Name: Yara Şifa murin Modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-05-28T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 39 s
Description: Keşfedin silikon atel kullanılan murin eksizyonel yara iyileşme modelini; bu yöntem kontraksiyonu önleyerek epitelizasyon, proliferasyon ve anjiyogenezisi destekler. Her fare kendi kontrolü olarak kullanılarak terapötik ajanların sağlam preklinik testleri mümkün olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar, Ulusal Sağlık ve Avustralya Tıbbi Araştırma Konseyi (NHMRC) (: 632.512 Proje Hibe ID) fon desteği kabul etmek istiyorum. Louise Dunn Ulusal Kalp Vakfı Kariyer Geliştirme Bursu tarafından NHMRC Erken Kariyer Bursu ve Christina Bursill tarafından desteklenmiştir.

1. Ateller ve Tıkayıcı Pansuman hazırlanması <ol><li> 0.5 mm kalınlığında silikon kaplama ve kullanım makas veya silikon diskler oluşturmak için bir biyopsi yumruk 10 mm daireler Anahat. </li><li> Merkezi 10 mm dairenin ortasında bir 5 mm biyopsi yumruk ve bir atel olarak kullanılacak disk gibi-bir &quot;halka&quot; oluşturmak için bir delik oluşturmak için sıkıca bastırın. </li><li> Bu Opsite ve dairesel pansuman oluşturmak için kullanımı makas gibi şeffaf bir kapalı pansuman 10 mm daireler Anahat. </li></ol> 2. Deney Hayvanları <ol><li> Yapılacak tüm deneyler için Hayvan Etik Kurulu onayı alın. </li><li> Ticari bir damızlık (örneğin Jackson Laboratories) 8 haftalık (22-26 gram) erkek C57BL/6J fareler kullanın. </li><li> 21 standart koşullar altında farenin Ol ° C ve yiyecek ve suya serbest erişim ile, 12 saat ışık-karanlık çevrimi. </li><li> (İsteğe bağlı): Diyabet bir bolus intraperitoneal inje tarafından 6 ila 7 haftalık farelerde neden olabilirDüzenli kan şekeri izleme (AccuChek glucometer) ile teyit hiperglisemi ile 165 mg / kg streptozotosin (sitrat tamponu, pH 4,5) bir ction,. Diyabetik farelerde poliüri olabilir ve böylece yatak ıslaklık ortadan kaldırmak için ve ağırlıkları yakından izlenmelidir daha sık değiştirilmesi gerekebilir. </li></ol> 3. Anestezi ve Operatif Hazırlık <ol><li> % 100 oksijen izofluran% 5 (akış hızı 1 L / dk) ile genel anestezi neden ve izofluran% 1-3 ile anestezi korumak. </li><li> Bastırılır fare derin pedal refleksleri olun ve yüzüstü pozisyonda fare yerleştirin. </li><li> Daha da geri ve iki kürek kemikleri arasında 3 cm boyun tabanından kesme makineleri ile kürk kaldırarak ameliyat bölgesi hazırlayın. </li><li> Tüy dökücü krem ​​hafif bir uygulama 2 dakika daha uzun süre uygulanabilir. Islak gazlı bezlerden tüm krem ​​sağlamak için kullanılabilir ve kalan kürk kaldırılır. </li><li> Bir ile cilt silinalkol sürüntü ve% 10 iki uygulama povidon-iyot (Betadine) ve fare asmak. </li></ol> 4. Eksizyon ve Yara splintleme <ol><li> Fare yara iyileşme modeli şematik gösterimi Şekil 1&#39;de sunulmuştur. </li><li> (Şekil 2A-2B) omuz hizasında fare orta hattın her iki tarafında yara için iki adet dairesel model anahat steril bir 4 mm biyopsi yumruk kullanın. </li><li> Anahat ve istemsiz, carnosus (Şekil 2e) de dahil olmak üzere deri altı doku (Şekil 2c-2d), boyunca devam eden tam kat yara