Name: bir (A) Güvenlik Önlemleri ve Çalışma Usul BSL-4 Laboratuvar: 2. Genel Uygulamalar (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-10-03T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 53 s
Description: Öğrenin, BSL-4 laboratuvarında plak assay yöntemiyle güvenli çalışma uygulamalarını ve biyogüvenlik dolapları temizlik prosedürlerini. Bu yöntem, yüksek güvenlikli ortamlarda viral analizler için kritik öneme sahiptir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu yayının içeriği, ABD Sağlık ve İnsan Hizmetleri Bakanlığı'nın (DHHS) veya yazarlara bağlı kurum ve şirketlerin görüşlerini veya politikalarını yansıtmak zorunda değildir. Bu çalışma kısmen, Battelle Memorial Enstitüsü'nün ABD Ulusal Alerji ve Bulaşıcı Hastalıklar Enstitüsü (NIAID) ile Sözleşme No. kapsamında yaptığı ana sözleşme aracılığıyla finanse edildi. HHSN272200700016I. M.R.H., D.P., L.B., K.J. ve J.W. bu işi Battelle Memorial Enstitüsü'nün çalışanları olarak gerçekleştirdiler. Bu işi yapan Battelle Memorial Enstitüsü'nün alt yüklenicileri şunlardır: MRI Global'in bir çalışanı olarak S.M.; Lovelace Respiratory Research Institute, Inc.'in bir çalışanı olarak M.G.L.; ve J.H.K. Tunnell Government Services, Inc.'in bir çalışanı olarak.

