Name: Orijinal Tümör Geliştirme Murin Deneysel Modeli ve Periton Metastaz yoluyla Ortotopik aşılama (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-12-09T12:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 17 s
Description: Öğrenin over karsinomu peritoneal yayılım mekanizmalarını fare modelinde ortotopik aşılama ile incelemeyi. Bu yöntem metastaz biyolojisini anlamak ve tedavi stratejileri geliştirmek için kritik bilgiler sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar yararlı tartışmalar ve teknik yardım için Kadın Hastalıkları ve Doğum Anabilim Dalı üyeleri ve Kanser Biyoloji teşekkür ederiz. Bu çalışma Bilim Teşvik (JSPS) için Japan Society tarafından desteklenen Hibe-in-Aid Bilimsel Araştırma (15K15604 H. Kajiyama için).

Tedavi protokolü Nagoya Üniversitesi tarafından kabul edilen hayvan deney için kuralları takip eder. Hücre süspansiyonları hazırlanması 1. <ol><li> İnsan yumurtalık berrak hücreli karsinoma hücre hattı. <ol><li> (100 birim / ml streptomisin: 0.1 mg / ml penisilin),% 10 fetal sığır serumu (FBS) ve penisilin / streptomisin ile RPMI-1640 ortamı içinde ES-2 hücreleri 12 koruyun. % 5 CO2 nemlendirilmiş inkübatör içinde 37 ° C &#39;de kültür hücreleri. </li><li> % 0.05 tripsin /% 0.02 EDTA çözeltisi (tripsin / EDTA) logaritmik büyüme fazında hücreler toplanır. <ol><li> (- 25 cm 2 başına 4 ml, 2 + Ca 2 + / Mg olmadan PBS 3), sonra bir kez PBS ile yıkama hücreleri, hücre kültürü geminin eski ortamı çıkarın. </li><li> Daha sonra, 25 cm tripsin / EDTA 2 &#39;ye 1 ml. tripsin / EDTA ile hücre mono tabakasının karşılamak için hücre kültür kabı döndürerek. kaldırma ve tripsin / EDTA atıldıktan sonra, hücre dönüş3 inkübatör kültür gemi - hücreleri 5 dakika kadar veya ayrılır. </li><li> Bir mikroskop altında hücreleri incelemek hücreler, hücre kültürü damar ve yüzen yüzeyinden ayrılır sağlamak. </li><li> Tripsin (25 cm2 başına 5 mi) inaktive ve hücrelerin yeniden askıya almak için büyüme ortamı içeren taze serum ekleyin. 15 ml konik tüp yeniden askıya hücreleri aktarın. </li><li> 5 dakika boyunca 300 x g&#39;de santrifüjleyin. 4 ° C&#39;de ya da oda sıcaklığında santrifüjleme ya da gerçekleştirir. Dikkatle süpernatant kaldırmak ve (25 cm 2 başına 5 ml) büyüme ortamı ile hücreleri askıya yeniden. </li></ol></li><li> (Tripan mavi eksklüzyonu ile, örneğin,) hücre sayımı, daha sonra 2 x 10 8 hücre / ml bir yoğunlukta büyüme ortamında yeniden askıya. buz üzerinde asılı hücreleri koyun. </li></ol></li><li> Çözülme dondurulmuş hücre dışı matris (ECM) bir buz banyosu içinde hidrojel alikotları tabanlı. </li><li> 1 (nihai hücre c: 1 bir oranda ECM bazlı hidrojel alikotları hücre süspansiyonu ekleyinbağlı yoğunlaşma: 1 x 10 5 hücre / orta-ECM tabanlı hidrojel ul) ve iyice karıştırın. kullanılana kadar bir buz banyosu içinde hazırlanan hücre süspansiyonları yerleştirin. </li></ol> Hücre süspansiyonları, 2. Ortotopik aşılama NOT: özel bir paketi gerektirmez Cerrahi. Cerrahi ayrı ve en az aktiviteye sahip odasının bir bölgesinde bir laboratuar sıra üzerine gerçekleştirilebilir. Bir laminar kapağı da kullanılabilir. Steril cerrahi aletler kullanılmalıdır ve makas cilt kesi yapmak için kullanılmamalıdır. <ol><li> Bu ortotopik aşılama modeli için