oluşturmak için iris makası ortasında cilt kaldırmak için dişli forseps kullanın ve tüketim dairesel parça doku. </li><li> Orta hat (Şekil 2f) diğer tarafında yara için işlemi tekrarlayın. </li><li> Silikon atel her taraftan plastik koruyucu kaplama çıkarın. </li><li> Cyanoacryla uygulayınte yapıştırıcı (örneğin Super Glue veya Krazy Tutkal) bir silikon atel bir tarafa. </li><li> Merkezi yara üzerinde atel (Şekil 2g) ve çapa konumlandırma (Şekil 2 saat) sağlamak için kesintiye 6-0 naylon sütür ile atel. </li><li> Diğer yara üzerindeki splintleme işlemi tekrarlayın. </li><li> Bu zaman noktasında gerekli ise, bir yara (Şekil 2i) ve diğer araç kontrolü için, test edilecek olan tedavi edici bileşik (100 ul) uygulanır. </li><li> Şeffaf bir oklüzif sargı (örneğin, OpSite) (Şekil 2J-2k) ile yara kapsamaktadır. </li><li> Bir cetvel atel altına yerleştirilir ve bir fotomikrograf (2l Şekil) alınır. </li></ol> 6. Ameliyat sonrası Yönetimi <ol><li> Carprofen (5 mg / kg) ameliyat sonrası ağrı kesici için alt deri enjeksiyon yoluyla günde bir kez uygulanır. </li><li> Ameliyat hayvan ayrı ayrı kafeslerde tutuldu ve ısı m muhafaza edildikten sonraats tamamen iyileşti kadar. </li><li> Ağrı ve kilo kaybı bulguları için günde iki kez hayvan izleyin. Biz ağrı veya kilo kaybı hiçbir brüt davranış görüntüler görülmektedir. </li></ol> 7. Yara Ölçme ve Tedavi <ol><li> Yara, günlük olarak ölçülebilir. </li><li> % 5 izofluran gaz (akış hızı 1 L / dk) ile genel anestezi neden, ve sonra fare derin duyu refleksleri sağlamak% 1-3 izofluran kullanılarak bastırılır. </li><li> Forseps ile yavaşça geri kabuğu tıkayıcı pansuman. </li><li> Yara çapının ölçülmesi için cerrahi kumpas kullanarak. Biz X, Y ve Z ekseni (Şekil 2m-2o) yanı sıra ileride (Şekil 2 p) için bir fotomikrograf boyunca üç ölçümün ortalama almak. </li><li> İsteğe bağlı: Şu anda hayvan bir lazer Doppler görüntüleme (Şekil 2q) kullanarak kan perfüzyon için değerlendirilebilir. </li><li> Tedavi edici bileşik ve araç kontrolü arasında yeniden uygulama performans olabilir,Bu noktada med. </li><li> Temiz bir şeffaf kapalı pansuman sonra yeniden uygulanır ve tamamen iyileşti kadar hayvanların sıcak tutulur. </li><li> Not: atel düzgün güvenli değilse yara kolayca sözleşme olacaktır (Şekil 2r). </li></ol> 8. Histolojik Analizi <ol><li> Anestezi aşırı dozda 10 gün sonra fareler Euthanize. </li><li> Forseps kullanarak ve bir neşter bıçak sıyırın dikkatle atel dikişler çıkarın ve. </li><li> Çevresinde ve yara alanı altında geniş bir tam eksizyon oluşturmak ve fosfat içinde% 4 paraformaldehit içinde doku inkübe iris makası kullanarak 4 ° C&#39;da gece boyunca (PBS), tamponlu tuzlu su. </li><li> ° C sonra -80 Ekim bileşik ve dondurularak doku ve yerine dikkatle dabbing aşırı çözeltinin ayrılması 4 ° C de 24 saat daha süreyle PBS çözeltisi içinde% 17 sukroz doku transferi </li><li> Hematoksilin ve eozin boyama, yara yapısı ve epitel boşluğu görselleştirmek için kullanılabilir. Neovascularisation kılcal sayısı (Von Willebrand faktörü kullanılarak) belirlemek için immünohistokimyasal analizleri ile tespit edilebilir. </li></ol>