1. Laboratuvar Girişi <ol><li> Önce BSL-4 laboratuvara girmeden deney (örneğin, hücreler, medya ve sarf malzemeleri) için bir BSL-2 laboratuvar tüm malzemeleri toplayın. </li><li> (Referans 7 ayrıntılı olarak belirtilen) BSL-4 girişi işlemini tamamlayın. </li></ol> BSL-4 Laboratuvarı Sınıf II Biyogüvenlik Kurulu 2. Hazırlık <ol><li> Bir kez BSL-4 laboratuvar içinde tamamlanmıştır günlük iç kontrol listesini (Şekil 1) emin olun. Kontrol listesi önceden doldurulması ve virüsler kullanılacak olan işaret edilmemiş ise kontrol listesini doldurun. Kontrol listesi tamamlanmış ise, isim eklemek ve hangi virüs listesine kullanılacaktır. </li><li> (% 5, çift dörtlü amonyum dezenfektan çözeltisi ile, örneğin, N-alkil dimetil benzil amonyum klorür, N-alkil dimetil benzil amonyum etil (kanat dahil) BSC tüm içini püskürtülerek Sınıf II BSC temizlemeajan klorür veya başka bir dezenfektan uygun kullanılır) ve kağıt havlu 10,11 ile siliniz ediliyor. yapışkan dezenfektan solüsyon kaldırmak için kabine ve kanat içinde% 70 etanol solüsyonu püskürtün. </li><li> Oturmuş ise, kabinin arka ulaşılabilir olmasını sağlamak için rahat bir yükseklikte Sınıf II BSC önünde sandalye ayarlamak ve laboratuvar uzmanının yüz ön açılış yukarıda (Şekil 2) 11 yer aldığını. </li><li> Biyogüvenlik kabini için bir atık kabını hazırlayın. çöp bidonuna çift dörtlü amonyum dezenfektan solüsyon son konsantrasyonu hiçbir% 5&#39;ten az olduğundan emin olun. buna göre planlamak ve% 10 çözelti hangi atık dezenfektan sulandırmak olacağı eklenecektir yapmak. Buna ek olarak, sırasında ve testin tamamlanmasından sonra önce çıkarılması ve eldivenli elleri için bir ürün sprey Sınıf II BSC içinde% 5 çift dörtlü amonyum dezenfektan solüsyon ile bir sprey şişesi yerleştirin. </li> &lt;li&gt; Hava akımının 11 Sınıf II BSC ve bozulma içine tekrarlanan malzeme tanıtımları önlemek için olabildiğince geri olarak kabinede Sınıf II BSC tüm deney için gerekli olan uygun malzemeler yerleştirin. </li></ol> 3. Örnek: plak deneyi <ol><li> virüs içeren örneklerini almak ve elle saklama konumundan virüsü kontrol ve 37 ° C&#39;de bir inkübatör içinde malzeme eritin. </li><li> planlanan virüs seyreltmeleri ile uygun olarak kullanılacak olan 6-çukurlu tablalara, etiketleyin. kapak ve gövde ayrılır başarılı ise eşleştirme sağlamak için levha kapakları ve vücut işaretleyin. </li><li> Sınıf II BSC içine adım 3,1-3,2 malzemeleri getir. Diğer tarafta ( &quot;kirli yüzü&quot;) üzerine ( &quot;temiz tarafı&quot;) ve atık değil ya da bir tarafta virüs ile temas gelmeyecek tüm öğeleri yerleştirin. Eğer mümkünse, aerosol getirici faaliyetlerin 1 sırasında ayrı &quot;kirli bulaşıklar&quot; dan &quot;temiz ürün&quot; en az 30 cm1. </li><li> Iç merkez kendini 11 korumanın en etkili pozisyonu olacak şekilde tasarlanmıştır olarak, mümkün olduğunca Sınıf II BSC iç merkezine yakın çalışın. </li><li> Virüs numune ve kontrol virüsü 50 ul çıkarın ve% 2 fetal sığır serumu ile Dulbecco tadil edilmiş Eagle ortamı içinde, 450 | il içine koyun. Kadar gerekli (Şekil 3A) olarak seri dilüsyonları yaparak devam edin. </li><li> örneklerinde hava kabarcığı oluşumunu en aza indirmek için çalışırken dilüsyonları sırasında, yavaş ve dikkatli bir pipet ile virüs numuneleri en az 5 kez karıştırın. iyi bir sonraki seyreltme her eklemeden sonra pipet uçları değiştirin. </li><li> Son seyreltme, örnek 5 kez karıştırıldıktan sonra dilüsyonları eşit hacimlerde sağlamak için atık kabına virüs numunesinin 50 ul atın. </li><li> ipuçları atarken, genci önce ucu içini ve dışını temizlemek için atık kova dezenfektan solüsyon ile her ucu durulayınAtık kovanın içine ucu ing. </li><li> seyreltme yapıldıktan sonra, 6-çukurlu bir levhanın her çukuruna ortam 500 ul bırakarak kenara sulandırma kaynaklarının ayarlamak ve hücre kültürü levhasına ait gözler içindeki ortam aspire başlar. </li><li> Bir kılavuzu, ayarlanabilir ses kullanarak pipet üstüne atık kova pipet, aspirat dezenfektan solüsyon ile bittiğinde, buton pipet, pipet içinin düzgün dekontaminasyonu sağlamak. Deneyin sonuna kadar atık kova içine ucu bırakın. </li><li> Ortam plakalardan çıkarıldıktan sonra, her bir örnek için ipuçları, her değişen iki kopya halinde, önceden etiketlenmiş plakaları uygun kuyuya doğru numune 100 ul ilave edin. </li><li> Plak tahlil aşılar tamamlanmasının ardından, dezenfektan solüsyon ile eldivenli ellerini sprey ve elle kuvöz içine geri plakaları koymadan önce tüm plakaları dışında silmek için dezenfektan solüsyon ile ıslatılmış kağıt havlu kullanın. YenidenTüm plakaları geri inkübatör içine kadar bu işlemi turba. </li><li> 1 saat hücreleri üzerinde her 15 dk numunenin uygun dağılma sağlamak için şekil-8 hareket plakaları sallayın. </li><li> Sallanan plakaları tamamlanmasından sonra, plak deneyi içinde bindirme için kullanılan bir 2x Eagle minimum zorunlu ortam maddesi karışımı ve% 1.6 kitre, agaroz daha işlemek için daha kolay olan bir yarı-katı kaplaması ile birlikte, Sınıf II BSC plakalara döndürür. </li><li> de yüzeyi boyunca kaplamanın eşit dağılımı için şekil-8 hareket yeniden 6-çukurlu plaka ve kaya içinde her bir oyuğa katlamalı karışımı 2 ml ilave edilir. de kullanılan her bindirme karışımı ile kaplanmış kadar bu işlemi tekrarlayın. </li><li> serolojik pipet ucu bindirme işlemi gerçekleştirmeden çapraz kontaminasyonu engellemek için kuyu herhangi bir sıvı temas etmediğinden emin olun. </li></ol> 4. Atık Bertaraf ve Temizlik Cihazları ve Biyogüvenlik Kurulu &lt;ol&gt; <li> Tamamen en az 10 dakikalık bir temas süresi için atık kovası içerisinde% 5 dezenfektan çözelti içinde tüm atık malzeme daldırın. pipet uçları, serolojik pipet, ve yukarıda tarif edildiği gibi diğer atık dezenfekte. Buna ek olarak, solüsyon 10 dakika temas süresi için atık kovası ile temas halinde kalmasına izin% 5 dezenfektan solüsyon ile atık kova (içten ve dıştan) püskürtün. </li><li> atık geçmesi için temas süresi için beklerken,% 5 dezenfektan solüsyon ile bir kağıt havluyu emmek gibi mikropipetler olarak araçların aşağı silin ve BSC çıkarın. Sınıf II BSC dışında eldivenli ellerini