yaş 8 haftalık dişi çıplak farelerin (BALB / c nu / nu) kullanın. </li><li> (-% 4 2) İlk olarak, izofluran ile inhalasyon kullanarak fare uyutmak. Firma ayak tutam üzerine çekilmesi eksikliği doğrulayarak anestezi derinliğini kontrol edin. Fare uyuşturulduktan sonra, gerekli kurumasını önlemek için gözlere bir mülayim steril oftalmik merhem uygulayın. </li><li> Bir operat üzerinde anestezi fare yerleştirinaşağı sahne göbek tarafı ing. Cerrahi parkı alkol ve iyot bazlı veya klorheksidin bazlı fırçalayın hem birkaç kez dezenfekte edin. </li><li> dikey sağ kaburga kemer ve femur arasında omurga yakınında ~ 2 cm kesi olun. insizyon bölgesinde yaklaşık steril bir cerrahi örtü kullanın. açılış korumak için kelepçeler ile kazıma cilt yüzeyleri düzeltmek. Not: Retraktörler yerine kelepçeler de kullanılabilir. </li><li> Sonraki, karın boşluğu açmak için ilk kesi altında parietal periton ikinci bir kesi (yaklaşık 1 cm) yapmak. çizi karın yüzeyleri kelepçe. Karın boşluğunda yumurtalık kaldırmak için bir kelepçe ile ipsilateral yumurtalık ve fallop tüpü çevreleyen yağ dokusu klibi. Dikkatle gazlı bez yumurtalık ve fallop tüpü yerleştirin. Sonra, mikroskop altında fare göbek tarafı aşağıya bakacak şekilde yerleştirin. </li><li> hemen enjeksiyon öncesi (1/2 cc 29 G) bir insülin şırınga hücre süspansiyonu yerleştirin. Özenle hazırlanmış hücre süspansiyonu (enjekte 1- Yumurtalık içine 2 ul). Birkaç saniye için ECM bazlı hidrojel jelleşmesini sağlamak için yumurtalık içinde iğnesinin tespit edilmesi. jelleşme sonra, enjekte edilen tümör hücreleri, yumurtalığın içinde kalır. </li><li> Dikkatle vücuda yumurtalık döner. steril tıbbi ipek ile ikinci kesi dikin ve sonra yara klipleri ile cilt mühür. </li><li> Cerrahiden sonra, farenin, ilk 24 saatlik bir süre için bir analjezik (örn, meloksikam, kas içinden (İM) ya da deri altından (sc), 0.2 mg / kg) uygulanır. </li></ol> 3. Post-cerrahi tedavisi <ol><li> sternal yatma korumak için yeterli bilinci yerine kadar fare sıcak tutmak için sıcak bir paketi ile temiz kağıt üzerinde ayrı bir kafes içinde her fare yerleştirin. Sonra, yetiştirilmesi ve izlenmesi için kafeslerine hayvanları dönün. Cerrahi tedavi sonrası 7 gün - 3 günlük fareler izleyin. </li><li> Ameliyat sonrası farelerin izlenmesi <ol><li> ağrı belirtileri durumunda, analge idareSICS günlük olarak (örneğin, meloksikam, İM, veya SC, 0.2 mg / kg). </li><li> Fareler enfeksiyon (örneğin, kızarıklık, şişlik, akıntı) belirtileri varsa, bir anti-enfektif reaktif (örn, penisilin, im, 100.000 IU / kg) ile günlük enjeksiyon yönetmek. </li></ol></li><li> ameliyat sonrası tedavi sonrası 14 gün - cilt kapatma malzemelerdir 10 çıkarın. </li></ol> Tümörlerin ve Metastazlarının 4. Analizi NOT: Tümör enjekte over 2 oluşacaktır - aşılamadan sonra 3 hafta. <ol><li> Karbon dioksit fareler kurban, ve daha sonra analiz için numune 14,16-20 (örneğin, tümörler, metastazlar, organları) 13-15 toplar. Not: bir in vivo görüntüleme sistemi, mevcut ise ışıldaması (örneğin, lusiferaz) ya da floresan proteini (örneğin GFP) üretimi enzimler taşıyan hücrelerin Bu protokol kullanılabilir. Bu modifiye protokol için yararlı bilgiler sağlayacaktırprimer tümörden kanser hücrelerinin yayılmasını dinamiği. </li></ol>

