireysel nöron aktivitelerinin ve birincil duyusal alanların nasıl görselleştirileceğini açıklamaktadır.

Yenidoğan Fare Duyusal Korteksinde Tek Nöron Çözünürlükte Spontan Aktivitenin İn vivo Görselleştirilmesi

Burada, özellikle hipokampal, koku soğanı devreleri ve insan nöronal ağlarında, büyük ölçekli nöronal toplulukların hesaplama dinamiklerini araştırmak için HD-MEA'yı kullanıyoruz. Hesaplama araçlarıyla birlikte uzay-zamansal aktiviteyi yakalamak, nöronal topluluk karmaşıklığı hakkında içgörüler sağlar. Yöntem, beyin fonksiyonlarının anlaşılmasını geliştirir, potansiyel olarak biyobelirteçleri ve nörolojik bozukluklar için tedavileri tanımlar.

CMOS Entegre Yüksek Yoğunluklu Mikroelektrot Dizisi Üzerinde Multimodal Büyük Ölçekli Nöronal Topluluk Dinamiğinin Kaydedilmesi ve Analizi

Burada, sıçanlarda ve farelerde yüksek yoğunluklu mikro-elektrokortikografi (μEcoG) kaydı için cerrahi, implantasyon ve kayıt yöntemleri dahil olmak üzere iki protokol sunuyoruz. μECoG kayıtları, sıçan işitsel korteksinde laminer politrod kaydı veya fare somatosensoriyel korteksindeki nöral aktivitenin optogenetik manipülasyonu ile kombinasyon halinde gerçekleştirilir.

Kemirgenlerde Laminer Politrodlar ve Optogenetiğin Mikro Elektrokortikografi ile Entegre Edilmesi ile Kortikal İşlemenin Çok Ölçekli Araştırılması

Öğrenin, WGA-Alexa izleyicileri kullanarak farelerde sinir devrelerini canlı izleme yöntemini. Bu teknik, serebellum, korteks ve omurilikteki topografik projeksiyonların hızlı, çift yönlü görüntülenmesini sağlar.

Çok Renkli Sinir Devre Topografya Revealing

Daha fazla video keşfet