Name: Kolorektal Kanser Ortotopik Fare Modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-12-04T04:21:00.000+00:00
Duration: 8 min 43 s
Description: Öğrenin, kolorektal kanserin doğal ilerleyişini incelemek ve yeni tedavi ajanlarını test etmek için farelerde ortotopik model kurma yöntemini. Bu teknik, tümör davranışı ve tedavi etkinliği hakkında değerli bilgiler sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Cerrahi Anabilim Dalı, University of California, San Francisco Raymond Shaheen, MD

I. Hücre Hazırlık <ol><li> Kolorektal kanser hücrelerinin kültür ortamında yetişen ve akışkan hasat. </li><li> Bir tek hücre süspansiyonu fosfat hazırlanan tamponlu tuz ve buz üzerinde tutulmalıdır. </li></ol> II. Tümör Hazırlık <ol><li> Önceden belirlenmiş subkutan kolorektal tümör ile bir fare ötenazi. </li><li> Subkutan bir tümör 2-3 mm&#39;lik parçalar steril tekniği kullanarak kaldırıldı ve bölünmüş </li><li> Tümör adet fosfat tutulur buz üzerinde tamponlu salin. </li></ol> III. Fare Hazırlık Not: Laboratuarımızda fare uyutmak için izofluran inhale kullanır; alternatif olarak, aynı etkiyi elde etmek için enjektabl anestezikler kullanabilirsiniz <ol><li> Anestezi derinliği ayak tutam kullanılarak değerlendirilir. Ayak tutam refleks çekilme yoktur olmalıdır. </li><li> Antibiyotikler bu noktada verilebilir. </li><li> Daha önce traş anestezi fare, düzgün bir şekilde konumlandırılmış. </li><li> Karın betadin çözümü ile prepped. </li><li> Karın ve cerrahi alan steril bir moda dökümlü. </li></ol> IV. Laparotomi <ol><li> Küçük bir nick cilt yapılır </li><li> Karın duvarı kas kavradı ve kaldırdı </li><li> Karın boşluğuna girilir ve makas, tek bir bıçak uzak intraabdominal içeriğini itmek için kullanılır. </li><li> Kesi 2-3 cm uzatıldı </li></ol> Çekum V. Pozlama <ol><li> Kör biten çantası ile birlikte çekum tespit ve exteriorized </li><li> Çekum önceden kesilmiş, steril gazlı bez kullanarak fare geri kalanından izole </li><li> Ilık tuzlu su çekum nemli tutmak için kullanılır. </li></ol> VI. Hücreler Çekal Duvar içine enjeksiyon <ol><li> A 27 G veya ince iğne çekal duvarın içine 50 mcL hacmi bir hücre enjekte etmek için kullanılır. </li><li> Iğne kaldırıldı. </li><li> Enjeksiyon yerinde, herhangi bir kaçak olmak üzere kontrol </li><li> Çekum karın boşluğuna geri döndü </li></ol> VII. Çekum üzerine Tümör Nakli Not: çekal duvar içine hücreleri enjekte ek olarak, alternatif bir yaklaşım çekum üzerine tümör nakli için <ol><li> 8 dikiş bir rakam, 6-0 veya 7-0 ölçekli sütür kullanarak çekum üzerine yerleştirilir. </li><li> Çekal duvara hafifçe hasar görmüş </li><li> Ardından, tümörün parça konumlandırılmış </li><li> Dikiş bağlı </li><li> Çekum karın boşluğuna geri döndü </li></ol> VIII. Fare Karın Duvarı Kapatma ve Kurtarma <ol><li> Fare karın duvarı, 3-0 veya 4-0 ölçekli sütür kullanarak üç kesintiye dikiş kullanılarak kapalı </li><li> Alternatif olarak, bir çalışan basit bir dikiş kullanabilirsiniz </li><li> Post-operatif ağrı kesiciler ve bu noktada bir sıvı bolus verilebilir </li><li> Fare anestezi kurtarmak için izin verilir. </li></ol> Not: inhale anestezikler bu genellikle 30 saniye sürer IX. Sonuçlar - İlköğretim Tümör ve Karaciğer Metastaz <img src="/files/ftp_upload/old/484_2008_2_11_8/A.png" alt="" /><img src="/files/ftp_upload/old/484_2008_2_11_9/B.png" alt="" /><img src="/files/ftp_upload/old/484_2008_2_11_10/C.png" alt="" /> Primer Tümör - yerinde gösterilir (A) ve (B) neovaskülarizasyon kanıt, H &amp; E boyama, tümörler, lokal olarak invaziv (C) <img src="/files/ftp_upload/old/484_2008_2_11_11/D.png" alt="" /> Karaciğer Metastaz gösterilen ex vivo (D)

