Name: Biyolojik ortamda oluşturuluyor ve Gözlem Kemilüminesans için Yeni Bir Teknik (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-03-09T12:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 57 s
Description: Keşfedin, rutenyum kompleksi kullanan yeni bir kemilüminesans görüntüleme tekniği ile ameliyat sırasında yüksek sinyal-gürültü oranı sağlayan biyolojik görüntüleme yöntemini. Bu teknik, kanser dahil çeşitli hastalık durumlarının araştırılmasına olanak tanır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar, yararlı tartışmaları için Prof. Jan Grimm ve Bay Travis Shaffer'a ve makaleyi düzenledikleri için Bay David Gregory'ye teşekkür eder. Kısmen NIH Kanser Merkezi Destek Hibesi P30CA008748-48 tarafından desteklenen MSK Hayvan Görüntüleme Çekirdek Tesisi tarafından sağlanan teknik hizmetler minnetle kabul edilmektedir. Yazarlar, cömert destekleri için NIH'ye (K25 EB016673 ve R21 CA191679, T.R. ve 4R00CA178205-02, B.M.Z.), MSK Moleküler Görüntüleme ve Nanoteknoloji Merkezi'ne (T.R.), TOW Vakfı'na (B.C.) ve Ulusal Bilim Vakfı Bütünleştirici Lisansüstü Eğitim ve Araştırma Stajı'na (IGERT, Hunter College'da B.C. ve T.M.S. için 0965983) teşekkür eder. Bu yayında bildirilen araştırma, Kral Abdullah Bilim ve Teknoloji Üniversitesi'nden sağlanan fonlarla desteklenmiştir.