<ol><li>Sen, C. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+skin+wounds%3A+a+major+and+snowballing+threat+to+public+health+and+the+economy%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+Repair%22%5BJournal%5D)">Human skin wounds: a major and snowballing threat to public health and the economy.</a> Wound Repair. 17, 763-771 (2009).</li>
<li>Sen, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wound+healing+essentials%3A+let+there+be+oxygen%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+Repair+Regen%22%5BJournal%5D)">Wound healing essentials: let there be oxygen.</a> Wound Repair Regen. 17, 1-18 (2009).</li>
<li>Gurtner, G. C., Werner, S., Barrandon, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wound+repair+and+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Wound repair and regeneration.</a> Nature. 453, 314-321 (2008).</li>
<li>Lindblad, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Considerations+for+selecting+the+correct+animal+model+for+dermal+wound-healing+studies%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biomater.+Sci.+Polym.+Ed%22%5BJournal%5D)">Considerations for selecting the correct animal model for dermal wound-healing studies.</a> J. Biomater. Sci. Polym. Ed. 19, 1087-1096 (2008).</li>
<li>Grose, R., Werner, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wound-healing+studies+in+transgenic+and+knockout+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Wound-healing studies in transgenic and knockout mice.</a> Mol. Biotechnol. 28, 147-166 (2004).</li>
<li>Reid, R. R., Said, H. K., Mogford, J. E., Mustoe, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+future+of+wound+healing%3A+pursuing+surgical+models+in+transgenic+and+knockout+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Coll.+Surg%22%5BJournal%5D)">The future of wound healing: pursuing surgical models in transgenic and knockout mice.</a> J. Am. Coll. Surg. 199, 578-585 (2004).</li>
<li>Fang, R. C., Mustoe, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+wound+healing%3A+utility+in+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biomater.+Sci.+Polym.+Ed%22%5BJournal%5D)">Animal models of wound healing: utility in transgenic mice.</a> J. Biomater. Sci. Polym. Ed. 19, 989-1005 (2008).</li>
<li>Wong, V. W., Sorkin, M., Glotzbach, J. P., Longaker, M. T., Gurtner, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+approaches+to+create+murine+models+of+human+wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biomed.+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Surgical approaches to create murine models of human wound healing.</a> J. Biomed. Biotechnol. 2011, 969618(2011).</li>
<li>Galiano, R. D., Michaels, J. t, Dobryansky, M., Levine, J. P., Gurtner, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+and+reproducible+murine+model+of+excisional+wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+Repair%22%5BJournal%5D)">Quantitative and reproducible murine model of excisional wound healing.</a> Wound Repair. 12, 485-492 (2004).</li>
<li>Galiano, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topical+vascular+endothelial+growth+factor+accelerates+diabetic+wound+healing+through+increased+angiogenesis+and+by+mobilizing+and+recruiting+bone+marrow-derived+cells%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">Topical vascular endothelial growth factor accelerates diabetic wound healing through increased angiogenesis and by mobilizing and recruiting bone marrow-derived cells.</a> The American Journal of Pathology. 164, 1935-1947 (2004).</li>
<li>Thangarajah, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+molecular+basis+for+impaired+hypoxia-induced+VEGF+expression+in+diabetic+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">The molecular basis for impaired hypoxia-induced VEGF expression in diabetic tissues.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 106, 13505-13510 (2009).</li>
<li>Raza, A., Bayles, C., Biebel, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigation+of+Bacterial+Growth+and+Moisture+Handling+Properties+of+Transparent+Dressings%3A+3M+Tegaderm+Transparent+Dressing%2C+3M+Tegaderm+HP+Transparent+Dressing%2C+and+Opsite+IV3000+Transparent+Dressing%5BTitle%5D)+AND+%22Smith+and+Nephew+Report%22%5BJournal%5D)">Investigation of Bacterial Growth and Moisture Handling Properties of Transparent Dressings: 3M Tegaderm Transparent Dressing, 3M Tegaderm HP Transparent Dressing, and Opsite IV3000 Transparent Dressing.</a> Smith and Nephew Report. , (1998).</li>
<li>Chung, T. Y., Peplow, P. V., Baxter, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Testing+photobiomodulatory+effects+of+laser+irradiation+on+wound+healing%3A+development+of+an+improved+model+for+dressing+wounds+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Photomed.+Laser+Surg%22%5BJournal%5D)">Testing photobiomodulatory effects of laser irradiation on wound healing: development of an improved model for dressing wounds in mice.</a> Photomed. Laser Surg. 28, 589-596 (2010).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

