Brezilya'da Saha Sürümleri için Genetiği Değiştirilmiş Aedes aegypti'nin Seri Üretimi

Aegypti'nin kontrolü, yavrularının ölmesine neden olan genetik bir modifikasyon içeren böcekler kullanılarak sağlanabilir. Erkekler serbest bırakıldığında çiftleşirken, bu çiftleşmelerden üretilen dişi yavrular ölür. Popülasyon kontrolü, genetik olarak steril erkeklerin sürekli olarak serbest bırakılmasıyla sağlanabilir.

Ölüme neden olan gen, diyete bir panzehir eklenerek kontrol edilebilir ve genetik modifikasyona sahip böceklerin hayatta kalmasına izin verir. Aegypti'nin nüfus baskısını sağlamak için. Genetiği değiştirilmiş bir sivrisinek hattı kullanılarak, çok sayıda erkek sivrisineğin serbest bırakılması gerekir.

Bu, mümkün olan en yüksek kalite ve zindeliğe sahip maksimum sayıda erkek sivrisinek elde etmek için toplu yetiştirme tekniklerinin kullanılmasını gerektirir. OX 5 1 3 A'nın toplu yetiştirilmesi, yumurta üretimi, erkeklerin üretimi ve erkeklerin serbest bırakılmadan önce ortaya çıkması ve olgunlaşması olmak üzere üç ana alana ayrılabilir. Bu bir şemadır Brezilya'daki Moscamed'de OX 5 1 3 A.Males üretimi için kullanılan arka uç tesisin, yumurta üretim kolonisi odasında sürekli olarak yüksek kaliteli yumurtalar üretilmektedir.

Bu yumurtalar daha sonra yavruların cinsiyete göre sıralandığı erkek üretim alanındaki yavrulara yetiştirilir. Erkekler için kalite kontrol çalışmaları için özel bir alan sağlanmıştır. Erkekler daha sonra serbest bırakma cihazlarına yerleştirilir ve serbest bırakılmadan önce ortaya çıkmalarına ve olgunlaşmalarına izin verilir.

Bu videoda gösterilen teknikler yumurta üretimi ve erkek üretim alanlarına uygulanabilir. Yumurta elde etmek için Erkek üretimi için, yerel bir mezbahadan alınan hayvan kanını kullanarak yapay zar beslemesi kullanıyoruz. Bu işlem için gerekli malzemeler, yükseltilmiş bir sırt deseni ile yaklaşık 10 santimetre kare biyofilm ve anin plakasıdır.

Bir tarafta biraz kan ve yaklaşık 250 gram buğday tanesi ile dolu bir puf. Plaka besleme sistemi, beslenmeyi teşvik etmek için sivrisineklerin beslenmesi için bir zar olarak paraform kullanır. Param insan derisi üzerinde soyulur.

Param daha sonra kalınlığını azaltmak için dikkatlice gerilir. Alüminyum levhanın desen tarafı daha sonra üç tarafı paraformla kaplanır, paraforma zarar vermemeye dikkat etmek ve ayrıca kenarları iyi bir şekilde kapatmak. Daha sonra plakanın açık tarafından kan eklenir ve paraform yapılır.

Besleyici yaklaşık üçte birine kadar kanla doldurulur. Biyofilm daha sonra kanın kaçmasını önlemek için dikkatlice yerine kapatılır. Kan besleyici plakalar daha sonra yetişkin kafeslerinin üstüne yerleştirilir.

Fasulye torbaları mikrodalgada 10 saniye ısıtılır ve kanı ısıtmak için tabağa yerleştirilir. Gerekirse, puf her 10 ila 15 dakikada bir yeniden ısıtılabilir. Kan beslemesinden üç gün sonra bir FU pozisyon bölgesi sağlanır.

Yumurtalık pozisyon bölgesi, yarısı suyla dolu yuvarlak plastik bir kap içindeki filtre kağıdıdır. Dişilerin yumurtalarını bırakmaları için karşı pozisyon bölgesini yetişkin kafesine yerleştirin. İki gün sonra, yumurta kağıdını çıkarın ve sektör koşullarında kuruması için emici kağıdın üzerine yerleştirin.

