Name: Orthotopic insan Glioblastoma Multiforme Xenografts fare modelleri sitotoksik bağışıklık hücrelerinin stereotaksik evlat edinen Transfer (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-09-01T13:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 15 s
Description: Öğrenin, glioblastoma multiforme için sitotoksik bağışıklık hücrelerinin stereotaksik evlat edinen transfer protokolünü. Bu yöntem, immün yetmez fare modellerinde intratumoral hücresel immünoterapinin uygulanabilirliğini ve antitümör etkinliğini gösterir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar personeli sitometresi tesisi (Cytocell) ve Üniversite Hastanesi hayvan tesis (UTE) Nantes hayvan yetiştirme ve bakım, hücresel ve tissular çekirdek tesis Nantes Üniversitesi (MicroPICell) görüntüleme için görüntüleme için Nantes teşekkür uzman teknik yardım. Bu eser INSERM, CNRS, Université de Nantes, Institut National du kanser (Inca #PLBio2014-155), Ligue Nationale contre le kanser (AO Bölgelerarası 2017) ve Avrupa konsorsiyumu dönemi-Net Transcan2 tarafından finanse edildi (Immunoglio). Takım Fondation pour la Recherche Medicale (DEQ20170839118) tarafından finanse edilmektedir. Bu eser IGO LabEX bağlamında gerçekleşmiştir ve IHU Cesti programları, desteklenen Ulusal Araştırma Ajansı Investissements d'Avenir yolu ile tarafından programları ANR-11-LABX-0016-01 ve ANR-10-IBHU-005, anılan sıraya göre. IHU Cesti projesi de Nantes Metropole ve Pays de la Loire bölgesi tarafından desteklenmektedir. Yazarlar Chirine Rafia el yazması düzeltmek yardım sağlamak için teşekkür ederiz.