getirmeden önce% 5 dezenfektan solüsyon ile eldivenli ellerini püskürtün. <ol><li> BSC gelen mikropipetler çıkardıktan sonra, araçlarla ilgili yapışkan oluşumunu önlemek için% 70 etanol çözeltisi ile ayrı bir kağıt havlu ile silin. etkin bir şekilde% 5 dezenfektan ile sildi olamaz herhangi aletleri Sprey ve 10 dakika boyunca BSC çözelti ile temas halinde bırakın. </li></ol></li><li> Yeterli temas süresinden sonra, BSC tüm öğeleri kaldırmak. lavaboya atık malzemeleri içeren atık kovası dahil olmak üzere öğeleri, atın. Dezenfektan kalıntılarını temizlemek için yeniden kullanılabilir öğeleri durulayın. kendi depolama yerlerine tüm öğeleri döndürür. </li><li> Sınıf II BSC çalışma yüzeyini, kabine tarafını temizlemek ve geri camın iç ve% 5 dezenfektan solüsyon ile kanat 1% 70 etanol çözeltisi ile izledi. </li><li> çekin ve otoklav için ayrı pipet tepsilerine atık kovası ve yer yüzeyi dezenfekte serolojik pipetler serolojik pipetler tahliye (serolojik pipetler bir kavuz tehlikesi ve çöp torbası ile yırtılabilir. önce sert taraflı kap içinde bu pipetler yerleştirin otoklav). </li><li> lavabonun altına yerleştirilmiş bir süzgeç içine atık kovası içeriğini dökün. </li><li> straine içeriğini lavaboya kırmızı biohazard torba ile kaplı olduğu bir biyolojik tehlikeli atık konteyneri getirin ve dökümüKırmızı biyolojik tehlike torbaya r. süzgeç içine yapışabilir mikropipet ipuçları kaldırmak için süzgeç içine sokmayın. Bütün ipuçlarını kaldırılana kadar atık kabının içine boyunca süzgeç vurmak, ya da süzgeç ipuçları çıkarmak için cımbız kullanın. </li><li> lavabonun yanındaki rafa üzerinde kurumasına atık kova ve yeri durulayın. </li></ol> 5. Otoklavlama Atık <ol><li> Bir arabası üzerinde bir otoklav tepsisine biyolojik tehlikeli atık kabı ve yerden biyolojik tehlike çantayı çıkarın. </li><li> tepsiye güvenli çanta tutmak için otoklav tepsinin kenarlarına bağlayan, açık biohazard çanta bırakmak ve torba dışının üzerinde otoklav bant bir parça yerleştirin. </li><li> serolojik pipet ucu tepsiye otoklav bant iki adet koyun ve kişinin baş harflerini ve tarih ile etiketleyin. otoklav tepsisi ile arabası üzerinde serolojik pipet tepsiye yerleştirin. </li><li> otoklav açın. sağlanan otoklav yükleme / boşaltma ca bağlayınve otoklav için rt arabası üzerinde dinlenmek için geri çekilebilir otoklav platformu ortaya çıkarmak. </li><li> otoklav metal çubuk çıkarın ve üst açın. Otoklav sterilizasyon döngüsü başarıyla tamamlandığını kontrol etmek için metal çubuk haline Geobacillus stearothermophilus sporları içeren bir biyolojik gösterge flakon yerleştirin. </li><li> otoklav tepsisine atık torbasına merkezi haline metal çubuğu yerleştirin, ancak metal çubuk hala kolayca erişilebilir olduğundan emin olun. </li><li> Geri çekilebilir otoklav platformu üzerine atık ve serolojik pipet tepsi ile dolu otoklav tepsiyi yerleştirin ve tekrar otoklav içine itin. </li><li> otoklav gelen otoklav yükleme / boşaltma sepeti ayırın ve otoklav kapağı kapatın. </li><li> otoklav başlatın. </li><li> devir başlamıştır kadar otoklav bırakmayın. otoklav işletim ekranı o çalıştırmak için kalan süre gösterecektir. </li><li> otoklav çalışma tamamlandıktan sonra, biyolojik ind kaldırmakicator ve belirli bir kuluçka makinesi içinde ısıtılarak büyüme değerlendirir. Büyüme biyolojik göstergesi tespit edilirse, otoklav çöp yeniden çalıştırın ve yeniden göstergeyi değerlendirmek. Hiçbir büyüme tespit edilirse, tesis çöp kaldırın. </li></ol> 6. Örnek: Tespit ve Plak analizi boyanması <ol><li> geçti (kullanılan virüs bağlıdır) gün uygun sayıda sonra laboratuara geri dönmek ve bir kez daha bölümlerde 1. ve 2. adımları uygulayın. </li><li> Dikkatle adım 3.1.2 tamamlanan inkübatör plak tahlil plakaları kaldırmak ve elle Sınıf II BSC içine yerleştirin. </li><li> Ortam ve katlamalı malzeme her Pipet ve dezenfektan çözeltisi kap içine dağıtılması ve% 10 nötr tamponlu formalin,% 0.8 kristal violet 12,13 içeren bir karışım ile değiştirin. Karışım tabakalarına virüsü inaktive 30 dakika boyunca plakalar üzerinde kalmasına izin verin. </li><li> inaktivasyon sonra, dikkatlice nötr kaldırmakAyrı bir çöp bidonuna tamponlu formalin / kristal viyole karışımı ve yer atılmadan önce nötralize edilecek. </li><li> dezenfektan ile eldivenli ellerini Sprey ve yukarıda açıklandığı gibi Sınıf II BSC onları geçirmeden önce plakaların dışında silin. </li><li> Fazla leke kaldırın ve sonra kurutmak için arabaya plakaları yerleştirmek için plakaları durulama, lavabo geçin. </li><li> Plakalar tamamen kuruduktan sonra, plaklar saymak için bir ışık kutusu kullanın. Tüm sayıları kaydeder ve standart denklemi (Şekil 3B) virüs titreleri hesaplar. </li></ol> 7. BSL-4 Laboratuvarı Numune Çıkarma <ol><li> BSL-2 laboratuvar koşullarında manipüle edilecek herhangi bir numune inaktive. Takip% 10&#39;luk nötral tamponlu formalin (NBF) ya da Trizol LS (fenol, guanidin izotiosiyanat, amonyum tiyosiyanat, sodyum asetat, gliserol) 1,14 ile IRF-Frederick iç biyogüvenlik ofisi tarafından onaylanan iki yöntemden birini. aktarım saönce BSL-4 laboratuvar kaldırılması için ambalaj BSC dışında yeni bir temiz tüp veya plaka örnek olarak şunlar verilebilir. </li><li> torbanın içine ve BSL-4 laboratuvar üzerinden transferi yapılan numune tüpleri dışında dezenfekte etmek için yeterli,% 5 dezenfektan veya sabitleyici çözeltisi içeren bir ısı ile yapıştırılan bir torbada tüpler ya da plakalar içinde ısı ile yapıştırılan etkisizleştirilmiş örnekler. Aynı prosedürü izleyerek başka kese içine bu keseyi yerleştirin. </li><li> İkinci torba kapatılır ve ısıyla kaynaklanarak kese dışında dezenfekte en az 10 dakika süreyle,% 5 dezenfektan içeren bir daldırma tankı içine ısıyla kaynaklanarak kese yerleştirin. </li><li> inaktivasyon yöntemi kullanılmış ve oda örnekleri transfer olacak yere, ajan kullanılan tüplere sayı ve tüplerin boyut, hacim ortaya koymaya laboratuarın içinde bir smaç tankı seyir defteri doldurun. </li><li> dunk tankından keseyi almak ve BSL-2 laboratuara numune almak için BSL-4 laboratuvar dışında bir meslektaşım ile koordine edin. </li></ol>