<ol><li>Heijstek, M. W., Kraneburg, O., Rinkes Borel, I. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+of+colorectal+cancer+and+liver+metastases%5BTitle%5D)+AND+%22Dig+Surg%22%5BJournal%5D)">Mouse models of colorectal cancer and liver metastases.</a> Dig Surg. 22, 16-25 (2005).</li>
<li>Kobaek-Larsen, M., Thorup, I., Diederichsen, A., Fenger, C., Hoitinga, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Review+of+colorectal+cancer+and+its+metastases+in+rodent+models%3A+comparative+aspects+with+those+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Comp+Med%22%5BJournal%5D)">Review of colorectal cancer and its metastases in rodent models: comparative aspects with those in humans.</a> Comp Med. 50, 16-26 (2000).</li>
<li>Wilmanns, C., Fan, D., O'Brian, C. A., Bucana, C. D., Fidler, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+and+ectopic+organ+environments+differentially+influence+the+sensitivity+of+murine+colon+carcinoma+cells+to+doxorubicin+and+5-fluorouracil%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Cancer%22%5BJournal%5D)">Orthotopic and ectopic organ environments differentially influence the sensitivity of murine colon carcinoma cells to doxorubicin and 5-fluorouracil.</a> Int J Cancer. 52, 98-104 (1992).</li>
<li>Kashtan, H., Rabau, M., Mullen, J. B., Wong, A. H. C., Roder, J. C., Shiptz, B., Stern, H. S., Gallinger, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intra-rectal+injection+of+tumor+cells%3A+a+novel+animal+model+of+rectal+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Surg+Oncol%22%5BJournal%5D)">Intra-rectal injection of tumor cells: a novel animal model of rectal cancer.</a> Surg Oncol. 1, 251-256 (1992).</li>
</ol>

Fare subkutan bir tümör modelleri oluşturmak ve izlemek için kolay olmasına rağmen, bu model, kolorektal kanser orijinal anatomik site çoğaltmak olamayacağını açıktır. Mikroçevresinin farkı nedeniyle, deri altında büyüyen kolorektal kanser hücrelerinin fenotipi değiştirmek ve hemen hemen her zaman ilerleme ve metastaz 1,2 başarısız gösterilmiştir. Aslında, tedaviye tümör yanıtı, kanser hücrelerinin ektopik (subkutan) karşı ortotopik konumu 3 implante olup olmadığına bağlı olarak önemli ölçüde değişebilir. Kolorektal ka...

