Siyatik Sinir Sıçanlarda Ağrı aşırı duyarlılık Test Kronik daraltma

Bu prosedürün genel amacı, kronik daralma, siyatik sinirin yaralanması, yaygın olarak kullanılan bir kemirgen nöropatik ağrı modeli gerçekleştirmek ve ortaya çıkan ağrı davranışlarını kantitatif olarak ölçmektir. Bu, siyatik sinirde bir daralma yaralanması oluşturmak için önce orta uyluk seviyesinde açıkta kalan siyatik sinirin etrafına dört kromik bağırsak ligatürü yerleştirilerek gerçekleştirilir. Daha sonra, bir von fray anthes kullanarak mekanik uyarana pençe çekme eşiğini ve bir plantar analjezi ölçer kullanarak termal uyarana pençe çekme gecikmesini kantitatif olarak ölçerek istenen zaman noktalarında arka pençedeki ağrı davranışlarını izleyin.

Sonuç olarak, hem mekanik hem de termal uyaranlara karşı uyarılmış geri çekilme tepkilerinin ölçümü yoluyla mekanik ve termal ağrının, yaralı arka pençenin aşırı duyarlılığının varlığını gösteren sonuçlar elde edilebilir. İlk olarak bene ve Z tarafından geliştirilen bu periferik sinir yaralanması yöntemi, nöropatik ağrının üretildiği periferik ve merkezi mekanizmaların neler olduğu gibi kronik ağrı alanındaki temel soruları yanıtlamamıza yardımcı olabilir. Bu tekniğin etkileri, nöropatik ağrının tedavisine kadar uzanır, çünkü bu model ağrı aşırı duyarlılığını azaltmak için yeni stratejileri incelemek için temel sağlar.

Genel olarak, bu yönteme yeni olan bireyler mücadele edecektir, çünkü cmic bağırsak dikişlerini statik sinirin etrafına yerleştirmek ve yeterli ancak aşırı olmayan sinir hasarına neden olmak için uygun bir sıkılık özellikle zordur. Bu işleme başlamak için, cerrahi çalışma yüzeyini% 70 etanol ile dezenfekte edin ve daha önce otoklavlanmış steril aletleri gazlı bez zımbaları ve swabları hazırlayın. Daha sonra, fareyi% 5 ISO flor kullanarak bir indüksiyon odasında uyuşturun.

Ameliyat sırasında özel yapım bir yüz maskesi ile %2 ISO flor verin. Bundan sonra, farenin sol arka bacağını tıraş edin, ardından hayvanı 37 santigrat derecede termo ayarlı bir ısıtma matına yerleştirin. Gözlere kayganlaştırıcı oftalmik merhem sürün.

Daha sonra kromik bağırsak süttürünü yaklaşık üç santimetrelik küçük parçalar halinde keserek hazırlayın, steril tuzlu suya batırın. Ardından, traş edilen alanı üç alternatif alkol ve iyot çözeltisi uygulamasıyla sterilize edin. Hayvan göğüs kafesi üzerinde yatarken, sol arka bacağını kaldırın ve ayaktaki maskeleme bandını kullanarak uyluk kemiğini omurgaya 90 derece tutun.

Daha sonra uyluk kemiğinin yaklaşık üç ila dört milimetre altındaki cilde bir kesi yapın. Bağ dokusunu keserek cildi kesiği çevreleyen kastan ayırın. Gluteus superficialis ile biceps fems kasları arasındaki bağ dokusunu kesmek için bir çift künt makas kullanın.

Daha sonra, siyatik sinirin net bir şekilde görüntülenmesini sağlamak için iki kas arasındaki boşluğu genişletmek için bir ekartör kullanın, ardından siyatik sinirin yaklaşık 10 milimetresini çevredeki bağ dokusundan nazikçe serbest bırakmak için forseps ve mikro makas kullanın. Her ligatür için siyatik sinirin trifurkasyonuna proksimaldeki ilk ligatürü bağlayın. Tek bir gevşek döngü ile başlayın.

Daha sonra iki ucu ilmeğin yakınından kavrayın ve ilmek zar zor oturana ve bağ sinir boyunca kaymayana kadar çekin. Ardından ilmeği uygun konumunda tutun ve düğümü tamamlamak için ilk ilmeğin üzerine ikinci bir ilmek yerleştirin. Daha sonra, ligatürün gevşek uçlarını yuvarlak bir milimetreye kesin, sinirin daralması minimum olmalıdır.