Etik deyimi: onaylanmış bir protokole ve Memorial Sloan Kettering Kanser Merkezi (MSK) Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi (IACUC) etik kuralları uyarınca göre yapıldı tarif edilen in vivo hayvan deneylerinde tümü. Bir püskürtme cihazı 1. İnşaat <ol><li> Iki vidayı (x 25 mm 2 4) kullanılarak kısım B (12.7 x 10.7 x 1.8 cm 3) merkezinde dik ahşap parça A (12.5 x 2.5 x 1.8 cm 3) takın. Ahşap parça C takın (11 × 2.5 × 1.8 cm 3) C bölümü (11 x 2.5 x 1.8 cm 3) hala hareket ettirilebilir şekilde bir vida kullanılarak kısım A (12.5 x 2.5 x 1.8 cm 3) ortasına. Bkz: Şekil 1. </li><li> iki döngüler, ya bir tane oluşturmak yoluyla iki delik plastik 3 oz küçük püskürtücü (D) sprey şişe tetik alt ucundan Matkap ve paslanmaz çelik çubuk itin (1/16 &quot;çelik 10 cm) (E) tetikleyici yan. </li&gt; <li> kaymasını kablo bağları önlemek için koli bandı (F) ile sprey şişesinin alt kısmını sarın. Iki plastik kablo bağları kullanarak ahşap parça C (11 x 2.5 x 1.8 cm 3) (28 cm) (G) sprey şişesi takın. </li><li> 011 servo motor (I) kesiniz ve servo kontrolü (H) gevşek kablolar ile yeniden bağlayın. Ardından, koli bandı kullanarak ahşap kısım A (12.5 x 2.5 x 1.8 cm 3) üstüne servo motora takın. </li><li> ataç (K) kullanarak servo motor koluna bir kalem (J) takın. Sıkıca plastik kaplı büküm telleri (L) kullanılarak çelik çubuk döngüler kalem dış kısımlarını bağlamak ve koli bandı ile kalem üzerinde biter sabitleyin. </li><li> servo motor kontrol ünitesinin manyetik kablo konnektörünü (M) kesiniz ve hoparlör kablosu (N) onu takın. Sonra, odun parçası B (12.7 x 10.7 x 1.8 cm 3) servo motor kontrol ünitesini bantlayın. yarısında manyetik konnektörleri ile bir w1 kablosunu kesin ve bakır s gevşek ucuna bir parçasını takmakPeaker kablosu (1 M). Mevcut w1 kablo ve 9V pil (manyetik) i2 geçiş anahtarı ve p1 gücü bağlayın. </li></ol> Yöntem 2. Hassasiyet Belirlenmesi <ol><li> 1.5 ml mikrosantrifüj tüpü içinde, 260 ug (347 nmol), 52 ug (69 nmol), 26 ug (34 nmol) miktarlarında ters osmoz, su (100 uL) içinde [Ru (bpy) 3] Cl2 çözeltilerini hazırlamak 5 ug (6.9 nmol), 3 ug (3.5 nmol), 520 ng (694 pmol), 260 ng (347 pmol), 52 ng (69 umol), 26 ng (34 pmol), 5 ng (6.9 pmol), 3 ng (3.5 umol). </li><li> Her biri 100 uL karıştırın [Ru (bpy) 3] Cl amonyum seryum nitrat sulu çözeltisi, 100 uL 2 çözeltisi ((NH4) 2 Ce (NO 3) 6) bir mikroskop lamı üzerine, su (25 mM) &#39;de. </li><li> Görüntüleme yazılımı başlatarak biyoparlaklık okuyucuda satın ayarlayın. <ol><li> kullanıcı profiline oturum açın ve Acqui bakmaklan de kontrol paneli. &quot;Başlatma&quot; ve enstrüman hazır olana kadar bekleyin tıklayın. </li><li> denetlenmeyen &quot;Görüntüleme Modu&quot; için bakın ve &quot;Işıklı&quot; ve &quot;Fotoğraf&quot; işaretli olduğundan emin olun ve &quot;Floresan&quot;. </li><li> Değiştir &quot;Temas Süresi&quot; 20 s &quot;Lüminesans&quot; ayarı. &quot;Kutulamanın&quot;: aşağıdaki gibidir: &quot;Lüminesans&quot; için kalan ayarları ayarlayın Orta; &quot;F / durdur&quot;: 1; ve &quot;Emisyon Filtresi&quot;: Açık. NOT: pozlama süreleri enstrümantasyon ve kullanılan deneysel ayarlarına göre adapte edilmesi gerekebilir, sunulan kurulum farklı ise. </li><li> &quot;Temas Süresi&quot; For: &quot;Fotoğraf,&quot; aşağıdaki ayarları kullanın Auto; &quot;Binning&quot;: Orta; ve &quot;F / durdur&quot;: 8. &quot;Görüş Alanı&quot; açılır menüsünden için target.Look görüntüleme göre &quot;Konu Boy&quot; ayarlayın. Başlangıç ​​ayarı &quot;C&quot; dir c arasında &quot;B&quot; olarak değiştirin (14 cm mesafedenamera ve örnek aşaması). </li></ol></li><li> Oksitleyici madde korumak için görüntüleme odasının zemininde siyah inşaat bir kağıda üzerinde mikroskobik slayt koyarak nebulizatör ayarlayın. Bir 100 μLdroplet karıştırın [Ru (bpy) 3] CI2 solüsyonunun sulu bir çözeltisi, 100 uL (NH4) 2 Ce ile (NO 3) 6. yeşil kutu çarpı dikkate alınmalıdır. <ol><li> siyah inşaat kağıt üzerinde görüntüleme konuyu yerleştirin, ilgi alanı yeşil ışık kutusu crosshair merkezinde olacak şekilde numune sahnede sergiledi. ahşap destek plastik sprey şişesinde ayırarak nebülizatör hazırlayın. plastik hazne içine (su / etanol 1: 3) ve ahşap destek yerine tekrar trietilamin ihtiva eden bir çözelti doldurun. </li><li> biyolüminesans okuyucu içinde nebulizatör yerleştirin ve güç kablosu nebulizatör kablosu çıkarılmış olduğundan emin olun. Emin olun güç anahtarıaçık, geçiş anahtarı kapalıdır ve kırmızı LED yanıyor püskürtme memesi kafası tarafından görüntüleme konuya doğru kameradan görünüm tıkanıklığı en aza indirerek sprey akışı, görüntüleme konuyla ilgili ilgi alanına doğru işaret edilmektedir böyle nebülizatör yerleştirin. </li><li> Sprey onları kalkan (mikroskobik slaytlar ya da enjeksiyon sitelerinde örneğin, beyaz işaretleri) herhangi bir potansiyel sıcak noktalar üzerinde inşaat küçük kağıt, siyah parçalarını yerleştirin. Bir yerde görüntüleme konu nebulizer veya manyetik kapı mandalı ile karışmaz şekilde görüntüleme bölmesi içindeki nebulizatör uzaktan kord en az 40 cm. görüntüleme sistemi kapağını kapatın. NOT: Crosshair ayarı &quot;adlı Alanında&quot; dayalı boyutu değişecektir &quot;Görüntü Living;&quot; Bu &quot;B&quot; olarak ayarlanmış olduğundan emin olun. </li></ol></li><li> görüntüleme dizisi başlatarak bir görüntü kazanır. içinde &quot;Acquire&quot; Click &quot;Toplama Kontrol Paneli.&quot; ilk görüntüleme dizisine üzerindeence, istenen (önerilir) ise Otomatik kaydetmeyi etkinleştirmek ve bir veri klasörünü seçin. dizinin sonuna kadar &quot;Edit Görüntüleme Etiketler&quot; iletişim geçiyoruz. NOT: kontrol yazılımı cihazın eylemleri adım-adım, gerçek zamanlı olarak gösterir. ölçüm hazırlanması ve doğru pozisyonda örnek sahne taşındıktan sonra, kamera deklanşörü açılır ve ölçüm zamanını sayar. deklanşör açılış ayrıca makine tarafından oluşturulan bir tık sesi ile duyulabilir. </li><li> kemilüminesansını oluşturmak için geçiş şalteri üç kez geçerek: obtüratör açılır gibi, trietilamin solüsyonu üç patlamaları (su / etanol içinde 3, sprey patlama başına 0.24 ± 0.04 ml 1) püskürtün. NOT: Numune sahne Ölçüm sırasında hareket edecektir. Bu izin enstrümanın içinde yeterli (en az 40 cm) kablo bırakın. Çözelti artan borusu ile talip olabilir nebulizatör ile püskürtülür olduğunu ve borunun hiçbir hava kabarcığı olmadığından emin olun. Birkaç yedek Batterie varihtiyaç halinde hazır nebulizer için s. </li></ol> Vivo Görüntüleme 3. Sistemik İntravenöz Enjeksiyonu Sonrası <ol><li> 1.5 ml mikrosantrifüj tüpü içinde, [Ru (bpy) 3] Cl2 nmol 8 ila 33 ihtiva eden fosfat tamponlu tuz (PBS) çözeltisi, 100 uL hazırlar. Sulu bir çözeltisi (NH4) 2 Ce hazırlama (NO 3), aynı zamanda, su (25 mM) 6. </li><li> İntravenöz, sağlıklı farelerin kuyruk venine 100 uL [Ru (bpy) 3] CI2 enjekte (n = 5). </li><li> CO 2 boğulma yoluyla enjeksiyondan sonra fareler 10 dakika euthanize. <ol><li> Daha sonra kalp ve akciğerleri maruz U-şeklinde kaburga kemer kaldırmak, gövde bir Y-cut ile cildi çıkarın. Sol ventrikül 18 bir 24 gauge iğne yoluyla PBS 20 mL sağ atriyum bir çıkış kesme ve enjekte fareler serpmek. Dikkatle göbek kesticilt ve böbrek ve karaciğer maruz kalmaktadır. görünür bir kesim oluşturmak için organları aracılığıyla uzunlamasına kesin. </li></ol></li><li> Aşağıdaki değişikliklerle, adım 2.3-2.6 anlatıldığı gibi tedarik ayarlayın. <ol><li> İyice nebülizör plastik hazne yıkandıktan sonra, bunun yerine trietilamin su (NH4) içindeki bir 2 Ce (NO 3) 6 (25 mM) ile doldurun. NOT: iyice kristalize beri, her kullanımdan sonra nebulizatör memesini durulanması önemlidir (NH 4) 2 Ce (NO 3) 6 birkaç kullanımdan sonra püskürtme memesini yok edebilir. </li></ol></li><li> Görüntüleme için, bütün hayvanlar veya organ örnekleri kullanın. <ol><li> Bütün karın görüntüleme için, kamera ve cihazın arka işaret kafa bakacak açık karın fare karkas yerleştirin. Organı ortalamak yeşil ışık kutusu crosshair (örneğin, karaciğer veya böbrek) yansıması. </li><li> Fveya organ görüntüleme ve miktar bireysel, görüntüleme cihazdan fare kaldırmak ve onu aşağı pin. Önceden açılmış gövdesinden başlayarak, iç organların (örneğin, böbrek, karaciğer, akciğer, kas, dalak, beyin, kalp) tüketim. kas dokusu çıkarılması için arka bacak deri yoluyla kesti. Dikkatle beyin çıkarılması için bir neşter ile kafatası açın. <ol><li> ilgi organ karaciğer, böbrek veya dalak ise, uzunlamasına ikiye tüm organları kesilmiş bir petri veya siyah inşaat kağıt parçası üzerinde her organı yerleştirin. </li></ol></li><li> Tek organlar için kemilüminesan izleyici nispi emisyon kurmak için adımlar 2,3-2,6 açıklanan prosedürü uygulayın. </li></ol></li></ol> Lenf nodu 4. İn Vivo Görüntüleme <ol><li> [Ru (bpy) 3] Cl2 80 nmol ihtiva eden bir PBS çözeltisinden 10 uL hazırlayın. Sulu bir çözeltisi (NH4) 2 Ce hazırlayın (NO 3) 6 waAynı zamanda ter (25 mM). </li><li> subdermal, sağlıklı farelerin arka bacağına çözeltisinin 10 ul enjekte edilir (n = 5). Bir negatif kontrol olarak, saf PBS 10 uL karşı taraftaki pençenin enjekte edilir. Enjeksiyondan sonra CO 2 boğulma yoluyla 15 dakika fareler Kurban. popliteal lenf düğümlerine kadar lenf kanalları ortaya çıkarmak için her iki arka ayakları üzerinde cilt kaldırmak. </li><li> Adım 3.4 anlatıldığı gibi satın ayarlayın. </li><li> , Her iki arka bacak popliteal lenf düğümleri kaldırmak bolun ve miktar tayini amacıyla, (aşama 3.5.3) daha önce açıklandığı gibi, bir Petri tabağına oksidan ile püskürtülür. </li></ol>