Kuruduğunda yumurtalar kağıttan çıkarılır. Bir boya fırçası kullanarak, yumurtalara zarar vermemeye dikkat ederek yumurtaları büyük bir tepsiye nazikçe fırçalayın. Çok sert fırçalayarak, küf oluşumunu önlemeye yardımcı olmak için ölü böcekleri ve diğer kalıntıları temizlemek için yumurtalar bir elekten geçirilir.

Ve yumurtaların ağırlıkça daha doğru sayılması için, kurutulmuş yumurtalar Bir gramlık alikotlar halinde ayarlanır. Bu 100.000 yumurtaya eşittir. Küçük plastik kaplara analitik bir ölçek kullanılarak, yumurtalar bu kaplarda altı haftaya kadar sektör içi koşullar altında saklanabilir.

Kuluçkalık yumurtalar için, kaynamış su eklenerek, kapağı kapatılarak ve soğumaya bırakılarak kavanozlar kurulur. Bu, yumurtaların çatlamasını sağlamak için sudaki oksijeni azaltır. Kavanoza bir gram yumurta eklenir ve kapak tekrar kapatılır.

Bir saat boyunca kavanozun içindekileri iki litre su içeren bir tepsiye aktarın ve bir gece bekletin. Sektör içi koşullar altında. Yumurtadan çıktıktan bir gün sonra, larvalar tepsiden 200 kalite paslanmaz çelik elek ile Sid'e alınır.

Elekteki deliklerin çapı yaklaşık olarak kuzey 0.075 milimetredir. Larvalar daha sonra iki litrelik bir behere yerleştirilir. Daha sonra beher iki litreye kadar su ile doldurulur.

Beheri manyetik bir karışım üzerine yerleştirin ve büyük bir manyetik pire ekleyin. Larvaları yeterince karıştırmak için karıştırma hızını ayarlayın, ancak çok hızlı değil. Bu, hasar karıştırmaya neden olabileceğinden, kalite kontrol için hasarı önlemeye yardımcı olmak için mümkün olan en az süre boyunca bir larva yapılmalıdır.

Kuluçka hızı, yumurtalar bir saat boyunca kuradan çıktıktan sonra belirlenir ve ertesi gün, emici bir sünger ile beyaz bir emici kağıt parçasına üç, bir mil alikot yerleştirilir. Emici kağıdın altında, saymak için kullanılan karelerden oluşan bir ızgara vardır. Üç farklı ızgara karesinden yumurtadan çıkmış ve çıkmamış yumurtaların sayısını sayın.

Yumurtadan çıkmış bir yumurtayı tanımlamak kolaydır. Yumurtanın üst kısmında yumurta kapağı eksik olduğundan, yaklaşık %80 ila %90'lık bir kuluçka oranı bekleriz. Her tepsiye eklenecek su hacmini hesaplamak için mil başına ortalama larva sayısı kullanılır. Tepsi başına istenen sayıda larva elde etmek için, her biri bir milden üç alikot alın ve ayrı Petri kaplarına yerleştirin.

Daha kolay sayım için larvaları dağıtmak için 10 ila 20 mil daha su ekleyin. Larvalar görünüşte beyaz olduğu için siyah bir arka plan kullanarak larvaları sayın ve bu saymayı kolaylaştırır. Bir sayaç, pipet ve sabit bir el kullanılması tavsiye edilir kayıt.

Mil başına toplam larva sayısı, Uygun hacimde su ve larva daha sonra bardaklara alınır. Larvaları beherde aynı yerden almaya dikkat edin. Her seferinde Larvalar daha sonra önceden su ile doldurulmuş tepsilere eklenir.

Tepsiler, mil başına 30 mikrogram konsantrasyonda panzehir tetrasiklin içerir. Bir tepsideki larvaların yoğunluğu, derinlik, yüzey alanı ve yetişkinlerin büyüklüğü için optimize edilmelidir. Optimum yoğunluğun mil başına bir ila üç larva arasında olduğunu bulduk.

Larvaları beslemek için pul balık yemi kullanıyoruz. Balık yemi bir karıştırıcıda ezilir. Tutarlı bir ince toz elde etmek için, her yaşam aşaması biraz farklı miktarlarda yiyecek gerektirir.

Bu nedenle diyet her gün için optimize edilmiştir ve işçiliği azaltmak için tepsi başına belirli bir ağırlık kullanılır. Gerekli miktarda yiyeceği kolay ve verimli bir şekilde dağıtan hacimsel kaşıklar tasarladık ve ürettik. Erkek pube yedinci günde ortaya çıkmaya başlar ve sekizinci günde erkeklerin yaklaşık% 70'i yemek yemiş olacaktır.

