Name: Sıcak iskemi / reperfüzyon hasarının bir sıçan akciğer transplantasyon modeli: sonuçları iyileştirmek için optimizasyonlar (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-10-28T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 37 s
Description: Öğrenin sıçan akciğer transplantasyonunda standartlaştırılmış kollama tekniğini ve anatomik işaretleri kullanarak. Bu yöntem iskemi-reperfüzyon hasarı ve transplantasyon biyolojisinde moleküler araştırmalar için güvenilir bir model sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Erkek Sprague-Dawley sıçanları (180-270 g vücut ağırlığı) ticari olarak satın alındı (örneğin, Envigo) ve Ohio State Üniversitesi Hayvan Tesisi'nde patojensiz koşullar altında barındırıldı. Tüm prosedürler, NIH ve Ulusal Araştırma Konseyi'nin Laboratuvar Hayvanlarının İnsancıl Bakımı ve Kullanımı Kılavuzu'na göre ve Ohio State Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi'nin (IACUC Protokolü # 2012A00000135-R2) onayıyla insancıl bir şekilde gerçekleştirilmiştir.
1. İlk kurulum
<ol><li>Cerrahi cihazları ayarlayın. NOT: Bu hayatta kalma dışı bir ameliyattır. Sağkalım ameliyatı yapılacaksa, steril aletler ve bariyer önlemlerinin alınması gerekecektir.<ol><li>Kalp atış hızı/oksijen doygunluğu izleme ekipmanını ve ısıtma kartını 42 ° C'ye açın.</li>
		<li>İzofluran evaporatörünü önceden ısıtmak için havalandırma ve anestezi makinesini açın. NOT: 7,2 mL/kg tidal hacim (Td), 2 cmH2O pozitif uçlu ekspiratuar basınç (PEEP) ve 80 bpm solunum hızı kullanın.</li>
		<li>Anestezi şırıngasını 10 mL sıvı izofluran ile doldurun ve şırıngayı havalandırma ve anestezi makinesine monte edin.</li>
		<li>Cerrahi mikroskobu, mikrocerrahın tercihlerine göre ayarlanmış yükseklik ve odak ile açın.</li>
		<li>Elektrokoter cihazını açın.</li>
	</ol></li>
	<li>Cerrahi aletleri hazırlayın ve yerleştirin (Şekil 1). NOT: Tüm cerrahi aletler 121 °C'de 30 dakika süreyle otoklavlandı.</li>
	<li>Donör ve alıcı sıçanların vücut ağırlığını toplayın ve kaydedin.</li>
	<li>Manşet yapmak için kullanılacak anjiyo-kateterin (20, 18, 16, 14 veya 12 G) doğru ölçüsünü belirlemek için Tablo 1'i ve sıçanın vücut ağırlığını kullanın.</li>
	<li>Vücut ağırlığına göre boyut kılavuzunu kullanarak pulmoner arter (PA), bronş (Br) ve pulmoner ven (PV) için manşetler hazırlayın (Tablo 1 ve Şekil 2).<ol><li>20 G, 18 G, 16 G, 14 G veya 12 G boyutlarında anjiyo-kateter (Şekil 2A-E) cerrahi mikroskop altında steril bir yüzeye yerleştirin.</li>
		<li>Daha sonra, manşet gövdesinin üstünde 1 mm X 1 mm tırnağı (genişlik x yükseklik) olan 2 mm uzunluğunda bir manşet gövdesi oluşturmak için anjiyo-kateteri 90 ° 'lik bir açıyla kesmek için bir kaburga sırtı cerrahi bıçağı # 11 (Şekil 2F) kullanın (Şekil 2G).</li>
		<li>Manşetleri kullanıma hazır olana kadar steril salin içinde saklayın.</li>
	</ol></li>
	<li>Çözümler hazırlayın.<ol><li>10 mL ketamine (100 mg / mL) 1 mL ksilazin (100 mg / mL) ekleyerek steril bir enjeksiyon şişesinde ketamin ve ksilazin karışımı hazırlayın. NOT: Bu kokteylin son kullanma tarihi, kullanılan bileşenlerin en erken son kullanma tarihi kullanılarak belirlenir.</li>