<ol><li>Biosafety in microbiological and biomedical laboratories. 5th edn. Chosewood, L. C., Wilson, D. E. , , U.S. Dept. of Health and Human Services. Washington, D.C. Available from: 
 <a target="_blank" href="http://www.cdc.gov/biosafety/publications/bmbl5/">http://www.cdc.gov/biosafety/publications/bmbl5/</a> (2009).</li>
<li>Bioterrorism agents/diseases by category. , Centers for Disease Control and Prevention. Atlanta, GA, USA. Available from: 
 <a target="_blank" href="http://emergency.cdc.gov/agent/agentlist-category.asp">http://emergency.cdc.gov/agent/agentlist-category.asp</a> (2014).</li>
<li>Executive order 13546 -- Optimizing the security of Biological Select Agents and Toxins in the United States. , The White House, Office of the Press Secretary. Washington, DC. Available from: 
 <a target="_blank" href="http://www.whitehouse.gov/the-press-office/executive-order-optimizing-security-biological-select-agents-and-toxins-united-stat">http://www.whitehouse.gov/the-press-office/executive-order-optimizing-security-biological-select-agents-and-toxins-united-stat</a> (2010).</li>
<li>Shurtleff, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+impact+of+regulations%2C+safety+considerations+and+physical+limitations+on+research+progress+at+maximum+biocontainment%5BTitle%5D)+AND+%22Viruses%22%5BJournal%5D)">The impact of regulations, safety considerations and physical limitations on research progress at maximum biocontainment.</a> Viruses. 4, 3932-3951 (2012).</li>
<li>de Kok-Mercado, F., Kutlak, F. M., Jahrling, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+NIAID+Integrated+Research+Facility+at+Fort+Detrick%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Biosafety%22%5BJournal%5D)">The NIAID Integrated Research Facility at Fort Detrick.</a> Appl Biosafety. 16, 58-66 (2011).</li>
<li>Keith, L., et al. Preclinical imaging in BSL-3 and BSL-4 envrionments: imaging pathophysiology of highly pathogenic infectious diseases. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKeith%2C+L+%22Pharmaco-imaging+in+drug+and+biologics+development%22">Pharmaco-imaging in drug and biologics development</a>. Moyer, B. R., Cheruvu, N. P. S., Hu, T. , Springer-Verlag. New York, NY. (2014).</li>
<li>Janosko, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safety+Precautions+and+Operating+Procedures+in+an+%28A%29BSL-4+Laboratory%3A+1.+Laboratory+Suite+Entry+and+Exit+Procedures%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Safety Precautions and Operating Procedures in an (A)BSL-4 Laboratory: 1. Laboratory Suite Entry and Exit Procedures.</a> J Vis Exp. , (2015).</li>
<li>Baer, A., Kehn-Hall, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Viral+concentration+determination+through+plaque+assays%3A+using+traditional+and+novel+overlay+systems%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Viral concentration determination through plaque assays: using traditional and novel overlay systems.</a> J Vis Exp. , e52065(2014).</li>
<li>Gonzalez-Hernandez, M. B., Bragazzi Cunha, J., Wobus, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plaque+assay+for+murine+norovirus%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Plaque assay for murine norovirus.</a> J Vis Exp. , e4297(2012).</li>
<li>Biosafety manual for Texas Tech University. , Texas Tech University. Lubbock, TX. Available from: 
 <a target="_blank" href="http://www.depts.ttu.edu/ehs/web/docs/ttu_biosafety_manual.pdf">http://www.depts.ttu.edu/ehs/web/docs/ttu_biosafety_manual.pdf</a> (2005).</li>
<li>Working safely in your NuAire biological safety cabinet. , NuAire. Plymouth, MN. Available from: 
 <a target="_blank" href="http://ors.uchc.edu/bio/resources/pdf/3.2.3.A.3_nuaireBSC.pdf">http://ors.uchc.edu/bio/resources/pdf/3.2.3.A.3_nuaireBSC.pdf</a> (2015).</li>
<li>Alfson, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Particle+to+plaque-forming+unit+ratio+of+Ebola+virus+influences+disease+course+and+survival+in+cynomolgus+macaques%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol%22%5BJournal%5D)">Particle to plaque-forming unit ratio of Ebola virus influences disease course and survival in cynomolgus macaques.</a> J Virol. , (2015).</li>
<li>Shurtleff, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standardization+of+the+filovirus+plaque+assay+for+use+in+preclinical+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Viruses%22%5BJournal%5D)">Standardization of the filovirus plaque assay for use in preclinical studies.</a> Viruses. 4, 3511-3530 (2012).</li>
<li>Blow, J. A., Dohm, D. J., Negley, D. L., Mores, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Virus+inactivation+by+nucleic+acid+extraction+reagents%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol+Methods%22%5BJournal%5D)">Virus inactivation by nucleic acid extraction reagents.</a> J Virol Methods. 119, 195-198 (2004).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

