Name: Sürekli IV İnfüzyon İnme-uyarılmış Beyin ödem Eğitim için Farelerde Arginin-vazopressin Reseptör Engelleyici Conivaptan için seçim Tedavisi Rota olduğunu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-09-01T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 44 s
Description: Keşfedin inme sonrası fare modelinde sürekli IV infüzyon ile conivaptan uygulamasını ve beyin ödemi üzerindeki etkilerini. Bu yöntem, ilaç veriliş yolunun önemini anlamak için araştırmacılara yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Biz fon ve imkanları sağlamak için İsveç Tıp Merkezi teşekkür ederim. Biz de laboratuvar alanı cömert kullanımı için Craig Hastanesi teşekkür ederiz.

Deneyler araştırma bakım ve hayvanların kullanımı için Ulusal Sağlık Enstitüleri kurallarına uygun olarak yürütülmüştür ve İsveç Tıp Merkezi Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından kabul edildi. Tüm işlemler, uygun aseptik teknikler ile yapıldı. çalışma için kullanılan Deney hayvanları 25 ile 27 g vücut ağırlığına sahip yabani tip C57 farelerine, 3 aylık, erkektir. Vivo İnme İndüksiyon 1. <ol><li> Ön-ceket önce Cerrahi Diş Reçine ile Filament. <ol><li> 7-0 naylon dikiş gelen filament 12 mm uzunluğunda bir parça kesin. 1 kısım sertleştirici reçine 2 parça karıştırın ve hemen yaklaşık 1/3 tüm uzunluğunun kapak karışımına filamanın ucu batırın. hızlı bir şekilde çıkarın ve diş reçine düz yüzeyli ceket ile kaplı olduğundan emin olun. </li><li> Hava kullanımdan önce 2 saat boyunca filamanın kurutun. </li></ol></li><li> Bir içine fare yerleştirinn, anestezi indüksiyonu odası (2 litre hacim) ve 2 L / dk odasına girmeden% 25 oksijen bakımından zenginleştirilmiş havada bulunan% 1.5 izofluran akışını ayarlamak. </li><li> Kuyruk tutam yanıt eksikliği ile belirlenen tam olarak, 8 anestezi kadar fare indüksiyon odasında kalmasına izin verin. </li><li> ısıtılmış bir ped ile ameliyat masasına üzerine fare koyun ve burun konisi ile kendiliğinden teslim anestezi bakımı için% 1 izofluran konsantrasyonu ayarlayın. </li><li> ön ve ensesindeki saçları klip ve ispirto ile boyun püskürtün. Her iki göze veteriner oftalmik merhem sürün. </li><li> sürekli vücut ısısını izlemek için, ameliyat sırasında dijital ekrana bağlı bir rektal ısı probu kullanın. </li><li> , Yatar pozisyonda fare yerleştirin dezenfeksiyon için povidon-iyot,% 10 bodur çözümü uygulayın, steril bir örtü ile kapatın ve daha sonra bir boyutu 10 cerrahi neşter bıçağı ile boyun boyunca bir orta hat kesi yapmak. </li> &lt;li&gt; Geçici 6.0 ipek sütür ile sol karotis arter (CCA) Arter. </li><li> Sol dış karotid arter (ECA) başka bir kravat yerleştirin. </li><li> internal karotis arter (ICA) bir mikrovasküler klip yerleştirin. </li><li> mikrovasküler makas ile eksternal karotid arter üzerinde küçük bir delik kesin. klip çıkarırken direnci (CCA çatallanma noktasından yaklaşık 5-7 mm) keçe kadar, ECA ağzına diş reçine ile kaplı 7-0 naylon sütür yapılmış bir filamanın takın ve cephalically ilerletin. </li><li> pozisyonunda filamanın sabitlemek için internal karotid arter üzerine geçici bir kravat yerleştirin. Diyagram, Şekil 1A bakın. ipek sütür ile cilt kapatın ve adım 2.6 gibi% 0.5 bupivakain 0.2 ml boynun ön yüzünde yara sızmak. </li><li> Fare 60 dakika için bir kurtarma odasında bilinci anestezi uyandırmak ve yeniden kazanmak için izin verir. o kazanmış kadar sahipsiz hayvan bırakmayınYeterli bilinç sternum recumbence korumak için. </li><li> = Geri kalanı, 3 de karşı tarafa fakat normal postür için çizerek 0 = normal motor fonksiyonu, gövde ve kuyruk lift üzerinde kontralateral ön ayakları 1 = fleksiyon, 2 kontralateral eğilerek = aşağıdaki gibidir: nörolojik defisit puanlama (NDS) için fareyi test geri kalanı, 4 yan = hiçbir spontan motor aktivite. 