Name: Jinekolojik ve Ürolojik Kanserleri Incelemek Için Vivo Modelinde Tavuk Chorioallantoic Membran Kullanma (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-01-28T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 13 s
Description: Keşfedin: Tavuk chorioallantoic membran modeli ile jinekolojik ve ürolojik kanserleri in vivo ortamda hızlıca çalışın. Hücre hatları ve hasta tümör örnekleriyle tedavi stratejilerini test edin.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar dr Fuyuhiko Tamanoi ve Binh Vu bu yöntem üzerinde ilk eğitim için teşekkür etmek istiyorum. Dr. Eva Koziolek ile yapılan görüşmeler bu yaklaşımın optimizasyonunda etkili olmuştur ve çok beğenilmiştir. Bu çalışma aşağıdaki kaynaklardan kaynak olmadan mümkün olmazdı: Tütün Ile İlgili Hastalık Araştırma Programı Doktora Sonrası Bursu (27FT-0023, ACS), Savunma Bakanlığı (DoD) Yumurtalık Kanseri Araştırma Programı (W81XWH-17-1-0160), NCI/NIH (1R21CA216770), Tütünle İlgili Hastalık Araştırma Programı Yüksek Etki Pilot Ödülü (27IR-0016) ve UCLA kurumsal desteği, JCCC Tohum Hibesi (NCI/NIH P30CA016042) ve LW Araştırma Başkan Yardımcısı Ofisinden 3R Grant dahil.