Aşağıdaki yordam içeren hayvan konular (anlaşma #00186.02; Pays de la Loire [Fransa] bölgesel Etik Komitesi) Kurumsal kurallarına göre gerçekleştirilen. İnsan PBMCs bilinçli sağlıklı bağış (Etablissement Français du Sang Nantes, Fransa) toplanan kan gelen izole edildi. Tüm adımlar steril koşullarda gerçekleştirilir.
1. non-spesifik sitotoksik efektör T lenfositler genişlemesi
<ol><li>Hazırlamak ve besleyici hücreler, 35 Gy ışınlatayım. 2 x 105 - 4 x 105 efektör hücreleri, uyarılması için 10 x 106 PBMCs ve 1 x 106 BLCLs üç farklı ve sağlıklı bağışçılardan hazırlayın.</li>
	<li>Besleyici hücreler ve % 10 FCS ısı inaktive, 2 mM L-glutamin, penisilin (100 IU/mL) ve streptomisin (0.1 µg/mL) ve 300 IU/mL rekombinant IL-2 takıma RPMI 15 mL efektör hücrelere resuspend.</li>
	<li>PHA-L 1 µg/mL nihai bir konsantrasyon eklemek, dikkatlice karıştırın ve hücre süspansiyon 96-şey U popolu plakaları bir kuyu başına 150 µL dağıtmak.</li>
	<li>37 ° C'de ve oksijen bir atmosferde % 5 CO2 kuluçkaya.</li>
	<li>Büyük hücreli kültür wells formunda kümeler kadar günlük plaka kontrol (~ 7 gün).</li>
	<li>Hücreleri 1 x 106 hücre/mL taze kültür ortamında, bir kültür şişesi içine aktarın.</li>
	<li>(2 bir hafta x) sayarak toplam cep numarasını belirlemek ve taze kültür ortamında 1 x 106 hücre/mL proje. Not: Efektör bağışıklık hücreleri dinlenme State (genellikle 3 hafta sonra ilk amplifikasyon uyarıcı) tedavi yönetim için hazır olmalıdır. Saflık ve reaktivite bu efektör hücreler in vivo enjeksiyonları (Örneğin, vitro deneyleri ile) önce kontrol edilmelidir.</li>
</ol>2. pre-operative efektör hücreleri hazırlık
<ol><li>Efektör hücre sayısı kontrol ettikten sonra 50 mL tüp efektör hücrelerde Santrifüjü (300 x g 5 min için) tarafından toplamak. Not: aşırı hücre (Örneğin, 50 x 106) için herhangi bir kaybı telafi etmek için hazır olun.</li>
	<li>Dikkatle süpernatant kaldırmak ve 15 mL steril PBS ve 300 x g de 5 dk santrifüj yıkama gerçekleştirmek için hücrelerde resuspend.</li>
	<li>Dikkatli bir şekilde ve tamamen süpernatant kaldırın ve sonra hücre pelet 1 mL steril PBS resuspend.</li>
	<li>Santrifüjü 300 x g 5 min için de için 1.5 mL microtube resuspended hücrelerde aktarın.</li>
	<li>Yavaş yavaş pipetting tarafından dikkatli bir şekilde ve tamamen süpernatant kaldırın.</li>
	<li>Hücre Pelet fare başına steril PBS 8 µL resuspend. Not: Bu kritik bir adımdır.</li>
	<li>Hücre süspansiyon hacmi bir micropipette kullanarak ölçün. Gerekirse, steril PBS (PBS 15 µL doz başına 20 x 106 hücreler) ve dikkatlice karıştırın.</li>
	<li>, 15 ve 20 μL (imperatively < 20 µL) arasında fare başına son birimdir micropipette, kullanarak kontrol edin.</li>
	<li>Buz hücrelerdeyse stereotaksik enjeksiyon kadar tutun. Not: daha 3 h timepoints test değil.</li>
</ol>3. stereotaksik enjeksiyon
<ol><li>
Ekipman kurulumu
	<ol>
<li>Bir araya getiren ve küçük bir hayvan stereotaksik kare kafa içi enjeksiyonları (Örneğin, şırınga boyutu, istenen birim ve enjeksiyon oranı) doğruluğunu sağlamak için üreticinin yönergelerine göre kalibre. Not: Yavaş infüzyon hızı (Örneğin, 2-3 µL/dak) önerilir.</li>
		<li>Mikrobiyal emanet dolabı (MSC) kısırlık araçlarının bakımını ve fareler korumak için altında malzeme bulaşan yükleyin. Not: yer "izotermal blok" 37 ° C'de bir su banyosunda Bu sistem, ameliyat sırasında fareler hipotermi sınırlar. Yastıkları, sonrası yordam bakımı için gerekli olan Isıtma sürekli sıcaklık izleme sırasında kullanılmalıdır.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Pre-operative hayvan hazırlık
	<ol>
<li>Bir fare ketamin (10 mg/mL) ve xylazine (0.1 mg/mL) 10 µL/g fare vücut ağırlığının, mayi enjeksiyonu ile anestezi.</li>
		<li>Tam anestezi ve analjezi Hayvan emin olmak için bir ayak çimdik testi gerçekleştirin. Not: Herhangi bir hareket derin olmayan analjezi bir göstergesidir ve bu durum ortaya çıkarsa, bir kaç dakika daha işlem tekrarlanmadan önce gereklidir.</li>
		<li>Sonra fare düzgün anestezi, makas (arasında iki kulak, burun kadar) cerrahi sitesinden kürk kaldırmak için kullanabilirsiniz.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Pre-operative hücre hazırlık
	<ol>
<li>Dikkatli bir pipet hücrelerle topaklanma herhangi bir hücreyi önlemek için önce her iğne (birkaç kez) resuspend.</li>
		<li>Dikkatle gerekli hücre süspansiyon birim (15-20 µL) kabarcıklar aspirasyon önlemek için 22-G microsyringe çizin. Not: Bu hücre-yükleme adım içine microsyringe enjekte birimleri'deki en aza indirmek önemlidir. Hücreler arasında yordamlar topaklanma herhangi bir hücreyi engellemek ve efektör hücreleri yönetim kohort çift sayıda sağlamak için tek tek her enjeksiyon için yeniden yükleyin.</li>
		<li>O zaman, belgili tanımlık tenkıye adapte şırınga pompa yerleştirin.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Yordam bakım
	<ol>
<li>Cerrahi sitesi povidone-iyot %5 çözüm en az 3 batırılmış temizleme bezi ile dezenfekte x.</li>
		<li>Yağlama oftalmik merhem herhangi bir kornealar kurutma önlemek için fareyi'nın gözlerinin içine yerleştirin.</li>
		<li>Pozisyon stereotaksik karede sıcak izotermal blok imzalat fare fare ısısını ameliyat sırasında korumak ve mortalite sınırlamak için steril bir plastik film ile kaplı. Not: Fare burun ve diş uygun şekilde işlem sırasında yeterli solunum akışını sağlamak için diş çubuğunun üzerinde konumlandırılmış olmalıdır.</li>
		<li>Fare diş çubuğunun üzerinde konumlandırılmış bir kez sıkıca fare kulaklar kafa hareketsiz altında kulak çubuklarını sıkın. Not: kulak zarı zarar vermemeye veya solunum uzlaşmaya dikkat et.</li>
		<li>1-2 cm ensizyon sagittal cilt kafatası kafatası ortaya çıkarmak için posterior anterior üst kısmı boyunca steril makasla olun.</li>
		<li>Sagittal ve koronal sütür (Bregma) ( Şekil 1' de gösterilen) enjeksiyon önce stereotaksik yerelleştirme için simge olarak hizmet verecek kesişimi tanımlayın.</li>
		<li>Bu noktada yukarıda microsyringe bir yer.</li>
		<li>2 mm sağ yanal ve 0,5 mm Bregma ön microsyringe taşıyın.</li>
		<li>Bir microdrill kullanarak, önceden belirlenen koordinatları steril bir matkap ile kafatası içinde küçük bir delik açmak. Beynin herhangi bir travmatik yaralanmayı önlemek için yüzeysel kalması için dikkatli olun. Not: Bu protokol için kurulan bir tümör (bir hafta sonra tümör hücre enjeksiyon) içinde bağışıklık hücreleri enjekte edildi. Deri yeniden (skar) ve enjeksiyon olmalıdır (delik genellikle hala enjeksiyon sonra 2 hafta kadar mevcut) tümör hücre implantasyonu için kullanılan aynı koordinatlarda gerçekleştirilir. Koordinatları beyin parankimi13,14tümör ve efektör hücrelere enjekte için seçildi.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Enjeksiyon bağışıklık efektör hücrelerin
	<ol>
<li>Dikkatle microsyringe delinmiş deliğe yerleştirin ve yavaş hareket, beyin zarı içinde aşağı 3 mm ve sonra geriye doğru 0,5 mm son derinliğe kadar efektör hücreleri enjekte önce 2.5 mm iğne iletmek.</li>
		<li>2-3 µL/dak efektör hücre enjeksiyon çalıştırın ve enjeksiyon süresi boyunca fareler izleme.</li>
		<li>Enjeksiyon işlemi tamamlandıktan sonra yalnızca 1 mm için iğne geri çekilin ve yavaş yavaş tamamen çekilmesi infüzyon sitesinden herhangi bir sızıntı önlemek için microsyringe, önce bir dakika için microsyringe tutmak. Not: hayvan stereotaksik aygıttan kaldırılmasını, hemen enjeksiyon donanımları yaklaşan deneyler için temiz.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Ameliyat sonrası bakım ve takip fare
	<ol>
<li>Hayvan stereotaksik çerçevesinden kaldırın ve hemen povidone-iyot %5 çözüm kesi sitede uygulamak ve uygun bir cerrahi sütür ile cildi kapatmak.</li>
		<li>%2 lidokain jel doğrudan yaraya uygulayın ve buprenorfin 0.15 µg/g tarafından Subkutan Enjeksiyon sonrası yordam analjezi için yönetmek.</li>
		<li>Yer geri onun kafes bir ısıtma yastığı yukarıda imzalat fare 37 ° C için uygun fare vücut ısısını korumak için ve herhangi bir hipotermi önlemek için ayarlayın. Not: Ayrı konut gerekli değildir.</li>
		<li>Anesteziden tamamen iyileşti kadar fareyi izlemek ve konut odasına aktar. Not: birkaç beklenmedik komplikasyonlar (< %5 enjekte farelerin) meydana gelmiş gibi bugüne kadar bu protokolü de desteklenir.</li>
		<li>Her gün fareler izlemek ve azalan herhangi bir sağlık işaretleri (Örneğin, Kambur duruş, hareketliliğin, secde veya önemli vücut kilo kaybı [≥ % 15]) gözlendiğinde onları ötenazi.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Stupp, R., Roila, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Malignant+glioma%3A+ESMO+clinical+recommendations+for+diagnosis%2C+treatment+and+follow-up%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Oncology%22%5BJournal%5D)">Malignant glioma: ESMO clinical recommendations for diagnosis, treatment and follow-up.</a> Annals of Oncology. 20 Suppl 4, 126-128 (2009).</li>
<li>Weller, M., Cloughesy, T., Perry, J. R., Wick, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standards+of+care+for+treatment+of+recurrent+glioblastoma--are+we+there+yet%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Neuro-Oncology%22%5BJournal%5D)">Standards of care for treatment of recurrent glioblastoma--are we there yet?</a> Neuro-Oncology. 15 (1), 4-27 (2013).</li>