<ol><li>Jemal, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+cancer+statistics%5BTitle%5D)+AND+%22CA+Cancer+J+Clin%22%5BJournal%5D)">Global cancer statistics.</a> CA Cancer J Clin. 61 (2), 69-90 (2011).</li>
<li>Kajiyama, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+clinical+outcome+of+patients+with+recurrent+epithelial+ovarian+carcinoma%3A+is+it+the+same+for+each+histological+type%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Gynecol+Cancer%22%5BJournal%5D)">Long-term clinical outcome of patients with recurrent epithelial ovarian carcinoma: is it the same for each histological type.</a> Int J Gynecol Cancer. 22 (3), 394-399 (2012).</li>
<li>Kikkawa, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+treatment+of+epithelial+ovarian+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nagoya+J+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Advances in treatment of epithelial ovarian cancer.</a> Nagoya J Med Sci. 68 (1-2), 19-26 (2006).</li>
<li>Yoshikawa, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinicopathologic+features+of+epithelial+ovarian+carcinoma+in+younger+vs.+older+patients%3A+analysis+in+Japanese+women%5BTitle%5D)+AND+%22J+Gynecol+Oncol%22%5BJournal%5D)">Clinicopathologic features of epithelial ovarian carcinoma in younger vs. older patients: analysis in Japanese women.</a> J Gynecol Oncol. 25 (2), 118-123 (2014).</li>
<li>Kajiyama, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Involvement+of+SDF-1alpha%2FCXCR4+axis+in+the+enhanced+peritoneal+metastasis+of+epithelial+ovarian+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Cancer%22%5BJournal%5D)">Involvement of SDF-1alpha/CXCR4 axis in the enhanced peritoneal metastasis of epithelial ovarian carcinoma.</a> Int J Cancer. 122 (1), 91-99 (2008).</li>
<li>Terauchi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Possible+involvement+of+TWIST+in+enhanced+peritoneal+metastasis+of+epithelial+ovarian+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Exp+Metastasis%22%5BJournal%5D)">Possible involvement of TWIST in enhanced peritoneal metastasis of epithelial ovarian carcinoma.</a> Clin Exp Metastasis. 24 (5), 329-339 (2007).</li>
<li>Bronstein, L., Zechner, C., Koeppl, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bayesian+inference+of+reaction+kinetics+from+single-cell+recordings+across+a+heterogeneous+cell+population%5BTitle%5D)+AND+%22Methods%22%5BJournal%5D)">Bayesian inference of reaction kinetics from single-cell recordings across a heterogeneous cell population.</a> Methods. 85, 22-35 (2015).</li>
<li>Guo, W., Zhang, S., Liu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+a+novel+orthotopic+model+of+breast+cancer+metastasis+to+the+lung%5BTitle%5D)+AND+%22Oncol+Rep%22%5BJournal%5D)">Establishment of a novel orthotopic model of breast cancer metastasis to the lung.</a> Oncol Rep. 33 (6), 2992-2998 (2015).</li>
<li>Lewis-Tuffin, L. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Src+family+kinases+differentially+influence+glioma+growth+and+motility%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Oncol%22%5BJournal%5D)">Src family kinases differentially influence glioma growth and motility.</a> Mol Oncol. , (2015).</li>
<li>Saar, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+tumorgrafts+in+nude+mice%3A+A+new+method+to+study+human+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Prostate%22%5BJournal%5D)">Orthotopic tumorgrafts in nude mice: A new method to study human prostate cancer.</a> Prostate. 75 (14), 1526-1537 (2015).</li>
<li>Zou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((miR-29c+suppresses+pancreatic+cancer+liver+metastasis+in+an+orthotopic+implantation+model+in+nude+mice+and+affects+survival+in+pancreatic+cancer+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Carcinogenesis%22%5BJournal%5D)">miR-29c suppresses pancreatic cancer liver metastasis in an orthotopic implantation model in nude mice and affects survival in pancreatic cancer patients.</a> Carcinogenesis. 36 (6), 676-684 (2015).</li>