<ol><li>Kersten, K., de Visser, K. E., van Miltenburg, M. H., Jonkers, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetically+engineered+mouse+models+in+oncology+research+and+cancer+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+Molecular+Medicine%22%5BJournal%5D)">Genetically engineered mouse models in oncology research and cancer medicine.</a> EMBO Molecular Medicine. 9 (2), 137-153 (2017).</li>
<li>Jackson, S. J., Thomas, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+tissue+models+in+cancer+research%3A+looking+beyond+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Disease+Models+%26+Mechanisms%22%5BJournal%5D)">Human tissue models in cancer research: looking beyond the mouse.</a> Disease Models & Mechanisms. 10 (8), 939-942 (2017).</li>
<li>Cheon, D. J., Orsulic, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+Models+of+Cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Pathology%3A+Mechanisms+of+Disease%22%5BJournal%5D)">Mouse Models of Cancer.</a> Annual Review of Pathology: Mechanisms of Disease. 6 (1), 95-119 (2011).</li>
<li>Howlader, N., et al. SEER Cancer Statistics Review, 1975-2016. , National Cancer Institute. Bethesda, MD. https://seer.cancer.gov/csr/1975_2016/ (2018).</li>
<li>Ribatti, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chicken+chorioallantoic+membrane+angiogenesis+model%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Chicken chorioallantoic membrane angiogenesis model.</a> Methods Molecular Biology. 843, 47-57 (2012).</li>
<li>Nowak-Sliwinska, P., Segura, T., Iruela-Arispe, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+chicken+chorioallantoic+membrane+model+in+biology%2C+medicine+and+bioengineering%5BTitle%5D)+AND+%22Angiogenesis%22%5BJournal%5D)">The chicken chorioallantoic membrane model in biology, medicine and bioengineering.</a> Angiogenesis. 17 (4), 779-804 (2014).</li>
<li>Lokman, N. A., Elder, A. S., Ricciardelli, C., Oehler, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chick+chorioallantoic+membrane+%28CAM%29+assay+as+an+in+vivo+model+to+study+the+effect+of+newly+identified+molecules+on+ovarian+cancer+invasion+and+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Science%22%5BJournal%5D)">Chick chorioallantoic membrane (CAM) assay as an in vivo model to study the effect of newly identified molecules on ovarian cancer invasion and metastasis.</a> International Journal of Molecular Science. 13 (8), 9959-9970 (2012).</li>
<li>Xiao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chick+Chorioallantoic+Membrane+Assay%3A+A+3D+Animal+Model+for+Study+of+Human+Nasopharyngeal+Carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Chick Chorioallantoic Membrane Assay: A 3D Animal Model for Study of Human Nasopharyngeal Carcinoma.</a> PLoS ONE. 10 (6), e0130935(2015).</li>
<li>Deryugina, E. I., Quigley, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chick+embryo+chorioallantoic+membrane+model+systems+to+study+and+visualize+human+tumor+cell+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Histochemistry+and+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Chick embryo chorioallantoic membrane model systems to study and visualize human tumor cell metastasis.</a> Histochemistry and Cell Biology. 130 (6), 1119-1130 (2008).</li>
<li>Shoin, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chick+Embryo+Assay+as+Chemosensitivity+Test+for+Malignant+Glioma%5BTitle%5D)+AND+%22Japanese+Journal+of+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Chick Embryo Assay as Chemosensitivity Test for Malignant Glioma.</a> Japanese Journal of Cancer Research. 82 (10), 1165-1170 (1991).</li>
<li>Hagedorn, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accessing+key+steps+of+human+tumor+progression+in+vivo+by+using+an+avian+embryo+model%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Science+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Accessing key steps of human tumor progression in vivo by using an avian embryo model.</a> Proceedings of the National Academy of Science U S A. 102 (5), 1643-1648 (2005).</li>
<li>Kavaliauskaitė, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Effect+of+Sodium+Valproate+on+the+Glioblastoma+U87+Cell+Line+Tumor+Development+on+the+Chicken+Embryo+Chorioallantoic+Membrane+and+on+EZH2+and+p53+Expression%5BTitle%5D)+AND+%22BioMed+Research+International%22%5BJournal%5D)">The Effect of Sodium Valproate on the Glioblastoma U87 Cell Line Tumor Development on the Chicken Embryo Chorioallantoic Membrane and on EZH2 and p53 Expression.</a> BioMed Research International. 2017, 12(2017).</li>
<li>Liu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Histone+Methyltransferase+EZH2+Mediates+Tumor+Progression+on+the+Chick+Chorioallantoic+Membrane+Assay%2C+a+Novel+Model+of+Head+and+Neck+Squamous+Cell+Carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Oncology%22%5BJournal%5D)">The Histone Methyltransferase EZH2 Mediates Tumor Progression on the Chick Chorioallantoic Membrane Assay, a Novel Model of Head and Neck Squamous Cell Carcinoma.</a> Translational Oncology. 6 (3), 273-281 (2013).</li>
<li>Rudy, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+Wnt+pathway+inhibition+of+human+squamous+cell+carcinoma+growth+and+metastasis+in+the+chick+chorioallantoic+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Otolaryngology+-+Head+%26+Neck+Surgery%22%5BJournal%5D)">In vivo Wnt pathway inhibition of human squamous cell carcinoma growth and metastasis in the chick chorioallantoic model.</a> Journal of Otolaryngology - Head & Neck Surgery. 45 (1), 26(2016).</li>
<li>Canale, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interleukin-27+inhibits+pediatric+B-acute+lymphoblastic+leukemia+cell+spreading+in+a+preclinical+model%5BTitle%5D)+AND+%22Leukemia%22%5BJournal%5D)">Interleukin-27 inhibits pediatric B-acute lymphoblastic leukemia cell spreading in a preclinical model.</a> Leukemia. 25, 1815(2011).</li>
