Ortotopik Pankreas Kanseri Fare Modeli Dinamik Kontrast Geliştirilmiş Manyetik Rezonans Görüntüleme

Bu prosedürün genel amacı, farelerde ORTOTOPİK pankreas tümörü ksenogreftlerine dinamik kontrastlı manyetik rezonans görüntüleme veya DCE-MRI uygulamaktır. Bu, önce pankreasın karından çıkarılması ve ardından insan pankreas kanseri hücrelerinin pankreasın kuyruğuna yavaşça aşılanmasıyla gerçekleştirilir. Pankreas daha sonra karın içine geri döndü ve tümörün çapı beş ila yedi milimetre olduğunda, doku kütlesi humalarının üzerine plastik bir levha ve bir yüzey bobini yerleştirilir.

Sonuçta, tümör ksenogreftinin mikrovasküler kısmı D-C-E-M-R-I ile görüntülenebilir. Bu tekniğin, deri altı tümör ksenogreftinin D-C-M-R-I gibi geleneksel yöntemlere göre ana avantajı, ortotopik pankreas tümör modellerinin, neovaskülarizasyon, kan temini ve tümör hücresi invazyonu dahil olmak üzere primer tümör mikroçevresinin değerlendirilmesine izin vermesidir. Prosedür, araştırma görevlisi Sharon Samuel ve her ikisi de laboratuvarımızdan bir araştırma teknisyeni olan Marie Warren tarafından gösterilecektir.

Anestezi uygulanmış sekiz haftalık bir dişi kızak valfi deniz faresini bir ısıtma yastığına yerleştirerek başlayın, uygun sedasyon seviyesini ayak parmağınızı sıkıştırarak onaylayın. Daha sonra, hayvanın karnının sol üst çeyreğinden kılları çıkarın ve iris düz makas kullanarak cilde analjezik bir ilaç uygulayın. Deride ve peritonda bir santimetrelik bir kesi yapın ve pankreası kesiden nazikçe kaldırın.

Daha sonra, 2,5 milyon insan pankreas kanseri hücresini 30 mikrolitre DMEM'de pankreasın kuyruğuna yavaşça infüze etmek için 28 gauge iğne ile donatılmış 0,5 mililitrelik bir insülin şırıngası kullanın. Solüsyon tarafından pankreasın başında küçük bir kabarcık oluşturulduğunu onaylayın. Daha sonra pankreası nazikçe karın içine geri yerleştirin ve derideki peritonu iki kesintili beş sıfır prolin sütürle tek kat halinde kapatın.

Cerrahi alanın iki parmağıyla palpasyonu ile tümör boyutunu günlük olarak kontrol edin. Tümörler tipik olarak çevredeki doku ve organlardan daha yoğun ve engebeli hissederler. Hayvanları hastalık belirtileri açısından da günlük olarak izleyin.

Tümör çapı beş ila yedi milimetreye ulaştığında, bir mikro polietilen tüpün bir ucuna keskin bir 30 gauge iğne ve diğer ucuna künt bir 30 gauge iğne ucu yerleştirin. Yeni hazırlanmış MRG kontrast maddesi içeren bir mililitrelik bir şırıngayı künt iğne ucuna bağlayın ve tüm tüpü doldurmak için pistona yavaşça basın. Daha sonra hayvanın kuyruk damarlarını bir ısı lambası altında genişletin ve keskin 30 gauge iğnenin şaftını tutmak için Kelly forsepslerini kullanın.

İğneyi dikkatlice genişlemiş kuyruk damarlarından birine sokun ve kuyruğu düz tutmak için hem kuyruğu hem de tüpü 10 x 100 milimetrelik bir plastik parçaya bantlayın. Ardından, görüntüleme sırasında hayvanın vücut ısısını düzenlemek için fareyi dolaşan ılık suyla donatılmış bir hayvan yatağına sırtüstü yatırın. Bu sırada bir rektal sıcaklık probu da yerleştirin.

Hayvan pozisyondayken, karın bölgesine ortogonal olarak bükülmüş bir plastik tahta uygulayın, tümörün tahtanın üst ucunun arkasına yerleştirildiğinden emin olun ve ardından tümörün sıkıca yakalandığından emin olmak için tahtayı yaklaşık iki milimetre aşağı çekin. Ardından, görüntüleme sırasında hayvanın solunumunu izlemek için göğüs bölgesine bir solunum pedi dönüştürücü bantlayın. Şimdi yüzey bobinini tümör bölgesinin üstüne yerleştirin ve hayvan yatağına güvenli bir şekilde bantlayın.

Ardından, tümör bölgesi hacim bobininin merkezinde olana kadar hayvan yatağını MR tarayıcıya itin. Tümörü bulmak için T iki ağırlıklı MRG uygulayın, ardından T bir haritalama için çeşitli çevirme açılarına sahip T bir ağırlıklı MRG uygulayın. Daha sonra D-C-E-M-R-I görüntüleme için, gadolinyum bazlı MRG kontrastının enjeksiyonundan önce, sırasında ve sonrasında sürekli olarak sabit bir çevirme açısı ile T bir ağırlıklı MRG uygulayın.

Görüntüleme sırasında hayvanın solunumunu ve vücut ısısını sürekli olarak izleyin, görüntülemenin sonunda iğneyi ve diğer probları çıkarın ve alt karın bölgesine yumuşak bir şekilde masaj yaparken hayvanı bir ısı lambasının altına yerleştirin. Hayvan kantitatif olarak uyanana kadar. D-C-E-M-R-I, ortotopik pankreas tümörü ksenogreftleri için başarıyla uygulanabilir.

Örneğin, referans bölge modelini kullanarak, bu kontrast haritaları, MR'nin enjeksiyonundan bir dakika önce tümör bölgesini renk ölçeğinde gösterir. Kontrast madde. Ve T ile çakıştıktan beş ve 40 dakika sonra gri tonlamada iki ağırlık MR görüntüsü. Bu deneydeki fare, ortotopik bir insan pankreas tümörü ksenogrefti taşıyordu.

Bu kontrast artış eğrilerinin tümör bölgesinden ve paravertebral kas bölgesinden ortalaması alındı. Tümör için bu kts ve KEP haritaları, Mr.Kontrast maddesinin yıkama ve yıkanma oranını gösterir Bu TCMI prosedürünü denerken, tümörün tahtanın üst ucunun arkasında yer aldığından emin olmak önemlidir.