Kalan üç bitişik harf için adımları, her bir ek bitişik harfi bir öncekinden bir milimetre daha yakın bağlayarak tekrarlayın. Ayrıca ameliyatın sonunda minimum daralma ile kas tabakasını kapatmak için dikişler ve cildi sabitlemek için zımba kullanın. Ardından, yarayı sterilize etmek için iyot çözeltisi kullanın.

Anestezi iyileşme süresi boyunca hayvanı yakından gözlemleyin ve düz kağıt yataklı ayrı bir kafeste iyileşmesine izin verin. Deneye başlamadan önce. Hayvanı birkaç gün boyunca günlük olarak kullanın.

Daha sonra davranış testinden önce, fareyi muhafazada alışkanlık haline getirin. Test ortamı sessiz tutulmalı ve sabit sıcaklık ve nem seviyeleri ile iyi kontrol edilmeli ve her test oturumu günün benzer bir saatinde gerçekleştirilmelidir. Test gününde mekanik çekilme eşiğini incelemek için, deneyden 15 ila 30 dakika önce dinamik bir plantar von fray anter kullanarak fareyi yükseltilmiş ağ zemin test kafesine yerleştirin, dokunma stimülatörü ünitesini filament ile doğrudan arka pençenin orta ekici yüzeyinin altına yerleştirin ve başlat tuşuna basın.

Bu, arka pençenin ekici yüzeyini artan bir kuvvetle mekanik olarak uyarmak için filamenti kaldırır. Ardından, hem yaralı hem de yaralanmamış arka pençelerden mekanik çekilme eşiğini kaydedin. Bu cihaz, geri çekilme reaksiyonu üzerine sağlanan maksimum değeri otomatik olarak kaydeder ve görüntüler.

Mekanik stimülasyonu, uyaran testi ile yaralanmamış arka pençeler arasında yaklaşık beş dakikalık bir aralıkla, dengeli bir sırayla üç kez tekrarlayın ve ardından pençe çekme eşiklerinin ortalamasını hesaplayın. Test gününde termal çekilme gecikmesini incelemek için, fareyi cam zemine yerleştirin. Test kafesi deneyden 15 ila 30 dakika önce bir termal ekici analjezi aleti kullanarak, kızılötesi kaynağı doğrudan arka pençenin orta ekici yüzeyinin altına yerleştirin ve başlat tuşuna basın.

Bu, arka pençenin ekici yüzeyini şeffaf bir cam yüzeyden yayılan bir ısı demetine maruz bırakır. Ardından, hem yaralı hem de yaralanmamış arka pençelerden çekilme gecikmesini kaydedin. Bu cihaz, termal uyaranın başlangıcından pençenin ısı kaynağından çekilmesine kadar geçen süreyi otomatik olarak kaydeder.

Isı stimülasyonunu, yaralı ve yaralanmamış arka pençeleri dengelenmiş bir sırayla test eden uyaranlar arasında yaklaşık beş dakikalık bir aralıkla en az üç kez tekrarlayın ve ardından pençe çekme ortalamasını hesaplayın Buradaki gecikmeler, siyatik sinirin kronik daralmasından önce ve 12 gün sonrasına kadar wistar sıçanlarının hem yaralı hem de yaralanmamış pençelerinde mekanik çekilme eşiğini göstermektedir. Yaralı ipsilateral arka pençede, yaralanmamış kontralateral arka pençeye kıyasla mekanik uyaranlara pençe çekme eşiğinde önemli bir azalma vardır. Burada gösterilen, siyatik sinirin kronik daralmasından önce ve 12 gün sonrasına kadar hem yaralı hem de yaralanmamış pençelerde termal geri çekilme gecikmesidir.

Benzer şekilde, termal çekilme gecikmesi, yaralı ipsilateral arka pençede, yaralanmamış kontralateral arka pençeye kıyasla önemli ölçüde azalır. Bir kez ustalaştıktan sonra, CCI ameliyatı hayvan başına 20 dakika gibi kısa bir sürede düzgün bir şekilde gerçekleştirilebilir ve bu da arka pençenin uzun süreli ağrı aşırı duyarlılığına neden olur. Bu prosedürü denerken, bağları gevşek bir şekilde bağlamayı unutmamak önemlidir, çünkü ödem sonrası bağların altında kendi kendine boğulma olur ve bu da geliştikten sonra daralmaya neden olur.

Periferik sinir hasarının bu tekniği, sinir hasarına bağlı kronik ağrının altında yatan mekanizmaları araştırmak için nöropatik ağrı alanındaki araştırmacılar için ağrı aşırı duyarlılığı P dalgasının test edilmesiyle birleştirilmiştir.