bir (A) Güvenlik Önlemleri ve Çalışma Usul BSL-4 Laboratuvar: 4. Tıbbi Görüntüleme İşlemleri

Bu görüntüleme prosedürünün genel amacı, bir hayvan biyogüvenlik seviye 4 tesisinde hayvanların tıbbi görüntülemesini gerçekleştirmek için gerekli güvenlik prosedürlerini göstermektir. Hayvan biyogüvenliği seviye 4 ortamında görüntüleme yoluyla, hastalığın ilerlemesi non-invaziv olarak değerlendirilir ve potansiyel terapötik ve aşı değerlendirmelerine yardımcı olan biyobelirteçler tanımlanır. Görüntüleme süitleri sıcak ve soğuk taraflar olarak ayrıldığından, enfekte hayvanlar sıcak tarafta güvenli bir şekilde görüntülenirken, görüntüleme ekipmanının çoğu kolay bakım için dışarıda, soğuk tarafta kalır.

Amacımız, ölümcül virüs hastalığının bu hayvan modellerini güvenli bir şekilde görüntüleyebileceğimizi göstermek ve böyle bir ortamda çalışmanın sınırlamalarını ele almaktır. Hayvan prosedürlerini göstermek, entegre araştırma tesisindeki hayvan tesisi yöneticisi Russ Byrum olacak. Görüntüleme teknolojisi uzmanımız Chris Bartos, hayvanın tarayıcıya yerleştirilmesini koordine etmek ve görüntüleri elde etmek için karşılaştırmalı tıp ekibiyle birlikte çalışıyor.

Hayvan denekleri içeren prosedürler, Hayvan Bakım ve Kullanımı Komitesi ve Kurumsal Biyogüvenlik Komitesi tarafından onaylanmıştır. Bilgisayarlı tomografi tarayıcısını hazırlamak için, tarama odasının sıcak veya soğuk tarafında hiçbir personelin bulunmadığını ve denek masasının boş olduğunu doğrulayın. Hava, su ve Teflon'dan yapılmış, fantom olarak adlandırılan bir nesnenin başının ve vücudunun yoğunluğunu temsil eden bir nesnenin, tarama masasının sıcak tarafındaki uygun tutucuya yerleştirildiğinden emin olun.

Soğuk taraftan, fantomun yatağa düzgün şekilde takılıp takılmadığını kontrol edin. Fantomu deliğin ortasına doğru ilerletin. Tarayıcının üreticinin spesifikasyonlarına uygun olduğundan emin olmak için laboratuvarda standartlaştırılmış kalite kontrol parametrelerini kullanarak fantomun bir taramasını elde edin.

Karşılaştırmalı tıp personeline bilgisayarlı tomografinin veya BT tarayıcısının kullanıma hazır olduğunu bildirin. Kullanmadan en az on dakika önce hayvan prosedür odasındaki aşağı çekiş masasını açın. Aşağı çekiş tablasının yüzeylerini, %5 çift kuaterner amonyum dezenfektan solüsyonu gibi onaylı bir dezenfektan kullanarak temizleyin ve dezenfekte edin.

İç yüzeylere püskürtün ve 10 dakikalık temas süresinden sonra yüzeyleri kurulayın, ardından kalan dezenfektanı çıkarmak için yüzeyleri %70 etanol ile püskürtün ve silin. Anestezi indüksiyon kutusu ve hayvan taşıma eldivenleri de dahil olmak üzere gerekli ekipman ve malzemeleri aşağı çekiş masasına yerleştirin. Hayvan tutma cihazını bilgisayarlı tomografi tarayıcı yatağına kurun, ardından yaşamsal belirti monitörünü kurun.

Buharlaştırıcıdaki izofloran hacmini kontrol edin ve gerekirse daha fazla izofloran ekleyin. Anestezi makinesinde sızıntı olup olmadığını görsel olarak inceleyin ve gerekirse sızıntıya neden olan herhangi bir sorunu düzeltin. Atık anestezik gazı yakalayan süpürme kutusunu tartın.

Gine domuzunu barındıran kafesi, görüntüleme odasının bitişiğindeki kemirgen tutma odalarından birinden aşağı çekiş masasına aktarın. Kafes kartındaki hayvan kimlik numarasını doğrulayın. Kafesin kapağını açın ve pozitif basınçlı giysi eldivenlerinin üzerine hayvan koruyucu deri eldivenler giyin.

Yavaşça kobay al. Hayvanı anestezi indüksiyon kutusuna yerleştirin ve kutuyu kapakla kapatın. Hayvan taşıma eldivenlerini çıkarın ve takım eldivenlerini %5 ikili kuaterner amonyum dezenfektan solüsyonu ile temizleyin.

Hayvanı ve kafesi içeren anestezi indüksiyon kutusunu aşağı çekiş masasından çıkarın ve bir taşıma arabasına yerleştirin. Arabayı kullanarak hayvanı bilgisayarlı tomografi tarama odasına götürün. CT tarayıcı odasında, süpürme kutusunu ve anestezi makinesini hemen indüksiyon kutusuna bağlayın.

Metin protokolünde belirtildiği gibi anesteziyi başlattıktan sonra, CT tarayıcı odasının sıcak tarafında, anestezi indüksiyonu sırasında hayvanın dış uyaranlara yanıt vermediğini kontrol ederek ve kas tonusunu kontrol ederek yeterli anestezi derinliği için hayvanı izleyin. Anestezi uygulanmış kobayları indüksiyon kutusundan çıkarın ve görüntüleme yatağında yüzüstü pozisyonda tutma yastığına yerleştirin. Ek bakım anestezisi için, burun konisini kobayın üzerine yerleştirin ve dakikada bir litre oksijen vermek için gazı açın.