<li>Chen, S. H., Shine, H. D., Goodman, J. C., Grossman, R. G., Woo, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+therapy+for+brain+tumors%3A+regression+of+experimental+gliomas+by+adenovirus-mediated+gene+transfer+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Gene therapy for brain tumors: regression of experimental gliomas by adenovirus-mediated gene transfer in vivo.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 91 (8), 3054-3057 (1994).</li>
<li>Choi, P. J., Tubbs, R. S., Oskouian, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emerging+Cellular+Therapies+for+Glioblastoma+Multiforme%5BTitle%5D)+AND+%22Cureus%22%5BJournal%5D)">Emerging Cellular Therapies for Glioblastoma Multiforme.</a> Cureus. 10 (3), e2305(2018).</li>
<li>Zhu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+and+Therapy+of+Glioblastoma+in+a+Mouse+Model+Using+Exosomes+Derived+From+Natural+Killer+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Immunology%22%5BJournal%5D)">Targeting and Therapy of Glioblastoma in a Mouse Model Using Exosomes Derived From Natural Killer Cells.</a> Frontiers in Immunology. 9, 824(2018).</li>
<li>Chung, D. S., Shin, H. J., Hong, Y. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+hope+in+immunotherapy+for+malignant+gliomas%3A+adoptive+T+cell+transfer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunology+Research%22%5BJournal%5D)">A new hope in immunotherapy for malignant gliomas: adoptive T cell transfer therapy.</a> Journal of Immunology Research. 2014, 326545(2014).</li>
<li>Vauleon, E., Avril, T., Collet, B., Mosser, J., Quillien, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overview+of+cellular+immunotherapy+for+patients+with+glioblastoma%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+and+Developmental+Immunology%22%5BJournal%5D)">Overview of cellular immunotherapy for patients with glioblastoma.</a> Clinical and Developmental Immunology. 2010, (2010).</li>
<li>Brown, C. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regression+of+Glioblastoma+after+Chimeric+Antigen+Receptor+T-Cell+Therapy%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+of+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Regression of Glioblastoma after Chimeric Antigen Receptor T-Cell Therapy.</a> The New England of Journal of Medicine. 375 (26), 2561-2569 (2016).</li>
<li>Jarry, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stereotaxic+administrations+of+allogeneic+human+Vgamma9Vdelta2+T+cells+efficiently+control+the+development+of+human+glioblastoma+brain+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Oncoimmunology%22%5BJournal%5D)">Stereotaxic administrations of allogeneic human Vgamma9Vdelta2 T cells efficiently control the development of human glioblastoma brain tumors.</a> Oncoimmunology. 5 (6), e1168554(2016).</li>
<li>Dutoit, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploiting+the+glioblastoma+peptidome+to+discover+novel+tumour-associated+antigens+for+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%22%5BJournal%5D)">Exploiting the glioblastoma peptidome to discover novel tumour-associated antigens for immunotherapy.</a> Brain. 135 (Pt 4), 1042-1054 (2012).</li>
<li>Joalland, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IL-21+Increases+the+Reactivity+of+Allogeneic+Human+Vgamma9Vdelta2+T+Cells+Against+Primary+Glioblastoma+Tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunotherapy%22%5BJournal%5D)">IL-21 Increases the Reactivity of Allogeneic Human Vgamma9Vdelta2 T Cells Against Primary Glioblastoma Tumors.</a> Journal of Immunotherapy. 41 (5), 224-231 (2018).</li>
<li>Clemenceau, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effector+memory+alphabeta+T+lymphocytes+can+express+FcgammaRIIIa+and+mediate+antibody-dependent+cellular+cytotoxicity%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">Effector memory alphabeta T lymphocytes can express FcgammaRIIIa and mediate antibody-dependent cellular cytotoxicity.</a> The Journal of Immunology. 180 (8), 5327-5334 (2008).</li>
<li>Abdelwahab, M. G., Sankar, T., Preul, M. C., Scheck, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracranial+implantation+with+subsequent+3D+in+vivo+bioluminescent+imaging+of+murine+gliomas%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Intracranial implantation with subsequent 3D in vivo bioluminescent imaging of murine gliomas.</a> Journal of Visualized Experiments. (57), e3403(2011).</li>
<li>Jarry, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treg+depletion+followed+by+intracerebral+CpG-ODN+injection+induce+brain+tumor+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroimmunology%22%5BJournal%5D)">Treg depletion followed by intracerebral CpG-ODN injection induce brain tumor rejection.</a> Journal of Neuroimmunology. 267 (1-2), 35-42 (2014).</li>
<li>June, C. H., O'Connor, R. S., Kawalekar, O. U., Ghassemi, S., Milone, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CAR+T+cell+immunotherapy+for+human+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">CAR T cell immunotherapy for human cancer.</a> Science. 359 (6382), 1361-1365 (2018).</li>
<li>Baruch, E. N., Berg, A. L., Besser, M. J., Schachter, J., Markel, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adoptive+T+cell+therapy%3A+An+overview+of+obstacles+and+opportunities%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer%22%5BJournal%5D)">Adoptive T cell therapy: An overview of obstacles and opportunities.</a> Cancer. 123 (S11), 2154-2162 (2017).</li>
<li>Bryant, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+and+immunotherapeutic+potential+of+gammadelta+T-cells+in+patients+with+glioblastoma%5BTitle%5D)+AND+%22Neuro-Oncology%22%5BJournal%5D)">Characterization and immunotherapeutic potential of gammadelta T-cells in patients with glioblastoma.</a> Neuro-Oncology. 11 (4), 357-367 (2009).</li>
<li>Pereboeva, L., Harkins, L., Wong, S., Lamb, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+safety+of+allogeneic+innate+lymphocyte+therapy+for+glioma+patients+with+prior+cranial+irradiation%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Immunology%2C+Immunotherapy%22%5BJournal%5D)">The safety of allogeneic innate lymphocyte therapy for glioma patients with prior cranial irradiation.</a> Cancer Immunology, Immunotherapy. 64 (5), 551-562 (2015).</li>
<li>Bailey, S. L., Carpentier, P. A., McMahon, E. J., Begolka, W. S., Miller, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Innate+and+adaptive+immune+responses+of+the+central+nervous+system%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Reviews+in+Immunology%22%5BJournal%5D)">Innate and adaptive immune responses of the central nervous system.</a> Critical Reviews in Immunology. 26 (2), 149-188 (2006).</li>
<li>Louveau, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+and+functional+features+of+central+nervous+system+lymphatic+vessels%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Structural and functional features of central nervous system lymphatic vessels.</a> Nature. 523 (7560), 337-341 (2015).</li>
<li>Menei, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Local+and+sustained+delivery+of+5-fluorouracil+from+biodegradable+microspheres+for+the+radiosensitization+of+glioblastoma%3A+a+pilot+study%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer%22%5BJournal%5D)">Local and sustained delivery of 5-fluorouracil from biodegradable microspheres for the radiosensitization of glioblastoma: a pilot study.</a> Cancer. 86 (2), 325-330 (1999).</li>
<li>Menei, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stereotaxic+implantation+of+5-fluorouracil-releasing+microspheres+in+malignant+glioma%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer%22%5BJournal%5D)">Stereotaxic implantation of 5-fluorouracil-releasing microspheres in malignant glioma.</a> Cancer. 100 (2), 405-410 (2004).</li>
<li>Salot, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Large+scale+expansion+of+gamma+9+delta+2+T+lymphocytes%3A+Innacell+gamma+delta+cell+therapy+product%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunological+Methods%22%5BJournal%5D)">Large scale expansion of gamma 9 delta 2 T lymphocytes: Innacell gamma delta cell therapy product.</a> Journal of Immunological Methods. 326 (1-2), 63-75 (2007).</li>
<li>Bennouna, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phase-I+study+of+Innacell+gammadelta%2C+an+autologous+cell-therapy+product+highly+enriched+in+gamma9delta2+T+lymphocytes%2C+in+combination+with+IL-2%2C+in+patients+with+metastatic+renal+cell+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Immunology%2C+Immunotherapy%22%5BJournal%5D)">Phase-I study of Innacell gammadelta, an autologous cell-therapy product highly enriched in gamma9delta2 T lymphocytes, in combination with IL-2, in patients with metastatic renal cell carcinoma.</a> Cancer Immunology, Immunotherapy. 57 (11), 1599-1609 (2008).</li>
<li>Singh, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+human+brain+tumour+initiating+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Identification of human brain tumour initiating cells.</a> Nature. 432 (7015), 396-401 (2004).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Bir evlat edinen transferini yerli seçilen veya mühendislik bağışıklık efektör hücreleri temsil eden verimli tümör hücreleri dönüştürülmüş15karşı ayrıntıları sınırlayıcı dikkat çekici infiltrative beyin kanser gibi tedavisi için umut verici bir yaklaşım, 16,17,18. Ancak, beyin oluşur, merkezi sinir sistemi, kan - beyin bariyerini varlığını ve klasik lenfatik drenaj sistemi19<...