<li>Loos, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amino-functionalized+nanoparticles+as+inhibitors+of+mTOR+and+inducers+of+cell+cycle+arrest+in+leukemia+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Amino-functionalized nanoparticles as inhibitors of mTOR and inducers of cell cycle arrest in leukemia cells.</a> Biomaterials. 35 (6), 1944-1953 (2014).</li>
<li>Rovithi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+bioluminescent+chick+chorioallantoic+membrane+%28CAM%29+models+for+primary+pancreatic+cancer+cells%3A+a+platform+for+drug+testing%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Development of bioluminescent chick chorioallantoic membrane (CAM) models for primary pancreatic cancer cells: a platform for drug testing.</a> Scientific Reports. 7, 44686(2017).</li>
<li>Majerník, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+Insights+into+the+Effect+of+Hyperforin+and+Photodynamic+Therapy+with+Hypericin+on+Chosen+Angiogenic+Factors+in+Colorectal+Micro-Tumors+Created+on+Chorioallantoic+Membrane%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Science%22%5BJournal%5D)">Novel Insights into the Effect of Hyperforin and Photodynamic Therapy with Hypericin on Chosen Angiogenic Factors in Colorectal Micro-Tumors Created on Chorioallantoic Membrane.</a> International Journal of Molecular Science. 20 (12), 3004(2019).</li>
<li>Swadi, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimising+the+chick+chorioallantoic+membrane+xenograft+model+of+neuroblastoma+for+drug+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Cancer%22%5BJournal%5D)">Optimising the chick chorioallantoic membrane xenograft model of neuroblastoma for drug delivery.</a> BMC Cancer. 18 (1), 28(2018).</li>
<li>Klingenberg, M., Becker, J., Eberth, S., Kube, D., Wilting, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+chick+chorioallantoic+membrane+as+an+in+vivo+xenograft+model+for+Burkitt+lymphoma%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Cancer%22%5BJournal%5D)">The chick chorioallantoic membrane as an in vivo xenograft model for Burkitt lymphoma.</a> BMC Cancer. 14 (1), 339(2014).</li>
<li>Avram, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standardization+of+A375+human+melanoma+models+on+chicken+embryo+chorioallantoic+membrane+and+Balb%2Fc+nude+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Oncology+Reports%22%5BJournal%5D)">Standardization of A375 human melanoma models on chicken embryo chorioallantoic membrane and Balb/c nude mice.</a> Oncology Reports. 38 (1), 89-99 (2017).</li>
<li>Zabielska-Koczywas, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3D+chick+embryo+chorioallantoic+membrane+model+as+an+in+vivo+model+to+study+morphological+and+histopathological+features+of+feline+fibrosarcomas%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Veterinary+Research%22%5BJournal%5D)">3D chick embryo chorioallantoic membrane model as an in vivo model to study morphological and histopathological features of feline fibrosarcomas.</a> BMC Veterinary Research. 13 (1), 201(2017).</li>
<li>Skowron, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applying+the+chicken+embryo+chorioallantoic+membrane+assay+to+study+treatment+approaches+in+urothelial+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Urologic+Oncology%3A+Seminars+and+Original+Investigations%22%5BJournal%5D)">Applying the chicken embryo chorioallantoic membrane assay to study treatment approaches in urothelial carcinoma.</a> Urologic Oncology: Seminars and Original Investigations. 35 (9), e511-e523 (2017).</li>
<li>Jefferies, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+imaging+of+engineered+human+tumors+in+the+living+chicken+embryo%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Non-invasive imaging of engineered human tumors in the living chicken embryo.</a> Scientific Reports. 7 (1), 4991(2017).</li>
<li>Taizi, M., Deutsch, V. R., Leitner, A., Ohana, A., Goldstein, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+and+rapid+in+vivo+system+for+testing+therapeutics+on+human+leukemias%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Hematology%22%5BJournal%5D)">A novel and rapid in vivo system for testing therapeutics on human leukemias.</a> Experimental Hematology. 34 (12), 1698-1708 (2006).</li>
<li>Strojnik, T., Kavalar, R., Barone, T. A., Plunkett, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+model+and+immunohistochemical+comparison+of+U87+human+glioblastoma+cell+xenografts+on+the+chicken+chorioallantoic+membrane+and+in+rat+brains%5BTitle%5D)+AND+%22Anticancer+Research%22%5BJournal%5D)">Experimental model and immunohistochemical comparison of U87 human glioblastoma cell xenografts on the chicken chorioallantoic membrane and in rat brains.</a> Anticancer Research. 30 (12), 4851-4860 (2010).</li>
<li>Ribatti, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+chick+embryo+chorioallantoic+membrane+as+a+model+for+tumor+biology%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Cell+Research%22%5BJournal%5D)">The chick embryo chorioallantoic membrane as a model for tumor biology.</a> Experimental Cell Research. 328 (2), 314-324 (2014).</li>
<li>Hu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Non-integrating+Lentiviral+Approach+Overcomes+Cas9-Induced+Immune+Rejection+to+Establish+an+Immunocompetent+Metastatic+Renal+Cancer+Model%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Therapy+-+Methods+%26+Clinical+Development%22%5BJournal%5D)">A Non-integrating Lentiviral Approach Overcomes Cas9-Induced Immune Rejection to Establish an Immunocompetent Metastatic Renal Cancer Model.</a> Molecular Therapy - Methods & Clinical Development. 9, 203-210 (2018).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