<li>Lau, D. H., Lewis, A. D., Ehsan, M. N., Sikic, B. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multifactorial+mechanisms+associated+with+broad+cross-resistance+of+ovarian+carcinoma+cells+selected+by+cyanomorpholino+doxorubicin%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Multifactorial mechanisms associated with broad cross-resistance of ovarian carcinoma cells selected by cyanomorpholino doxorubicin.</a> Cancer Res. 51 (19), 5181-5187 (1991).</li>
<li>Bao, L., Matsumura, Y., Baban, D., Sun, Y., Tarin, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+inoculation+site+and+Matrigel+on+growth+and+metastasis+of+human+breast+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Cancer%22%5BJournal%5D)">Effects of inoculation site and Matrigel on growth and metastasis of human breast cancer cells.</a> Br J Cancer. 70 (2), 228-232 (1994).</li>
<li>Huang, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiological+investigation+on+major+depressive+disorder+in+the+most+heavily+damaged+areas+from+Wenchuan+earthquake+in+2008%5BTitle%5D)+AND+%22Zhonghua+Liu+Xing+Bing+Xue+Za+Zhi%22%5BJournal%5D)">Epidemiological investigation on major depressive disorder in the most heavily damaged areas from Wenchuan earthquake in 2008.</a> Zhonghua Liu Xing Bing Xue Za Zhi. 31 (2), 167-170 (2010).</li>
<li>Ma, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mortality+of+neonatal+respiratory+failure+related+to+socioeconomic+factors+in+Hebei+province+of+China%5BTitle%5D)+AND+%22Neonatology%22%5BJournal%5D)">Mortality of neonatal respiratory failure related to socioeconomic factors in Hebei province of China.</a> Neonatology. 100 (1), 14-22 (2011).</li>
<li>Lin, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serum+levels+of+FGF-21+are+increased+in+coronary+heart+disease+patients+and+are+independently+associated+with+adverse+lipid+profile%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Serum levels of FGF-21 are increased in coronary heart disease patients and are independently associated with adverse lipid profile.</a> PLoS One. 5 (12), e15534(2010).</li>
<li>Liu, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lumbar+interspinous+non-fusion+techniques%3A+comparison+between+Coflex+and+Wallis%5BTitle%5D)+AND+%22Nan+Fang+Yi+Ke+Da+Xue+Xue+Bao%22%5BJournal%5D)">Lumbar interspinous non-fusion techniques: comparison between Coflex and Wallis.</a> Nan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao. 30 (11), 2455-2458 (2010).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wave+intensity+analysis+of+carotid+artery%3A+a+noninvasive+technique+for+assessing+hemodynamic+changes+of+hyperthyroid+patients%5BTitle%5D)+AND+%22J+Huazhong+Univ+Sci+Technolog+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Wave intensity analysis of carotid artery: a noninvasive technique for assessing hemodynamic changes of hyperthyroid patients.</a> J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci. 30 (5), 672-677 (2010).</li>
<li>Song, G. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+transcriptional+profiling+and+preliminary+study+on+heterosis+mechanism+of+super-hybrid+rice%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Plant%22%5BJournal%5D)">Comparative transcriptional profiling and preliminary study on heterosis mechanism of super-hybrid rice.</a> Mol Plant. 3 (6), 1012-1025 (2010).</li>
<li>Wan, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+analysis+of+variation+of+Han+female+adolescent+bone+development+in+Henan+and+Zhejiang+province%5BTitle%5D)+AND+%22Fa+Yi+Xue+Za+Zhi%22%5BJournal%5D)">The analysis of variation of Han female adolescent bone development in Henan and Zhejiang province.</a> Fa Yi Xue Za Zhi. 26 (2), 97-99 (2010).</li>
<li>Wang, H. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Excitation-emission+fluorescence+characterization+study+of+the+three+phenolic+compounds%5BTitle%5D)+AND+%22Guang+Pu+Xue+Yu+Guang+Pu+Fen+Xi%22%5BJournal%5D)">Excitation-emission fluorescence characterization study of the three phenolic compounds.</a> Guang Pu Xue Yu Guang Pu Fen Xi. 30 (5), 1271-1274 (2010).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