		<li>Şırıngalara sıçanlar için uygun dozu çekin (100 g sıçanın vücut ağırlığı başına 0.1 mL ketamin / ksilazin karışımı; örneğin, 200 g'lık bir sıçan için, 0.2 mL ketamin / ksilazin karışımı verilecektir). NOT: Bu dozaj, sıçana 91 mg / kg ketamin ve 9.1 mg / kg ksilazin verecektir ve bir sıçanı 60-80 dakika boyunca sakinleştirmelidir.</li>
		<li>1.000 U / kg'lık bir dozda verilecek olan heparini hazırlayın.</li>
		<li>Salin, PBS ve koruma solüsyonunu buz üzerinde saklayın (Malzeme Tablosu).</li>
	</ol></li>
</ol>2. Donör sıçan hazırlığı
<ol><li>Ketamin ve ksilazin karışımını intraperitoneal olarak enjekte ederek ve ayak parmağının sıkışmasına yanıt eksikliği ile değerlendirilebilecek cerrahi bir anestezi düzleminin gelişmesi için ~ 10 dakika bekleyerek donör sıçanda anesteziyi indükleyin.</li>
	<li>Kesi bölgesini elektronik makas kullanarak tıraş edin.</li>
	<li>Donör sıçanı cerrahi ısıtma tahtasına sırtüstü pozisyonda yerleştirin ve insizyon bölgesini betadin ile ıslatılmış steril bir gazlı bezle silin. Ardından alanı% 70 izopropil alkollü çubukla silin. 3 kez tekrarlayın.</li>
	<li>Makas kullanarak boynun ortasından 3 ila 4 cm'lik bir orta hat cilt insizyonu yapın ve forseps kullanarak (kanamayı önlemek için makas yerine) deri altı dokuları ve kasları dikkatlice diseke edin.</li>
	<li>Endotrakeal entübasyon için, trakea etrafına 4-0 ipek sütür iplik takın ve trakeaya 16 G anjiyo-kateter yerleştirin. Sütürü trakea etrafına çift düğümle sıkıca bağlayın ve ardından anjiyo-kateteri yerinde tutmak için tek bir düğümle bitirin.</li>
	<li>Anjiyo-kateteri ventilatöre bağlayın ve sıçanda% 1-2 izofluran içeren cerrahi bir anestezi düzlemi tutun.</li>
	<li>Makas kullanarak kombine orta hat ve enine insizyon olarak laparo-sternotomi yapın.</li>
	<li>Heparini (1.000 U / kg) inferior vena kava (IVC) yoluyla bir insülin şırıngası ile enjekte edin ve sistemik dolaşım için 10 dakika bekleyin. NOT: Bu heparin uygulaması, donör akciğerdeki kan pıhtılaşmasını önler.</li>
	<li>Torasik kemer boyunca keserek diyaframı dikkatlice diseke edin ve ardından sternumu boyuna kadar takip ederek göğüs boşluğunu açığa çıkarın.</li>
</ol>3. Donör akciğer sıcak iskemisi ve tedariki
<ol><li>IVC'yi keserek donör sıçanı ötenazi yapın.</li>
	<li>Akciğerler hala ventilasyon yaparken, hem sağ hem de sol kulak kepçelerini mikro diseksiyon yay makası ile kesin ve yerçekimi, akciğerleri, tüpe bağlı yerçekimi ve doğrudan pulmoner arterden sokulan 18 G anjiyo-kateter ile 28 cmH2O'da asılı bir şırıngada 20 mL koruma çözeltisi ile yıkayın.</li>
	<li>Vantilatörü endotrakeal tüpten ayırın ve vücut ağırlığına bağlı olarak uygun miktarda hava ile doldurulmuş 5 mL'lik bir şırıngaya bağlayın. NOT: Akciğerleri şişirmek için havanın hacmi, gelgit hacminin iki katı (Td = 7.2 mL / kg) ile hesaplanabilir, örneğin, 200 g'lık bir sıçanın Td'si 1.44 mL'dir ve 2 ile çarpılması, akciğerleri şişirmek için gereken 2.88 mL havaya eşit olacaktır.</li>
	<li>Donörün akciğerlerini şişirin.</li>
	<li>Akciğerleri şişirmek için trakeaya bir Yaşargil kelepçesi koyun ve akciğerleri ve kalbi steril pamuklu gazlı bezle örtün. Gazlı bezi tuzlu suyla nemlendirin, donör sıçanı bir alt ped ile sarın ve akciğerlerde sıcak iskemiyi indüklemek için ısınma ameliyat tahtasında 1 saat bekletin (Şekil 3).</li>