CAM modeli kullanılarak tümör genişlemesi ve engraftment in vivo hayvan modelleri mevcut daha hızlı ve doğrudan gözlemlenebilir tümör büyümesi sağlar. Buna ek olarak, özellikle bağışıklık sistemi zayıf farelerin maliyeti ile karşılaştırıldığında, ekipman ilk satın alma tamamlandıktan sonra maliyetleri önemli ölçüde daha düşüktür. Tavuk embriyolarının ilk, bağışıklık sistemi kolayca insan ve murin dokusunun engraftment izin verir. Bu güçlü olsa bile, CAM modeli sınırlamaları var. Uzun süreli tedavi çalışmaları garanti edi...

Fareler malignite de dahil olmak üzere insan hastalıklarının incelenmesi için klasik model organizma olarak hizmet vermiştir. Memeliler olarak, insanlarla birçok benzerlikleri vardır. Genetik benzerlik onların yüksek derecede insan hastalıklarının genetik kontrolü içine büyük bir fikir sağlamak için fare genomunun transgenik manipülasyon izin verdi1. Farelerin kullanımı ve deneyleri konusunda geniş deneyim, biyomedikal araştırmalar için tercih edilen model olmalarına yol açmıştır. Ancak, murine modelleri ile ilgili etik ve bilimsel endişelere ek olarak, onlar da oldukça pahalı ve zaman alıcı olabilir2,3. Tümörlerin gelişimi haftalar hatta aylar sürebilir. Sadece tipik bir kurumda konut tümörler gelişmekte iken binlerce dolar yüzlerce çalıştırabilirsiniz. Yumurtalık kanseri bu dezavantajı bir örnektir çünkü murine modellerinde büyüme kolayca ay sürebilir. Araştırma ilerleme gecikmeler potansiyel yumurtalık kanseri hastalarının ısrarla düşük 5 yıllık sağkalım oranı sadece% 47 (yani, 30 yıl içinde sadece% 10 sağkalım artışı)4etkiler. Benzer şekilde, ürolojik kanserler (böbrek, prostat ve mesane kanserleri) Amerika Birleşik Devletleri'nde tüm kanser vakalarının% 19 ve kansere bağlı ölümlerin% 11oluşturmaktadır 4. Böylece, jinekolojik ve ürolojik kanserleri incelemek için vivo yaklaşımında yeni bir yaklaşım, bu model sadece ilk tarama deneylerine uygulansa bile, bir laboratuvarda önemli ölçüde zaman, emek ve para tasarrufu sağlayabilir. Ayrıca, araştırma bulgularının ortaya çıkan ivme önemli ölçüde bu kanserler yıllık tanısı 177.000 bireyleretkileyebilir.
Tavuk CAM modeli yukarıda belirtilen sorunları ele birçok avantaj sunuyor. Anjiyogenez çalışmak için popüler bir model5,6, tümör hücre li invazyonu7,8, ve metastaz7,9, civciv embriyo CAM modeli zaten kanserlerin birçok formları çalışmak için kullanılmıştır, glioma dahil10,11,12, baş ve boyun skuamöz hücreli karsinom13,14, lösemi15,16, pankreas kanseri17, ve kolorektal kanser18. Ayrıca, CAM modelleri nöroblastom için üretilmiştir19, Burkitt lenfoma20, melanom21, ve kedi fibrosarkom22. Önceki çalışmalar da mesane kanseri engraftment sundu23 ve prostat kanseri hücre hatları24, ancak sınırlı protokol detayları ile. Sadece yumurta farelerden çok daha ucuz, ama onlar da son derece tekrarlanabilir sonuçlarüretmek 25,26. Hızlı vaskülatür gelişimi gösterirler ve tümör engraftment birkaç gün gibi hızlı bir şekilde oluşabilir ve açık pencereden uzunlamasına görselleştirilebilir. Yumurta döllenme ve kuluçka arasında 21 günlük zaman dilimi ile, deneyler birkaç hafta içinde tamamlanabilir. Ayrıca, düşük maliyet, sınırlı konut ihtiyaçları ve küçük boyut kolayca fare çalışmaları için engelleyici olacaktır büyük ölçekli deneyler izin verir.
Bu nedenle, jinekolojik ve ürolojik kanserlerin engraftment için CAM modeli optimize etmek için çalıştı. Erken tavuk embriyosu27immünazdurumu nedeniyle, hem fare hem de insan hücreleri kolayca implante edilebilir. Bu nedenle, biz başarıyla yumurtalık, böbrek, prostat ve mesane kanserleri engrafted var. Bu tümör tiplerinin her biri için, CAM kolayca kurulan murine ve / veya insan tümör hücre hatları kabul eder. Daha da önemlisi, taze hasat birincil insan tümör dokuları da ya sindirilmiş hücrelerden veya başarı oranı yüksek katı doku parçaları engraft olabilir. Bu kanser türlerinin ve hücre kaynaklarının her biri optimizasyon gerektirir, burada paylaştığımız.