Bu deri yara iyileşmesinin deneysel fare modelidir. Bu modelin önemli bir özelliği, insanlarda oluşan işlemi için benzer hale reepitelizasyon ve yeni doku oluşumu meydana gelebilir, böylece yara büzülmesini önlemek için silikon splintlerin kullanılmasıdır. Bu model, çok yönlü ve fizyolojik ve patofizyolojik (örneğin, diyabet) ortamlarda yara iyileşmesi değerlendirmek için de kullanılabilir. Bu model aynı zamanda ekonomik bir ortamda potansiyel yara iyileşmesi veya anjiyojenez tedavi değerlendirmek için kullanıl...

Bozulmuş yara iyileşmesi önemli morbidite ve tüm dünyada ölüm sorumludur, bu diyabet 1,2 olanlar için geçerlidir. İnsanlarda, yara iyileşmesi 3 örtüşen önemli var olduğu, süreçlerin bir süreklilik olduğunu. Hemen sonra yaralama, inflamatuvar süreçleri başlatılır. Inflamatuar hücreler hücre çoğalması, göç ve anjiyogenez süreçleri teşvik faktörler bırakın. Reepitelizasyon ve yeni doku oluşumu sonra bu kollajen gibi matriks proteinlerinin apoptoz ve yeniden organizasyon hem de gerektirir yeniden bir aşaması vardır. Yara iyileşmesinin karmaşıklığı şu in vitro çoğaltılması ve bu hayvan modellerinin kullanılması gerekmektedir edilemez. Bugüne kadar, yara iyileşmesi çalışmaları iyileşme süreçleri eşdeğer ve insanlar için benzer olmasını sağlamak için, bu tür domuz gibi büyük hayvan modelleri ile sınırlı kalmıştır. Ancak, büyük anima kullanarakbu tür çalışmalar için ls evine zor ve her zaman pratik 4 değildir olabilir. Laboratuvar fare kolayca genetik 5-7 mekanik soruşturma için manipüle edilebilir ekonomik bir hayvan modeli temsil eder. Ancak, fare yaralar daralma 8 sürecinde öncelikle nedeniyle, insan için farklı iyileşir. Bu da, kısmen, insanlarda büyük ölçüde eksik olan istemsiz carnosus adlandırılan geniş bir deri altı çizgili kas tabakası kaynaklanmaktadır. Farelerde, bu kas tabakası deriye bağımsız olarak derin kas hareket etmesine olanak sağlar ve cilt aşağıdaki yaralama hızlı daralma sorumludur. Bu sınırlamayı aşmak için, sıçangil yara iyileşmesi bir splintin kullanımı (Şekil 1) 8,9 insan yara iyileşmesi çoğaltmak için adapte edilebilir. Bu videoda yeniden epithelializa insan süreçleri yara daralma ortadan kaldırır ve daha yakından yaklaşık olarak atel fare yara modeli göstermektion ve yeni doku oluşumu. Bu modelde panniculus carnosus içeren iki tam kat eksizyon fare orta hat her iki tarafında sırtı, bir oluşturulur. Bir silikon atel yapıştırıcı yardımı ile yara etrafına yerleştirilen ve atel sonra kesilen dikişlerle sabitlenir. Her fare böylece hayvan sayısını azaltarak, bir yara tedavi ve diğer araç kontrol alma ile, kendi kontrol gibi davranır. Topikal uygulama sonrası, şeffaf bir kapalı pansuman uygulanır. Daha da topikal uygulamalar ve / veya yara bölgesinde 10,11 ölçümü için gerekli zaman sargı kaldırılabilir. De deneylerin tamamlanması, yara kapama, morfolojik mimari ve neovaskülarizasyon derecesi immünohistokimyasal olarak değerlendirilebilir. Bu ekonomik ve model yapmak kolay da diyabet veya diğer patofizyolojilere bağlamında yara iyileşmesi değerlendirmek için kullanılabilir.