(Kim IV tümörü grade) GBM erişkinlerde en sık ve agresif birincil beyin kanseri var. Cerrahi ve radyo-kemoterapi birleştirir agresif tedaviler rağmen GBM son derece kötü prognoz (medyan sağkalım 14.6 ay ve % 2-yılı-ölüm > 73)1ile ilişkili olarak kalır. Bu kaç etkili tedavi gelişmeler üzerinde son on yılda2doğrulandıktan kanıtlamaktadır. Daha etkili tedavi stratejileri3,4,5tasarımı için adaylar arasında immunotherapies6 Şu anda incelenmiştir izlemek ve son derece invaziv ve radyo/kemoterapi dayanıklı tümör ortadan kaldırmak için hücreleri, hızlı ve ölümcül tümörün nüks7anahtar katkılarından dolayı şüpheli. Çeşitli potansiyel immünolojik hedefleri belirlendi ve için önerilen immunotherapies, doğal içeren veya değiştirilmiş αβ veya ϒδ T lenfositler GBM özgü tümör antijenleri veya stres kaynaklı molekülleri8,9gibi olduğunu, 10. Seçili GBM reaktif bağışıklık hücre effectors yönetmek için olasılık efektör lenfositler yüksek miktarlarda kalıntı malignite siteye doğrudan sunmak için eşsiz bir fırsat temsil eder. Bu strateji desteklemek için biz son zamanlarda orthotopic birincil insan GBM xenografts sadakatle taşıyan immünyetmezligi fareler üzerinde temel modelleri beyin tümörleri GBM hastaların9,11' deki gelişimi özetlemek göstermiştir. Ayrıca, bu modeller adoptively transfer edilen allojeneik insan Vϒ9Vδ2T lenfosit güçlü antitümör etkinliğini göstermek için kullanılmıştır.
Bu iletişim kuralı GBM, allojeneik T lenfositler evlat edinen transferinde dayalı gibi beyin tümörlerinin stereotaktik immunotherapies ulaşmak için kritik deneysel adımları açıklar. Makale gösterir: (i) gibi insan Vϒ9Vδ2T lenfosit; tedavi allojeneik bağışıklık efektör T lenfositler amplifikasyon (ii) enjeksiyon için bu efektör T lenfositler hazırlanması; (iii) içinde beyin tümörü yakınındaki stereotaksik yönetim için yordam. Bu makalede ayrıca bu hücresel effectors davranışını içgörü sonra stereotaksik enjeksiyon sağlar.
Burada sunulan tedavi yaklaşımı 20 x 106 efektör hücreleri başına doz her beyin tümörü taşıyan immünyetmezligi fare için enjeksiyon temel alır. Bağışıklık hücreleri büyük miktarlarda üretmek için bir ilk vitro genişleme adım gereklidir. Bu nedenle, belirsiz hücre açılımları phytohemagglutinin (PHA-L) kullanarak gerçekleştirilir ve allojenik besleyici hücreler ışınlanmış: periferik kan mononükleer hücreler (PBMCs) sağlıklı bağış ve Epstein Barr virüsü EBV dönüştürülmüş B-lymphoblastoid hücre vitro enfeksiyon EBV içeren kültür Marmoset B95-8 hücre satırından 1 µg/mL cyclosporin-A. huzurunda süpernatant ile PBMCs elde satırları (BLCLs),
GBM reaktif efektör bağışıklık hücreleri karşılaştırılır ve vitro deneyleri9' dan seçilmiş. Bu efektör hücreler aktif hale gelir ve standart iletişim kuralları kullanarak kendi doğası göre (Örneğin, insan Vγ9Vδ2 T lenfositler9 veya insan anti-herpes virüsü αβ T lenfositler12) > %80, rutin olarak en az bir saflığı ile güçlendirilmiş sitometrik analiz tarafından kontrol. Aşağıda verilen hücre genişletme yordam çeşitli insan lenfosit alt kümeleri için geçerlidir.