<table><tbody><tr><td>-010 Teflon (PTFE) Beyaz 55 Duro Shore D O-Ringler</td><td>O-Ring Store</td><td>TEF010</td><td>Hücre tohumlama için yapışmaz halka. 1/4 "ID X 3/8" OD X 1/16 "CS Politetrafloroetilen (PTFE).</td></tr><tr><td>C4-2</td><td>ATCC</td><td>CRL-3314</td><td>İnsan prostat kanseri hücre hattı.</td></tr><tr><td>CWR22Rv1</td><td></td><td></td><td>CWR hücreleri, Dr. David Agus'un (Güney Kaliforniya Üniversitesi Keck Tıbbı)</td></tr> <tr><td>Sitokeratin 8/18 Antikoru (C-51)</td> <td>Novus Biologicals</td><td>NBP2-44929-0.02mg</td><td>İnsan yumurtalık CAM tümörlerinin immünohistokimyasal analizi için 1:100 oranında seyreltmede kullanılır.</td></tr><tr><td>D-Luciferin Ateşböceği, potasyum tuzu</td><td>Goldbio</td><td>LUCK-1G</td><td></td></tr><tr><td>Hassas Ameliyat Makası; Kıvrımlı; keskin-keskin; 30 mm bıçak uzunluğu; 4-3/4 inç Toplam Uzunluk</td><td>Roboz Cerrahi</td><td>RS6703</td><td>Bu bir örnek olarak verilmiştir. Benzer herhangi bir kavisli makas da işe yarayacaktır.</td></tr><tr><td>Dremel 8050-N/18 Micro 8V Max Alet Kiti</td><td>Dremel</td><td>8050-N/18</td><td>Bu kit gerekli tüm aletleri içerir.</td></tr><tr><td>Döllenmiş tavuk yumurtası (Rhode Island Red - Brown, Lab Grade)</td><td>AA Lab Eggs Inc.</td><td>N/A</td><td>Yerel bir yumurta tedarikçisinin tanımlanması gerekecektir, çünkü bu tedarikçi yalnızca bölgesel olarak teslimat yapar.</td></tr><tr><td>HT-1376</td><td>ATCC</td><td>CRL-1472</td><td>İnsan mesane kanseri hücre hattı.</td></tr><tr><td>Hovabator Genesis 1588 Deluxe Yumurta Kuluçka Makinesi Combo Kit</td><td>Kuluçka Ambarı</td><td>HB1588D-YOK-1102-1588-1357</td><td>Diğer yumurta kuluçka makineleri kullanılabilir, ancak güvenilirliklerinin doğrulanması gerekir. İmplantasyondan sonra, CO2 devre dışı bırakılmış bir hücre inkübatörü de kullanılabilir.</td></tr><tr><td>ID8</td><td></td><td></td><td>Ticari olarak mevcut değildir, lütfen PMID: 10753190'ye bakın.</td></tr><tr><td>Incu-Bright Cool Light Yumurta Candler</td><td>Kuluçka Ambarı</td><td>1102</td><td>Diğer mumcular da kullanılabilir; Ancak, test ettiklerimiz arasında bu tercih edilir. Bu mumcu, yukarıda belirtilen inkübatör kitine dahildir.</td></tr><tr><td>İris Forseps, 10cm, Kavisli, Tırtıklı, 0.8mm uçlar</td><td>Dünya Hassas Aleti</td><td>15915</td><td>Bu bir örnek olarak verilmiştir. Benzer kavisli forsepsler de işe yarayacaktır. Bu yöntem için birden fazla marka kullanılmıştır.</td></tr><tr><td>Isofluran</td><td>Kesme Makinesi</td><td>, Dağıtma 0010250</td><td></td></tr><tr><td>IVIS Lumina II, In Vivo Görüntüleme Sistemi</td><td>, Perkin, Elmer,</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Matrigel, Membran, Matris, HC; LDEV-Free</td><td>Corning</td><td>354248</td><td>Hücre dışı matris çözeltisi</td></tr><tr><td>MyC-CaP</td><td>ATCC</td><td>CRL-3255</td><td>Murin prostat kanseri hücre hattı.</td></tr><tr><td>Taşınabilir Pipet Yardımı XP Pipet Kontrol Cihazı</td><td>Drummond Scientific</td><td>4-000-101</td><td>Benzer herhangi bir pipet kontrol cihazı uygun olacaktır.</td></tr><tr><td>PrecisionGlide Hipodermik İğneler</td><td>BD</td><td>305196</td><td>Bu bir örnek olarak verilmiştir. Herhangi bir 18G iğne benzer şekilde çalışır.</td></tr><tr><td>RENCA</td><td>ATCC</td><td>CRL-2947</td><td></td></tr><tr><td>Semken Forseps</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>11008-13</td><td>Bu bir örnek olarak verilmiştir. Benzer herhangi bir forseps veya araştırmacının tercihine uygun başka bir stil uygun olacaktır.</td></tr><tr><td>SKOV3</td><td>ATCC</td><td>HTB-77</td><td>İnsan yumurtalık kanseri hücre hattı.</td></tr><tr><td>Numune forseps</td><td>Elektron Mikroskobu Bilimleri</td><td>72914</td><td>Bu bir örnek olarak verilmiştir. Biyolüminesans görüntüleme için kabuğu çıkarmak için kullanılan forseps, 3 mm genişliğinde uçlar ile yaklaşık 12,8 cm uzunluğundadır.</td></tr><tr><td>Steril Pamuk Topları</td><td>Fisherbrand</td><td>22-456-885</td><td>Bu örnek olarak verilmiştir. Herhangi bir steril pamuk topu yeterli olacaktır.</td></tr><tr><td>Lastik ile Karıştırma Çubukları Policeman; 5 mm çap, 6 inç uzunluk</td><td>United Scientific Supplies</td><td>GRPL06</td><td>Bu bir örnek olarak verilmiştir. Benzer herhangi bir cam karıştırma çubuğu da işe yarayacaktır.</td></tr><tr><td>T24</td><td>ATCC</td><td>HTB-4</td><td>İnsan mesane kanseri hücre hattı.</td></tr><tr><td>Tegaderm Şeffaf Pansuman Orijinal Çerçeve Stili 2 3/8" x 2 3/4"</td><td>Moore Medical</td><td>21272</td><td></td></tr><tr><td>Doku Kültürü Kapları, 10 cm çapında</td><td>Corning</td><td>353803</td><td>Bu örnek olarak verilmiştir. Benzer, steril 10 cm'lik bir tabak kullanılabilir. Doku kültürü tedavisi gerekli değildir.</td></tr><tr><td>Tygon Clear Laboratuvar Tüpü - 1/4 x 3/8 x 1/16 duvar (50 fit)</td><td>Tygon</td><td>AACUN017</td><td>Bu bir örnek olarak verilmiştir. Benzer büyüklükteki herhangi bir boru da işe yarayacaktır.</td></tr></tbody></table>