<table><tbody><tr><td>0,5 mm kalınlığında presle kapatılacak silikon kaplama</td><td>Invitrogen</td><td>P18178</td><td>Dış çapı 1 cm, iç çapı 0,5 cm olan "çörekler" halinde kesin</td></tr><tr><td>Biyopsi zımbası 5 mm</td><td>Steifel</td><td>BC-B1-0500</td><td>Eksize edilecek yara alanının ana hatlarını çizmek için</td></tr><tr><td>Vannas makas 8,5 cm kavisli</td><td>World Precision Instruments </td><td>501232</td><td>Yara insizyonu ve eksizyonu için</td></tr><tr><td>Dumonte #7b forseps, 11 cm</td><td>Dünya Hassas Aletler</td><td>501302</td><td>Kesi oluştururken ve cildi çıkarırken cildi kavramak için </td></tr><tr><td>Graefe forseps, tırtıklı 10cm</td><td>Dünya Hassas Aletler</td><td>14142</td><td>Silikon atelin cilde takılmasına yardımcı olmak için</td></tr><tr><td>İğne tutucu, pürüzsüz çeneler, kavisli, 12,5 cm</td><td>World Hassas Aletler</td><td>14132</td><td></td></tr><tr><td>Malis forseps, pürüzsüz, düz, 12 cm</td><td>Codman ve Shurtleff, Inc (J& Amp; J)</td><td>80-1500</td><td>Silikon halkaları cilde dikmek için</td></tr><tr><td>Cetvel, 0,5 mm tonlama</td><td>n/a</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kaliperler 0,25 mm tonlama</td><td>Duckworth ve Kent</td><td>9-653</td><td>Yara alanını ölçmek için</td></tr><tr><td>Opsite FlexiFix şeffaf yapışkan film. 10 cm x 1 m</td><td>Smith & Yeğeni</td><td>66030570</td><td></td></tr><tr><td>Rimadyl (Carprofen)</td><td>Pfizer</td><td>462986</td><td></td></tr></tbody></table>

yara Şifa murin modeli

Murine Model of Wound Healing

Yara iyileşmesi ve onarım insan hayatta meydana gelen en karmaşık biyolojik süreçleri bulunmaktadır. Yaralanma sonrası, birden fazla biyolojik yollar aktif hale gelir. Örneğin diyabetli hastalarda görülür Engelli yara iyileşmesi, bu amputasyon gibi ciddi olumsuz sonuçlara yol açabilir. Yara onarımı teşvik yeni ilaçlar geliştirmek için giderek artan bir ivme nedenle, var. Bunların test gibi genellikle pratik değildir domuz gibi büyük hayvan modellerinde sınırlı kalmıştır. Bu ekonomik ve mekanik soruşturma için izin verir genetik manipülasyon, mükellef olarak fareler, ideal klinik öncesi modeli temsil eder. Ancak, öncelikle daralma yoluyla gerçekleşir olarak bir fare iyileşme insanlarınkine temelden farklıdır sarılır. Bizim fare modeli yara etrafında bir atel dahil ederek bu üstesinden gelir. Yara splintleme olarak, onarım işlemi yakından ayna epitelizasyon, hücre çoğalması ve anjiyogenez, ardından bağlıdırinsan yara iyileşmesinin biyolojik prosesler. Tutarlılık ve bakım gerektiren iken, bu fare modeli karmaşık cerrahi teknikleri içerir ve örneğin, damar gelişimini inhibe edebilir ya da iltihap umut vaat eden maddelerin güçlü bir test edilmesine izin vermektedir. Iki yara hazırlanır Dahası, her bir fare, test bileşiği ve aynı hayvan üzerinde araç kontrolü, hem de uygulama sağlayan, kendi kontrolü olarak görev yapar. Sonuç olarak, biz insanların bu karşılaştırılabilir yara iyileşmesi, pratik bir,-öğrenmek için kolay ve güçlü modeli göstermektedir.