BSL-4 laboratuvarda çalışma önemli bir zaman ve detaylara ek dikkat gerektirir. Bu ortamda çalışmanın herhangi bir tür iyi kapsamlı, eğitimli ve vicdani bireyler gerektirir. Tahlil laboratuar çalışanları eğitilmelidir hangi birkaç önemli kavramları karıştırmak gibi standart viral plak deneyi, BSL-4 laboratuvarda yüksek sonucu patojenler ile çalışmak için ortak bir prosedürün doğru bir model sağlar. İlk büyük konsept yüksek sonucu patojenler için birincil çevreleme olarak işlev Sınıf II BSC, ...

A correction was made to the authors section in: Safety Precautions and Operating Procedures in an (A)BSL-4 Laboratory: 2. General Practices
One of the authors names was corrected from:
Nicole Joselyn
to:
Nicole Josleyn

A correction was made to the authors section in: Safety Precautions and Operating Procedures in an (A)BSL-4 Laboratory: 2. General Practices

Erratum: Safety Precautions and Operating Procedures in an (A)BSL-4 Laboratory: 2. General Practices

Yüksek sonucu patojenleri ele laboratuvar personelinin güvenliği (enfeksiyon propilaksisler ne tedavi seçenekleri mevcuttur) her şeyden olduğu gibi Sağlık ve İnsan Hizmetleri Departmanı biyomedikal patojen ile çalışma güvenli yürütülmesi için tesis yapımı için kurallar ve en iyi uygulamaları kurmuştur biyogüvenlik perspektifinden 1 klinik laboratuvarlar. mevzuat ve düzenleme sayesinde, uygulamaları ve prosedürleri çok bu patojenlerin ile çalışmak için uyulması gereken zorunlu gereklilikler haline gelmiştir. ABD, kolayca insandan insana aktarılan patojenlerin, yüksek vaka-ölüm oranları neden ve / veya önemli bir halk sağlığı etkisi ve biyoterörizm potansiyeline sahip, Alerji ve Bulaşıcı Sağlık / Ulusal Enstitüsü Ulusal Enstitüsü olarak kategorize edilir hastalık (NIH / NIAID) Öncelikli A Patojenler ve ya hastalık Kontrol ve Önleme (CDC) Biyoterörizm Kategori Merkezleri A Ajanlar 2. Buna ek olarak, HBu patojenler, potansiyel biyoterörizm ajanları olan kitlesel zayiat veya ekonomi, kritik altyapı, ya da kamu güveninin 3 yıkıcı etkileri potansiyeli varsa igh sonucu patojenler Tier 1 Seç Ajanlar olarak sınıflandırılır. BSL-4 laboratuvarlar ile enstitüleri erişim dahil BSL-4 operasyonlar, daha çok BSL-2/3 operasyonlarından daha kontrol edilir. Örneğin, bunun nedeni büyük takım eğitim gereksinimleri, geniş rehberlik gereksinimleri ve ilave tıbbi biyogüvenlik önkoşul bir BSL-2 veya BSL-3 laboratuvar ile karşılaştırıldığında BSL-4 laboratuvar erişmek için önemli ölçüde daha zordur. Buna ek olarak, bir BSL-2 veya BSL-3 tesisi 4-6 karşı bir BSL-4 tesis daha fiziksel güvenlik bariyerleri genellikle vardır. BSL-4 giriş ve çıkış işlemleri bizim ilk makalede belirtildiği gibi, laboratuvar personeli BSL-4 laboratuvar 7 içine giriş için hak kazanmak için kapsamlı eğitim ve psikolojik tarama tabi. WBSL-4 laboratuvar ithin, enfeksiyon ve hatalar riski önlenir veya kurulacak prosedürler izlenerek hafifletilmiş. Araştırma asgari çoklu görev veya dikkat dağıtıcı ile, dikkatli ve bilinçli hareket etmelidir. pozitif basınç takım elbiseli eğildim güçtür ve yüz maskesi gibi mikroskopi gibi prosedürleri kısıtlayabilir. Hacimli eldiven gibi küçük öğelerle çalışılırken veya tüpleri etiketleme olarak ince motor görevleri performansını engellemektedir. BSL-4 laboratuvarlar harcanan zamanı en aza indirmek için, laboratuvar uzmanları görev (ler) tamamlanması için BSL-4 laboratuvar içine bu malzemeleri BSL-2 laboratuvarda öncesinde yapılabilir adımları belirlemek ve daha sonra taşımak için çalışma prosedürleri gözden geçirmelidir. BSL-2 laboratuarda daha fazla işlem için malzeme çıkarırken, malzeme sabit ve mühürlü bir sekonder kapta BSL-4 laboratuvar kaldırılır. kaldırılması gerekebilir örnekleri şunları içerir: enzime bağlı immunosorbe ile analiz edilecek sabit plakaları ya da enfekte olmuş malzeme tüplerint deneyi (ELISA), imüno-floresan deneyi (İFA) ya da polimeraz zincir reaksiyonu (PCR). BSL-2 laboratuarlarında kıyasla BSL-4 laboratuvarlar gerekli kişisel koruyucu ekipman dayattığı fazla fiziksel sınırlamalara ek olarak, hücre kültürü plakaları ve atık yüksek sonucu patojenlerin etkisizleştirilmesi için prosedürler daha az patojenik virüsler için gerekli olan daha sıkı BSL-2 laboratuvarda incelenir. En azından, bu yöntemler, CDC gereksinimi karşılamalıdır. Örneğin, kirli hücre kültür plakaları ve diğer malzemeler arasında, nötr tamponlu formalin gibi kimyasal reaktifler ile inaktive edilebilir. Tedavi hücre kültür plakaları veya tüp, bir sıvı dezenfektan ile dolu bir daldırma tankı ile laboratuvar formalin içeren ısı ile yapıştırılan torbalar içine yerleştirilmiş ve kaldırılması bulunmaktadır. Atık kovaları dezenfektan çözümleri ile dolu ve dezenfektanlar geçici deney sırasında ve DISI için oluşturulan atık almak için kullanılır sprey, Eldiven nfecting sırasıyla biyogüvenlik kabine yüzeyleri ve aletleri temizleme. listelenen konsantrasyona Kuaterner amonyum dezenfektan solüsyon tüm ABD BSL-4 laboratuvarlar (Barr J, kişisel iletişim, 2015) için altın standart olarak kabul edilir. Bir atık kovası Katı atık kirlenme potansiyelini ortadan kaldırmak için otoklava. adına görsel akışı ve genel BSL-4 prosedürleri sınırlamaları göstermektedir, bir yaygın olarak kullanılan virüs prosedüre bir örnek olarak, standart bir virütik plak deneyi kullanılmıştır. Viral tahlil işlemi genel olarak tarif edilirken, bu protokolde laboratuvar personelinin güvenliğini sağlamak için kullanılan biyogüvenlik prosedürleri stres. Plak tahlil tekniği 8,9 ek arka plan için önceki klasik plak tahlil görselleştirme bakınız. Burada sunulan prosedürler CDC 1 tarafından açıklanan BMBL talimatlarına uyun. Ancak, sunulan protokollerIRF-Frederick özgü. Her BSL-4 tesis BSL-4 laboratuvar içinde deneylerin yürütülmesini etkileyen farklı standart operasyon prosedürlerini (SOP) ve çalışma yöntemleri vardır. atık akımı yönetimi ve plak deneyleri yürütülmesi için alternatif prosedürler bu laboratuarların yönetimine ve işleyişine ilişkin olarak farklılık gösterebilir. Yine de, bir BSL-4 takım laboratuvar ve BSL-4 ortam içinde Class II dolapları işi gerçekleştirmek için prosedürlerin kurulum genel bir anlayış yüksek riskli patojenlerin çalışmaları düşünürken bilim adamları kısıtlamaları ve güvenlik etkileri anlamanıza yardımcı olacaktır. BSL-4 laboratuvarda çalışmalarını çevreleyen zorluklar dışında işbirlikçileri artan farkındalık düzeltilmiş beklenti ve araştırma topluluğu tıbbi önlemler geliştirmeye daha kolay yol açabilir.

<table><tbody><tr><td>Micro-Chem Plus</td><td>Ulusal Kimya Laboratuvarları</td><td>255</td><td></td></tr><tr><td>Etanol</td><td>Fisher</td><td>BP2818500</td><td></td></tr><tr><td>2 ml 96 Derin Kuyu Plakaları</td><td>Fisher</td><td>278743</td><td></td></tr><tr><td>10 ml Serolojik Pipet</td><td>Fisher</td><td>13-678-11E</td><td></td></tr><tr><td>25 ml Serolojik Pipet</td><td>Fisher</td><td>13-678-11</td><td></td></tr><tr><td>6 oyuklu plakalar</td><td>Fisher</td><td></td><td></td>140675</tr><tr><td>Kristal Menekşe</td><td>Sigma</td><td>HT90132-1L</td><td></td></tr><tr><td>% 10 Nötr Tamponlu Formalin</td><td>Fisher</td><td>22-050-105</td><td></td></tr><tr><td>Tragacanth</td><td>Fisher</td><td>50-702-2000&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>20 &mu; l Pipet</td><td>Uçları Fisher</td><td>21-402-550</td><td></td></tr><tr><td>200 &mu; l Pipet</td><td>Uçları Fisher</td><td>21-402-561</td><td></td></tr><tr><td>1.000 &mu; l Pipet Uçları</td><td>Fisher</td><td>21-402-581</td><td></td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Lonza</td><td>12-604Q</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>Sigma</td><td>F2442-500mL</td><td></td></tr><tr><td>Penisilin / Streptomisin</td><td>Lonza</td><td>17-602E</td><td></td></tr><tr><td>2x EMEM</td><td>Kalite Biyolojik</td><td>115-073-101</td><td></td></tr><tr><td>Pipetleyici</td><td>Drummond</td><td>4-000-101</td><td></td></tr><tr><td>1.000 &; l Pipet ve nbsp;</td><td>Yağmur</td><td>&nbsp; L-1000XLS+</td><td></td></tr><tr><td>200 &mu; l Pipet ve nbsp;</td><td>Yağmur</td><td>&nbsp; L-200XLS+</td><td></td></tr><tr><td>12-kuyulu, çok kanallı 200 &mu; l Pipetleyici</td><td>Rainin</td><td>L12-200XLS +</td><td></td></tr> <tr><td>8-Kuyulu, Çok Kanallı 1.000 & mu; l Pipetleyici</td><td>Rainin</td><td>LA8-1200XLS</td><td></td></tr><tr><td>Ekspres Tıbbi</td><td>Malzemeleri Doğrula&nbsp;</td><td></td><td></td>MMM12192</tr><tr><td>Otoklav</td><td>Getinge</td><td>GEB 2404 AMB-2</td><td></td></tr><tr><td>Otoklav Torbası</td><td>Fisher</td><td>01-828E</td><td></td></tr><tr><td>2.000 ml Beher</td><td>Fisher</td><td>02-591-10H</td><td></td></tr><tr><td>Otoklav Tepsisi</td><td>Fisher</td><td>13-359-20B</td><td></td></tr><tr><td>Pipet</td><td>Tepsisi Fisher</td><td>13-361-5</td><td></td></tr><tr><td>37 &derece; C Kuluçka</td><td>Makinesi Fisher</td><td>WU-39321-00</td><td></td></tr><tr><td>Biohazard Can</td><td>Rubbermaid Ticari</td><td>FG614500 KIRMIZI</td><td></td></tr><tr><td>Otoklav Bandı</td><td>Fisher</td><td>15-903</td><td></td></tr><tr><td>IRF Tesisi Tarafından Yapılan</td><td>Otoklav Çubuğu</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Light Box</td><td>Fisher</td><td>S11552</td><td></td></tr><tr><td>Isı Mühürleyen</td><td>Fisher</td><td>NC9793612&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Isı Yalıtım Torbaları</td><td>Fisher</td><td>01-812-25H</td><td></td></tr><tr><td>Biyolojik Tehlike Çantası</td><td>Fisher</td><td>01-828E</td><td></td></tr></tbody></table>