Metin protokolünde belirtildiği gibi izofloran verin. Stabil solunum ve kalp atış hızlarını kontrol edin. Kobay tamamen uyuşturulduğunda indüksiyon kutusuna anesteziyi kapatın.

Kornea epitelinin kurumasını önlemek için her iki göze de oftalmik merhem sürün. Kobayları CT taraması için konumlandırmak için CT tarayıcı odasının soğuk tarafındaki lazer sistemini etkinleştirin. Lazer artı işaretinin altında ilgilenilen anatomiyi kapatmak için tablo giriş ve çıkış düğmelerini kullanın.

Görüş alanını ayarlamak için, ilgilenilen anatomi üzerinde başlangıç noktasını ayarlamak için lazer düğmesini kullanın. Kendileri ile bilgisayarlı tomografi tarayıcısı arasına bir kurşun kalkan yerleştirmek için sıcak taraftaki karşılaştırmalı tıp personeli ile iletişime geçin. Üreticinin protokolüne göre CT çalışma görüntüleri için dilim yerleştirme için bir anket taraması edinin.

Anket görüntülerinde BT çalışma görüntüleri için dilim yerleşimini reçete edin. Kontrast enjeksiyonu kullanılıyorsa sıcak taraf personeli ile koordineli çalışın. Üreticinin protokolüne göre çalışma taramasını alın, ardından bilgisayarlı tomografi görüntülerini yine üreticinin protokolüne göre tarayıcı konsolunda yeniden oluşturun.

Görüntüleri bir resim arşivleme ve iletişim sistemine gönderin. İhtiyaç duyulduğunda, arşivleme sistemine kaydedilen bu veriler üzerinde daha fazla kalitatif ve kantitatif analizler yapın. Gine domuzunu tarayıcı yatağından CT tarayıcı odasındaki yiyeceklerle birlikte bir mikro izolater kafesine aktarın.

Hayvanı tuttuktan sonra nitril eldivenleri temizleyin. Arabayı kullanarak kafesi hayvan işlem odasındaki barınma alanına geri taşıyın. Kafesi HEPA havalandırmalı raflara geri koymadan önce anesteziden tamamen iyileşene kadar hayvanı izleyin.

Hem hayvan prosedür odasındaki aşağı çekiş masasını hem de tarayıcı bölme alanını %5 çift kuaterner amonyum çözeltisi ile dezenfekte edin. İkili kuaterner amonyum çözeltisine 10 dakika maruz kaldıktan sonra yüzeyleri %70 etanol çözeltisi ile silin. Monitör ve anestezi makinesi gibi hassas elektronik ekipman gibi doğrudan püskürtülemeyen öğeleri çift kuaterner amonyum doymuş bir bezle ve ardından etanol doymuş bir bezle silin.

Hayvanların taşınması ile ilgili tüm güvenlik prosedürlerine ve standart işletme prosedürlerine sıkı sıkıya bağlı kalmak, bir ABSL4 laboratuvarında güvenli bir şekilde çalışmak için çok önemlidir. Enfekte hayvanların indüksiyon kutusu içinde hayvan işlem odasından görüntüleme odasına aktarılması, ortak koridorların kontaminasyon riskini en aza indirir. Soğuk taraftaki görüntüleme personelinin sıcak taraftaki karşılaştırmalı tıp personeli ile iletişim kurması için kulaklıklı Bluetooth telefonları içeren iletişim sistemlerinin kurulması ve görsel iletişim, ayrılan personel arasındaki iletişimsizlik potansiyelini azaltır.

Uygun prosedürleri izleyerek, IRF Frederic'te hayvan biyogüvenlik seviye 4 araştırması yapılırken laboratuvar kaynaklı enfeksiyonlar veya hayvan deneklerde çapraz kontaminasyon kaydedilmemiştir. ABSL4 viral patojenleri akciğerle ilgili patolojileri indükleyebilir ve BT, hayvan enfeksiyon modellerinde hastalığın ilerlemesini izlemek için değerli bir araçtır. BT görüntüleri, X-ışını radyasyonunun dokulara emilmesinden oluşturulur.

BT'de, kemik gibi görüntülenen nesnenin yoğunluğu ne kadar büyükse, nesne o kadar parlak görünür. Kalp ve karaciğer gibi yoğun organ dokuları orta yoğunlukta olma eğilimindeyken, sağlıklı akciğerler gibi hava dolu dokular siyah görünür. BT, vücudun 3 boyutlu bir görüntüsüne yeniden yapılandırılan 360 derecelik bir görünüm üzerinde birden fazla radyografi elde eder.

Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik düzgün bir şekilde uygulanırsa yaklaşık 30 dakika içinde yapılabilir. Benzer prosedürleri izleyerek, PET, SPECT ve MRI gibi diğer görüntüleme yöntemleri, hastalık patogenezi ve hatta belki de virüsün kendisinin görüntülenmesi ile ilgili ek soruları yanıtlamak için kullanılabilir. Bu videoyu izledikten sonra, prosedürün karmaşıklığını ve bir hayvan biyogüvenlik seviye 4 tesisindeki laboratuvar hayvanlarında tıbbi görüntüleme yapmak için gereken kaynakları iyi bir şekilde anlamış olmalısınız.