<table><tbody><tr><td>Hücre kültürü medyaları ve bileşenleri</td><td></td><td></td><td>kullanılan hücre hattına göre değişiklik gösterecektir</td></tr><tr><td>Fosfat Tamponlu Salin</td><td>BioWhittaker</td><td>17-512F</td><td>birçok diğer satıcı tarafından da satılmaktadır</td></tr><tr><td>15 mL santrifüj tüpleri, polipropilen</td><td>Corning</td><td>430790</td><td></td></tr><tr><td>Kapaklı 6 kuyucuklu plakalar</td><td>BD Biosciences</td><td>353046</td><td></td></tr><tr><td>Iris pensi, düz, tırtıklı uçlu</td><td>World Precision Instruments, Inc.</td><td>15914</td><td>bu aletlerden bir çift bulundurmak en iyisidir</td></tr><tr><td>Iris diseksiyon makası, düz, keskin</td><td>World Precision Instruments, Inc.</td><td>14393</td><td></td></tr><tr><td>İğne tutucu (standart)</td><td>World Precision Instruments, Inc.</td><td>14109</td><td></td></tr><tr><td>İğne tutucu (Castroviejo)</td><td>World Precision Instruments, Inc.</td><td>14137</td><td></td></tr><tr><td>Cidex Plus</td><td>World Precision Instruments, Inc.</td><td>7364</td><td>aletler periyodik olarak otoklavlanmalı, ancak Cidex içinde bekleterek de sterilize edilebilir</td></tr><tr><td>6-0 veya 7-0 sütür</td><td></td><td></td><td>çekum için; UCSF Cerrahi Bölümü'nün katkılarıyla</td></tr><tr><td>3-0 veya 4-0 sütür</td><td></td><td></td><td>karın duvarı için; UCSF Cerrahi Bölümü'nün katkılarıyla</td></tr><tr><td>Anestezi cihazı / İzofluran</td><td>J.A. Baulch and Associates</td><td>3206</td><td>birçok diğer satıcı tarafından da satılmaktadır</td></tr><tr><td>Isıtma pedi, tek kullanımlık, 6&quot; x 6&quot;</td><td>Prism Technologies</td><td>20419</td><td></td></tr><tr><td>Bant, turuncu, 13 mm x 13 m</td><td>Fisher Scientific</td><td>15901F</td><td>anestezize edilmiş fareyi sabitlemek için</td></tr><tr><td>Pro-Cord/Kablosuz Tıraş Makinesi</td><td>Oster Professional Products</td><td>78997-010</td><td>fare tüylerini tıraş etmek için</td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Fisher Scientific</td><td>19-027132</td><td>herhangi bir tıbbi malzeme mağazasından da satın alınabilir</td></tr><tr><td>2 x 2 gazlı bez, 3 katlı</td><td>Johnson &amp;amp; Johnson</td><td>7635</td><td>herhangi bir tıbbi malzeme mağazasından da satın alınabilir</td></tr><tr><td>Steril Alan, Bariyer, 16&quot; x 29&quot;</td><td>Johnson &amp;amp; Johnson</td><td>0905</td><td>herhangi bir tıbbi malzeme mağazasından da satın alınabilir</td></tr><tr><td>Pamuk uçlu aplikatörler, 6&quot;</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-960-3Q</td><td>herhangi bir tıbbi malzeme mağazasından da satın alınabilir</td></tr><tr><td>Şırınga, 10 cc, Luer lock uçlu</td><td>BD Biosciences</td><td>309604</td><td></td></tr><tr><td>Şırınga, 1 cc, tüberkülozini, slip uçlu</td><td>BD Biosciences</td><td>309602</td><td></td></tr><tr><td>27 1/2 G iğne</td><td>BD Biosciences</td><td>305109</td><td></td></tr><tr><td>30 G iğne</td><td>BD Biosciences</td><td>305106</td><td></td></tr></tbody></table>

kolorektal kanser ortotopik fare modeli

Orthotopic Mouse Model of Colorectal Cancer

Geleneksel subkutan bir tümör modeli kolorektal kanser eğitimi için ideal daha az. Kolorektal kanser özelliği, doğal bir yerde çoğalan kanser hücrelerini, Ortotopik fare modelleri, yüksek sadakat, insan hastalık yineler. Bu modeli kurmak için iki teknik kullanılabilir. Her iki teknikte de benzer ve çekum maruz kalma fare anestezi ve laparotomi gerektirir. Bir teknik çekal duvar içine kolorektal kanser hücre süspansiyonu enjeksiyon içerir. Kanser hücreleri kültürde yetişen zaman akışkan hasat ve tek bir hücre süspansiyonu olarak hazırlanmıştır. Hücrelerin küçük bir ses sızıntısını önlemek için yavaş yavaş enjekte edilir. Diğer teknik çekum üzerine subkutan bir tümör bir parça nakli içerir. Önceden belirlenmiş subkutan kolorektal tümör ile bir fare ötenazi ve steril tekniği kullanarak tümör kaldırılır. Tümör parçasının başka bir fare nakli için küçük parçalara ayrılır. Nakli için, önce çekal duvara hafifçe tümör hücre infiltrasyonu kolaylaştırmak için zarar görmüştür. Birincil tümörleri ve karaciğer metastazlarının geliştirmek için zaman, tekniği, hücre hattı ve kullanılan fare türlerinin bağlı olarak değişecektir. Bu ortotopik fare modelinde, kolorektal kanseri doğal bir ilerleme eğitim ve kolorektal kansere karşı yeni tedavi ajanları test için yararlıdır.