	<li>1 saatlik sıcak iskemiden sonra, kalp-akciğer bloğunu mikro diseksiyon yay makası ve forseps ile eksize edin ve buz üzerinde steril bir Petri kabı üzerinde buz gibi soğuk PBS ile nemlendirilmiş steril gazlı bez üzerine yerleştirin. NOT: Aşağıdaki adımların tümü, akciğerler buz üzerindeki Petri kabının üzerindeyken gerçekleşmelidir.</li>
	<li>Sol akciğeri yemek borusundan ve post-kaval lobdan ayırmak için pulmoner ligamentleri mikro diseksiyon yay makası ile dikkatlice kesin.</li>
	<li>Sol akciğer hilar bölgesini Vannas-Tübingen yay makası ile dikkatlice kesin ve sol PV, PA ve Br'yi temin edin.</li>
	<li>Manşetleri PV, PA veya Br üzerine yerleştirin (Şekil 4A-C).<ol><li>Manşet tırnağını kapmak için bir sivrisinek hemostatı kullanın.</li>
		<li>PV, PA veya Br'nin distal ucunu uygun manşet gövdesinden tutmak, manşetin etrafındaki ekstra dokuyu atmak ve 8-0 kullanarak güvence altına almak için ince forseps kullanın naylon dikiş. Ekstra dokuyu ve manşet gövdesinin etrafındaki manşeti kesmek için Vannas-Tübingen yay makası kullanın.</li>
	</ol></li>
	<li>Donör akciğeri, alıcı sıçana nakledilmeye hazır olana kadar buz üzerindeki Petri kabında tuzlu su ile nemlendirilmiş gazlı bezle kaplı tutun (Şekil 4D). NOT: Ortalama soğuk iskemi süresi 84 dakika ± 11 dakika S.D.'dir.</li>
</ol>4. Alıcı sıçan hazırlığı
<ol><li>Ketamin ve ksilazin karışımını (100 g sıçan başına 0.1 mL) intraperitoneal olarak enjekte ederek ve ayak parmağının sıkışmasına yanıt verilmemesi ile değerlendirilebilecek cerrahi bir anestezi düzleminin gelişmesi için 10 dakika bekleyerek alıcı sıçanda donör sıçanla aynı şekilde anestezi indükleyin.</li>
	<li>Elektronik makas kullanarak kesi alanını tıraş edin.</li>
	<li>Donör sıçanı sırtüstü pozisyona yerleştirin ve insizyon bölgesini betadine ile ıslatılmış steril bir gazlı bezle silin. Ardından alanı% 70 izopropil alkollü çubukla silin. 3 kez tekrarlayın.</li>
	<li>Sıçan havalandırma makinesine sabitlenmeden önce, 4. interkostal boşluğu bulmaya hazırlanırken sıçanın göğsüne çizgiler çizin.<ol><li>Göğsü suprasternal çentikten ksifoid sürece kadar ölçün ve bir çizgi çizin (Şekil 5A).</li>
		<li>Bu çizginin ortasında, göğsün sol tarafı boyunca, ölçümün yarısını suprasternal çentikten ksifoid sürece kadar ölçen bir çizgi çizin (Şekil 5A ve B).</li>
	</ol></li>
	<li>Endotrakeal entübasyon kitinden bir LED ışığına bağlı fiber optik kabloyu kullanarak görselleştirme yoluyla 16 G anjiyo-kateter kullanarak alıcıyı entübe edin.</li>
	<li>Anjiyo-kateteri ventilatöre bağlayın ve% 1-2 izofluran ile cerrahi anestezi düzlemini koruyun.</li>
	<li>4. interkostal boşluğu bulmak için, göğüs duvarının güçlü bir palpe edilebilir kardiyak impulsun hissedilebileceği alanını bulun (Şekil 5C, kırmızı daire).</li>
	<li>Bu konumda, cildi makasla ve kası mikro diseksiyon yaylı makasla kesin ve 4. interkostal boşluğu mümkün olduğunca geniş açmak için retraktörü kullanın (Şekil 5D ve E). NOT: Kas diseksiyonu sırasında kanamayı önlemek veya durdurmak için elektriksel koter kullanın.</li>