jinekolojik ve Ürolojik kanserleri incelemek için vivo modelinde tavuk chorioallantoic membran kullanma

Using the Chicken Chorioallantoic Membrane In Vivo Model to Study Gynecological and Urological Cancers

Fare modelleri in vivo kanser çalışmaları için kriter testleri dir. Ancak, maliyet, zaman, ve etik hususlar alternatif in vivo kanser modelleri için çağrılara yol açmıştır. Tavuk koryoallantoik membran (CAM) modeli tümör gelişiminin doğrudan görselleştirilmesine izin veren ve in vivo görüntüleme için uygun olan ucuz, hızlı bir alternatif sağlar. Bu nedenle, jinekolojik ve ürolojik tümörlerin bu modele engrafting için optimize edilmiş bir protokol geliştirmeye çalıştık, burada sunduğumuz. Yaklaşık 7 gün sonra döllenme sonrası, hava hücresi yumurtanın vaskülarize tarafına taşınır ve kabukta bir açıklık oluşur. Daha sonra murine ve insan hücre hatları ve primer dokulardan tümörler engrafted olabilir. Bu genellikle hücre dışı matris ve orta hücresel dağılım önlemek ve hücreler bir vasküler kaynağı işe kadar besin desteği sağlamak için bir karışımı tohumlu vardır. Tümörler yumurtadan çıkmadan 14 gün öncesine kadar büyüyebilir. Ateş böceği luciferase ile transeksif hücreleri yerleştirerek, biyolüminesans görüntüleme membran ve kanser hücresi embriyo yayılmış tümör büyüme hassas tespiti için kullanılabilir. Bu model potansiyel tümörijenite, invazyon, metastaz ve terapötik etkinliğini incelemek için kullanılabilir. Tavuk CAM modeli geleneksel murine modelleri ile karşılaştırıldığında önemli ölçüde daha az zaman ve mali kaynaklar gerektirir. Yumurtalar bağışıklık sistemi zayıf ve bağışıklık toleranslı olduğundan, herhangi bir organizmanın dokuları potansiyel olarak insan dokularının implantasyonu için gerekli pahalı transgenik hayvanlar (örneğin, fareler) olmadan implante edilebilir. Ancak, Bu modelin avantajları nın çoğu potansiyel olarak da sınırlamalar olabilir, kısa tümör üretimi süresi ve immün/immün toleranslı durum da dahil olmak üzere. Ayrıca, tavuk koryoallantoik membran modelinde burada engraft sunulan tüm tümör tipleri rağmen, tümör büyüme değişen derecelerde bunu.

