Diyabetik Fare Böbrek Kapsül içine, Pankreas Islets Nakli

Merhaba, Benim adım Greg Zod. Bluestone Laboratuvarı'ndaki UCSF Diyabet Merkezi'ndeyim ve bugün size diyabetik farelerin böbrek kapsülünün altına ayna deliklerinin nasıl nakledileceğini göstereceğim. Bu prosedür, farelerin sinjeneik veya allojenik suşundan saflaştırılmış deliklerin alınmasını, bu deliklerin alınmasını, saflaştırılmasını ve diyabetik farelerin böbrek kapsülünün altına nakledilmesini içerir.

NOD gibi doğal olarak diyabetik olabilen fareler veya strep pitosin enjeksiyonu ile yapay olarak diyabetik hale getirilen fareler. Artık halkaları elle seçmeye hazırız. Pipetle mera ile emerken kuşgözlerini elle seçeceğim ve sayacağım.

Dokumuzda herhangi bir a'yı geride bırakacağım ve ışıkların dokuda nasıl kırıldığını, neyin kuşgözü olduğunu ve neyin delik olmadığını görebilirsiniz. Ve sonra halkaları sayıyorum. Onları mikro bir tüpe koyacağım ve nakil için toplayacağız.

Halkalar daha yoğun, neredeyse kırmızımsı bir görünüme sahiptir ve R'deki as daha hafif ve daha kabarıktır. Ve aynı zamanda beyazımsı bir görünüme sahiptir. Yani biz, kuşgözü yaparken bir miktar doku alacaksınız, ama kuşgözlerinin çoğunu tuttuğunuz sürece sorun yok.

Ve gördüğünüz gibi R dokusunda güzel ve büyük bir parça var. Ve işte burada güzel bir kuşgözü ve üzerinde başka bir delik var. Ve sonra, ama arada bir miktar as var, bir şeyleri hareket ettirebilir ve tek tek delikleri yakalayabilirsiniz.

Ve fark ettiyseniz, konik olmayan bir pipet ucu kullanıyorum. Bu uç çok ince cidarlıdır ve düzdür. Bu, deliklerin uca girip çıkması için daha fazla kolaylık sağlar.

Bir lenf nodu tutmaya çalışmamaya dikkat edin. Bunlar, sindirilen ve saflaştırılan pankreas lenf düğümleri olan ezoterik lenf düğümleridir. Mümkünse sadece kuşgözlerini tutmaya ve lenf düğümlerini geride bırakmaya çalışıyorum.

Halkaları elle topladığımda, bu mikro santrifüj tüpünün dibinde 500 I serbest deliğim var. Şimdi bu halkaları nakil için P one 50 tüpümüze aktaracağım. Ve bunu nasıl yapıyorum, bir pipet ucu alıyorum ve tüpün altındaki halkaları yavaşça aspire ediyorum.

Ben, halkalar pipet ucuna girdikten sonra, B 50 borusuna bağlı silikon hortumumu alıyorum ve onları davlumbazın duvarının kenarına bantlayarak pipetin ucuna oturmalarına izin vereceğim. Peletler pipet ucuna yerleştikten sonra, pipeti çıkaracağız ve pistonu değil pipet üzerindeki kadranı kullanarak peleti yavaşça boruya ilerleteceğiz. Ve pipeti çevirirken, hortumu hareket ettiriyorum.

Peletlerin P 50 borusuna girmesine izin verirler. Peletler borunun ucundan yaklaşık bir inç'e kadar hareket ettiğinde, peletleri orada tutmak için boruyu büktüm. Silikon boruyu çıkardım ve bükülmeye aktardım.

Bu daha sonra kesilmiş beş değirmenlik bir pipet ile bir santrifüj tüpüne yerleştirilir. Sonra boruyu katlayıp beş değirmenlik pipete bantlıyorum. Ve şimdi Centrifusion için hazır.

Fare traş edildi ve uyuşturuldu, Ve ayak parmağının sıkışmasına tepki vermediğinden emin olmak için kontrol edeceğiz. Ve fareyi propon iyot çubuklarıyla temizleyeceğim. Ameliyat aseptik olarak yapılır, ancak aletlerimin tüm uçları sterildir.

Dalağın hemen sağında, farenin sol kanadında küçük bir kesi yapacağım. Şimdi fikir, bu kesiyi küçük tutmak, böylece böbreği yukarıda tutmak. Böbreği izole ettiğinizde, şimdi o böbreğin hemen üzerindeki periton duvarını kesecek ve küçük bir kesi yapacaktır.

Ve tek bir hareketle, cildi sola kaldırıyorum ve yukarı itiyorum, böbreği aşağı itiyorum ve aynen bu şekilde dışarı çıkarıyorum. Böbreği nemli tutuyorum, biraz tuzlu su ve gentamisin bir antibiyotik. 25 gauge bir iğne ile, tüpümün yerleştirileceği yer için böbrekte küçük bir çentik yapacağım.

Böbreği oymak istemiyorsun, sadece küçük bir çentik yapmak istiyorsun. Küçük bir kan çizgisi göreceksiniz. O zaman bildiğin gibi, kapsülün içindesin.

Bir eğim üzerinde kesilmiş P 50 hortumumu alarak, yaptığım kesiğin dudağının altına yakalayacağım ve boruyu yavaşça kapsülün altına yerleştireceğim. Pavel bu işlem sırasında böbreği nemli tutar çünkü kuru bir kapsül kolayca yırtılır. P 50 borusu kapsülün altına girdikten sonra, Pavo vidalı tahrikli bir Hamilton şırınga kullanarak peleti ilerletecektir.

Ve burada peletin yavaşça içeri girdiğini görebilirsiniz. Ve vidalı sürücüye dayalı olarak kuşgözü teslimatını yönlendirirsiniz. Halkalar teslim edildikten sonra kuru bir gazlı bez ucu alıyorum, bölgeyi kuruyorum ve bir koter demir kullanarak çentiği ve böbreği mühürlüyorum.

Beş oh ipek kullanarak karın zarını tuttum ve diktim. Fareyi kapatmak için çalışan bir dikiş yapıyorum. Ben, cildi cilt zımbaları ile kapatıyoruz.

Fareyi uyandırmadan önce, ona deri altına bpro, amin ve grip nixon antienflamatuarları ve bir ağrı kesici enjeksiyonu yapıyorum. Fare daha sonra bir ısıtma yastığı üzerindeki kafesine geri döndürülür. Bu yüzden size farelerin böbrek kapsülünün altına deliklerin nasıl nakledileceğini gösterdim.

Bu, transplantasyon toleransına veya diyabet tedavi yöntemlerine bakmak için harika bir modeldir. Özellikle laboratuvarımızda, bu modeli, treglerin kuşgözü hücre nakli üzerindeki etkilerine bakmak veya farklı kostimülatör blokaj molekülleri ile toleransı indüklemek için kullanıyoruz.