4,9 <ol><li> NDS testi için, gözlem (2-3 dk) için düz bir yüzey üzerinde kuyruk ve yerine göre fare kaldırın. Alternatif olarak, kurtarma odasında fareler gözlemlemek. nedeniyle MCA yetersiz tıkanıklığına alt deneyden 2&#39;den NDS sergileyen fareler hariç. Not: Lazer Doppler flowmetre teknik MCA oklüzyonu teyit etmek için kullanılabilir 9-11. </li></ol></li><li> Yeniden uyutmak yukarıda açıklandığı gibi, indüksiyon odasında toparlanmanın 60 dakika sonra hayvan% 10 povidon-iyot fırçalama çözeltisi ile önceki cilt kesisi yeniden sterilize ve cerrahi yara yenidenkesme ve ipek sütür kaldırarak boyun ön. </li><li> ECA filamanın kaldırmak için aşağıdaki adımları gerçekleştirin: <ol><li> ICA bir mikrovasküler klip yerleştirin. ICA üzerinde dikiş çöz ve açık klip tutarak filamanın çekin. </li><li> klibi kapatın ve kesim proksimal ECA üzerine kravat yerleştirin. </li><li> klibini kaldırmak ve beyne kan akışını geri CCA dan bitişik harfleri çıkarın. Diyagram, Şekil 1B bakın. </li></ol></li></ol> Sürekli 48 saat Tedavi Juguler Ven içine IV Kateter 2. Kurulum Not: hemen fare uyanış olmadan adım 1.16.3 sonra kateter kurulumu devam edin. <ol><li> esnek borular iki farklı boyutları kullanın: iç boruyu takın; (; iç boru korunması için dış çapı 3.18 mm), dış boru içine (dış çapı 0.94 mm ilacı içeren aşılanmış olan). </li><li> P, Yüzüstü pozisyonda fare dantel dezenfeksiyonu için% 10 povidon-iyot bodur çözümü uygulayın ve bir boyut 10 cerrahi neşter bıçağı ile ensesindeki 1 cm kesi yapmak. , Yatar pozisyonda içine fare çevirin% 10 povidon-iyot fırçalama çözeltisi ile boyun ön yeniden sterilize ve boynun ön cerrahi yara yeniden. Tünel boynun ön arka yapılan kesiden cilt altına boru ve açık yara 1 cm onu ​​exteriorize. </li><li> orta hattan yaklaşık 1 cm yanal boynun ön sol kanattan gelen deri altı yağ dokusu çıkarın. Sol juguler ven bulun 5 mm aralıklı ven boyunca iki bağları yerleştirin ve hafifçe damar germek. mikrovasküler makasla iki bağları arasındaki şah damarından küçük bir delik açın; (Kalbe doğru), iç boru 5 mm derinliğinde kaudal ucunu yerleştirin. </li><li> şahdamarından hem bağları ile boru sabitleyin. boynun ön deriyi kapatın3-0 ipek sütür. Diyagram, Şekil 1C bakın. </li><li> Bir dikiş ile ensesindeki cilde boru sabitleyin ve bir fırdöndü ile Mikroinfüzyon IV pompasına hortumu bağlayın. döner yiyecek ve su tam erişim ile kafes içinde farelerin serbest dolaşımını sağlar. </li><li> önündeki deri kesiler ve post-operatif ağrı önlemek için% 0.5 bupivakain 0.2 ml ensesini Infiltrate. Not: Kurumsal özel hayvan protokolleri bağlı olarak, hayvan eroin, NSAID veya antibiyotik öncesi ve sonrası işlevsel ile tedavi edilebilir. Ancak, söz konusu tedaviler iskemik inme sonucu sonuçlarını değiştirebilir (Tartışma Bölüm bakınız). 11-14 </li><li> hayvan deneyinde uç noktasına kadar ayrı bir kafeste hayvan kurtarma odasında uyandırmak ve daha sonra evine izin verin. sternal muhafaza edilmesi için yeterli bilinci yerine kadar sahipsiz hayvan bırakmayınrecumbence. </li><li> 1.5 mL / kg / saat, 4 sürekli 48 saatlik IV Conivaptan tedavisinde (% 5 dekstroz içinde 0.14 mg / ml) ya da araç için infüzyon hızını ayarlamak ve infüzyon başlar. Not: IV infüzyon Conivaptan toplam 1.44 ml bir toplam hacim içinde yaklaşık 0.2 mg / fare / gün olmalıdır. Not: 1.44 ml% 5 dekstroz çözeltisi içinde 0.2 mg toplam miktarda, günde iki kez Conivaptan intraperitoneal (İP) enjeksiyonu gerçekleştirin. IP enjeksiyonu, daha önce açıklanan uygulama. 15 gövde ve kuyruk posterior yüzeyinin cilt kavrama fareler kısıtlamaktadır. 26 G / 1/2 inç iğne kullanılarak karın sol alt kadranda içine Conivaptan veya aracına enjekte edilir. 15 </li><li> Deneyin (48 saat) süresi boyunca günde iki kez hayvanları gözlemlemek. Hayvanlar yiyecek ve su tam erişim için izin verir. Hayvan sıkıntı ya da nefes darlığı belirtileri gösteriyorsa bir veteriner danışınız. ötanazi ciddi dist hayvan için gerekli iseArş aşağıda adım 3.1 bakın ve çalışma hayvan hariç. </li></ol> son noktada İnme-uyarılmış Beyin Ödemi 3. Değerlendirme <ol><li> % 5 izofluran ile aşırı anestezi ile fare Kurban. </li><li> orta hat boyunca kafatası kemiği üzerinde bir cilt kesi yapmak için bir neşter kullanın ve beyin üzerinde tüm kafatası açığa cildi geri çekin. foramen magnum başlayarak, yanal her iki tarafta beynin çevresi boyunca kafatası kemiği kesti, ve onun altındaki beyin dokunmadan dikkatlice kaldırın. omurgadan beyin ve kafatası tabanında takılır sinirleri Sever. </li><li> , Beyin kaldırmak koku ampul ve beyincik ayırın ve daha önce açıklandığı gibi, iskemik ve non-iskemik serebral hemisfer içine interhemisferik fissür boyunca beyni incelemek. 9 </li><li> Islak-kuru karşılaştırarak oranları (WDR), daha önce 4,9 açıklandığı gibi beyin ödemini değerlendirin. dokuları tartmakönce ve bir fırın içinde 100 ° C&#39;de 3 gün boyunca kurutulduktan sonra. % H 2 O = olarak beyinin su içeriğini (BWC) hesaplayın (1-kuru ağırlık. / Islak ağırlık.) X% 100. </li></ol>