<ol><li>Fong, Y., Giulianotti, P. C., Lewis, J., Koerkamp, B. G., Reiner, T. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aFong%2C+Y+%22Imaging+and+Visualization+in+The+Modern+Operating+Room%3A+A+Comprehensive+Guide+for+Physicians%22">Imaging and Visualization in The Modern Operating Room: A Comprehensive Guide for Physicians</a>. , Springer. (2015).</li>
<li>Nguyen, Q. T., Tsien, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescence-guided+surgery+with+live+molecular+navigation+-+a+new+cutting+edge%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Cancer%22%5BJournal%5D)">Fluorescence-guided surgery with live molecular navigation - a new cutting edge.</a> Nat. Rev. Cancer. 13 (9), 653-662 (2013).</li>
<li>Weissleder, R., Pittet, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+in+the+era+of+molecular+oncology%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Imaging in the era of molecular oncology.</a> Nature. 452, 580-589 (2008).</li>
<li>Heller, S., Zanzonico, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nuclear+probes+and+intraoperative+gamma+cameras%5BTitle%5D)+AND+%22Semin.+Nucl.+Med%22%5BJournal%5D)">Nuclear probes and intraoperative gamma cameras.</a> Semin. Nucl. Med. 41 (3), 166-181 (2011).</li>
<li>van Dam, G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraoperative+tumor-specific+fluorescence+imaging+in+ovarian+cancer+by+folate+receptor-%CE%B1+targeting%3A+first+in-human+results%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Med%22%5BJournal%5D)">Intraoperative tumor-specific fluorescence imaging in ovarian cancer by folate receptor-α targeting: first in-human results.</a> Nat. Med. 17 (10), 1315-1319 (2011).</li>
<li>Zavaleta, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Raman-based+endoscopic+strategy+for+multiplexed+molecular+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U+S+A%22%5BJournal%5D)">A Raman-based endoscopic strategy for multiplexed molecular imaging.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U S A. 110 (25), E2288-E2297 (2013).</li>
<li>Harmsen, S., Bedics, M. A., Wall, M. A., Huang, R., Detty, M. R., Kircher, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rational+design+of+a+chalcogenopyrylium-based+surface-enhanced+resonance+Raman+scattering+nanoprobe+with+attomolar+sensitivity%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Commun%22%5BJournal%5D)">Rational design of a chalcogenopyrylium-based surface-enhanced resonance Raman scattering nanoprobe with attomolar sensitivity.</a> Nat. Commun. 6, 1-9 (2015).</li>
<li>Thorek, D. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Positron+Lymphography%3A+Multimodal%2C+High-Resolution%2C+Dynamic+Mapping+and+Resection+of+Lymph+Nodes+After+Intradermal+Injection+of+18F-FDG%5BTitle%5D)+AND+%22Nucl.+Med%22%5BJournal%5D)">Positron Lymphography: Multimodal, High-Resolution, Dynamic Mapping and Resection of Lymph Nodes After Intradermal Injection of 18F-FDG.</a> Nucl. Med. 53 (9), 1438-1445 (2012).</li>
<li>Thorek, D. L. J., Riedl, C. C., Grimm, J. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24078721">Clinical Cerenkov Luminescence Imaging of 18F-FDG.</a> Nucl. Med. 55 (1), 95-98 (2014).</li>
<li>Gross, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioluminescence+imaging+of+myeloperoxidase+activity+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Med%22%5BJournal%5D)">Bioluminescence imaging of myeloperoxidase activity in vivo.</a> Nat. Med. 15 (4), 455-461 (2009).</li>
<li>Lee, J. -J., White, A. G., Rice, D. R., Smith, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+imaging+using+polymeric+nanoparticles+stained+with+near-infrared+chemiluminescent+and+fluorescent+squaraine+catenane+endoperoxide%5BTitle%5D)+AND+%22Chem.+Commun%22%5BJournal%5D)">In vivo imaging using polymeric nanoparticles stained with near-infrared chemiluminescent and fluorescent squaraine catenane endoperoxide.</a> Chem. Commun. 49 (29), 3016-3018 (2013).</li>
<li>Lee, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+imaging+of+hydrogen+peroxide+with+chemiluminescent+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Mater%22%5BJournal%5D)">In vivo imaging of hydrogen peroxide with chemiluminescent nanoparticles.</a> Nat. Mater. 6 (10), 765-769 (2007).</li>
<li>Baumes, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((thermally+activated%2C+near-infrared+chemiluminescent+dyes+and+dye-stained+microparticles+for+optical+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Chem%22%5BJournal%5D)">thermally activated, near-infrared chemiluminescent dyes and dye-stained microparticles for optical imaging.</a> Nat. Chem. 2 (12), 1025-1030 (2010).</li>
<li>Siraj, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescence%2C+Phosphorescence%2C+and+Chemiluminescence%5BTitle%5D)+AND+%22Anal.+Chem%22%5BJournal%5D)">Fluorescence, Phosphorescence, and Chemiluminescence.</a> Anal. Chem. 88 (1), 170-202 (2016).</li>
<li>Hercules, D. M., Lytle, F. E. <a target="_blank" href="http://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/ja00972a052">Chemiluminescence from Reduction Reactions.</a> Am. Chem. Soc. 88 (20), 4745-4746 (1966).</li>
<li>Kerr, E. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/266918014_Annihilation_Electrogenerated_Chemiluminescence_of_Mixed_Metal_Chelates_in_Solution_Modulating_Emission_Colour_by_Manipulating_the_Energetics">Annihilation electrogenerated chemiluminescence of mixed metal chelates in solution: modulating emission colour by manipulating the energetics.</a> Chem. Sci. 6, 472-479 (2015).</li>
<li>Montalti, M., Credi, A., Prodi, L., Gandolfi, M. T. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMontalti%2C+M+%22Handbook+of+Photochemistry+3rd+Ed%22">Handbook of Photochemistry 3rd Ed</a>. , CRC Press Taylor & Francis Group. Boca Raton, FL, USA. 379-404 (2006).</li>
<li>Gage, G. J., Kipke, D. R., Shain, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole+Animal+Perfusion+Fixation+for+Rhodents%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Whole Animal Perfusion Fixation for Rhodents.</a> J. Vis. Exp. (65), e3564(2012).</li>
<li>Büchel, G. E., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=Near-infrared+intraoperative+chemiluminescent+imaging">Near-infrared intraoperative chemiluminescent imaging.</a> ChemMedChem. , (2016).</li>
<li>Ntziachristos, V., Ripoll, J., Wang, L. V., Weissleder, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Looking+and+Listening+to+Light%3A+the+Evolution+of+Whole-Body+Photonic+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Looking and Listening to Light: the Evolution of Whole-Body Photonic Imaging.</a> Nat. Biotechnol. 23, 313-320 (2005).</li>