bir (a) güvenlik Önlemleri ve Çalışma usul bsl-4 laboratuvar: 2. genel uygulamalar

Safety Precautions and Operating Procedures in an (A)BSL-4 Laboratory: 2. General Practices

bir biyogüvenlik düzeyi 4 (BSL-4) çevreleme laboratuvarda çalışma zamanı ve detay için büyük dikkat gerektirir. olmayan yüksek sonucu patojenler ile bir BSL-2 laboratuvarda yapılır aynı iş BSL-4 ortamda önemli ölçüde daha uzun sürer. Bu artan zaman gereksinimi nedeniyle laboratuvar kaynaklı enfeksiyonlar, olası kontaminasyon çalışma ortamı ve yüksek sonucu patojenlerin olası sürümünden yerel halktan araştırmacı korumayı amaçlayan faktörlerin çok sayıda etmektir. laboratuvar içinde, hareket zorunlu tam vücut emniyet elbise bağlı hava hortumları nedeniyle sınırlıdır. Buna ek olarak, Sınıf II biyogüvenlik kabinleri (BSC) kaldırılır her öğenin dezenfeksiyon gereklidir. Laboratuvar uzmanları BSL-4 laboratuvar uygulamaları konusunda eğitilmelidir ve performans becerileri yüksek yeterliliğini göstermek gerekir. Bu yazının amacı, uygun prosedürleri ve laboratuvar b sağlamak için teknikleri ana hatlarıyla ortaya koymaktırörnek prosedür olarak, standart bir virütik plak deneyi kullanılarak iosafety ve deneysel doğruluk. Bir Deney görsel üzerinde durulacaktır Özellikle, uygun teknikler BSL-4 ortamında güvenli çalışma. Bu teknikler şunlardır: deneyler, uygun çalışma bitmiş Sınıf II BSC temizliği, atık yönetimi ve BSL-4 laboratuvar içinde oluşturulan atıkların güvenli bertaraf ve BSL içinden inaktive numunelerin çıkarılması için bir Sınıf II BSC kurma BSL-2 laboratuara 4 laboratuvar.

BSL-4 laboratuvar içinde uygun prosedürler izlenerek testlerin güvenli ve etkili tamamlanmasını sağlamak için kritik öneme sahiptir. Tamamlanan günlük iç kontrol listesi (Şekil 1) atıfta bulunarak, laboratuvar personeli bu ekipman tam olarak faaliyete olduğundan emin olun. BSC merkezinde uygun vücut pozisyonu deney optimum hava akış koşulları (Şekil 2) altında gerçekleştirilir sağlar. Virüs Örnek seri plaka başına 30-300 plaklar (Şekil 3A)</stron...

Bir BSL-4 laboratuvarında viral testler yapmak, gerekli ek güvenlik önlemleri nedeniyle bir BSL-2 laboratuvarındaki çalışmalara kıyasla daha karmaşıktır. Burada, uygun Sınıf II biyogüvenlik kabini kullanımını, atık yönetimini/bertarafını ve numune kaldırmayı gösteren bir BSL-4 laboratuvarında kullanılan uygulama ve prosedürlere genel bir bakış sunuyoruz.

bir (A) Güvenlik Önlemleri ve Çalışma Usul BSL-4 Laboratuvar: 2. Genel Uygulamalar

Work in a biosafety level 4 (BSL-4) containment laboratory requires time and great attention to detail. The same work that is done in a BSL-2 laboratory ...