<ol><li>Gueniau, C., Oberlander, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+kappa+opioid+agonist+niravoline+decreases+brain+edema+in+the+mouse+middle+cerebral+artery+occlusion+model+of+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Exp+Ther%22%5BJournal%5D)">The kappa opioid agonist niravoline decreases brain edema in the mouse middle cerebral artery occlusion model of stroke.</a> J Pharmacol Exp Ther. 282, 1-6 (1997).</li>
<li>Krafft, P. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Etiology+of+stroke+and+choice+of+models%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Stroke%22%5BJournal%5D)">Etiology of stroke and choice of models.</a> Int J Stroke. 7, 398-406 (2012).</li>
<li>Vakili, A., Kataoka, H., Plesnila, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+arginine+vasopressin+V1+and+V2+receptors+for+brain+damage+after+transient+focal+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Role of arginine vasopressin V1 and V2 receptors for brain damage after transient focal cerebral ischemia.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 25, 1012-1019 (2005).</li>
<li>Zeynalov, E., Jones, S. M., Seo, J. W., Snell, L. D., Elliott, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arginine-Vasopressin+Receptor+Blocker+Conivaptan+Reduces+Brain+Edema+and+Blood-Brain+Barrier+Disruption+after+Experimental+Stroke+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+one%22%5BJournal%5D)">Arginine-Vasopressin Receptor Blocker Conivaptan Reduces Brain Edema and Blood-Brain Barrier Disruption after Experimental Stroke in Mice.</a> PloS one. 10, e0136121(2015).</li>
<li>Med Lett Drugs Ther.. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conivaptan+%28Vaprisol%29+for+hyponatremia%5BTitle%5D)+AND+%22The+Medical+letter+on+drugs+and+therapeutics%22%5BJournal%5D)">Conivaptan (Vaprisol) for hyponatremia.</a> The Medical letter on drugs and therapeutics. 48, 51-52 (2006).</li>
<li>Zhao, X. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+arginine+vasopressin+on+the+cortex+edema+in+the+ischemic+stroke+of+Mongolian+gerbils%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropeptides%22%5BJournal%5D)">Effect of arginine vasopressin on the cortex edema in the ischemic stroke of Mongolian gerbils.</a> Neuropeptides. 51, 55-62 (2015).</li>
<li>Manaenko, A., Chen, H., Kammer, J., Zhang, J. H., Tang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+Evans+Blue+injection+routes%3A+Intravenous+versus+intraperitoneal%2C+for+measurement+of+blood-brain+barrier+in+a+mice+hemorrhage+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Comparison Evans Blue injection routes: Intravenous versus intraperitoneal, for measurement of blood-brain barrier in a mice hemorrhage model.</a> J Neurosci Methods. 195, 206-210 (2011).</li>
<li>Adams, S., Pacharinsak, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+anesthesia+and+analgesia%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Mouse+Biol%22%5BJournal%5D)">Mouse anesthesia and analgesia.</a> Curr Protoc Mouse Biol. 5, 51-63 (2015).</li>
<li>Zeynalov, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+perivascular+pool+of+aquaporin-4+mediates+the+effect+of+osmotherapy+in+postischemic+cerebral+edema%5BTitle%5D)+AND+%22Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">The perivascular pool of aquaporin-4 mediates the effect of osmotherapy in postischemic cerebral edema.</a> Crit Care Med. 36, 2634-2640 (2008).</li>
<li>Zeynalov, E., Dore, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low+doses+of+carbon+monoxide+protect+against+experimental+focal+brain+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotox+Res%22%5BJournal%5D)">Low doses of carbon monoxide protect against experimental focal brain ischemia.</a> Neurotox Res. 15, 133-137 (2009).</li>
<li>Zeynalov, E., Nemoto, M., Hurn, P. D., Koehler, R. C., Bhardwaj, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotective+effect+of+selective+kappa+opioid+receptor+agonist+is+gender+specific+and+linked+to+reduced+neuronal+nitric+oxide%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Neuroprotective effect of selective kappa opioid receptor agonist is gender specific and linked to reduced neuronal nitric oxide.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 26, 414-420 (2006).</li>