<table><tbody><tr><td>3 farklı sağlıklı donörden</td> <td>PBMC'ler</td><td></td><td></td></tr><tr><td>3 farklı donörden</td><td>BLCL'ler</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Roswell Park Memorial Institute medium (RPMI)</td><td>Gibco</td><td>31870-025</td><td></td></tr><tr><td>FCS</td><td>Dutscher</td><td>S1810-500</td><td></td></tr><tr><td>L-glutamin</td><td>Gibco</td><td>25030-024</td><td></td></tr><tr><td>penisilin/streptomisin</td><td>Gibco</td><td>15140-122</td><td></td></tr><tr><td>IL-2</td><td>Novartis</td><td>proleukin</td><td></td></tr><tr><td>PHA-L</td><td>Sigma</td><td>L4144</td><td></td></tr><tr><td>Stereotaksik çerçeve</td><td>Stoelting Co.</td><td>51600</td><td></td></tr><tr><td>Stereotaksik çerçeve için fare adaptörü&nbsp; &nbsp;</td><td>Hırsızlık A.Ş.</td><td>51624</td><td></td></tr><tr><td>Mikroşırınga Pompa Enjektörü&nbsp;</td><td>WPI</td><td>UMP3-4</td><td></td></tr><tr><td>NanoFil Şırınga</td><td>WPI</td><td>NF34BV-2</td><td></td></tr><tr><td>NSG fareleri</td><td>Charles River</td><td>NSGSSFE07S</td><td></td></tr><tr><td>Ketamin</td><td>Merial</td><td>Imalg & egrave; ne 1000</td><td></td></tr><tr><td>Ksilazin</td><td>Bayer</td><td>Rompur% 2</td><td></td></tr> <tr><td>Makas</td><td>WPI</td><td>201758</td><td></td></tr><tr><td>Forseps</td><td>WPI</td><td>501215</td><td></td></tr><tr><td>OmniDrill 115 / 230V</td><td>WPI</td><td>503598</td><td></td></tr><tr><td>Vicryl 4-0</td><td>Ethicon</td><td>VCP397H</td><td></td></tr><tr><td>Ksilokain</td><td>Astrazeneca</td><td>3634461</td><td></td></tr></tbody></table>