Hayvan modelleri, kanser hücrelerine karşı tümör gelişimi, ilerlemesi, metastaz ve ilaç etkinliğinin mekanizmalarını analiz için esastır. insan yumurtalık kanseri hücreleri olan farelere, aynı zamanda bir hayvan modeli olarak kullanılmıştır. Burada, ortotopik yerinde yumurtalık tümörü hücre uygulama için daha az invaziv bir prosedür açıklanmaktadır. dorsal zayıf bir retroperitoneal yaklaşımla yumurtalık içine bu prosedür, aşılama kullanan diğer sık ​​kullanılan tekniklere göre önemli avantajlar sunmaktadır. Birincisi, k...

Epitelyal over kanseri (EOC) jinekolojik maligniteler 1 arasında kansere bağlı ölüm oranı en yüksek oluşturmaktadır. EOC öncelikle nedeniyle geç semptomatoloji, kötü prognoz ile ilişkilidir ve genellikle birden çok intraperitoneal saçınımlı ve uzak metastaz 2-4 ile ilişkilidir. Periton yaygınlaştırma çok adımlı bir işlemdir. İlk olarak, tümör hücrelerinin birincil lezyonlarla ayırmak ve karın boşluğuna göç ederler. Tümör hücrelerinin periton mesothelium eklemek, onlar Mesothelium 5,6 ile dokuları işgal etmeye başlar. Daha iyi tümör biyolojisi (örneğin, kanser ilerleme ve terapötik yanıt) anlamak için, fare modelleri bilgi hazinesi sağlar. İnsan kanser hücreleri bir ksenograft yaygın insan kanser hücreleri, intraperitonal, intravenöz ve ortotopikal, deri altından aşılanır olan fare modellerinde kullanılmaktadır. Bir orthotopically g bir hayvan modelirafted tümör daha verimli ve doğru bir şekilde heterotopically aşılanmış tümörlü bir hayvan modeli ile karşılaştırıldığında insanlarda tümör ortamı yansıtan sonuçlar üretebilir. Bu nedenle, birçok insan tümörleri için, ortotopik transplantasyon modelleri 7-11 kurulmuştur. Burada, ventral aşılamadan oranla invazivliğini sınırlı dorsal kanadını, bir retroperitoneal yaklaşımla insan EOC hücrelerinin ortotopik aşılama açıklar. Bu teknik EOC yararlı bilgiler, periton yayılması özellikle mekanizmasının çeşitli sağlayabilir.

<table><tbody><tr><td>Matrigel matrisi&nbsp;</td><td>BD</td><td>354234</td><td>ECM bazlı hidrojel</td></tr><tr><td>İnsülin şırıngası</td><td>TERUMO</td><td>SS-05M2913</td><td>1/2 cc, 29 G x 1/2 "</td></tr><tr><td>Dikişli</td><td></td><td></td> dikiş iğnesi <td>11 mm, 3/8, Naylon6-0</td></tr><tr><td>Refleks 7 mm Yara Klipsi</td><td>Uygulayıcı CellPoint Scientific</td><td>204-1000</td><td></td></tr><tr><td>&nbsp; Refleks 7 mm yara klipsi</td><td>CellPoint Scientific</td><td>203-1000</td><td></td></tr></tbody></table>

orijinal tümör geliştirme murin deneysel modeli ve periton metastaz<em&gt; yoluyla</emyumurtalık kanseri hücreleri ile&gt; ortotopik aşılama

Murine Experimental Model of Original Tumor Development and Peritoneal Metastasis via Orthotopic Inoculation with Ovarian Carcinoma Cells

o periton yayılmasını gösterir çünkü Epitelyal over kanseri (EOC) kötü prognoz ile ilişkilidir. prognozu iyileştirmek için, periton yayılmasını kontrol etmek önemlidir. Tümör hücreleri primer lezyonlardan ayırmak ve mesothelium eklemek nasıl Ancak, hala belirsizdir. Uygun bir hayvan modelinin kurulması in vivo periton yayılım mekanizmasının bir anlayış kazanmak için gereklidir. Bu çalışmada, biz periton ve uzak organlara da dahil olmak üzere metastaz gelişimine fare yumurtalık yüzeyine EOC hücrelerinin lokal enjeksiyon işlemi tanıtmak. yaş 8 haftalık dişi çıplak fareler (BALB / c nu / nu) kullanılmıştır. Bir görüş mikroskobik alan altında, EOC hücreleri dorsal zayıf bir retroperitoneal yaklaşımla fare yumurtalıkların enjekte edildi (orta-ekstrasellüler matriks (ECM) 1 x 10 5 hücre / ul hidrojel / tek taraflı yumurtalık / fare tabanlı). Önerilen bu yöntem le olanfare için ss invaziv prosedür ve yumurtalık zarar en aza indirir. Burada, EOC özgün ve metastatik tümör oluşumu gelişiminde metodolojik adımları açıklar.