<li>Ma, M. C., Qian, H., Ghassemi, F., Zhao, P., Xia, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxygen-sensitive+%7Bdelta%7D-opioid+receptor-regulated+survival+and+death+signals%3A+novel+insights+into+neuronal+preconditioning+and+protection%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Oxygen-sensitive {delta}-opioid receptor-regulated survival and death signals: novel insights into neuronal preconditioning and protection.</a> J Biol Chem. 280, 16208-16218 (2005).</li>
<li>Ahmad, M., Zhang, Y., Liu, H., Rose, M. E., Graham, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prolonged+opportunity+for+neuroprotection+in+experimental+stroke+with+selective+blockade+of+cyclooxygenase-2+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Prolonged opportunity for neuroprotection in experimental stroke with selective blockade of cyclooxygenase-2 activity.</a> Brain Res. 1279, 168-173 (2009).</li>
<li>Meisel, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preventive+antibacterial+treatment+improves+the+general+medical+and+neurological+outcome+in+a+mouse+model+of+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Preventive antibacterial treatment improves the general medical and neurological outcome in a mouse model of stroke.</a> Stroke. 35, 2-6 (2004).</li>
<li>Miner, N. A., Koehler, J., Greenaway, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraperitoneal+injection+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Intraperitoneal injection of mice.</a> Appl Microbiol. 17, 250-251 (1969).</li>
<li>Adis International Limited. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conivaptan%3A+YM+087%5BTitle%5D)+AND+%22Drugs+in+R%26D%22%5BJournal%5D)">Conivaptan: YM 087.</a> Drugs in R&D. 5, 94-97 (2004).</li>
<li>Murphy, T., Dhar, R., Diringer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conivaptan+bolus+dosing+for+the+correction+of+hyponatremia+in+the+neurointensive+care+unit%5BTitle%5D)+AND+%22Neurocrit+Care%22%5BJournal%5D)">Conivaptan bolus dosing for the correction of hyponatremia in the neurointensive care unit.</a> Neurocrit Care. 11, 14-19 (2009).</li>
<li>Liu, X., Nakayama, S., Amiry-Moghaddam, M., Ottersen, O. P., Bhardwaj, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arginine-vasopressin+V1+but+not+V2+receptor+antagonism+modulates+infarct+volume%2C+brain+water+content%2C+and+aquaporin-4+expression+following+experimental+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Neurocrit+Care%22%5BJournal%5D)">Arginine-vasopressin V1 but not V2 receptor antagonism modulates infarct volume, brain water content, and aquaporin-4 expression following experimental stroke.</a> Neurocrit Care. 12, 124-131 (2010).</li>
<li>Wallace, B. K., Jelks, K. A., O'Donnell, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemia-induced+stimulation+of+cerebral+microvascular+endothelial+cell+Na-K-Cl+cotransport+involves+p38+and+JNK+MAP+kinases%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Cell+Physiol%22%5BJournal%5D)">Ischemia-induced stimulation of cerebral microvascular endothelial cell Na-K-Cl cotransport involves p38 and JNK MAP kinases.</a> Am J Physiol Cell Physiol. 302, C505-C517 (2012).</li>
<li>O'Donnell, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravenous+HOE-642+reduces+brain+edema+and+Na+uptake+in+the+rat+permanent+middle+cerebral+artery+occlusion+model+of+stroke%3A+evidence+for+participation+of+the+blood-brain+barrier+Na%2FH+exchanger%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Intravenous HOE-642 reduces brain edema and Na uptake in the rat permanent middle cerebral artery occlusion model of stroke: evidence for participation of the blood-brain barrier Na/H exchanger.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 33, 225-234 (2013).</li>
<li>Walcott, B. P., Kahle, K. T., Simard, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+treatment+targets+for+cerebral+edema%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotherapeutics%22%5BJournal%5D)">Novel treatment targets for cerebral edema.</a> Neurotherapeutics. 9, 65-72 (2012).</li>
<li>Shen, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+G+protein-coupled+receptor+81+%28GPR81%29+protects+against+ischemic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22CNS+Neurosci+Ther%22%5BJournal%5D)">Inhibition of G protein-coupled receptor 81 (GPR81) protects against ischemic brain injury.</a> CNS Neurosci Ther. 21, 271-279 (2015).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