orthotopic insan glioblastoma multiforme xenografts fare modelleri sitotoksik bağışıklık hücrelerinin stereotaksik evlat edinen transfer

Stereotactic Adoptive Transfer of Cytotoxic Immune Cells in Murine Models of Orthotopic Human Glioblastoma Multiforme Xenografts

Glioblastoma multiforme (GBM), Yetişkin, en sık ve agresif birincil beyin kanseri genellikle kötü prognoz ile ilişkilidir ve kıt etkili tedaviler son on yılda önerilmiştir. Roman tedavi edici stratejiler tasarlamak için umut verici adaylar arasında hücresel immunotherapies son derece invaziv ortadan kaldırmak için hedef almış ve kemoterapi-olup tümör hücreleri, büyük olasılıkla bu kanser bir hızlı ve ölümcül nüks dahil. Böylece, tümör çevresinde insan Vϒ9Vδ2 T lenfositler gibi allojeneik GBM reaktif bağışıklık hücre effectors administration(s) verimli sunmak için eşsiz bir fırsat temsil eder ve son derece konsantre doğrudan içine terapötik ajanlar beyin maligniteler sitesi. Burada, orthotopic insan birincil beyin tümörü taşıyan immünyetmezligi farelerde hazırlık ve allojenik insan lenfosit stereotaksik yönetim için bir iletişim kuralı mevcut. Bu çalışmada fizibilite ve allojenik insan lenfosit intrabrain tümör yataklar içinde stereotaksik enjeksiyonları itimat bu hücresel immunotherapies antitümör etkinliğini preklinik bir kanıtı-of-concept sağlar.