Çekum üzerine bir kanser hücre süspansiyonu çekal duvar subkutan tümörün bir parçasının veya transplantasyon içine enjeksiyon: İki teknikleri bu modeli kurmak için kullanılan olabilir. Bu model, kolorektal kanseri doğal bir ilerleme eğitim ve kolorektal kansere karşı yeni tedavi ajanları test için yararlıdır.

Kolorektal Kanser Ortotopik Fare Modeli

Geleneksel subkütan tümör modeli, kolorektal kanserin incelenmesi için ideal değildir. ... özelliklerine sahip olan kolorektal kanserin ortotopik fare modelleri...

Merhaba, benim adım William Sang. Stanford Üniversitesi Patoloji Bölümü'ndeki Dr. Edgar Engelman'ın laboratuvarındayım. Aynı zamanda University of California San Francisco'da cerrahi asistanıyım.Bugün size kolorektal kanserin ortotopik fare modelinin nasıl kurulacağını göstereceğim. Bu model, kolorektal kanserin doğal ilerlemesini incelemek ve kolorektal kansere karşı yeni terapötik ajanları test etmek için kullanışlıdır. Bu durum, geleneksel deri altı tümör modelinin aksine bir özelliktir.Subkutan tümör modeli, deri altında büyüyen tümör hücrelerinin değişmiş bir fenotip sergilemesi ve sıklıkla ilerleyememesi veya metastaz yapamaması nedeniyle idealden uzaktır. Aslında, tümörlerin tedaviye verdiği yanıt, tümör hücrelerinin subkutan veya ortotopik bir konuma implante edilmesine bağlı olarak büyük farklılıklar gösterebilir. Kolorektal kanserin ortotopik fare modelini oluşturmak için iki farklı teknik kullanılabilir.Tekniklerden biri, bir kolorektal kanser hücresi süspansiyonunun SQL duvarına enjeksiyonunu içerir. Diğer teknik ise, bir deri altı tümör parçasının çekuma transplantasyonunu içerir. Her iki teknik de benzerdir ve şu adımları içerir; birincisi, hücre veya tümör hazırlığı.

orthotopic-mouse-model-of-colorectal-cancer

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Bu videoda, obez olmayan diyabetik/şiddetli kombine immün yetmezlik (NOD/SCID) farelerinde kolorektal kanser hücrelerinin ilerlemesini incelemek için hastadan türetilmiş bir ortotopik ksenogreft kolorektal kanser fare modeli oluşturma protokolü açıklanmaktadır. Bu fare modeli, primer tümör büyümesi ve metastaz paterni anlamada yardımcı olur.

Kolorektal Kanserin PDOX Fare Modelinin Oluşturulması: Bir Murin Modelinde Kolorektal Kanserin İlerlemesinin İncelenmesi

Bu videoda, floresan görüntülemeyi mümkün kılmak için GFP lentiviral partikülleri tarafından dönüştürülen CRC organoidleri üretme tekniği açıklanmaktadır. Bu GFP etiketli organoidler, hayvan modellerine yerleştirildiğinde, tümör invazyonu ve metastazı incelemeye yardımcı olur.

CRC Organoid Hücre Etiketleme: GFP Lentivirus ile Dönüştürülmüş Kolorektal Kanser Organoid Hücreleri Oluşturmak İçin Bir Yöntem

Bu videoda, kolorektal kanser hastadan türetilmiş ksenogreftlerin veya PDX'lerin spontan metastaz fare modelini oluşturmak için kullanılan protokol açıklanmaktadır. Bu ksenogreft modelleri, insan karsinomlarının özelliklerini kısmen taklit eder ve invazyon ve metastaz dahil olmak üzere insan malignitelerinin kritik yönlerini anlar.

Spontan Metastaz Fare Modelleri: Ortototopik Olarak Enjekte Edilen Kolorektal Kanser Hücrelerinin Metastatik Potansiyelini İncelemek İçin Bir Platform

Videoda, yüksek derecede homojen tümörlere sahip ortotopik bir fare modeli geliştirmek için kanserli hücrelerin intracekal enjeksiyonu tekniği açıklanmaktadır. Bu nedenle, ortotopik fare modeli, metastazın gerçekçi simülasyonuna izin vererek, tümör büyümesi ve yayılması sırasındaki fenotip değişikliklerini incelemek için değerli bir araç sağlar.