Bu çalışma klinik öncesi inme araştırmalar için önemli bir değere sahiptir. Bu çalışma, farede deneysel inme sonrası Conivaptan (0.2 mg / gün) sürekli IV infüzyonu etkili bir şekilde tedavi 48 saat sonra, beyin ödemi azaltır ortaya koymaktadır. Beyin ödemi üzerindeki Conivaptan aynı dozda IP enjeksiyonu etkisi de araştırılmıştır. hem IV ve IP yollarıyla Conivaptan tedavisi belirtildiği gibi farelerde aquaresis üretir: biraz fizyolojik seviyelerin üzerinde plazma osmolalitesinde 1) artış; ve 2) nedeniyle böbrekte su geri...

İnme, hastalar ve klinisyenler için çok büyük bir yük olmaya devam ediyor. Hayvan inme modelleri laboratuvar ortamında yaklaşık yirmi yıldır kullanılmaktadır. 1 Bununla birlikte, hayvanlarda işe yarayan deneysel tedaviler genellikle insanlarda başarısız olur. 2 Tedavi sonuçlarındaki bu tutarsızlık, hayvan araştırmalarında kullanılan ilaçların uygulama yolları, ilaç metabolizması ve eliminasyon oranı ve diğer birçok husus gibi çeşitli faktörlere bağlı olabilir. İnmenin en önemli komplikasyonlarından biri olan beyin ödemi, sinirbilimdeki güncel araştırmaların odak noktasıdır. Beyin ödemi oluşum mekanizmaları, iskemik beyin hasarına arginin-vazopressin (AVP) yanıtı tarafından tetiklenen su ve elektrolit dengesindeki bozuklukları içerir. 3 Bu nedenle, AVP ve reseptörleri (V1a ve V2), iskemik sonrası beyin ödemi oluşumu ile ilgili araştırma çalışmalarının ana odak noktasıdır. 3
Karışık arginin-vazopressin (V1a ve V2) reseptör blokeri conivananın farelerde iskemik sonrası beyin ödemi üzerindeki etkilerini incelemek için bir metodoloji geliştirdik. 4 Conivaptan5'in moleküler hedefleri, ilacı beyin ödeminin hafifletilmesinde özelliklerinin araştırılması için uygun bir aday haline getirir. Ayrıca, conivadana inmenin patofizyolojik olayları bağlamında çalışılmalıdır. 6 Bu çalışmayı tasarlarken, konivaptan için iki farklı uygulama yolu kullanarak tedavi sonuçlarını karşılaştırmayı düşündük: intravenöz (IV)4 ve intraperitoneal (IP). 7 Tedavilerin inmeye bağlı beyin ödemi üzerindeki etkileri değerlendirildi. Burada, orta serebral arter oklüzyonu (MCAO) ile deneysel inmenin cerrahi indüksiyonu için ayrıntılı protokoller tanımlanmıştır ve ardından juguler IV kateter takılarak sürekli konivaptan tedavisi uygulanmıştır. İnme indüksiyonundan sonra, hayvanlar rastgele aşağıdaki gruplara ayrıldı: IV veya IP ile tedavi edilen araç veya conivaptan (0.2 mg / gün).

<table><tbody><tr><td>Isıtmalı Ped K</td><td>& H Manufacturing Inc</td><td>1060</td><td></td></tr><tr><td>Rektal Problu Sıcaklık Monitörü</td><td>Physitemp</td><td>7029</td><td></td></tr><tr><td>İpek Sütür Makarası, 6-0</td><td>Cerrahi Uzmanlık Corporation</td><td>SP114</td><td></td></tr><tr><td>İğne Üzerinde İpek Sütür, 3-0</td><td>Ethicon</td><td>1684G</td><td></td></tr><tr><td>Naylon Sütür, 7-0</td><td>Ethicon</td><td>1696G</td><td></td></tr><tr><td>Sertleştirici Heraeus ile Diş Reçinesi Polisiloksan</td><td> Kulzer</td><td>65817930</td><td></td></tr><tr><td>Mikroinfüzyon IV Pompası</td><td>Kent Scietific</td><td>GT0897</td><td></td></tr><tr><td>Döner 22GA</td><td>Instech</td><td>375/22PS</td><td></td></tr><tr><td>Laboratuvar Hortumu, 0,94 mm x 0,51 mm</td><td>Dow Corning</td><td>508-002</td><td></td></tr><tr><td>Laboratuvar Hortumu, 3,18 mm x 1,98 mm</td><td>Dow Corning</td><td>508-009</td><td></td></tr></tbody></table>

sürekli iv İnfüzyon İnme-uyarılmış beyin ödem eğitim için farelerde arginin-vazopressin reseptör engelleyici conivaptan için seçim tedavisi rota olduğunu

Continuous IV Infusion is the Choice Treatment Route for Arginine-vasopressin Receptor Blocker Conivaptan in Mice to Study Stroke-evoked Brain Edema

İnme, dünyada morbidite ve mortalitenin en önemli nedenlerinden biridir. İnme, beyin ödemi ve diğer patofizyolojik olaylar nedeniyle karmaşıklaşır. inme-uyarılmış beyin ödemi gelişmesi ve evriminde en önemli oyuncuları arasında hormon arjinin-vasopresin ve reseptörleri, V1a ve V2 olduğunu. Son zamanlarda, V1a ve V2 reseptör blokeri Conivaptan inme sonrası beyin ödemi azaltmak için potansiyel bir ilaç olarak dikkat çekmektedir. Bununla birlikte, vuruş araştırma Conivaptan uygulamaları dahil hayvan modelleri uygulama uygun yolları göre değiştirilmesi gerekir. Burada 48 saat sürekli intravenöz (IV) &#39;sonuçları farelerde deneysel inme sonrası intraperitoneal (İP) Conivaptan tedavileri ile karşılaştırılmıştır. Bu orta serebral arter oklüzyonu Conivaptan (0.2 mg) veya aracın IV tedavisi için boyun damarına sonda yükleme ile kombine edildiği bir protokol geliştirilmiştir. Hayvanların Farklı Gruplar 0.2 ile muamele edilmiştirGünlük Conivaptan veya aracına IP mg bolus. Deneysel inme uyarılmış beyin ödemi, sürekli IV ve IP tedavilerden sonra farelerde değerlendirildi. sonuçların karşılaştırılması Conivaptan Sürekli infüzyon tedavisi Conivaptan IP uygulamasının farklı olarak, farelerde post-iskemik beyin ödemi azaltır olduğunu ortaya koymuştur. Bizim modeli inme ve beyin ödemi bağlamında Conivaptan uygulamaların gelecekteki çalışmalar için kullanılabileceğini düşünmekteyiz.

Hayvanların vücut sıcaklığı, fizyolojik aralıkta ve inme indüksiyon cerrahi prosedür boyunca sabit. MCAO çalışma dışı bırakıldı hemen sonra 2&#39;den düşük NDS sergiledi iki fare. Farelerde MCAO 48 saatte ipsilateral yarımkürede infarkt hacmi üretir. TTC-lekeli dilimleri değerlendirilmesi beyin iskemik inme başlangıcı şiddetli olur 2009. 10 Zeynalov, E. ve Dore, S., tarafından yayınlanan yarıkürenin yaklaşık% 50, MC...