Bu prosedürün genel amacı, plak sayım yöntemini örnek olarak kullanarak, biyogüvenlik düzeyi 4 kıyafetli bir laboratuvarda çalışırken güvenli uygulama yöntemlerini göstermektir. Bu prosedür, standart bir plak sayım işlemini biyogüvenlik düzeyi 4 ortamında gerçekleştirmek için gerekli olan modifikasyonları göstermektedir. Prosedürü benimle birlikte Entegre Araştırma Tesisi'nden teknisyen Tracey Burdette uygulamalı olarak gösterecektir.Günlük dahili sistem kontrol listesi tamamlandıktan sonra, ön cam dahil olmak üzere sınıf II biyolojik güvenlik kabininin iç kısmını %5'lik dual kuaterner amonyum dezenfektan çözeltisi püskürterek temizleyin. Ardından kabini kağıt havlularla silin; analiz sırasında ve tamamlandıktan sonra eldivenli ellere püskürtmek için dezenfektan çözeltisi içeren sprey şişesini kabinin içinde bıraktığınızdan emin olun. Yapışkan dezenfektan çözeltisini gidermek için kabin içine ve ön cama %70 etanol çözeltisi püskürtün.Biyogüvenlik kabini için bir atık kabı hazırlayın. Eklenen tüm sıvıları göz önünde bulundurarak, atık kabındaki çift kuaterner amonyum dezenfektan çözeltisinin nihai konsantrasyonunun %5'ten az olmadığından emin olun. %5'lik çift kuaterner amonyum dezenfektan çözeltisi içeren atık kabını sınıf II biyogüvenlik kabininin içine yerleştirin.Tüm işlemleri sınıf II biyogüvenlik kabininin iç merkezine mümkün olduğunca yakın bir konumda gerçekleştirin. İç merkez, kişiyi korumak için en etkili konum olacak şekilde tasarlanmıştır. Seyreltme kuyucuklarına 50 µL virüs örneği ve kontrol virüsü alın ve bunları %2 fetal bovine serum içeren 450 µL Dulbecco's Modified Eagle's medium içine yerleştirin.Gerektiği kadar seri dilüsyonlar yaparak devam edin. Virüs örneklerini, her dilüsyondan sonra pipet ucunu değiştirerek en az beş kez karıştırın. Örneklerde hava kabarcığı oluşumunu en aza indirmek için yavaşça karıştırın.İşlem tamamlandığında, dilüsyon kuyucuklarını kenara ayırın. Pipet uçlarını atarken, ucu atık kovasına bırakmadan önce ucun içini ve dışını dekontamine etmek için her bir ucu atık kovasındaki dezenfektan çözelti ile durulayın. Altı kuyucuklu hücre kültürü plakalarının kuyucuklarındaki besiyerinin büyük kısmını uzaklaştırın.Doğru numuneden 100 µL'yi, önceden etiketlenmiş plakaların uygun kuyucuklarına duble olarak ekleyin. İşlem tamamlandığında, eldivenli ellerinizi dezenfektan solüsyonu ile püskürterek temizleyin. Plakaları elle inkübatöre yerleştirmeden önce, tüm plakaların dış yüzeylerini dezenfektan solüsyonuna batırılmış bir kağıt havlu ile silin.Örneğin hücreler üzerine düzgün şekilde yayılmasını sağlamak için plakaları bir saat boyunca her 15 dakikada bir 8 şeklinde sallayın. Her kuyucuğa iki mililitre üst tabaka karışımı ekleyin ve üst tabakanın kuyucuk yüzeyine eşit şekilde dağılması için plakaları tekrar 8 şeklinde sallayın. Tüm atık malzemeleri, en az 10 dakikalık temas süresi boyunca atık kovasındaki %5'lik dezenfektan çözeltisine tamamen batırın.Atık kovasının içini ve dışını, sınıf II biyogüvenlik kabininin içini, ekipmanların dış yüzeylerini ve eldivenli elleri %5'lik dezenfektan çözeltisi ile püskürterek temizleyin. Çözeltinin atık kovasında ve diğer yüzeylerde 10 dakikalık bir temas süresi boyunca kalmasını sağlayın. Ardından malzemeleri biyogüvenlik kabininden çıkarıp lavaboya götürün.Kullanılmış pipeti otoklavlanmak üzere bir pipet tepsisine yerleştirin. Atık kovasının içeriğini lavabodaki bir süzgece boşaltın. Ardından, kırmızı biyotehlike torbası ile kaplanmış bir biyotehlike atık konteynerini lavaboya getirin ve süzgecin içeriğini kırmızı biyotehlike torbasına boşaltın.Biyotehlike torbasını bir araba üzerindeki otoklav tepsisine yerleştirin. Buharın torba içine girmesine izin verecek şekilde otoklav torbalarını bantla gevşekçe kapatın. Otoklav bantlarından birinin üzerine isim baş harflerinizi ve tarihi yazın.Delikli metal çubuğu otoklavdan çıkarın ve üst kısmı açın. Otoklav sterilizasyon döngüsünün başarıyla tamamlandığını kontrol etmek amacıyla, Geobacillus stearothermophilus sporları içeren bir biyolojik indikatör tüpünü metal çubuğun içine yerleştirin. Atıklarla dolu otoklav tepsisini otoklavın içine yerleştirin.Otoklavı çalıştırın ve döngünün başladığını kontrol edin. Otoklavın işlem ekranı, o çalışma için kalan süreyi gösterecektir. Gerekli inkübasyon süresi tamamlandıktan sonra, plak assay plaklarını inkübatörden dikkatlice çıkarın ve elle temiz sınıf II biyogüvenlik kabinine yerleştirin.Besiyerini ve üzerindeki materyalleri bir pipetle aspire edin ve dezenfektan çözelti kabına aktarın. Virüsü inaktive etmek için besiyerini, 30 dakikalık bir temas süresi boyunca %10 nötr tamponlu formalin ve %0,8 kristal viyole karışımı ile değiştirin. İnaktivasyonun ardından, nötr tamponlu formalin/kristal viyole karışımını dikkatlice uzaklaştırın ve bertaraf edilmeden önce nötralize edilmek üzere ayrı bir atık kabına yerleştirin.Lavaboda, fazla boyayı uzaklaştırmak için plakları durulayın ve ardından tamamen kurumaları için plakları bir tepsiye yerleştirin. Plakları saymak için bir ışıklı tablo (light box) kullanın. Tüm sayımları kaydedin ve standart denklemden virüs titlerini hesaplayın.İnaktive edilmiş örneklerin BSL-4 laboratuvarından çıkarılması için tüpleri veya plakaları bir ısı ile kapatma torbasına yerleştirin. Torbanın içini ve örnek tüplerinin dış yüzeyini dezenfekte etmek için torbanın içine %5'lik dezenfektan veya fissikasyon çözeltisi püskürtün. Ardından torbayı ısı ile kapatın.Aynı prosedürü takip ederek bu torbayı başka bir torbanın içine yerleştirin. İkinci torbayı ısı ile mühürleyin ve torbaların dış kısmını dezenfekte etmek için çift mühürlü torbaları %5'lik dezenfektan çözelti içeren bir daldırma tankında en az 10 dakika bekletin. Laboratuvar içindeki daldırma tankı kayıt defterini; tüplerin sayısını ve boyutunu, tüplerdeki hacmi, kullanılan ajanı, uygulanan inaktivasyon yöntemini ve numunelerin transfer edileceği odayı belirterek doldurun.Biyogüvenlik düzeyi 4 laboratuvarındaki uygun prosedürlerin takip edilmesi, deneylerin güvenli ve etkili bir şekilde tamamlanması için kritiktir. Laboratuvar personeli, tamamlanmış günlük dahili kontrol listesine başvurarak ekipmanların tam olarak çalışır durumda olduğunu sağlar. Virüs örneği, kuyuk başına 30 ila 300 plak içeren plaklar elde etmek ve virüs titresi belirlemek amacıyla seri dilüsyona tabi tutulur.Virüsün konak hücre hatlarına tropizmi, inokülasyon tekniği, virüs büyüme koşulları, uygun dilüsyon aralığı ve overlay seçimi dahil olmak üzere birçok faktör plak oluşumunu etkiler. Prosedür sırasında biyogüvenlik kabininde oluşan atıklar iki kez dezenfekte edilir. Atıklar, biyogüvenlik kabininden çıkarılmadan önce bir kez uygun şekilde dezenfekte edilir.Ardından, atıklar hayvan biyogüvenlik düzey 4 ortamından çıkarılmadan önce otoklavlanır. Bu prosedürlerin izlenmesi sayesinde, Frederick'teki Entegre Araştırma Tesisi'nde yürütülen hayvan biyogüvenlik düzey 4 araştırmaları sırasında hiçbir laboratuvar kaynaklı enfeksiyon kaydedilmemiştir. Bu teknik, uygun şekilde uygulandığında, örnek sayısına bağlı olarak üç ila dört saat içinde tamamlanabilir.Bu prosedürü uygularken, güvenli ve başarılı bir deney gerçekleştirmek için dilüsyonları doğru yaptığınızdan, plakleri buna göre saydığınızdan ve tüm güvenlik önlemlerine uyduğunuzdan emin olun. Bu videoyu izledikten sonra, pozitif basınçlı kıyafetlerin getirdiği fiziksel kısıtlamalar ve standart bir plak assay'ini tamamlamak için gereken ek süre hakkında iyi bir anlayış kazanmış olmalısınız.