İntracekal Tümör Hücresi Enjeksiyonu: Ortotopik Kolorektal Kanser Fare Modeli Oluşturmak için Kanser Hücreleri Verme Tekniği

Bu protokolün amacı, farelerde ortotopik pankreas tümörü ksenogreftleri için dinamik kontrastlı manyetik rezonans görüntüleme (DCE-MRG) uygulamaktır. DCE-MRG, hedef dokudaki mikrovasküler sistemi analiz etmek için invaziv olmayan bir yöntemdir ve yeni bir tedaviyi takiben bir tümörde vasküler yanıtı değerlendirmek için yararlıdır.

Ortotopik Pankreas Kanseri Fare Modeli Dinamik Kontrast Geliştirilmiş Manyetik Rezonans Görüntüleme

Metastatik klonların uzak bölgeleri kolonize etme yeteneği, çoğalma kapasitelerine ve/veya önemli bir çoğalma olmaksızın konakçı mikro ortamda hayatta kalma yeteneklerine bağlıdır. Burada, metastatik klonlar tarafından her iki tip karaciğer kolonizasyonunun kantitatif olarak görselleştirilmesine izin veren bir hayvan modeli sunuyoruz.

İleri Hayvan Karaciğer Kolorektal Metastaz Model: Görüntüleme Teknikleri ve Metastatik Klonların Özellikleri

Farelerin çekumuna tümör hücreleri veya organoidler enjekte edilerek ortotopik kolorektal tümörlerin oluşumunu ve ardından bu modelden dolaşımdaki tümör hücrelerinin (CTC'lerin) izole edilmesini açıklıyoruz.

Kolorektal kanserli bir Ortotopik Fare Modelinde Dolaşan Tümör Hücrelerinin İzolasyonu

Segmental adeno-cre enfeksiyonu ile genetik olarak tasarlanmış kolorektal kanserli fare modeli kurulması ve yüksek çözünürlüklü kolonoskopi ile gözlemlenmesi için bir protokol sunulmuştur.

Sporadik Kolorektal Kanserin Genetik Olarak Geliştirilmiş Fare Modeli

Bu protokol, yüksek dereceli ürosityal Hücre Karsinomu hücrelerinin intra-vesically instilling veya intra-rektal enjekte kolorektal kanser hücreleri olmayan obez diyabetik/şiddetli kombine tarafından hasta türeyen ortootopik xenograft modellerinin oluşturulması açıklanmaktadır immüneksikliği (NOD/SCıD) primer tümör büyümesi için fareler ve lenf nodu stromal hücrelerin etkisi altında spontan metastaz, hangi insan metastatik hastalıkların ilerlemesini taklit.

Insan Üromotorial Hücre Karsinomu ve kolorektal kanser tümörü büyüme ve spontan Metasrik için hasta türevi Ortootopik xenograft modelleri

Bu protokol, immün yetmezliği olan farelerin çekum duvarına hasta kaynaklı kanser hücrelerinin ortotopik implantasyonunu açıklar. Model, ilerlemiş kolorektal kanser metastatik hastalığını özetler ve klinik olarak anlamlı bir akciğer ve karaciğer metastazı senaryosunda yeni terapötik ilaçların değerlendirilmesine izin verir.

Farelerde Hasta Kaynaklı Kanser Hücrelerinin Ortotopik İmplantasyonu, İleri Kolorektal Kanseri Özetliyor

Bu çalışma, bir murin modelinde ışıldayan kolorektal kanser hücrelerinin in vivo deri altı indüksiyonuna ve ardından bir görüntüleme sistemi kullanılarak lüminesans ölçümüne odaklanmaktadır. Prosedür, gerçek zamanlı izleme ve terapötik değerlendirme için tekrarlanabilir bir tümör büyüme modeli oluşturmayı amaçlamaktadır.

Antitümör Etkinliğini Değerlendirmek için Atimik Çıplak Farelerde İnsan Kolorektal Kanser Hücrelerinin Deri Altı Enjeksiyonu

Öğrenin, kolorektal kanserin doğal ilerleyişini incelemek ve yeni tedavi ajanlarını test etmek için farelerde ortotopik model kurma yöntemini. Bu teknik, tümör davranışı ve tedavi etkinliği hakkında değerli bilgiler sağlar.

Kolorektal Kanser Ortotopik Fare Modeli

Daha fazla video keşfet