	<li>İnterkostal boşluk geniş bir şekilde açıldıktan sonra, Vannas-Tübingen yay makası kullanarak alıcının sol akciğerinin etrafındaki bağları dikkatlice inceleyin ve steril pamuklu çubuklar ve forsepsler kullanarak akciğeri göğüs bölgesinden dışarı çekin.</li>
	<li>Sol akciğerin etrafına steril gazlı bez yerleştirin ve bir Dieffenbach bulldog kelepçesi ile tutun.</li>
	<li>Sol akciğer hilar bölgesine mümkün olduğunca yakından bir Yaşargil kelepçesi uygulayın.</li>
</ol>5. Anastomozlar
<ol><li>Pulmoner ven (PV) anastomozu<ol><li>Alıcının PV'sinin etrafına 7-0 naylon sütür yerleştirin.</li>
		<li>Üst ve alt segmental damarları mümkün olduğunca distal olarak enine keserek Vannas-Tübingen yay makası kullanarak alıcının PV'sini kesin ve bir insülin şırıngası kullanarak kanı 0.2 mL heparinize salin (1 U / mL) ile temizleyin.</li>
		<li>Donör akciğeri hala buz gibi soğuk ıslak steril gazlı bezle sarılmış olarak göğüs boşluğuna yerleştirin.</li>
		<li>Donörün kelepçeli PV'sini alıcının PV'sine yerleştirin ve ardından önceden konumlandırılmış 7-0 naylon sütür ile sabitleyin (Şekil 6).</li>
	</ol></li>
	<li>Bronşiyal (Br) anastomoz<ol><li>Alıcının Br'sinin etrafına 7-0 naylon sütür yerleştirin.</li>
		<li>Üst ve alt segmental hava yollarını Vannas-Tübingen yay makası ile mümkün olduğunca distal olarak enine keserek alıcının Br'sini kesin.</li>
		<li>Donörün kelepçeli Br'sini alıcının Br'sine yerleştirin ve önceden konumlandırılmış 7-0 naylon sütür ile sabitleyin (Şekil 6).</li>
	</ol></li>
	<li>Pulmoner arter (PA) anastomozu:<ol><li>Alıcının PA'sının etrafına 7-0 naylon sütür yerleştirin.</li>
		<li>Alıcının PA'sını adventitial kılıfından kesin, damarın çevresinin yarısını Vannas-Tubingen yay makası ile kesin ve daha sonra bir insülin şırıngası kullanarak PA'daki kanı 0.2 mL heparinize salin (1 U / mL) ile temizleyin.</li>
		<li>Donörün kelepçeli PA'sını alıcının PA'sına yerleştirin ve önceden konumlandırılmış 7-0 naylon sütür ile sabitleyin (Şekil 6).</li>
	</ol></li>
</ol>6. Reperfüzyon
<ol><li>Nakledilen donör akciğerin reperfüzyonuna ve ventilasyonuna izin vermek için hilum üzerindeki Yaşargil kelepçesini çıkarın (Şekil 7).</li>
	<li>Mikro diseksiyon yay makası ve forseps kullanarak alıcının doğal sol akciğerini diseke edin.</li>
	<li>Nakledilen sol akciğeri alıcının toraksına dikkatlice yeniden konumlandırın.</li>
	<li>Torakotomi insizyonunu 6-0 naylon sütür kullanarak kapatın.<ol><li>Kaburgaların etrafına basit çift düğümlü üç adet 6-0 naylon sütür yerleştirin: 4. kaburgadan üstün ve 5. kaburgadan daha düşük (Şekil 8A).</li>
		<li>Üç sütürü bir araya getirmek için hemostatları kullanın (Şekil 8B).</li>
		<li>Havalandırma ayarlarında PEEP'i 6 cmH2O'ya yükseltin.</li>
		<li>Yarayı kapatmak için üç düğümü de çekerek aynı anda birbirine bağlayın (Şekil 8C).</li>
		<li>PEEP'i hemen 2 cmH2O'ya düşürün.</li>
		<li>6-0 naylon dikiş ile cildi kapatın. NOT: Laboratuvarımız transplantasyon sonrası akut fazı incelediğinden, bu modeldeki alıcı sıçan ventilasyon ve anestezi altında nakil sonrası 3 saat hayatta kalır ve daha sonra örnekler toplanır.</li>
	</ol></li>