Dişiler erkeklerden daha geç patlar, ancak sekizinci günde hala dişilerin önemli bir kısmı vardır. Erkek Pube'nin sınıflandırılması sekizinci ve dokuzuncu günlerde yapılır. Mümkün olan maksimum sayıda erkek KKD'yi geri kazanmak için, bir tepsinin içeriği elenir ve plakayı ayırmaya hazır bir sürahiye yerleştirilir.

Ayırıcı: Larvalar ile erkek ve dişi yavruları ayırmak için morfolojik ve boyut farklılıklarını kullanır. Cihaz, iki paralel cam plakadan oluşur. Dış plaka, dört ayar vidası kullanılarak ileri ve geri hareket ettirilebilir.

Ayar vidaları, dış plakanın belirli bir açıda ayarlanmasına izin verir, böylece aşağı doğru sivrilen plakalar arasında bir kama şekli boşluğu oluşturulabilir. Plaka ayırıcı, suyu toplamak için altında bir kap ile kurulur. Bir tepsiden gelen larvalar ve peepee, Cam plakalar arasındaki plaka ayırıcının üst kısmına dökülür.

Kadın papa, erkek papadan daha büyüktür ve onların üzerinde ayrılırlar. Larvalar, erkek pube'den daha ince olan düzleştirilmiş bir şekle sahiptir ve su ile yıkanarak ve açıyı ayarlayarak daha da aşağı ayrılırlar Larvalar ve erkek ve dişi pube, Sürekli yıkama ve plaka açısının ayarlanması ile daha da ayrılabilir. Alt ayar vidaları kullanılarak larvalar bir kabın içine akıtılabilir.

Larvaların bulunduğu kap çıkarılır ve daha sonra plaka ayırıcının altına yeni bir kap yerleştirilir. Erkek puy daha sonra yeni kabın içine atılabilir. Herhangi bir dişi puy'un Erkeklerle aynı şekilde yıkanmasına izin vermemeye dikkat edin.

Kabı bir erkek kaka ile çıkarın ve yenisiyle değiştirin. Ve son olarak, dişi KKD'ler taze kaba atılır. Erkek yavrular, dişi kontaminasyonu için kalite kontrollüdür.

Sıralamadan sonra, 500 erkek yavrudan üç alikot alınır ve mevcut dişi yavru sayısı mikroskopta geri sayılır. Dişiler, genital lob şekline bakılarak tanımlanabilir. Kadın genital lobu erkeklerden çok daha küçük ve yuvarlaktır.

% 1'den fazla kadın varsa, partiye başvurulmalı ve tekrar kontrol edilmelidir. Sıralanan erkek yavrular, tarlaya bırakılmadan önce ortaya çıkması ve olgunlaşması için serbest bırakma cihazlarına tahsis edilir. Altı aydan fazla bir süredir erkek ve dişi sınıflandırmasından elde edilen sonuçlar.

PUPI, dişi kontaminasyonunun ortalama olarak %0.02 olduğunu gösterdiBu kontaminasyon oranı, her ay salınan sadece 400 dişiyi temsil ediyor. Bu grafik, altı aylık bir üretim periyodu boyunca ortalama erkek ve dişi yavru verilerini göstermektedir. Erkekler çoğunlukla sekizinci günde, dişiler ise dokuzuncu günde yavrular.

Pupi büyüklüğü ölçüldü ve suda yüzen pupilerin fotoğrafları çekilerek ve ölçek olarak greico kullanılarak ölçülen celo toraks genişliği kullanılarak karşılaştırıldı. Erkekler, büyüklükleri çok az örtüşen dişilerden sürekli olarak daha küçüktür ve bu da yumurta üretim tesisinden tutarlı yetiştirme parametrelerinin elde edildiğini gösterir. Yaklaşık 19 metre karelik bir alanda, erkek üretim alanından haftada 4 milyonun üzerinde yumurta üretildi.

Haftada ortalama 571.000 erkek üretildi. Yumurtadan ayıklanmış erkek yavrulara kadar üretim verimliliği %26 civarındaydı Ortaya çıkma sırasında bir miktar erkek kaybı meydana geldi ve haftada salınan toplam erkek sayısı ortalama 543.000 oldu.