Şimdiye kadar, biz yumurtalık, böbrek, prostat ve mesane kanserleri için başarılı olması implantasyon bu yöntemi bulduk. Her biri implantasyon için belirli koşulları belirlemek için optimize edilse de, esneklik olabilir. Test edilen tümör tiplerinden yumurtalık kanseri büyümesi çok daha az belirgindi ve genellikle biyolüminesans görüntüleme yardımı olmadan görülemese de(Şekil 1). Ancak, CAM sertleşme implantasyon alanında forceps ile hissedilebilir. Bu biyolü...

Tavuk koryoallantoik membran modelini jinekolojik ve ürolojik kanser hücre hatlarının ve hasta kaynaklı tümörlerin engraftment için alternatif, nakledilebilir, in vivo modeli olarak sıyoruz.

Jinekolojik ve Ürolojik Kanserleri Incelemek Için Vivo Modelinde Tavuk Chorioallantoic Membran Kullanma

Mouse models are the benchmark tests for in vivo cancer studies. However, cost, time, and ethical considerations have led to calls for alternative in vivo ...

Tavuk korrioallantoik membran üzerine tümörlerin engraftment, veya CAM, tümörijenite çalışmaları için kullanılabilir, tedavi etkinliği veya hücresel crosstalk. Bu yöntem, in vivo ayarında immüntoleransa dayanıklı bir tümör büyümesine izin verir. CAM modeli kullanılarak, yeni terapötik yaklaşımlar hızla hücre hatları ve hatta hasta tümör örnekleri kullanılarak test edilebilir.Bu protokolün en önemli yönleri uygun CAM oluşumunu sağlamak ve yumurtaları açarken CAM veya vaskülatür bozmamaktır. Cam tam olarak geliştirildiğinde yedinci veya sekizinci gelişim gününde, yumurta rotatörükapatın ve biyogüvenlik kabininde yumurta rafına yaklaşık bir ila üç yumurta yerleştirin. Işıklar kapalı, tanımlamak ve bir yumurta hava hücresinin yerini işaretlemek için yumurta kabuğuna bir yumurta mum yerleştirin, sonra büyük bir kan damarı ağı bulmak için kabuk üzerinde yumurta mum hareket, gerektiği gibi yumurta dönen.İdeal bir damar yumurtanın ortasına yakın dallanacak. İmplantasyon için kullanılacak vaskülatür izlemek için bir marker kullanın. Kaputun ışığını geri döndükten sonra, doğrudan hava hücresinin merkezi üzerinde kabuk küçük bir delik açmak için silikon karbür taş ile donatılmış bir akülü döner alet kullanın.Kabuğun çoğu çıkarıldığında ancak beyaz iç zarı sağlam ken, vasküler pencerenin az önce gösterildiği gibi açılacağı küçük bir delik daha açın. İkinci delik hazır olduğunda, beyaz iç zarı hafifçe hava hücresi ve vaskülature üzerinde beyaz iç zarı delmek için 18 gauge iğne kullanın, ama CAM değil, delinmiş alanın tamamı boyunca bozulur dikkat. Kaput Unması ile, hava hücresinin yumurtanın ucundan damar üzerinde alana aktarıldığını doğrulamak için yumurta mumunu kullanın.Gerekirse, orijinal hava hücresi üzerinde deliğin etrafına bir pipet denetleyicisine yerleştirilen vakum borularını yerleştirin ve hava hücresini hareket ettirebilmek için hafifçe kısa patlamalar halinde emme uygulayın. Hava hücresinin yeni yerinin ana hatlarını hava CAM sınırı içinde yaklaşık 0,5 santimetre olarak işaretleyin ve yeni hava hücresi üzerindeki deliği kapatacak kadar büyük bir ambalaj bandı parçasını düzeltin. Diğer iki yumurtayı az önce gösterildiği gibi hazırladıktan sonra yumurtaları kuvöze geri döndürün ve deney için 1-3 kişilik gruplar halinde ek yumurtaaçın.Tüm yumurtalar açıldığında, bir biyogüvenlik kabininde yumurta rafına taşınan hava hücreleri ile bir ila üç yumurta aktarın ve CAM veya vaskülatür bozmadan hücre üzerinden tamamen hava hücresi sınırı üzerinde küçük bir çizgi kesmek için dairesel kesme tekerleği ile donatılmış bir akülü döner araç kullanın. Kavisli makas kullanarak, kabuk bir pencere oluşturmak ve embriyo canlılığını doğrulamak için kalan hava hücresi etrafında kesti. Canlı embriyolar geniş bir vaskülatür, berrak albumin, embriyo hareketi ve / veya görünür bir kalp atışı gösterecektir.Cansız embriyolarda, CAM birkaç opak görünebilir, varsa, damarlar mevcut ve embriyolar küçük veya hareket veya kalp atışı olmadan yok olabilir. Semkin forceps kullanarak, steril bir pamuk topu küçük parçalar çekin ve yavaşça herhangi bir kabuk toz ve enkaz kaldırmak için canlı embriyoların CAM yüzeyi leke, sonra CAM dokunmadan altı yedi santimetre şeffaf film pansuman dörtte biri ile kabuk açılış kapağı ve açılan pencere yukarı bakacak şekilde kuvöz yumurta dönmek. Yumurta raf bir parça kullanın, yumurta rotator kenarı, ya da haddeleme tutmak herhangi bir yumurta prop için başka bir uygun öğe.Transplantasyon için kanser hücresi süspansiyon hazırlamak için, ilgi kanser hücresi kültüründen hücreleri hasat ve santrifüj ile hücreleri tortu. Süpernatant aspire ve mekanik artık ortamda hücreleri resuspend. Hücre süspansiyonu buz üzerine yerleştirin ve orta hücre hacmini ölçmek için bir pipet kullanın.Sonra orta 20 ila 100 mikrolitre mililitre ekstrasellüler matris başına 2,7 ila 4 miligram ve herhangi bir büyüme faktörleri veya ilgi diğer katkı maddeleri ile takviye bir ila iki milyon hücre konsantrasyonu hücreleri yeniden askıya. Kanser hücresi implantasyonu için, yapışmaz bir halka kullanarak, yumurta rafına yerleştirilecek altı yumurta yerleştirin ve şeffaf film pansumanının kenarlarını açık pencereye doğru yuvarlayın ve filmi kabuklardan çıkarın. Yumurtalar uygun ve sağlıklı olup olmadığını kontrol edin.İdeal yumurta açılan alanın merkezinde küçük dallanma gemileri ile büyük bir gemi olacak. Kavisli iris forceps kullanarak, bir dal noktası üzerinde ideal gemi üzerinde CAM üzerine steril bir yapışmaz halka yerleştirin. Cam ve pipeti yavaşça halkanın ortasına kanser hücresi süspansiyon aşındırmak için steril bir cam karıştırma çubuğu kullanın.Tüm hücreler teslim edildiğinde, açılışı altının dörtte biri ile yedi santimetre şeffaf film pansumanı ile kapatın ve yumurtayı uygun bir implant adı ile etiketleyin. Daha sonra yumurtaları kuvöze, kabuğun dik olarak açılmasıyla güvenli bir şekilde yerleştirin. Yapışmaz bir halka kullanmadan kanser hücrelerini yerleştirmek için, hücre süspansiyonuna uygun büyüklükte bir pipet ucuna aspire edin ve ucun üst kısmını dikkatlice pipet ucunu dışarı tutarak ve ucu yatay olarak steril 10 santimetrelik doku kültür yemeğine yerleştirin.İpuçları yüklendikten sonra, 15 dakika sonra polimerizasyon için kontrol, 15 ila 30 dakika boyunca 37 derece santigrat santigrat kuvöz içine çanak yerleştirin. Her ucu çanak yerleştirilir gibi sıvı küçük bir miktar genellikle dışarı sızıntı olacaktır. Uç içindeki polimerizasyonun kapsamını tahmin etmek için bu sıvıyı kullanın.Matris hazır olduğunda, uygun büyüklükteki bir pipete bir ucu yerleştirin ve kısmen polimerize hücre süspansiyonu cam üzerine ideal büyük bir iyi gelişmiş geminin dallı noktası üzerinde zorlamak için piston depress. Bu yöntemler kullanılarak, hem insan hem de ürinen yumurtalık kanseri hücre hatları ve primer tümör parçaları, diğer in vivo modellerde gözlenen morfolojilerle uyumlu tümörlerin başarılı bir şekilde engreftleştirilen sonuçlanmıştır. Test edilen tümör tipleri, yumurtalık kanseri büyüme çok daha az belirgin ve genellikle biyolüminesans görüntüleme yardımı olmadan görünür değildi.İmplantasyon sırasında büyüme faktörleri veya hormonekleme etkileri de bu yöntemler kullanılarak test edilebilir. Böbrek kanseri için, kurulan hücre hatları veya primer insan böbrek tümörlerinden parçalardan berrak hücreli renal hücreli karsinom hücrelerinin implantasyonu hızlı, sağlam tümör oluşumu üretir. Ayrıca, birden fazla insan ve murin prostat kanseri hücre hatları ve insan mesane kanseri hücre hatları ve primer tümör parçaları bu modeli kullanarak tümörler kurmak için kullanılmıştır.CAM'i ve vaskülatürü bozmamak ve camın pencereyi açarken kabukla yapışmadığından emin olmak çok önemlidir. Başarılı engraftment sonra, CAM modeli bir tümör içinde farklı hücre tipleri arasında ilgi veya etkileşim tedavilerin terapötik etkinliğini değerlendirmek için kullanılabilir.

using-chicken-chorioallantoic-membrane-vivo-model-to-study

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Kanser Araştırmaları

Bu videoda, döllenmiş bir tavuk yumurtasının yumurta kabuğunu, dallanan kan damarlarından oluşan bir ağ taşıyan koryoallantoik zarını veya CAM'sini ortaya çıkarmak için açma tekniğini açıklıyoruz. Açıkta kalan CAM, in ovo tümör modellemesi için kullanılabilir.

Yumurta Pencereleme: Korioallantoik Membran Vaskülatürünü Ortaya Çıkarmak için Döllenmiş Tavuk Yumurtası Kabuğunu Açma Yöntemi

Bu videoda, bir in ovo model oluşturmak için kanser hücrelerinin bir tavuk koryoallantoik zarına implantasyonunu açıklıyoruz. Model, jinekolojik kanserin ilerlemesini incelemek için yumurtalık kanseri hücrelerini başarıyla aşılar.