</ol>7. Deneysel örneklerin toplanması (plazma, akciğer dokusu)
<ol><li>Kontrol örnekleri için, 3 saatlik reperfüzyon periyodu başlatıldıktan sonra donörün sağ loblarını toplayın.<ol><li>Protein veya RNA ekspresyon analizleri için superior lob ve post-kaval lobu snap-freeze yapın, histoloji için orta lobu koruyun ve ıslak-kuru ağırlık oranı için inferior lobu kullanın (Şekil 9A).</li>
	</ol></li>
	<li>3 saatlik reperfüzyon süresinin bitiminden 10 dakika önce, juguler ven içine bir insülin şırıngası ile heparin (1.000 U / kg) enjekte ederek alıcı örnekleri toplamaya hazırlanın. NOT: Bu heparin uygulaması, akciğerlerdeki kan pıhtılaşmasını önler ve tedarik sırasında daha kapsamlı bir kızarmaya izin verir.</li>
	<li>Plazma toplama<ol><li>3 saatlik reperfüzyon süresinin sonunda, IVC yoluyla bir şırınga ile 1 mL kan toplayın.</li>
		<li>Buz üzerinde saklayın ve daha sonra plazmayı hasat etmek için 10 dakika boyunca 2.000 x g'de santrifüj yapın.</li>
	</ol></li>
	<li>Ekssanguinasyona izin vermek için IVC'yi keserek alıcı sıçanı ötenazi yapın.</li>
	<li>Torasik kemer boyunca diyaframı diseke edin ve göğüs kafesini diseke ederek göğüs boşluğunu ortaya çıkarın.</li>
	<li>İstenirse doğal veya nakledilen akciğerlerden BAL sıvısı toplayın (isteğe bağlı). NOT: Akciğerde ıslak-kuru ağırlık oranı veya histoloji yapılıyorsa, sonuçları etkileyebileceğinden BAL sıvı toplanması yapılmamalıdır.<ol><li>Trakea etrafına 4-0 ipek sütür iplik takın ve sıvı sızıntısını önlemek için trakea ve entübasyon tüpünün etrafına sıkı bir çift düğüm bağlayın.</li>
		<li>Sağ loblardan ve sol lobdan BAL sıvı alımı için buz gibi soğuk PBS miktarını hesaplayın. NOT: Sağ akciğer için hacim oranı %63, sol akciğer için hacim oranı %37'dir16. Bu nedenle, her iki tarafa da aşılanacak PBS miktarını belirlemek için, hacim tidal hacmin iki katı (Td = 7.2 mL / kg) sağ akciğer için% 63 ve sol akciğer için% 37 ile çarpılarak hesaplanmalıdır.</li>
		<li>Sol akciğer hilar bölgesine bir Yasargil kelepçesi yerleştirin (Şekil 10A) ve anjiyo-katetere bağlı bir şırınga ile, hesaplanan miktarda buz gibi soğuk PBS'yi sağ akciğere (alıcının doğal lobları) aşılayın ve şırınga pistonunu yavaşça yukarı çekerek BAL sıvısını toplayın. İki kez gerçekleştirin. NOT: Aşılanan sıvının% 70-80 oranında geri kazanılması beklenmelidir.</li>
		<li>Sol akciğerdeki Yaşargil kelepçesini çıkarın ve kelepçeyi sağ akciğer hiler bölgesine yerleştirin (Şekil 10B).</li>
		<li>Nakledilen sol lobdan BAL sıvısını sağ loblar için toplandığı gibi toplayın ve ardından sağ akciğer hiler bölgesindeki kelepçeyi çıkarın.</li>
	</ol></li>
	<li>Sağ ve sol kulak kepçelerini mikro diseksiyon yay makası ile kesin ve akciğerleri, boruya bağlı 18 G anjiyo-kateter ve 28 cmH2O'da asılı 20 mL önceden soğutulmuş koruma çözeltisi içeren bir şırınga kullanarak PA boyunca yerçekimi ile yıkayın.</li>
	<li>Alıcının akciğerinden örnekler toplayın.<ol style="margin-left: 40px;"><li>Protein veya RNA ekspresyon analizleri için superior lob ve post-kaval lobu snap-freeze edin, histoloji için orta lobu koruyun ve ıslak-kuru ağırlık oranı için inferior lob kullanın) (Şekil 9A).</li>