<li>Koch, J. H., Gyarfas, E. C., Dwyer, F. P. <a target="_blank" href="http://www.publish.csiro.au/bi/BI9560371">Biological Activity of Complex Ions Mechanism of Inhibition of Acetylcholinesterase.</a> Austral. J. Biol. Sci. 9 (3), 371-381 (1956).</li>
<li>Juris, A., Balzani, V., Barigelletti, F., Campagna, S., Belser, P., Zelewsky, A. V. <a target="_blank" href="https://yoon.chem.wisc.edu/sites/yoon.chem.wisc.edu/files/Rubpy2.pdf">Ru(II) polypyridine complexes: photophysics, photochemistry, electrochemistry, and chemiluminescence.</a> Coord. Chem. Rev. 84, 85-277 (1988).</li>
<li>Knoll, J. D., Turro, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Control+and+utilization+of+ruthenium+and+rhodium+metal+complex+excited+states+for+photoactivated+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Coord.+Chem.+Rev%22%5BJournal%5D)">Control and utilization of ruthenium and rhodium metal complex excited states for photoactivated cancer therapy.</a> Coord. Chem. Rev. 282, 110-126 (2015).</li>
<li>Haley, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacology+and+toxicology+of+the+rare+earth+elements%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pharm.+Sci%22%5BJournal%5D)">Pharmacology and toxicology of the rare earth elements.</a> J. Pharm. Sci. 54 (5), 663-670 (1965).</li>
<li>Siekierski, S., Mioduski, T., Salomon, M. <a target="_blank" href="https://srdata.nist.gov/solubility/IUPAC/SDS-13/SDS-13.pdf">IUPAC Commission on Solubility Data. Solubility Data Series. Vol 13. Scandium, Yttrium, Lanthanum, and Lanthanide Nitrates</a>. , Pergamon Press. (1983).</li>
<li>Reiner, T., Jantke, D., Marziale, A. N., Raba, A., Eppinger, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metal-Conjugated+Affinity+Labels%3A+A+New+Concept+to+Create+Enantioselective+Artificial+Metalloenzymes%5BTitle%5D)+AND+%22ChemistryOpen%22%5BJournal%5D)">Metal-Conjugated Affinity Labels: A New Concept to Create Enantioselective Artificial Metalloenzymes.</a> ChemistryOpen. 2, 50-54 (2013).</li>
<li>Zanarini, S., et al. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/231643557_Synthesis_and_Electrochemiluminescence_of_a_Rubpy3-Labeled_Coupling_Adduct_Produced_on_a_Self-Assembled_Monolayer">Synthesis and Electrochemiluminescence of a Ru(bpy)3-Labeled Coupling Adduct Produced on a Self-Assembled Monolayer.</a> J. Phys. Chem. C. 112 (8), 2949-2957 (2008).</li>
<li>Liu, R., Lv, Y., Hou, X., Yang, L., Mester, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protein+Quantitation+Using+Ru-NHS+Ester+Tagging+and+Isotope+Dilution+High-Pressure+Liquid+Chromatography-Inductively+Coupled+Plasma+Mass+Spectrometry+Determination%5BTitle%5D)+AND+%22Anal.+Chem%22%5BJournal%5D)">Protein Quantitation Using Ru-NHS Ester Tagging and Isotope Dilution High-Pressure Liquid Chromatography-Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry Determination.</a> Anal. Chem. 84 (6), 2769-2775 (2012).</li>
<li>Jantke, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0022328X13004142">Synthetic strategies for efficient conjugation of organometallic complexes with pendant protein reactive markers.</a> J. Organomet. Chem. 744, 82-91 (2013).</li>
<li>Aoki, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+experimental+xenograft+mouse+model+of+diffuse+pontine+glioma+designed+for+therapeutic+testing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurooncol%22%5BJournal%5D)">An experimental xenograft mouse model of diffuse pontine glioma designed for therapeutic testing.</a> J Neurooncol. 108 (1), 29-35 (2012).</li>
<li>Forster, R. J., Bertoncello, P., Keyes, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrogenerated+Chemiluminescence%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Rev.+Anal.+Chem%22%5BJournal%5D)">Electrogenerated Chemiluminescence.</a> Annual Rev. Anal. Chem. 2, 359-385 (2009).</li>
<li>Connell, T. U., James, J. L., White, A. R., Donnelly, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protein+Labelling+with+Versatile+Phosphorescent+Metal+Complexes+for+Live+Cell+Luminescence+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Chem.+Eur.+J%22%5BJournal%5D)">Protein Labelling with Versatile Phosphorescent Metal Complexes for Live Cell Luminescence Imaging.</a> Chem. Eur. J. 21 (40), 14146-14155 (2015).</li>
<li>Zhou, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthesis%2C+labeling+and+bioanalytical+applications+of+a+tris%282%2C2%E2%80%B2-bipyridyl%29ruthenium%28II%29-based+electrochemiluminescence+probe%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">Synthesis, labeling and bioanalytical applications of a tris(2,2′-bipyridyl)ruthenium(II)-based electrochemiluminescence probe.</a> Nat. Protoc. 9 (5), 1146-1159 (2014).</li>
<li>Bœuf, G., et al. <a target="_blank" href="https://www.researchgate.net/publication/262418715_Encapsulated_RutheniumII_Complexes_in_Biocompatible_PolyDL-lactide-co-glycolide_Nanoparticles_for_Application_in_Photodynamic_Therapy">Encapsulated Ruthenium(II) Complexes in Biocompatible Poly(d,l-lactide-co-glycolide) Nanoparticles for Application in Photodynamic Therapy.</a> ChemPlusChem. 79 (1), 171-180 (2014).</li>
<li>Loizidou, M., Seifalian, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanotechnology+and+its+applications+in+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Brit.+J.+Surgery%22%5BJournal%5D)">Nanotechnology and its applications in surgery.</a> Brit. J. Surgery. 97 (4), 463-465 (2010).</li>
<li>Barry, N. P. E., Sadler, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Challenges+for+Metals+in+Medicine%3A+How+Nanotechnology+May+Help+To+Shape+the+Future%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Nano%22%5BJournal%5D)">Challenges for Metals in Medicine: How Nanotechnology May Help To Shape the Future.</a> ACS Nano. 7, 5654-5659 (2013).</li>
<li>Hasan, K., Bansal, A. K., Samuel, I. D. W., Roldán-Carmona, C., Bolink, H. J., Zysman-Colman, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tuning+the+Emission+of+Cationic+Iridium+%28III%29+Complexes+Towards+the+Red+Through+Methoxy+Substitution+of+the+Cyclometalating+Ligand%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.Sci.+Rep%22%5BJournal%5D)">Tuning the Emission of Cationic Iridium (III) Complexes Towards the Red Through Methoxy Substitution of the Cyclometalating Ligand.</a> Nat.Sci. Rep. 5, 1-15 (2015).</li>
<li>Truong, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemiluminescence+detection+with+water-soluble+iridium%28III%29+complexes+containing+a+sulfonate-functionalised+ancillary+ligand%5BTitle%5D)+AND+%22Analyst%22%5BJournal%5D)">Chemiluminescence detection with water-soluble iridium(III) complexes containing a sulfonate-functionalised ancillary ligand.</a> Analyst. 139 (22), 6028-6035 (2014).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.