Çalışmalarımız, conivadtanın yararlı etkilerinin farelerde deneysel inme sonrası uygulama yöntemine bağlı olduğunu ortaya koymuştur. Farelerde inme ile uyarılmış beyin ödemi oluşumu üzerine reseptör blokerinin IV kateter yoluyla verilmesi için bir araştırma protokolü geliştirdik.

Sürekli IV İnfüzyon İnme-uyarılmış Beyin ödem Eğitim için Farelerde Arginin-vazopressin Reseptör Engelleyici Conivaptan için seçim Tedavisi Rota olduğunu

Stroke is one of the major causes of morbidity and mortality in the world. Stroke is complicated by brain edema and other pathophysiological events. Among ...

Bu preklinik çalışmanın genel amacı, inme alanındaki gelecekteki araştırma çalışmalarının tasarımının geliştirilmesine yardımcı olmak için, inme sonrası Conivaptan uygulamasına dair başarılı bir fare modeli oluşturmaktır. Bu yöntem, farelerde Conivaptan'ın inme iyileşmesi üzerindeki faydalı etkilerinde uygulama yolunun öneminin ne olduğu gibi, inme araştırma alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, araştırmacılara Conivaptan'ın modellenme çalışmalarında ve inme kaynaklı beyin ödemi üzerindeki etkilerinde destek sağlayacak olmasıdır.Ameliyattan en az iki saat önce, 7-0 naylon sütürden 12 milimetrelik bir filament parçası kesin, ardından iki ölçek dental reçineyi bir ölçek sertleştirici ile karıştırın ve filamentin yaklaşık dört milimetrelik kısmı kaplanana kadar filamenti hızla karışımın içine daldırın. Filament ucunun pürüzsüz bir dental reçine tabakasıyla kaplandığını hemen doğrulayın. Ardından, filamenti iki saat boyunca havada kurutun.Reçine hazır olduğunda, anestezi uygulanmış bir fareyi ameliyat masasındaki bir ısıtma pedinin üzerine yerleştirin ve ayak parmağı sıkıştırma testine yanıt vermediğini doğrulayın. Boynun ön ve arka kısmındaki tüyleri tıraş makinesiyle temizleyin, boyna sürtme alkolü püskürtün ve her iki göze merhem uygulayın. Cerrahi işlem sırasında vücut sıcaklığını sürekli izlemek için dijital bir ekrana bağlı rektal sıcaklık probu kullanın.Fareyi bir diseksiyon mikroskobu altında sırtüstü pozisyona getirin ve gerekirse boynu kavisli tutmak için altına rulo yapılmış bir gaz parçası yerleştirin. Ardından boyun bölgesini %10 Povidone İyot temizleme solüsyonu ile dezenfekte edin. Daha sonra hayvanı steril bir örtüyle kapatın ve boyun boyunca orta hat boyunca bir insizyon yapmak için 10 numara cerrahi bıçak kullanın.6-0 ipek sütür kullanarak sol ortak karotis arteri geçici olarak bağlayın ve ardından sol dış karotis arteri bağlayın. İç karotis artere bir mikrovasküler klips yerleştirin ve dış karotis arterde küçük bir delik açmak için mikrovasküler makas kullanın. Diş reçinesi kaplı filamenti açıklıktan içeri yerleştirdikten sonra, direnç hissedilene kadar klipsi çıkarırken filamenti sefalik yönde ilerletin.Filamanı konumunda sabitlemek için internal karotis arterine geçici bir bağ koyun ve cildi ipek sütür ile kapatın. Ardından, boynun ön kısmındaki yaraya 0,2 mm 0,5% Bupivacaine infiltre edin ve fareyi, sternal resübans sağlanana kadar izleme altında tutulacağı bir iyileşme hücresine transfer edin. Nörolojik Defisit Skorlaması için fareyi kuyruğundan kaldırın ve hayvanı iki ila üç dakika boyunca düz bir yüzeye yerleştirin.Orta serebral arterin yetersiz tıkanması nedeniyle iki puanın altında Nörolojik Defisit Skoru sergileyen fareler hariç tutularak, hayvanın davranışı metne göre puanlayın. Filamenti çıkarmak için insizyon bölgesini %10 Povidone İyot temizleme solüsyonu ile yeniden sterilize edin, cerrahi yarayı tekrar açmak için sütürü kesin ve çıkarın. Ardından, bir diseksiyon mikroskobu altında, internal karotis arterine bir mikrovasküler klips yerleştirin ve internal karotis arter sütürünü çözün.Filamanı kaydırarak çıkarmak için klipsi açık tutun. Ardından klipsi hemen tekrar kapatın