(Gün 0 çap / gün x çap) - bir yara kapatma kısmının eğri yaranın ortalama çapının hesaplanması ve bir yüzde, yani, 100 gibi sonuçlar ifade ile belirlenir. Bu deneyde, bir tedavi bileşiği (veya taşıyıcı ortam kontrol) yaraya günlük olarak uygulandı. Terapötik bileşim büyük ölçüde hızlandırılmış yara kapatma kısmının (Şekil 3). Bu atel çıkarıldıktan hızlı yara daralma (Şekil 2r) yol ve insanlarda görülen yara iyileşmesinin desen uzaklaşmaktadır gibi atel, deney süresince muhafaza...

Fizyolojik ve patofizyolojik ortamlarda terapötik bileşiklerini değerlendirmek için de kullanılabilir deri yara iyileşmesinin Bir murin modeli.

Yara Şifa murin Modeli

Wound healing and repair are the most complex biological processes that occur in human life. After injury, multiple biological pathways become activated. ...

Bu prosedürün genel amacı, kontraksiyonu önlemek ve epitelizasyon, proliferasyon ile anjiyogenezi teşvik etmek için splintle sabitlenmiş bir yara oluşturmaktır. Bu işlem, öncelikle dorsumun hazırlanması ve orta hattın her iki yanına tam kat eksizyonel yaralar açılmasıyla gerçekleştirilir. Ardından, yaranın üzerine bir splint yerleştirilir ve sütürle sabitlenir.Ardından yara ölçülür ve tedaviler uygulanır. Son olarak, yaranın üzerine oklüzif bir pansuman yerleştirilir ve farenin iyileşmesine izin verilir. Nihayetinde, kutanöz eksizyonel yara iyileşmesi modeli; yara, epitelizasyon ve proliferasyon ile anjiyogenez dahil olmak üzere ilgili süreçlerin değerlendirilmesi için kullanılır.Bu tekniğin diğer yöntemlere göre temel avantajı, yara kontraksiyonunun önlenmesidir. Bu durum, yara iyileşme sürecine daha yakın olan epitelizasyon proliferasyonunu ve anjiyogenezi teşvik eder. İnsanlarda bu yöntem, terapötik bileşiklerin etkinliğini değerlendirmek için özellikle kullanışlıdır ve her fare kendi kontrolü olarak hizmet ettiğinden, bir çalışma için gereken hayvan sayısını minimize eder.Atel hazırlamak için öncelikle atelleri ve oklüziv pansumanları hazırlayarak başlayın. İlk olarak, bir silikon tabakası üzerine 10 mm çapında bir daire çizin ve ardından makas veya biyopsi punch'ı kullanarak silikon diskler oluşturun. Daha sonra, beş mm'lik bir biyopsi punch'ını 10 mm'lik diskin merkezine yerleştirin ve atel olarak kullanılacak donut şeklinde bir halka oluşturmak için kuvvetlice bastırın.Ops site gibi şeffaf oklüzif pansuman kullanarak aynı boyutta dairesel pansumanlar hazırlayın. Başlamak için, anestezi uygulanmış bir farede anestezinin uygun derinlikte olduğunu doğrulayın. Cerrahi bölgedeki tüm kılları temizledikten sonra, cildi tekrarlanan Betadine ve alkol uygulamalarıyla temizleyin.Hazır olduğunda, farenin omuz hizasında, orta hattın her iki yanında iki dairesel desen taslağı oluşturmak için steril dört milimetrelik bir biyopsi punch'ı kullanın. Ardından, taslağın ortasındaki deriyi kaldırmak için tırtıklı pens ve yarayı oluşturmak için iris makası kullanın. Panus osis dahil olmak üzere cilt altı dokusunun tamamen kesildiğinden emin olun.Dokuyu her iki taraftan kesin. Böylece iki dairesel yara ortaya çıkar. Silikon splintin her iki yanındaki plastik koruyucu kaplamayı çıkarın ve bir tarafına siyanoakrilat yapıştırıcı uygulayın.Splinti yaranın üzerine ortalayın ve kesikli 6-0 naylon sütürlerle yerine dikin. Diğer yara üzerinde de splintleme işlemini tekrarlayın. Bu noktada, bir yara kontrol grubu olarak kullanılırken diğerine terapötik bir bileşik uygulanabilir.Araç kontrolü için, splintlerin altına bir cetvel yerleştirin ve bir foto-mikrograf çekin. Yarayı, daha önce hazırlanan dairesel pansuman parçalarından biriyle kapatın. Analjezik uyguladıktan sonra, hayvanın ısıtılmış bir kafeste iyileşmesini sağlayın.Hayvanlar, ağrı belirtileri ve kilo kaybı açısından günde iki kez izlenir. Yarayı ölçmek için, hayvanı daha önce gösterildiği gibi anestezi altına alın ve oklüzif pansumanı pens yardımıyla nazikçe kaldırın. Bir ortalama elde etmek için yara çapını birden fazla noktadan cerrahi kumpas ile ölçün ve gelecekte referans olarak kullanmak üzere bir foto-mikrograf çekin.Bu aşamada, hayvanın kan perfüzyonu değerlendirilebilir. Bir lazer doppler görüntüleyici kullanarak, yaraya temiz, şeffaf ve oklüzif bir pansuman uygulayın ve hayvan tamamen iyileşene kadar sıcak tutun. Atlatılması gereken önemli bir nokta, splintlerin düzgün şekilde sabitlenmemesi durumunda, anestetik doz aşımıyla yapılan ötanazi sonrası yaranın kolayca büzüleceğidir; süturları çıkarmak için forseps ve bistüri ucu kullanın ve splinti yaralardan dikkatlice soyarak ayırın.İris makası kullanarak yara bölgesinin etrafında ve altında geniş, tam bir eksizyon gerçekleştirin. Doku çıkarıldıktan sonra, standart prosedürleri izleyerek tespit edin. Yara yapısını ve epitelyal boşluğu görselleştirmek için hematoksilin ve eozin boyaması kullanılabilir.Ek olarak, kılcal damar sayısını belirlemek için immünohistokimyasal analizlerle neovaskülarizasyon değerlendirilebilir. Yara kapanma eğrisi, yaranın ortalama çapı hesaplanarak ve sonuçlar yüzde olarak ifade edilerek belirlenir. Bu örnekte, terapötik bileşik, kontrollere kıyasla yara kapanmasını önemli ölçüde hızlandırmıştır.Bu teknik bir kez kavrandıktan sonra, doğru şekilde uygulandığında 30 dakika içinde tamamlanabilir. Bu prosedür gerçekleştirilirken, deneyler arasında tutarlılığı sağlamak için splintin eşit aralıklı sütürlerle güvenli bir şekilde sabitlenmesi önemlidir.