Burada, optik kemilüminesan muhabir tarafından oluşturulan fotonların emisyon yoluyla doku ortaya koymaya yeteneğine sahip bir teknoloji sundu. Diğer aksine, daha bu kemilüminesans muhabir sistemi radyoaktif olmayan ve çok yüksek hassasiyet seviyelerinde tespitini kolaylaştırır bir görüntüleme probu istihdam, teknoloji 4, 5, 6, 7, 8, <sup class="xr...

Son yıllarda, görüntüleme teknolojileri doktorlar hastalığı teşhis ve monitör yol devrim var. Bu görüntüleme teknolojileri, ancak bu tür pozitron emisyon tomografisi (PET), tek foton emisyon bilgisayarlı tomografi (SPECT), bilgisayarlı tomografi (BT) ve manyetik rezonans görüntüleme (MRI) gibi tüm vücut görüntüleme sistemleri, büyük ölçüde sınırlı olmuştur. Özellikle dikkat kanseri ödenmiştir ve teknolojik görüntüleme devrimler büyük ölçüde bu hastalığın teşhis ve tedavi edilir şekilde düzeldi. ameliyathane: Bu ilerlemelere rağmen, bu görüntüleme teknolojileri sadece uymaz bir yer var. Tüm vücut görüntüleme teknikleri, cerrahi planlamada yardımcı olabilir, bunlar genellikle tümör dokusunun tüm kaldırıldı veya artık tümör dokusu cerrahi sınırların 1&#39;de gizli kalır olsun hekimler gerçek zamanlı olarak belirlemeye yardımcı olmak için yeterince yüksek uzaysal çözünürlük yoksundur. Hiçbir infiltratif emin yapmaTümör marjları geride en önemli cerrahi hedeflerinden biridir ve cerrahlar titiz ve tedbirli doku rezeksiyonu arasında sıkı-ip yürümek gerekir edilir. Çok fazla çıkarılırsa, hastada istenmeyen yan etkiler arttırılmış olur çok az kaldırılan ise, nüks oranları, 3 2 artmıştır. Nedenle, doğru tümör marjları tasvir için çok önemlidir ve biz kemilüminesan intraoperatif görüntüleme aksi kurulan teknikleri ile tespit edilmemiş kalabileceği malign doku görselleştirmek için cerrahlara yardımcı olarak tümör marjlarının belirlenmesi doğruluğunu geliştirmek için yardımcı olabilir inanıyoruz. Şu anda intraoperatif görüntüleme sistemleri gibi olası yarar için araştırılan birçok görüntüleme teknolojileri vardır. Bu β- ve γ-radyasyon yayan sondalar 4, optik floresan 5, Raman spektroskopisi 6 dahil </sup&gt;, 7 ve Cherenkov ışıma 8, 9. Ancak bugüne kadar, bunların hiçbiri, standart klinik araçlar olarak kullanılır hale gelmiştir. Optik floresan görüntüleme şimdiye kadar bu tekniklerin en umut verici olduğu kanıtlanmıştır ve en çok araştırdı nedenle etti. Zaten birçok uygulama için değerli bir araç olarak gösterilmiş olsa da, bu sınırlamalar olmadan değildir. Gerçekten de, asıl dezavantajı doğal autofluorescent biyolojik doku tarafından üretilen arka plan floresan olduğunu. Bu arka plan otofloresan sinyali, floresan sinyalinin üretimi için gerekli olan, harici bir ışık kaynağı tarafından, florofor ilave olarak, çevre doku uyarılmasının bir ürünüdür. Pratik açıdan bakıldığında, bu otofloresans potansiyel ameliyathanede bu teknolojinin faydasını sınırlayabilir düşük sinyal-gürültü oranları, yol açabilir. Müdürfloresan görüntüleme üzerinden Kemiluminesan görüntüleme avantajı uyarma ışık gerekli olmasıdır. Bunun bir sonucu olarak, herhangi bir arka plan otofloresansı yoktur. Kemiluminesan görüntülemede, uyarma enerjisi yerine kimyasal oluşturulur. Bu işlem, daha yüksek bir sinyal-ses oranlarına neden olabilir, bu nedenle herhangi bir istenmeyen arka plan sinyali üretir ve. Bu sonuçta cerrahi sınırların daha hassas ve doğru algılama neden olabilir. Biraz şaşırtıcı bir ameliyat görüntüleme tekniği olarak bu yaklaşımın yarar 10 keşfedilmemiş kalmıştır. Gerçekten de, bu tekniğin en yakın örnek, farelerde 11, 12, 13, miyeloperoksidaz tarafından luminol oksitlenmesidir. merhaba ile düşük arka plan sinyali sonuçlanan (1) en az otofloresans: kemilüminesans biyomedikal görüntüleme aşağıdaki avantajları sunabilir araştırma oldukça keşfedilmemiş alan nedenleGher sinyal-gürültü oranları; (2) görünür gelen yakın-kızılötesi değişen kemilüminesan emisyonların ayarlanabilir dalga boyları; ve (3), bir bağlayıcı teknolojileri ile bir araya getirilmiş ve zaten mevcut biyomoleküllerin hedef olduğunda, hedef moleküler görüntüleme sondaları 14 tüm kütüphanelerin erişim sağlayan fonksiyonalitesine sahip kimyasal olarak ışık veren kompleksleri. Bu proof-of-prensibi çalışma rutenyum tabanlı görüntüleme maddesi kullanarak biyomedikal ortamda kemilüminesan görüntülemenin potansiyel yarar göstermektedir. Bu bileşiğin kemilüminesan özellikleri iyi 1960&#39;ların ortalarında 15 kadar uzanan araştırmaları ile incelenmiştir. Kimyasal aktivasyonu üzerine, madde, tıbbi görüntüleme amacıyla uygundur 600 nm 16 ° ışık üretir. Aktivasyon enerjisi uyarılmış durumda su 17 -foll 650 ns ömrü vardır yol açan bir redoks reaksiyonu sonucu elde edilenBu heyecanlı devletin gevşeme üzerine foton kuşağının borçlu. Bir özel tasarlanmış uzaktan nebulizatör kullanımı sayesinde, biz bileşik hem ex vivo ve in vivo tespit başardık. İlk deneylerin sonuçları bu teknolojinin daha fazla araştırılması düşündüren, oldukça ümit vericidir.