Bu çalışma içinde beyin tümörü taşıyan fareler stereotaksik enjeksiyonları tümör yatağın içinde gerçekleştirilen temel hücresel bağışıklık efektör hücrelerin evlat edinen transferlerin strateji açıklar.
Herhangi bir büyük enjeksiyon birimle ilişkili beyin hasarı riskini en aza indirmek için efektör hücre süspansiyon (15-20 µL PBS, 20 x 106 hücreler) konsantre gerekir. Bu hücre toplama adımı efektör hücrelerin canlılık...

Burada, orthotopic insan birincil beyin tümörü taşıyan immünyetmezligi farelerde hazırlık ve allojenik insan lenfosit stereotaksik yönetim için bir iletişim kuralı mevcut. Bu çalışmada bir kanıtı-of-concept fizibilite ve hücresel immunotherapies intrabrain teslim antitümör etkinliği için sağlar.

Orthotopic insan Glioblastoma Multiforme Xenografts fare modelleri sitotoksik bağışıklık hücrelerinin stereotaksik evlat edinen Transfer

Glioblastoma multiforme (GBM), the most frequent and aggressive primary brain cancer in adults, is generally associated with a poor prognosis, and scarce ...

Glioblastoma multiforme, erişkinlerde en sık görülen ve agresif primer beyin tümörü olmaya devam etmektedir. Cerrahiye dayalı agresif tedavilere ve ardından radyo ve kemoterapiye rağmen, GBM son derece kötü bir prognoz ve 15 aydan daha düşük bir medyan sağkalım ile ilişkilidir. Son on yılda çok az terapötik ilerleme kaydedildiğinden, hücresel immünoterapiler şu anda hızlı tümör nüksetmesinde rol oynayan yüksek invaziv ve dirençli GBM hücrelerini ortadan kaldırmak için araştırılmaktadır.Tümör çevresinde seçilmiş GBM-reaktif sitotoksik immün faktörlerin uygulanması, doğrudan rezidüel malignite bölgesine konsantre hücresel immünoterapi vermek için eşsiz bir fırsat olabilir. Grubumuz yakın zamanda ortotopik primer insan GBM ksenogreft taşıyan immün yetmezlikli NSG farelerinin hastalarda GBM'yi daha fazla gelişme için özetlediğini göstermiştir. Bu GBM modelleri, sitotoksik immün efektörlerin intratümöral enjeksiyonlar üzerindeki etkinliğini değerlendirmek için kullanıldı.Bu protokol, öncelikle GBM-reaktif immün efektör hücrelerin izolasyonu ve amplifikasyonuna dayanan terapötik sürecimizi tanımlar. İkincisi, bu efektör hücrelerin interkraniyal enjeksiyon için çoğaltılması. Ve üçüncüsü, fare beynindeki tümör bölgesine stereotaktik enjeksiyonları.Ortotopik enjeksiyondan sonra immün efektörün davranışı da araştırıldı. PHA fetüs stimülasyonundan üç hafta sonra, şişenin dibinde hücre kümesi oluşturan efektör hücreler dinlenme durumuna geri dönmüş ve kullanıma hazır olmalıdır. Efektör hücre sayısını kontrol ettikten sonra, hücreleri 115 mililitrelik tüpte yeniden askıya alın ve toplayın ve santrifüjleyin.Bir süpernatanı dikkatlice ve tamamen çıkarın. Ve hücreleri steril PBS'de yeniden askıya alın ve yıkamak için santrifüjleyin. Süpernatanı dikkatlice ve tamamen çıkarın.Ve sonra hücreleri bir mililitre steril PBS'de yeniden süspanse edin. Santrifüjleme için hücreleri bir mikrotüpe aktarın. Yine, yavaşça pipetleyerek süpernatanı dikkatlice ve tamamen çıkarın.Bir sonraki adım kritiktir, steril PBS'nin son hacminin yarısındaki hücreleri yeniden süspanse edin ve yumuşak ve dikkatli bir şekilde homojenize edin. Son hacmi mikropipet ile doğrulayın, fare başına son hacmin 20 milyon hücre için 15 ila 20 mikrolitre arasında olması gerekir. Fare başına 20 mikrolitreyi geçmeyeceğinden emin olun.Enjeksiyona kadar hücreleri buz üzerinde tutun. Hayvanın bir ayak parmağı çimdiklemesiyle yeterince uyuşturulduğundan emin olun ve ardından kürkü ameliyat bölgesinden, iki kulak arasından ve buruna kadar çıkarın. Hücre topaklanmasını önlemek için hücreleri yavaşça yeniden askıya alın ve kabarcıkların varlığını önlemek için hücre süspansiyonunu büyük bir özenle şırıngaya yükleyin.Ardından, şırıngayı uyarlanan şırınga pompasına yerleştirin. Ameliyat bölgesini tuz ve povidon iyot% 5 solüsyonu ile dezenfekte edin ve korneanın kurumasını önlemek için farenin gözlerine kayganlaştırıcı bir oftalmik merhem yerleştirin. Ardından, anestezi uygulanmış fareyi sıcak bir blok üzerindeki stereotaktik çerçeveye yerleştirin.Farenin burnunu ve dişlerini diş çubuğunun üzerine uygun şekilde yerleştirin. Kafayı hareketsiz hale getirmek için kulak çubuklarını fare kulaklarına sıkıca sıkın. Kulak zarlarına zarar vermemeye, solunumu tehlikeye atmamaya ve başın iyi hareketsiz olduğundan emin olmaya dikkat edin.Kafatasını ortaya çıkarmak için kafatasının üst kısmı boyunca steril makasla orta hat sagital cilt kesisi yapın. Stereotaktik lokalizasyon için yer işaretleri olarak hizmet etmek için sagital ve koronal yapıların kesişimini belirleyin ve şırıngayı bu noktanın üzerine yerleştirin. Şırıngayı önceden belirlenmiş koordinatlarda hareket ettirin.İki milimetre sağ lateral ve 0,5 milimetre ön kısımda bir mikro matkap kullanarak, steril matkap ucuyla kafatasında küçük bir delik açın. Beyin hasarını önlemek için yüzeysel kalmaya dikkat edin. Şırıngayı delinmiş deliğe dikkatlice yerleştirin.İğneyi dura içinde üç milimetre aşağı doğru yavaşça ileri doğru hareket ettirin ve ardından 0,5 milimetre geriye doğru 2,5 milimetre hücre enjeksiyonunun son derinliğine kadar hareket ettirin. Hücre enjeksiyonunu dakikada iki veya üç mikrolitre hızında çalıştırın ve fareleri enjeksiyon süresi boyunca izleyin. Enjeksiyon tamamlandıktan sonra, iğneyi sadece bir milimetre çekin ve infüzyon bölgesinden herhangi bir sızıntıyı önlemek için şırıngayı yavaşça tamamen çekmeden önce şırıngayı bir dakika daha yerinde tutun.Hayvanı stereotaktik çerçeveden dikkatlice çıkarın. Cildi uygun cerrahi dikişle kapatın ve doğrudan yaranın üzerine% 2 Lidokain jeli uygulayın. Anesteziden tam iyileşme sağlanana kadar uygun fare vücut sıcaklığını korumak için anestezi uygulanmış fareyi 37 santigrat dereceye ayarlanmış ısıtma yastığının üzerindeki ilgili kafesine aktarın.Süspansiyon çok konsantre olduğundan, hücre canlılığı ve reaktivitesi kontrol edildi. Efektör hücreler in vivo enjeksiyonu taklit etmek için şırıngaya yüklendi. Hücreler hemen veya 10 dakika sonra toplandı ve propidium iyodür boyaması için akış sitometrisi ile analiz edildi.Gördüğünüz gibi, hazırlık ve yükleme, efektör hücrelerin 24 saat sonra yaşayabilirliğini etkilemedi. Glioblastoma tümör hücrelerine karşı reaktivite, hazırlıksız hücreler veya hazırlanan efektörler kullanılarak da kontrol edildi ve gözlerde üç saat kaldı. Reaktivite, aktivasyon markörü CD107A'nın pozitif boyanması ile izlenir.Bu sonuçlar, efektör hücrelerin reaktivitesinin preparattan etkilenmediğini göstermektedir. Efektör hücrelerin enjeksiyonundan yedi gün sonra, fare beyinleri toplandı, bölümlere ayrıldı ve tümör yapısının tanımlanmasına izin vermek için hematik renklenme için boyandı. Daha sonra anti-insan CD3 boyama, efektör hücrelerin lokalizasyonuna izin verdi.İlginç bir şekilde, efektör hücreler tümörün etrafında ve tümör çekirdeğinde, aynı zamanda kontralateral hemisferde de bulundu. Enjeksiyondan 48 saat sonra fare beyninden izole edilen insan efektör T hücreleri, beyin hücrelerinin %2'sini temsil eder. Amplifikasyondan sonra% 99 saflık ile PHA, besleyiciler ve IL2 stimülasyonu varlığında hala çoğalabildiler.Bu protokol sayesinde, dinlenen insan efektör hücreleri, stereotaksik enjeksiyonu takiben birkaç gün boyunca bir fare beyin parankimi ile hayatta kalabilir ve devriye gezebilir. Sonuç olarak, insan efektör hücrelerinin stereotaktik enjeksiyonlarla adoptif transferi, sağlıklı hücreler üzerinde sınırlı zararlı etkileri olan infiltratif malign beyin tümörlerini etkili bir şekilde tedavi etmek için umut verici yaklaşımları temsil etmektedir. Bu uygulama yolu, insan hücrelerinin tümör bölgesine yakın bir şekilde iletilmesinden yararlanır ve dokular ve organizma içindeki seyreltmelerini sınırlar.Burada, efektör hücreler üzerinde zararlı etkiler olmaksızın ve daha da önemlisi, fareler üzerinde gözle görülür herhangi bir zararlı etki olmaksızın beyin tümörü içinde büyük miktarda bağışıklık hücresinin verilmesini takip eden prosedürü tanımladık. Dahası, fare beynine lokal olarak enjekte edilen bağışıklık hücreleri sadece hayatta kalmak ve ex vivo olarak aktive edilme ve amplifiye edilme yeteneklerini korumakla kalmaz, aynı zamanda çevredeki beyin dokusundaki yayılmış tümör hücrelerini de ortadan kaldırır. Toplu olarak, bu özellikler, GBM tümörlerini karakterize eden güçlü infiltratif tümör hücrelerinin ortadan kaldırılmasına izin vermek için gereklidir.Bu protokol, beyin tümörü model farelerde evlat edinme transfer prosedürünün kurulması için yeni bir fırsat sunmaktadır. Klinik CD'yi düşünmeden önce önemli bir adım.

stereotactic-adoptive-transfer-cytotoxic-immune-cells-murine-models

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Biz çıplak farelerin ve sonraki seri beyinlerine insan glioblastoma multiforme hücrelerinin hassas, stereotaktik implantasyon için tümleşik bir yöntem...

Stereotaktik intrakranial implantasyon ve<em&gt; In vivo</emGlioblastoma Multiforme bir Mouse Model Sistemde Tümör Xenografts arasında&gt; Bioluminescent Görüntüleme

Bu video, insan beyni tümörü taşıyan bir fare modeline insan efektör T lenfositlerini uygulamak için stereotaksik bir enjeksiyon tekniğini göstermektedir. Tümör taşıyan anestezi uygulanmış bir farenin stereotaktik bir çerçeveye yerleştirilmesi ve kafatasındaki enjeksiyon yerinde bir çapak deliği oluşturulması üzerine, tümör bölgesine efektör T lenfositler enjekte edilir.