ve eksternal karotid arteri kesim bölgesinin proksimalinden sütüre edin. Eksternal karotid arter ligasyonu güvenli hale geldiğinde, klipsi çıkarın ve beyne giden kan akışını yeniden sağlamak için common karotid arter etrafındaki sütürü çözün.Ortak karotis arteri sütürünü çıkardıktan hemen sonra, boynun arkasını %10'luk Povidone İyot solüsyonu ile dezenfekte edin ve bir santimetrelik bir insizyon yapmak için 10 numara cerrahi bistüri ucu kullanın. Ardından boynun ön kısmını yeniden sterilize edin ve cerrahi yarayı tekrar açın. Şimdi, 3,18 mm dış çaplı bir tüpün içine yerleştirilmiş 0,94 mm dış çaplı bir tüp parçasını, hayvanın boynunun arkasından önüne doğru deri altına tünelleyin ve tüp ön insizyona ulaştığında dışarı çıkarın.Boynun ön kısmının sol tarafındaki deri altı yağ dokusunu, orta hattın yaklaşık bir santimetre lateralinden uzaklaştırın. Ardından, diseksiyon mikroskobu altında sol juguler veni bulun ve damarı hafifçe gererek ven boyunca 5 milimetre arayla iki bağ koyun. Daha sonra, mikro vasküler makas kullanarak iki bağ arasındaki juguler ven üzerinde küçük bir delik açın ve iç borunun ucunu kalbe doğru kaudal yönde beş milimetre derinliğe yerleştirin.Tüpü her iki bağla da juguler vene sabitleyin ve boynun ön kısmındaki cildi kapatmak için 3-0 ipek sütür kullanın. Ardından, tüpü bir sütür yardımıyla boynun arkasındaki cilde sabitleyin ve tüpü bir döner eklem (swivel) aracılığıyla mikro-infüzyon intravenöz pompasına bağlayın. Ameliyat sonrası ağrıyı önlemek için boynun ön ve arka kısımlarındaki cilt kesilerini 0,2 ml 0,5% Bupivacaine ile infiltre edin ve hayvanın izlem altında iyileşme odasında uyanmasını sağlayın.Hayvan yan yattığında, Conivaptan veya taşıyıcı ile saatte kilogram başına 1,5 mililitre hızında 48 saatlik sürekli intravenöz tedavi için infüzyon hızını ayarlayın ve infüzyonu başlatın. Alternatif olarak, iki gün boyunca günde iki kez intraperitoneal olarak 0,2 miligram Conivaptan ve 1,44 mililitre %5 Dekstroz uygulayın ve her enjeksiyondan sonra hayvanları kısa bir süre gözlemleyin. Farelerde orta serebral arter oklüzyonu, tetrazolyum klorür boyama ile görselleştirildiği üzere, 48. saatte ipsilateral hemisferde hemisferin yaklaşık %50'sinin etkilendiği bir enfarkt hacmi oluşturur.60 dakikalık orta serebral arter tıkanıklığı indüksiyonundan 48 saat sonra beyin su içeriğinin değerlendirilmesi, intravenöz Konivaptan uygulamasının hem ipsilateral hem de kontralateral hemisferlerde beyin ödemini önemli ölçüde azalttığını ortaya koymaktadır. Buna karşılık, günlük 0,2 mililitrelik bolus şeklinde intraperitoneal Konivaptan tedavisi, inme kaynaklı beyin ödemi üzerinde benzer pozitif etkiler oluşturmakta başarısız olmuştur. Bu teknik, uygun şekilde uygulandığında ve uzmanlaşıldığında iki saat içinde tamamlanabilir.Bu prosedürü uygularken, çalışma sonucunuzu etkileyebileceği ve mortalite oranını artırabileceği için deneysel hayvanda aşırı kan kaybından kaçınmayı unutmamak önemlidir. Bu prosedürün ardından, post-iskemik beyin ödeminde inflamasyonun rolüne ilişkin ek soruları yanıtlamak için kan-beyin bariyeri bozulmasının değerlendirilmesi gibi diğer çalışmalar gerçekleştirilebilir. Bu tekniğin geliştirilmesi, nörobilim alanındaki araştırmacıların klinik çalışmalar için ilaç uygulama yolunun önemini keşfetmelerine önayak olmuştur.Bu videoyu izledikten sonra, farelerde cerrahi olarak iskemik koşulların nasıl oluşturulacağı, juguler vene intravenöz bir kateterin nasıl yerleştirileceği ve farelere sürekli IV infüzyon yoluyla Conivaptan'ın nasıl uygulanacağı konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız. Canlı hayvanlarla çalışmanın son derece riskli olabileceğini ve bu prosedürü gerçekleştirirken cerrahi eldiven ve maske takmak gibi önlemlerin her zaman alınması gerektiğini unutmayın.