<table><tbody><tr><td>Ahşap kısım A (12,5 & kez; 2,5 & kez; 1,8 cm)</td> <td>&nbsp; Ahşap El İşi</td><td>131404</td><td>3/4" x 24" x 30" huş kontrplak levhadan kesilmiş</td></tr><tr><td>Ahşap parça B (12,7 & kez; 10,7 & kez; 1,8 cm)</td><td>Ahşap El İşi</td><td>131404</td><td>3/4" x 24" x 30" huş kontrplak levhadan kesilmiş</td></tr><tr><td>Ahşap parça C (11 & kez; 2,5 & kez; 1,8 cm)</td> <td>Ahşap El İşi</td><td>131404</td><td>3/4" x 24" x 30& rdquo; huş kontrplak levha</td></tr><tr><td>Vidalar (4 & kez; 25 mm)</td><td>Screwfix</td><td>79939</td><td></td></tr><tr><td>Harmon Yüz Değerleri 3 oz mini püskürtücü</td><td>Yatak, Banyo ve Ötesi</td><td></td><td></td></tr><tr><td>paslanmaz çelik çubuk (10 cm 1/16" çelik)</td><td>Metals Depot Int. Inc.</td><td>2192</td><td></td></tr><tr><td>Kalem Klasik HB</td><td>Papermate</td><td>58592</td><td></td></tr><tr><td>Ataş</td><td>Ofis Deposu</td><td>221720</td><td></td></tr><tr><td>hoparlör kablosu</td><td>RCA Inc.</td><td></td><td></td>AH1650SN</tr><tr><td>Energizer 9V alkalin pil</td><td>Energizer Holdings Inc.</td><td>EN22</td><td></td></tr><tr><td>Hitech HS-82MG Mikro Servo Motor, 3.4 kg/cm çıkış torku @ 6V</td><td>Hitech RCD USA Inc.</td><td>32082S</td><td></td></tr><tr><td>İsim</td><td>Firma</td><td>Katalog Numara</td><td>Yorumlar</td></tr><tr><td>28 cm plastik kablo bağları</td><td>General Electric Inc.</td><td>50725</td><td></td></tr><tr><td>Koli bandı</td><td>3M Inc.</td><td>3939</td><td></td></tr><tr><td>littleBits w1 tel</td><td>littleBits Inc.</td><td>w1 kablosu</td><td></td></tr><tr><td>littleBits p1 gücü</td><td>littleBits Inc.</td><td>p1 gücü</td><td></td></tr><tr><td>littleBits i2 geçiş anahtarı</td><td>littleBits Inc.</td><td>i2 geçiş anahtarı</td><td></td></tr><tr><td>littleBits 011 servo</td><td>littleBits Inc.</td><td>011 servo</td><td></td></tr><tr><td>20 cm plastik kaplı tel büküm bağları</td><td>Dört Yıldızlı Plastik</td><td>71TIE8000</td><td></td></tr><tr><td>Tris(2,2&asal;-bipiridil)diklororutenyum(II) hekzahidrat</td><td>Sigma-Aldrich Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr> 224758 <tr><td>Amonyum seryum (IV) nitrat</td><td>Sigma-Aldrich Inc.</td><td>22249</td><td></td></tr><tr><td>İzofloran</td><td>Baxter Sağlık</td><td>1001936060</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>PBS1</td><td></td></tr><tr><td>Etanol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>2854</td><td></td></tr><tr><td>Trietilamin</td><td>Sigma-Aldrich Inc.</td><td>T0886</td><td></td></tr><tr><td>Su</td><td></td><td></td><td>Su, bir Milipore Mili-Q (Ar-Ge; 18 M&Omega;) kullanılarak arıtıldı</td></tr>.<tr><td>Dişi çıplak (soylu) fareler</td><td>Jackson Laboratuvarları</td><td>1929</td><td>yaş 5 - 6 hafta</td></tr><tr><td>Suş C57BL/6J&nbsp; &nbsp;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>NU/J erkek fareler&nbsp;</td><td>Jackson Laboratuvarları</td><td>2019</td><td>yaş 6 &ndash; 8 hafta</td></tr><tr><td>IVIS 200 biyolüminesans okuyucu</td><td>Kumpas Canlı Bilim</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Canlı Görüntü 4.2 yazılımı</td><td>Perkin-Elmer</td><td>128165</td><td></td></tr><tr><td>Mikroskop slaytları</td><td>ThermoScientific</td><td>4951PLUS4</td><td></td></tr></tbody></table>

biyolojik ortamda oluşturuluyor ve gözlem kemilüminesans için yeni bir teknik

A Novel Technique for Generating and Observing Chemiluminescence in a Biological Setting

İntraoperatif görüntüleme teknikleri, cerrahi müdahaleleri daha güvenli ve daha etkili hale getirme potansiyeline sahiptir; Bu nedenlerden dolayı, bu tür teknikler hızla ameliyathaneye taşınmaktadır. Burada, intraoperatif görüntüleme için henüz keşfedilmemiş bir tekniği kullanan yeni bir yaklaşım sunuyoruz: kemilüminesan görüntüleme. Bu yöntem, yüksek sinyal-gürültü oranlarına sahip ex vivo veya in vivo görüntüler üretmek için özel olarak oluşturulmuş bir nebulizasyon sistemi ile birlikte rutenyum bazlı bir kemilüminesan raportör kullanır. Rutenyum bazlı raportör, sulu bir oksitleyici çözeltiye maruz kaldıktan ve çevredeki doku içinde yeniden indirgendikten sonra ışık üretir. Bu yöntem, 6.9 pmol /cm2 kadar düşük raportör konsantrasyonlarını tespit etmemizi sağlamıştır. Bu çalışmada, farelerde subdermal ve intravenöz enjeksiyonları içeren in vivo çalışmalarımız için görsel bir rehber sunuyoruz. Sonuçlar, bu teknolojinin daha fazla klinik öncesi araştırma için umut verici bir aday olduğunu ve nihayetinde ameliyathanede yararlı bir araç haline gelebileceğini göstermektedir.

Protokol 1. bölümde tarif edilen vaporizatör, sistemin düşük bir maliyetle kolayca mevcut malzemelerden yapılabilir. Uzak tetikli bir biyolojik olarak ışık veren okuyucu içinde indirgeme / oksitleme maddesinin püskürtülmesi (Şekil 1) için bir ilave olacak şekilde tasarlanmıştır. Tasarım lensten 14 cm mesafeden biyoparlaklık okuyucunun içinde nebulizer güvenli çalışması için izin verir. lensin Hiçbir sisleme veya bulanıklaştırma işlemi sırasında gözlenmiştir. Bu ticari ol...

Bu protokol, kemilüminesan ışık emisyonu kaynağı olarak bir rutenyum kompleksi kullanan ve böylece in vivo görüntüleme sırasında yüksek sinyal-gürültü oranları üreten yeni bir intraoperatif görüntüleme tekniğini tanımlar. İntraoperatif görüntüleme, cerrahi prosedürlerin gerçekleştirilme biçiminde devrim yaratabilecek genişleyen bir alandır.

Biyolojik ortamda oluşturuluyor ve Gözlem Kemilüminesans için Yeni Bir Teknik

Intraoperative imaging techniques have the potential to make surgical interventions safer and more effective; for these reasons, such techniques are ...