<html> Altı çıplak fareler bu protokol açıklandığı gibi onların yumurtalıklar, insan berrak hücreli karsinom hücre hattı ES-2 ile aşılanmış vardı. Şekil 1A&#39;da gösterildiği gibi, 2 hafta sonra, 6 farelerinin 5 ES-2 hücreleri ile aşılandı yumurtalık tümör vardı, ama (bir kontrol olarak kullanılmıştır) aşılaması olmayan karşı yumurtalık tümör yoktu. Bunun yanında, 5 farelerin 2 asit ile birden periton disseminations göstermiştir. Hücreler karaciğer (Şekil 1B)</st...

over kanseri periton yayılması çok adımlı süreci açıklamak için, mevcut çalışma bu tümör hücreleri ile ortotopik aşılamadan yoluyla orijinal tümör gelişimi ve periton metastazı bir fare deneysel modeli sunar.

Orijinal Tümör Geliştirme Murin Deneysel Modeli ve Periton Metastaz<em&gt; yoluyla</emYumurtalık Kanseri Hücreleri ile&gt; Ortotopik aşılama

Epithelial ovarian carcinoma (EOC) is associated with a poor prognosis because it shows peritoneal dissemination. To improve the prognosis, it is ...

Bu prosedürün genel amacı, epitelyal over karsinomunda orijinal ve metastatik tümör oluşumunun gelişimini gözlemlemektir. Bu yöntem, tümör biyolojisinin veya peritoneal yayılımın anlaşılması gibi jinekolojik onkoloji alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, insan epitelyal over karsinomu veya EOC hücrelerinin ortotopik inokülasyonunun, dorsal flank ile büyütülen retroperitoneal bir yaklaşım aracılığıyla gerçekleştirilmesidir. İnsan over berrak hücreli karsinom hücre hattını hazırlamak için, ES2 hücrelerini %10 FBS ve PenStrep içeren RPMI-1640 ortamında, 37 °C ve %5 CO2 koşullarında ekim yapın ve sürdürün. Logaritmik büyüme aşamasında, kültürdeki eski ortamı uzaklaştırın ve hücreleri bir kez yıkamak için 3-4 mL PBS kullanın. Ardından, 1 mL tripsin/EDTA ekleyin ve tüm monokatmanı kaplamak için kabı sallayın. Tripsin solüsyonunu uzaklaştırıp atın ve hücreleri üç ila beş dakika boyunca inkübatöre geri koyun. Hücrelerin ayrıldığından ve yüzdüğünden emin olmak için mikroskop altında inceledikten sonra, tripsini inaktive etmek için 5 mL taze serum içeren büyüme ortamı ekleyin ve hücreleri 15 mL'lik konik bir tüpe aktarmadan önce yeniden süspanse edin. Süspansiyonu oda sıcaklığında 300 ×g'de santrifüjleyin

murine-experimental-model-original-tumor-development-peritoneal

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Kanser Araştırmaları

Yumurtalık kanseri Ortotopik hayvan modellerinde daha iyi insan hastalığı çoğaltmak ve bu nedenle kanser progresyonu ve tedaviye tümör yanıt anlayışımızı geliştirmek. Bir fare modelinde lusiferaz ifade over tümör hücrelerinin bir İntrabursal enjeksiyon alır. Tedavi ağızdan sonda ile yönetilmektedir. Tümör büyüme...

In vivo Görüntüleme ve Yumurtalık Kanseri Ortotopik Fare Modeli Tedavi Tedaviler

Immünkompetan Fare Seröz Yumurtalık Kanseri bir Ortotopik Model In vivo</emTümör Bağışıklık Yanıtları> Tümör Görüntüleme ve İzleme

Bu videoda, periton boşluğunun astarının in vitro üç boyutlu bir modelinin geliştirilmesini gösteriyoruz. Bu organotipik kültür, yumurtalık kanseri hücresi adezyonunu, invazyonunu ve proliferasyonunu araştırmaya yardımcı olabilir.