continuous-iv-infusion-is-choice-treatment-route-for-arginine

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Merkezi sinir sistemi içine yenidoğan farelerin beyin (intraserebroventriküler) ve (intravenöz) 2) sistemik tedavi ajanları tanıtmak içine 1): Bu makale, enjeksiyon iki çok farklı yöntemler göstermektedir.

Fare intraserebroventriküler sayesinde Terapötik Ajanlar teslimi (ICV) ve intravenöz (IV) Enjeksiyon

Bu videoda, bir mikro-ozmotik pompa beyin infüzyon sisteminin montajını ve ardından fare kafatasına cerrahi implantasyonunu gösteriyoruz. Bu sistem, potansiyel ilaçların sürekli olarak verilmesini sağlar ve bunların beyin ve beyin dokusu üzerindeki etkilerinin incelenmesini kolaylaştırır.

Fare Modelinde Sürekli İlaç İnfüzyon Sistemi: Sürekli İlaç Dağıtımı için Fare Beynine Mikro-ozmotik Pompa İnfüzyon Sistemini İmplante Etmek İçin Cerrahi Bir Prosedür

Kaynak: Zeynalov, E. et. al., Sürekli IV İnfüzyonu, İnme ile Uyarılmış Beyin Ödemini İncelemek İçin Farelerde Arginin-vazopressin Reseptör Blokeri Conivaptan için Seçim Tedavi Yoludur. J. Vis. Uzm. (2016)Bu video, bir fare modelinde bir arginin-vazopressin (AVP) reseptör antagonistinin intravenöz iletimini göstermektedir. Geçici orta serebral arter tıkanıklığı beyin ödemine neden olur. Bir AVP reseptör antagonisti, sol juguler vendeki bir kateter yoluyla uygulanır ve ödemi hafifletir.

Bir fare modelinde beyin ödemini azaltmak için reseptör blokerlerinin intravenöz verilmesi

Ya bir kateterin yerleştirilmesi ya da farelerde sağ yan ventrikül içine, bir bolus enjeksiyonu gerçekleştirerek merkezi sinir sistemi ilaçları hedeflemek için bir yöntem açıklanmaktadır. Biz antisens oligonükleotidler teslim odaklanmıştır. Bu teknik, diğer ilaçlara ve sıçanlara, kolaylıkla adapte edilebilir.

Kemirgen Merkezi Sinir Sistemi İlaçların doğrudan Intraventriküler teslim

Hemodinamiği ölçmek, sıvı sağlamak ve kan örneklemesi yapmak için vasküler erişimler, herhangi bir küçük hayvan modeli çalışması için önemlidir. Anestezi uygulanmış bir sıçanda monitörizasyon, infüzyon ve örnekleme yapmak üzere bir sisteme bağlanmak üzere karotis arter ve ortak juguler ven içine kateter implantasyonu için bir teknik sunuyoruz.

Karotis Arter ve Ven Juguler kateterizasyon bir Bilinçli Rat Modelinde, İnfüzyonları ve Kan Örnekleme hemodinamik Tedbirleri Gerçekleştirme

Konveksiyon-geliştirilmiş teslimat (CED) büyük doku hacimleri doğrudan perfüzyon ile beyin içine terapötik etkili teslim sağlayan bir yöntemdir. Prosedür kateterler ve optimize enjeksiyon prosedürü kullanımı gerektirir. Bu protokol, bir antikor, bir fare beyninde CED için bir metodoloji açıklanmaktadır.

Konveksiyon ile Murine beyin içine antikorların teslimi-gelişmiş teslimat

Iskemik inme sonrası yaygın karotis arter (fare) veya eksternal karotis arter (sıçan) yoluyla, enjekte çözeltileri veya süspansiyonlar için uyarlanabilir nöral kök hücreleri teslim etmek için bir yöntem bildirilmiştir. Enjekte edilen hücreler beyin parankim boyunca geniş bir şekilde dağıtılır ve doğumdan sonra 30 d'ye kadar tespit edilebilir.

Nöral Kök Hücrelerin Sıçan ve Fare Beynine İntra-Arteriyel Teslimatı: Serebral İskemiye Uygulama

Travmatik olmayan intraventriküler kanamanın kemirgen modellerinde kafa içi basıncının izlenmesi güncel literatürde yaygın değildir. Burada, bir sıçan hayvan modelinde intraventriküler kanama sırasında kafa içi basıncı, ortalama arteriyel basıncı ve serebral perfüzyon basıncını ölçmek için bir teknik gösterilmektedir.

Nontravmatik İntraventriküler Kanama Kemirgen Modelinde İntrakraniyal Basınç İzleme

Bu protokol, farelerde çoklu intravenöz bolus dozu uygulaması ve invaziv hemodinamik izleme yürütmek için adım adım bir prosedür sağlar. Araştırmacılar bu protokolü pulmoner arter hipertansiyonu için gelecekteki terapötik bileşik taraması için kullanabilirler.

Hipoksi ile İndüklenen Fare Pulmoner Arter Hipertansiyon Modelinde Çoklu İntravenöz Bolus Dozu ve İnvaziv Hemodinamik Değerlendirme

Bu protokol, apolipoprotein E (ApoE) eksikliği olan farelerde anjiyotensin II salınımı ile abdominal aort anevrizmasını indüklemek için ozmotik bir pompanın ve tekrarlanan ilaç tedavisi için juguler ven kateterli bir vasküler erişim portunun ardışık implantasyonunu tanımlar. Anevrizma gelişiminin 3D ultrason ile izlenmesi, dorsal implantlara rağmen etkili bir şekilde gerçekleştirilir.

Anjiyotensin II İndüklü Abdominal Aort Anevrizmasının Bir Fare Modelinde Santral Venöz Kateter ile İlaç Tedavisi ve 3D Ultrason ile İzleme

Keşfedin inme sonrası fare modelinde sürekli IV infüzyon ile conivaptan uygulamasını ve beyin ödemi üzerindeki etkilerini. Bu yöntem, ilaç veriliş yolunun önemini anlamak için araştırmacılara yardımcı olur.

Sürekli IV İnfüzyon İnme-uyarılmış Beyin ödem Eğitim için Farelerde Arginin-vazopressin Reseptör Engelleyici Conivaptan için seçim Tedavisi Rota olduğunu (Video) | JoVE Journal

Sürekli IV İnfüzyon İnme-uyarılmış Beyin ödem Eğitim için Farelerde Arginin-vazopressin Reseptör Engelleyici Conivaptan için seçim Tedavisi Rota olduğunu

Daha fazla video keşfet