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu videoda, ayrıntılı moleküler analiz için kolonoskopik indüklenen yara yatağını uygun bir zaman noktasında izole etmek için bir prosedürü açıklıyoruz. Bu analiz, gastrointestinal sistemin enflamatuar koşullarında yara iyileşme sürecini anlamaya yardımcı olur.

Kolonoskopik Kılavuzlu Murin Yara Modeli: İyileşme Sürecini Anlamak İçin Biyopsi Kaynaklı Yara Yatağını Kolondan İzole Etmek İçin Bir Yöntem

Biz bir non-invaziv vivo içinde aerodinamik ve maliyet-etkin, protokolü Imaging görselleştirmek ve reaktif oksijen türlerine (ROS) bir fare excisional yara modelinde oluşturulan ölçmek için L-012, bir chemiluminescent luminol-analog, kullanan açıklar.

Vivo Reaktif oksijen türleri içinde bir fare görüntüleme modeli yara

Burada, primer fibroblastlar kullanarak in vitro çizik testve farelerde in vivo deri yara iyileşmesi test için bir protokol salıyoruz. Her iki tahliller in vitro ve in vivo yara iyileşmesini değerlendirmek için basit yöntemlerdir.

In Vitro ve In Vivo In Vivo Analizi Yara İyileşmesi için Scratch Migration Tahlil ve Dorsal Skinfold Odası

Burada, biri hücresel ve sitokin yara iyileştirici yanıtlarını değerlendirmek, diğeri ise yara kapatma oranını ölçmek için tasarlanmış iki murine yara iyileşmesi modeli tanımlanmıştır. Bu yöntemler, kötü yara iyileşmesiçeşitli yönlerini mekanizmaları belirlemek için diyabet gibi karmaşık hastalık modelleri ile kullanılabilir.