Periton Boşluğu Astarında Yumurtalık Kanseri Metastazının Modellenmesi: Periton Astarının İn Vitro 3D Modelini Oluşturmak İçin Bir Yöntem

Bu videoda, bir fare modelinde yumurtalık kanseri hücrelerinin rahim içi enjeksiyonunu gösteriyoruz. Bu ortotopik murin modeli, tümör büyümesini non-invaziv olarak izlememize ve tekrarlayan yumurtalık kanserinin önlenmesi ve tedavisi için yeni tedavilerin etkinliğini değerlendirmemize yardımcı olur.

Rahim İçi Kanser Hücresi Enjeksiyonu: İntra-peritoneal Over Kanseri Fare Modeli Oluşturmak için Kanser Hücreleri Verme Tekniği

Bu videoda, tümör gelişimi ve periton metastazı incelemek için bir fare deneysel modeli oluşturma protokolü açıklanmaktadır. Bu yumurtalık kanseri modeli, insan epitelyal yumurtalık kanseri hücrelerinin dişi bir farenin yumurtalıklarına ortotopik olarak aşılanmasıyla üretilir.

Yumurtalık Kanseri Hücrelerinin Murin Yumurtalığına Ortotopik Aşılanması: Hücrelerin Peritoneal Yayılımını İncelemek için Bir Yumurtalık Kanseri Fare Modeli Oluşturma Prosedürü

Yumurtalık kanseri büyümesinin ve nüksünün tespitine, ölçülmesine ve izlenmesine olanak tanıyan non-invaziv bir hayvan görüntüleme platformunu tanımlıyoruz. Bu intraperitoneal ksenogreft modeli, yumurtalık kanserli hastaların klinik profilini taklit eder.

Non-invaziv Görüntüleme için fare modeli Algılama ve Monitör Yumurtalık Kanseri nüks için

Over kanseri metastazı, tümör yükünün doğru görsel kantitasyonunun zor olduğu çok sayıda yaygın intraperitoneal lezyon ile karakterizedir.  Burada, kırmızı floresan protein (RFP) etiketli tümör hücreleri ve optik görüntüleme kullanarak metastatik tümör yükünün in situ ve ex vivo kantitasyonu için bir yöntem açıklanmaktadır.

İçi periton Yumurtalık Kanseri Metastaz kantitasyonu

Bu protokol, ortopik osteosarkom ve pulmoner metastaz lezyonlarını taşıyan fare modelleri oluşturmak için intratibia osteosarkom hücre enjeksiyonunu tanımlamaktadır.

Ortotopik Osteosarkom ve Akciğer Metastazı Fare Modelleri Oluşturmak için İntratibiyal Osteosarkom Hücre Enjeksiyonu

Bu protokol, kanser hücresi-omentum etkileşiminin üç boyutlu (3D) ex vivo modelinin kurulmasını açıklar. Model, yağ nişi içindeki pro-tümör mekanizmalarını aydınlatmak ve yeni tedavileri test etmek için bir platform sağlar.

İnsan Omentumu Kullanılarak Over Kanseri Periton Metastazının Ex Vivo Modeli

Bu el yazması, tümör hipoksisinin metastaz üzerindeki etkilerinin doğrudan test edilmesine ve etki mekanizmalarının deşifre edilmesine izin veren bir hayvan modelinin geliştirilmesini açıklamaktadır. Burada açıklanan deneyler Ewing sarkomuna odaklansa da, benzer bir yaklaşım diğer tümör tiplerine de uygulanabilir.

Tümör metastaz üzerinde Hipoksi Test Etkisinin Vivo Modeli

Öğrenin over karsinomu peritoneal yayılım mekanizmalarını fare modelinde ortotopik aşılama ile incelemeyi. Bu yöntem metastaz biyolojisini anlamak ve tedavi stratejileri geliştirmek için kritik bilgiler sağlar.

Orijinal Tümör Geliştirme Murin Deneysel Modeli ve Periton Metastaz

Daha fazla video keşfet