Efektör T Lenfositlerinin İnsan Beyin Tümörleri Taşıyan Farelere Verilmesi

Malign gliomalar, farklı klinik ve moleküler özelliklere sahip heterojen bir yüksek infiltive glial neoplazm grubunu oluşturur. Primer ortotopik ksinograftlar preklinik hayvan modellerinde malign glioma alt tiplerinin histopatolojik ve moleküler özelliklerini rekapitulate eder.

Primer Ortotopik Glioma Xenografts Infiltratif Büyüme ve İsocitrat Dehidrogenaz I Mutasyonu Rekapitulate

Floklanmış, koşullu onkojenik alellerle tasarlanmış ve viral Cre aracılı rekombinasyon yoluyla transforme edilmiş farelerden toplanan fenotipik vahşi tip astrositler ve nöral kök hücreler, astrositom patogenezini modellemek için kullanılabilir in vitro ve in vivo dönüştürülmüş hücrelerin sinjeneik, bağışıklığı yetkin yavruların beyinlerine ortotopik enjeksiyonu ile.

Modelleme Astrositom Patogenez İn Vitro Ve In Vivo Kortikal Astrositler veya Şartlı, Genetiği fareler ile Nöral Kök Hücreler kullanma

Beyin de in vitro veya ektopik analizler tarafından temsil edilmeyen nitelikleri ile benzersiz bir sitedir. Tekrarlanabilir bulunduğu yere ve büyüme özelliklerine sahip Ortotopik fare modelleri güvenilir bir stereotaksik tespit aracı ve bir düşük basınç şırınga pompası kullanılarak kafatası içine uygulanan enjeksiyonları ile oluşturulabilir.

Oluşturma Anatomik Doğru ve İnsan Beyin Tümörleri Reproducible İntrakraniyal Ksenograftlar

Kemoterapi ve radyasyon bakım standardının lenfodepletiktif ve immünomodülatör etkileri, T hücresi immünoterapisinin antitümör etkinliğini artırmak için kullanılabilir. EGFRvIII'e özgü kimerik antijen reseptörü (CAR) T hücrelerinin üretilmesi ve bunların glioblastoma bakım standardı bağlamında uygulanması için bir yöntemin ana hatlarını çiziyoruz.

Bakım Glioblastoma Standardı Kapsamında Adoptif Tedavisi için CAR T hücrelerinin üretilmesi

Tümör arayan tedavi mezenkimal kök hücre (MSCs) invaziv glioblastoma için bir tedavi olarak umut verici. En uygun nakli MSCs teslimini iskele Tümör rezeksiyonu den içine içerir. Burada, glioblastoma tedavisinde MSC çalışmaya preklinik teknikleri de dahil olmak üzere sağlanan: görüntü güdümlü Tümör rezeksiyonu; MSC numaralı seribaşı iskele implantasyonu; ve ameliyat sonrası terapi izleme.

Görüntü güdümlü rezeksiyon Glioblastoma ve kafa içi tedavi kök hücre numaralı seribaşı iskele implantasyonu

Burada, genetiği değiştirilmiş fare modeli tümörlerinden türetilen hücrelerin intrakraniyal enjeksiyonu ile kurulan GBM için klinik öncesi bir ortotopik fare modelini tarif ediyoruz. Bu model, insan GBM'sinin hastalık özelliklerini gösterir. Translasyonel çalışmalar için, fare beyin tümörü in vivo MRG ve histopatoloji ile izlenir.

Glioblastoma multiforme'un Translasyonel Ortotopik Modelleri

Ortotopik pediatrik beyin tümörü modellerinin geliştirilmesi, kanser hücrelerini hassas bir şekilde implante etmek için stereotaksik bir cihaz kullanarak titiz bir hassasiyet gerektirir. Burada sunulan metodoloji, beyin tümörü hücrelerinin hazırlanması, intrakraniyal enjeksiyonların gerçekleştirilmesi ve beyin tümörü aşılanmasını değerlendirmek için ameliyat sonrası bir izleme sisteminin uygulanmasında yer alan adımları özetlemektedir.

Stereotaksik Cihaz Kullanılarak Beyin Tümörleri İçin Ortotopik Hasta Kaynaklı Ksenogreft Modellerinin Oluşturulması

Glioblastom, primer beyin kanserinin yıkıcı bir şeklidir ve lazer interstisyel termal terapi, ameliyat edilemeyen glioblastom için geleneksel cerrahi rezeksiyona umut verici bir alternatif olarak ortaya çıkmaktadır. Bu protokol, tedavi etkilerini veya adjuvan ve kombinatoryal tedavileri incelemek için kullanılabilecek optimize edilmiş bir klinik öncesi fare modelini tanımlar.

Glioblastomun Lazer İnterstisyel Termal Tedavisi için İmmünkompetan Bir Murin Modeli

Bu protokolün amacı, araştırmacılara intrakraniyal implantasyonlar için son derece tekrarlanabilir bir teknik sunmaktır.

Farelerde glioblastoma hasta kaynaklı ksenograft hücre hatlarının stereotaktik intrakranial implantasyonu

Öğrenin, glioblastoma multiforme için sitotoksik bağışıklık hücrelerinin stereotaksik evlat edinen transfer protokolünü. Bu yöntem, immün yetmez fare modellerinde intratumoral hücresel immünoterapinin uygulanabilirliğini ve antitümör etkinliğini gösterir.

Orthotopic insan Glioblastoma Multiforme Xenografts fare modelleri sitotoksik bağışıklık hücrelerinin stereotaksik evlat edinen Transfer (Video) | JoVE Journal

Orthotopic insan Glioblastoma Multiforme Xenografts fare modelleri sitotoksik bağışıklık hücrelerinin stereotaksik evlat edinen Transfer

Daha fazla video keşfet