safety-precautions-operating-procedures-an-bsl-4-laboratory-2-general

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Araştırmacılar genellikle biyogüvenlik seviye 1 veya 2 (BSL-1/2) deneyleri için gerekli prosedürler ve güvenlik önlemleri hakkında bilgi sahibi olsalar da, BSL-4 giysi laboratuvarlarındaki deneysel prosedürlere aşina olmayabilirler. Bu makale, BSL-4 giysisi laboratuvar sistemleri kontrolü, laboratuvar girişi, hareketi ve çıkış prosedürlerinin ayrıntılı bir görsel gösterimini sağlar.

bir (A) Güvenlik Önlemleri ve Çalışma Usul BSL-4 Laboratuvar: 1. Biyogüvenlik Seviye 4 Suit Laboratuvar Suite Giriş ve Çıkış İşlemleri

Burada, bir hayvan biyogüvenlik seviye 4 laboratuvarında tıbbi görüntülemeyi güvenli bir şekilde gerçekleştirmek için gereken hazırlama ve hayvan işleme prosedürlerine genel bir bakış sunuyoruz. Sahte enfekte olmuş bir kobayın bilgisayarlı tomografisi, yüksek sonuçlu bir patojenin neden olduğu hastalığı değerlendirmek için kullanılabilecek bu prosedürleri göstermektedir.

bir (A) Güvenlik Önlemleri ve Çalışma Usul BSL-4 Laboratuvar: 4. Tıbbi Görüntüleme İşlemleri

Yüksek sonuçlu patojenler, havadaki partiküller yoluyla denekleri potansiyel olarak enfekte edebildiğinden, aerobiyoloji, patogenez araştırmalarında ve tıbbi karşı önlem geliştirmede giderek daha fazla uygulanmaktadır. Bir hayvan biyogüvenlik seviyesi 4 maksimum muhafaza ortamında insan olmayan primatlarda bir aerosol mücadelesi sırasında aerobiyoloji prosedürlerinin ayrıntılı bir görsel gösterimini sunuyoruz.

bir (A) Güvenlik Önlemleri ve Çalışma Usul BSL-4 Laboratuvar: 3. Aerobiyoloji

Hızla konuşlandırılabilen, off-grid laboratuvar tasarlanmış ve inşa için uzak, kaynak kısıtlı genel ayarlar. Kritik lojistik gelişmiş, genişletilebilir, çok fonksiyonlu laboratuvar modülleri yönlerini ve özellikleri incelenmiştir. Temel Laboratuvar iş akışı için bir kontrol listesi ve solunum viral tanı testi için bir protokol geliştirilen ve sunuldu.

Uzak Laboratuvar Yönetimi: Solunum virüs tanılama

Bu protokol, ardından hızlı bir şekilde tüm hücre algılama, domates ve diğer taze ürün yüzeyler örnekleme için basit bir yapışkan bant tabanlı yaklaşım,...

Yapışkan bant tabanlı Örnekleme ve Floresans kombinasyonu In situ</emHızlı Algılama> Hibridizasyon Salmonella Taze üretin

HIV / AIDS tedavisi için anti-retroviral tedavi Güney Afrika'da büyük bir ölçekte izlenir. Flow sitometri, hematoloji (CD45), immünoloji (CD4) ve CD38 tahlil bağlantılı viral yük için birleştirilmiştir. NHLS-SA laboratuarları, Johannesburg kaydedildi, kaynak sınırlı teşhis için rol modelleri olarak hizmet veren bu modern yöntemleri, artan yerel iç kalite kontrolü ile maliyet-etkin.

HIV / AIDS Kapsamlı ve Maliyet Etkin Laboratuvar Kontrolü: Afrikalı bir Rol Modeli

Trichuris muris enfeksiyon dayanıklı farelerde koruyucu bir Th2 yanıtı oluşturmak ve duyarlı fareler patolojik bir Th1 yanıtı Th2 dokunulmazlık bağırsak modelidir.

Trichuris muris Enfeksiyon: Gut Tip 2 Bağışıklık ve İnflamasyon Bir Model

Biz roman laboratuar araçları ve timus intravital görüntü elde etmek için protokoller geliştirdik. Bizim tekniği T hücre gelişimi oluşur timus içinde "nişler" belirlenmesinde yardımcı olacaktır.

2-Foton Mikroskopi kullanarak Fare Thymus intravital Görüntüleme

Burkholderia cinsin üyeleri klinik önemi patojenlerdir. Bu, mekanik bozulma ve daha sonraki analiz için proteomik 2-D jel elektroforezi kullanılarak, toplam bakteri protein çıkarımı için bir yöntem tarif eder.

Toplam Protein Ekstraksiyon ve 2-D Jel Elektroforez Yöntemleri<em&gt; Burkholderia</em&gt; Türler

Süpürücüleri hastalıksız bölgelere kendi dışkılarıyla bulaşıcı bulaşıcı süngerimsi ensefalopati prionları translokasyonunda potansiyele sahiptir. Biz fare adapte skrapi prıonlar Amerikan kargalar sindirim sisteminde (Corvus brachyrhynchos), ölü hayvanların ortak bir tüketici olsa geçtikten sonra bulaşıcı kalırsa belirlemek için kullanılan ayrıntı yöntemleri.

Bir Kuş Türlerinin Sindirim Sistemi geçtikten sonra Bulaşıcı prions belirlenmesi için prosedürler

Öğrenin, BSL-4 laboratuvarında plak assay yöntemiyle güvenli çalışma uygulamalarını ve biyogüvenlik dolapları temizlik prosedürlerini. Bu yöntem, yüksek güvenlikli ortamlarda viral analizler için kritik öneme sahiptir.

bir (A) Güvenlik Önlemleri ve Çalışma Usul BSL-4 Laboratuvar: 2. Genel Uygulamalar

Daha fazla video keşfet