Tavuk Korioallantoik Membran Tabanlı Kanser Modellemesi: Kanser Hücresi Tümörigenezi ve Metastazı Çalışmak İçin Bir In Ovo Model

Bu video, bir CAM kanseri metastaz modeli oluşturmak için kanser hücrelerinin tavuk koryoallantoik membran damar sistemine intravenöz olarak enjekte edilmesi prosedürünü göstermektedir. Enjekte edilen hücreler sonunda dağınık tek kanser hücresi kolonileri oluşturur ve bu da kanser istilası ve metastazı çalışmasına izin verir.

Kanser Hücrelerinin Tavuk Korioallantoik Membran Damar Sistemine İntravenöz Enjeksiyonu: Kanser İstilasını ve Metastazı İncelemek için Korioallantoik Membran Kanseri Modeli Oluşturma Prosedürü

Bu videoda, perinöral invazyonu incelemek için civciv koryoallantoik membran veya CAM üzerinde dorsal kök gangliyonları ve kanser hücrelerini birlikte kültürleme yöntemini açıklıyoruz.

Civciv Korioallantoik Membran veya CAM Tümör Modeli: Tümör Hücrelerinin Perinöral İnvazyonunu Simüle Etmek İçin Bir In Ovo Yöntemi

Bu video, tümör taşıyan koryoallantoik membranın tavuk embriyosundan izolasyonunu göstermektedir. Hasat edilen CAM, daha sonraki sonraki uygulamalar için kullanılabilir.

Civciv Korioallantoik Membran Hasadı: Tavuk Yumurtasından Tümör Grefti Taşıyan Korioallantoik Membranı İzole Etmek İçin Bir Yöntem

Civciv koryoallantoik membran (CAM) immün yetmezliklidir ve oldukça vaskülarizedir, bu da onu doğal bir in vivo tümör büyümesi ve anjiyogenez modeli yapar. Bu protokolde, CAM testi kullanılarak üç boyutlu, vaskülarize hepatosellüler karsinom (HCC) tümörlerinin büyütülmesi için güvenilir bir yöntem tanımlanmıştır.

<em&gt; Ovo</emHepatosellüler karsinom Verimli Xenograftlarında Modeli olarak&gt; Piliç Chorioallantoic Membran (CAM) Deneyi

Perinevral invazyonu baş ve boyun skuanöz hücre karsinomları ve diğer tümörlerde agresif bir fenotiptir. Piliç chorioallantoik membran modeli anjiyogenez, kanser istilası ve metastif eğitimi için kullanılmıştır. Burada bu modelin perineval invazyonu in vivo olarak değerlendirmek için nasıl kullanılabilirler olduğunu gösteriyoruz.

Kafa ve boyun kanseri Perinevral Invazyonu değerlendirmek için Chick Chorioallantoik membran In vivo model

Metastatik berrak hücreli renal hücreli karsinom kapsamlı bir klinik öncesi araştırma için kapsamlı bir hayvan modeli olmayan bir hastalıktır. Bu protokol hastalık için iki yeni hayvan modelini göstermektedir: ortonik olarak implante edilmiş fare modeli ve tavuk koryoallantoik membran modeli, her ikisi de klinik olgulara benzeyen akciğer metastazı göstermektedir.

Fare Böbreği ve Tavuk Koryoallantoik Membranda Kurulan Metastatik Berrak Hücreli Renal Hücreli Karsinom Modelinin Karşılaştırılması

Bu protokol, kontrastlı ultrason görüntüleme ve mikrokabarcık aracılı ilaç dağıtımını incelemek için 5 ila 8 günlük tavuk embriyolarının ve bunların koryoallantoik membranının (CAM) in vivo bir model olarak nasıl elde edileceği ve kullanılacağına dair üç yöntemi açıklamaktadır.

Kontrastlı Ultrason Görüntüleme ve Mikrokabarcık Aracılı İlaç Dağıtım Çalışmaları için Tavuk Ex Ovo Embriyolarının ve Korioallantoik Membran Damarlarının In Vivo Model Olarak Hazırlanması

Bu, kanser metastazının baskılayıcılarını veya sürücülerini taramak için etkili bir yöntemdir. Bir ifade kütüphanesi ile transdüklenen hücreler, metastatik koloniler oluşturmak için tavuk chorioallantoic membran vaskülatürüne enjekte edilir. İnvazivliği azalmış veya artmış koloniler, fenotiplerini doğrulamak için ekscised, genişletilmiş, reenjected ve son olarak, yüksek verim sıralaması kullanılarak analiz edilir.

Hızlı ve Nicel Intravital Chick Chorioallantoic Membran Modeli Kullanılarak Metastatik Regülatörlerin Keşfi

Burada, insan yumurtalık dokusu için bir civciv koryoallantoik membran (CAM) ksenogreftleme modeli geliştirmek için bir protokol açıklıyoruz ve tekniğin etkinliğini, greft revaskülarizasyon zaman çerçevesini ve 6 günlük bir greftleme süresi boyunca doku canlılığını gösteriyoruz.

Yumurtalık Dokusu Transplantasyonunu İncelemek İçin Bir Araç Olarak Civciv Korioallantoik Membran (CAM) Modeli

Keşfedin: Tavuk chorioallantoic membran modeli ile jinekolojik ve ürolojik kanserleri in vivo ortamda hızlıca çalışın. Hücre hatları ve hasta tümör örnekleriyle tedavi stratejilerini test edin.

Jinekolojik ve Ürolojik Kanserleri Incelemek Için Vivo Modelinde Tavuk Chorioallantoic Membran Kullanma

Daha fazla video keşfet