Bu protokolün genel amacı, sinyal-gürültü oranları ve algılama limitleri açısından mevcut optik tekniklere göre avantajlar sağlayabilecek yeni bir preklinik, birlikte çalışabilir, kemilüminesan görüntüleme tekniği sunmaktır. Bu yöntem, biyolojik bilimlerle ilgili birçok alanda geleneksel optik görüntüleme teknikleriyle erişilemeyen temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin başlıca avantajları, yüksek sinyal-gürültü oranına sahip olması ve ne anlık ışık ne de radyasyon gerektirmemesidir.Bulduğumuz şey, bu tekniğin etkilerinin, bu tekniğin sunabileceği yüksek sinyal-gürültü oranları nedeniyle, kanser de dahil olmak üzere çoklu hastalık durumlarının interoperatif görüntülemesine doğru uzandığıdır. Bu teknik için gelen ışığa ihtiyaç duyulmadığından, gelen ışık emilimi ile ilgili herhangi bir sorun yoktur. Ayrıca, kemilüminesan çekirdek molekülünü işlevsel hale getirmek için büyük bir kimyasal alet kutusu mevcuttur.Prosedüre başlamak için, ters ozmoz suyunda 100 mikrolitrelik standart tris (bypiridine) rutenyum (II) klorür çözeltileri hazırlayın. Daha sonra, her bir standardı 100 mikrolitre 25 milimolar amonyum seryum nitrat çözeltisi ile ters ozmoz suyunda bir mikroskop lamı üzerinde birleştirin. Biyolüminesans okuyucu görüntüleme yazılımını açın ve başlat'a tıklayın.Görüntüleme modunda, ışıldayan ve fotoğrafın işaretli olduğundan ve floresanın işaretli olmadığından emin olun. Lüminesan pozlama süresini, gruplamayı, f/stop ve emisyon filtresi parametrelerini ayarlayın. Fotoğraf pozlama süresini, gruplamayı ve f/stop parametrelerini ayarlayın.Ardından konu yüksekliğini görüntülenecek örneğe göre ayarlayın. Kamera ile örnek sahne alanı arasında 14 santimetrelik bir mesafe için görüş alanını B olarak ayarlayın. Numune aşamasında biyolüminesans okuyucu görüntüleme odasının zeminini siyah inşaat kağıdı ile kaplayın.Ardından, standart karışım damlacığı ile ilk slaydı, damlacık yeşil ışık kutusu artı işaretinde ortalanmış şekilde numune tablasına yerleştirin. Ardından, özel yapım bir nebülizörün üç onsluk sprey şişesini 50/50 su ve etanol çözeltisinde 1:3 trietilamin çözeltisi ile doldurun. Aspirasyon borusunda hava kabarcığı olmadığından emin olun.Nebulizatör düzeneğini, damlacığın kamera görüşünü engellemeden, püskürtme memesi görüntülenecek damlacığa doğru bakacak şekilde görüntüleme odasına yerleştirin. Nebulizatör güç anahtarının ve güç göstergesinin açık olduğundan, manyetik geçiş anahtarının kapalı olduğundan ve güç nebulizatörü ile uzaktan kumanda kablolarının dolaşmadığından emin olun. Slayt üzerindeki işaretler gibi sıcak noktaları küçük siyah inşaat kağıdı parçalarıyla örtün.Nebulizatör uzaktan kumanda kablosunun en az 40 santimetresini görüntüleme odasına yerleştirin. Nebulizatör kablolarını kıvırmadan hazne kapısını yavaşça kapatın. Cihaz yazılımında, edin'e tıklayın, otomatik kaydetmeyi etkinleştirin ve veri dosyası yolunu ayarlayın.Görüntüleme sırasını başlatın. Deklanşör sesli bir tıklama ile açıldığında, numuneye üç patlama trietilamin çözeltisi püskürtmek için nebulizatör düğmesini üç kez değiştirin. Rutenyum görüntüleme ajanının minimum tespit edilebilir konsantrasyonunu belirlemek için prosedürü her standart slaytla tekrarlayın.İn vivo görüntüleme prosedürüne başlamak için, fosfat tamponlu salin içinde 8 ila 33 nanomol tris (bipiridin) rutenyum (II) klorür içeren 100 mikrolitre çözelti hazırlayın. 25 milimolar sulu bir amonyum seryum nitrat çözeltisi hazırlayın. Daha sonra, 100 mikrolitre rutenyum görüntüleme ajanını sağlıklı farelerin kuyruk damarına intravenöz olarak enjekte edin.Fareleri enjeksiyondan 10 dakika sonra karbondioksit boğulması ile kurban edin. Cildi bir Y kesimi ile gövdeden çıkarın ve ardından kalbi ve akciğerleri ortaya çıkarmak için kostal kemeri çıkarın. Sağ kulakçıkta bir çıkış kesin ve 24 gauge bir iğne ile sol ventriküle 20 mililitre PBS enjekte edin.Böbreği ve karaciğeri ortaya çıkarmak için göbek derisini kesin. İlgilenilen organ karaciğer, böbrek veya dalak ise, organdan gözle görülür uzunlamasına bir kesik açın. Biyolüminesan okuyucu yazılımında yeni bir görüntüleme dizisi hazırlayın.Tüm karın görüntülemesi için, fareyi açık karın kameraya bakacak ve baş aleti aletin arkasına bakacak şekilde görüntüleme odasına yerleştirin. İlgilenilen organı yeşil ışık kutusu artı işaretinde ortalayın. Sprey şişesini ve nozulu nebulizatör tertibatından iyice yıkayın ve ardından şişeyi amonyum seryum nitrat çözeltisi ile doldurun.Nebulizatörü, püskürtme memesi görüntüleme bölgesine yönlendirilmiş olarak görüntüleme odasına yerleştirin. Kameranın engellenmediğinden, kabloların dolaşmadığından ve uzaktan kumanda kablosunun en az 40 santimetresinin haznede olduğundan emin olun. Odayı kapatın ve görüntüleme dizisini başlatın.Deklanşör bir tıklama ile açılırken, görüntüleme alanına üç kez oksitleyici madde püskürtmek için düğmeyi üç kez değiştirin. Görüntülemeden sonra, nebulizatör tertibatını çıkarın ve amonyum seryum nitratın kristalleşmesini önlemek için püskürtme memesini iyice durulayın. Daha sonraki bireysel organ görüntüleme ve miktar tayini için, fareyi cihazdan çıkarın ve açık vücut boşluğundan başlayarak iç organları çıkarın.Kas dokusu örneklerini çıkarmak için arka bacak derisini kesin. İlgilenilen organ karaciğer, böbrek veya dalak ise, organı uzunlamasına ikiye bölün. Ardından organı bir Petri kabına veya siyah inşaat kağıdına yerleştirin.Her organı tüm hayvanla aynı şekilde görüntüleyin ve her sekanstan sonra püskürtme memesini durulayın. Bu prosedürde, farelere rutenyum bazlı bir görüntüleme ajanı enjekte edildi ve ilgilenilen dokuya kemilüminesansı indüklemek için bir oksitleyici püskürtüldü. Bu koşullarda görüntüleme ajanının saptanabilir minimum konsantrasyonu, santimetre kare başına 6.9 pikomol olarak belirlendi.Biyolüminesans okuyucu ile ilgilenilen organların beyaz ışıkta kemilüminesans görüntüleri elde edildi. Kemilüminesans sinyali ağırlıklı olarak intravenöz enjeksiyonu takiben böbreklerde gözlendi ve hidrofilik tris (bipiridin) rutenyum (II) katyonunun renal eliminasyonunu gösterdi. Görüntüleme ajanının tek başına PBS'ye karşı sinyal-gürültü oranı böbreklerde 27: 1 ve karaciğerde 21: 1 idi.Fare popliteal lenf nodları ayrıca rutenyum bazlı görüntüleme ajanının daha konsantre bir çözeltisinin deri altı enjeksiyonu ile değerlendirildi. Görüntüleme ajanını içeren lenf bezleri, tek başına PBS içeren lenf bezlerine göre anlamlı derecede daha büyük bir parlaklık gösterdi. Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik uygun şekilde yapılırsa iki saat içinde yapılabilir.Bu prosedürü denerken, ortam ışığını dışlamayı ve rutenyum tris bpy ile kontaminasyonu önlemeyi unutmamak önemlidir. Geliştirilmesinden sonra bu teknik, biyomoleküler görüntüleme alanındaki araştırmacıların farelerde kanser gibi hastalık durumlarını keşfetmelerinin önünü açacaktır. Bu yöntem, geleneksel optik görüntüleme teknikleriyle erişilemeyen sorulara ışık tutabilse de, geleneksel tekniklerle araştırılabilecek herhangi bir soru potansiyel olarak kemilüminesans ile ele alınabilir.