Dorsal Subkutan Polivinil Alkol Sünger İmplantasyonu ve Eksizyonal Kuyruk Deri Yara Modelleri kullanılarak Akut Yara İyileşmesinin Değerlendirilmesi.

Bu çalışmanın amacı yanık yara iyileşmesi bir murine modeli geliştirmektir. Önceden ısıtılmış pirinç şablonu kullanılarak farelerin sırt derisinde termal yanık yapıldı. Yanmış doku debrideed ve genetik olarak benzer donör fare kuyruğundan hasat bir deri greft içip kaplandı.

Allojenik Deri Grefti ile Yeniden Yapılandırılan Yanık Yarasının Murine Modeli

Bu protokol, farelerde ikili, tam kalınlıkta eksizyonel yaraların nasıl üretileceğin ve yaraların morfometrik analiziçin nasıl izlendiğini, hasat edilip hazırlanacağını açıklar. Morfometrik kusurları tanımlamak, tam olarak ölçmek ve tespit etmek için seri histolojik bölümlerin nasıl kullanılacağına iliş bir açıklama dahildir.

Murine Eksizyonel Yara İyileştirme Modeli ve Histolojik Morfometrik Yara Analizi

Burada, ex vivo insan derisini kullanarak yara onarımını değerlendirmek için optimize edilmiş bir teknik ve tam montajlı bir boyama yaklaşımı sergiliyoruz. Bu metodoloji, potansiyel yara tedavilerinin değerlendirilmesi için klinik öncesi bir platform sağlar.

Cilt Onarımını Doğru Değerlendirmek için İnsan Ex vivo Yara Modeli ve Tam Montajlı Boyama Yaklaşımı

Bu çalışma iki önemli deneysel teknik sunmaktadır: yara kapanmasını değerlendirmek için bir murin yara modelinin oluşturulması ve hücresel canlılığı korumak için murin derisinden tek hücreli süspansiyonların hazırlanması.

Fare Yara Modelleri ve Tek Hücre Süspansiyonlarının Hazırlanması

Dijital bir ısıtma cihazı kullanan farelerde bir yanık yarası iyileşme modeli oluşturmak için aerodinamik bir protokol sunulmuştur. Deri üzerinde oluşturulan satranç tahtası benzeri deney bölgeleri, yara iyileşme testi için daha fazla fonksiyonel analizi kolaylaştırır.

Dijital Isıtma Cihazına Dayalı Farelerin Satranç Tahtası Benzeri Yanık Yara İyileşme Modeli

Yaralar küresel bir sağlık sorununu temsil eder. Bu çalışma, yara ölçümü değişkenliğini en aza indirmek için dijital planimetri kullanan standart bir fotoğraf kabini geliştirdi. Farelerde yaraların 14 gün boyunca izlenmesi, yara alanı ve çevresinde başlangıçta bir artış olduğunu ve ardından kademeli olarak kapandığını ortaya koydu. Bu metodoloji, klinik öncesi modellerde yara kapatma kinetiğinin değerlendirilmesine yardımcı olabilir.

Bir Fare Modelinde Yara Kapanma Kinetiğini Değerlendirmek için Dijital Planimetri

Fizyolojik veya patolojik koşullar altında iyileşme sürecinin farklı aşamalarında çeşitli terapötik ajanların değerlendirilmesini sağlayan bir fare derisi yara modeli tanımlanır. Ayrıca, doku onarımı sırasında yara kasılma oranını izlemek için manuel planimetri protokolü detaylandırılmıştır.

Bir Fare Cerrahi Deri Yara Modeli: Yara İyileşme Çalışmaları ve Biyomateryal Değerlendirmesi için Bir Yaklaşım

Keşfedin silikon atel kullanılan murin eksizyonel yara iyileşme modelini; bu yöntem kontraksiyonu önleyerek epitelizasyon, proliferasyon ve anjiyogenezisi destekler. Her fare kendi kontrolü olarak kullanılarak terapötik ajanların sağlam preklinik testleri mümkün olur.

Yara Şifa murin Modeli

Daha fazla video keşfet