a-novel-technique-for-generating-observing-chemiluminescence

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Biyomühendislik

Yaşayan hayvanların bakteriyel enfeksiyonlar biyoparlaklık görüntüleme yöntemleri açıklanmıştır. Patojenler, canlı hayvanlarda enfeksiyon optik tüm vücut görüntüleme sağlayan lusiferaz ifade etmek için modifiye edilmiştir. Hayvan modelleri lusiferaz ifade patojenler ile enfekte olan ve hastalık ortaya çıkan ders biyoparlaklık görüntüleme ile gerçek zamanlı olarak görüntülenebilmekte.

Farelerde Görüntü Bakteriyel Enfeksiyonlar Lusiferaz Kullanımı

Bu yazıda onların büyüme ve metastaz sırasında metastatik meme kanseri hücrelerinde ifade böceği ve Renilla lusiferaz enzimler hem bioluminescent reaksiyonları, inşa görselleştirmek ve ölçmek için yöntemler...

Vivo Çift Yüzey Bioluminescent Imaging&#39;de

Sirkadiyen saatler tek tek hücrelerin içinde fonksiyon, yani, bu hücre-özerktir. Burada, non-invaziv, lusiferaz tabanlı gerçek zamanlı biyolüminesans teknolojisini kullanarak cep özerk saat modelleri üretme yöntemleri açıklanmaktadır. Muhabir hücreleri sirkadiyen biyoloji eğitimi için uysal, fonksiyonel model sistemleri sağlıyoruz.

Lusiferaz Biyoparlaklık Gazeteciler kullanma Gen Ekspresyonunun Hücre-özerk Sirkadiyen Saat Ritimleri İzlenmesi

Bioluminescent Bakteriyel Görüntüleme<em&gt; In Vivo</em

Bu videoda, ilaçların hassas ve hızlı taranması için biyolüminesans testinin faydasını vurgulayan bir yöntemi açıklıyoruz. Bu ilaçlar, etki şekillerindeki sinerjizmi değerlendirmek için tek başına veya kombinasyon halinde test edilebilir.

Hücresel Biyolüminesans Tabanlı Test: Kombinatoryal İlaç Taraması için Yüksek Verimli Bir Yöntem

Bakteriyel biyolüminesans gen kasetinin ifade eden memeli hücreleri...

Sitotoksisite Sürekli ve gerçek zamanlı izlenmesi için özerk Bioluminescent Memeli Hücre

Proteinler arasındaki etkileşimleri tüm hücresel süreçleri için temel vardır. Bio-ışıldama, rezonans enerji transferi kullanılarak, proteinlerin bir çift arasındaki etkileşim, canlı hücrelerde ve gerçek zamanlı olarak izlenebilir. Bundan başka, potansiyel olarak patojenik mutasyonların etkisi değerlendirilebilir.

Biyoparlaklık Rezonans Enerji Transferi kullanma Canlı Hücrelerde Protein-protein etkileşimleri araştıran

Ilgili ilkeleri ölçme ve floroforlar ve antikor hedefli koşulları çok sayıda uyumluluğunu göstererek Lüminesans (YAKIT) dan Sınırsız Uyarma tarafından Floresans temel ve uygulanabilirliğini genişletilmesi.

BRET Ötesinde Bir Adım: Sınırsız Uyarma tarafından Flüoresan Lüminesans dan (YAKIT)

Genetik olarak kodlanmış luciferase gen ekspresyonu popüler bir non-invaziv muhabir var. Gaz ve sıcaklık optimize Kaydedici (timsah) Imaging otomatik bir boyuna luciferase çok çeşitli koşullar altında kollarındaki hücrelerden Boylamsal kayıt sağlar. İşte nasıl timsah sirkadiyen ritim araştırma bağlamında kullanılabilir göstermektedir.

Kollarındaki gazetecilere bir otomatik boyuna Luciferase gaz ve sıcaklık optimize Kaydedici (timsah) Imaging kullanarak esnek ölçüm

Kollarındaki bakteri gibi çekirdek algılama mekanizmaları, çeşitli aracılığıyla ışık üretim düzenler. Bu roman yöntemi bioluminescence in situ incelenmesi ve hücre yoğunluğu için ışık emisyon korelasyon sağlar. Bir yapay kollarındaki Escherichia coli sistemi sağlar lux operons, Lux proteinler ve onların Interplay karakterizasyonu.

Situ Ölçüm ve korelasyon hücre yoğunluğu ve kollarındaki bakterilerin ışık emisyon

Küçük moleküllü bir substratı oksitleyen bir lusiferaz enzimi tarafından yayılan biyolüminesans ışığı, bir lusiferin, fotosensoriyel proteinleri aktive etmek için kullanılabilir, böylece ışık stimülasyonuna başka bir boyut ekler ve hücrelerde zamansal ve mekansal ölçeklerde çok sayıda ışık aracılı fonksiyonun manipülasyonunu sağlar.

Biyolüminesan Optogenetik 2.0: Fotosensör Proteinleri In Vitro ve In Vivo'yu Aktive Etmek için Biyolüminesanstan Yararlanma

Keşfedin, rutenyum kompleksi kullanan yeni bir kemilüminesans görüntüleme tekniği ile ameliyat sırasında yüksek sinyal-gürültü oranı sağlayan biyolojik görüntüleme yöntemini. Bu teknik, kanser dahil çeşitli hastalık durumlarının araştırılmasına olanak tanır.

Biyolojik ortamda oluşturuluyor ve Gözlem Kemilüminesans için Yeni Bir Teknik

Daha fazla video keşfet