		<li>Sol nakledilen sol lobu üç bölüme ayırın: dondurulmuş için toplanan üst bölge, histoloji için orta bölge ve ıslak-kuru ağırlık oranı için alt bölge (Şekil 9B).</li>
	</ol></li>
</ol>

<ol><li>Mizuta, T., Kawaguchi, A., Nakahara, K., Kawashima, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simplified+rat+lung+transplantation+using+a+cuff+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Simplified rat lung transplantation using a cuff technique.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 97 (4), 578-581 (1989).</li>
<li>Zhai, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simplified+rat+lung+transplantation+by+using+a+modified+cuff+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Investigative+Surgery%22%5BJournal%5D)">Simplified rat lung transplantation by using a modified cuff technique.</a> Journal of Investigative Surgery. 21 (1), 33-37 (2008).</li>
<li>Goto, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simplified+rat+lung+transplantation+using+a+new+cuff+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Thoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Simplified rat lung transplantation using a new cuff technique.</a> Annals of Thoracic Surgery. 93 (6), 2078-2080 (2012).</li>
<li>Guo, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improvements+of+surgical+techniques+in+a+rat+model+of+an+orthotopic+single+lung+transplant%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Medical+Research%22%5BJournal%5D)">Improvements of surgical techniques in a rat model of an orthotopic single lung transplant.</a> European Journal of Medical Research. 18, 1(2013).</li>
<li>Tian, D., Shiiya, H., Sato, M., Nakajima, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+lung+transplantation+model%3A+modifications+of+the+cuff+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Rat lung transplantation model: modifications of the cuff technique.</a> Annals of Translational Medicine. 8 (6), 407(2020).</li>
<li>Rajab, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anastomotic+techniques+for+rat+lung+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Anastomotic techniques for rat lung transplantation.</a> World Journal of Transplantation. 8 (2), 38-43 (2018).</li>
<li>Reis, A., Giaid, A., Serrick, C., Shennib, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+outcome+of+rat+lung+transplantation+with+modification+of+the+nonsuture+external+cuff+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Heart+and+Lung+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Improved outcome of rat lung transplantation with modification of the nonsuture external cuff technique.</a> Journal of Heart and Lung Transplantation. 14 (2), 274-279 (1995).</li>
<li>Sugimoto, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+orthotopic+lung+transplantation+model+in+rats+with+cold+storage%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery+Today%22%5BJournal%5D)">Experimental orthotopic lung transplantation model in rats with cold storage.</a> Surgery Today. 39 (7), 641-645 (2009).</li>
<li>Santana Rodriguez, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Technical+modifications+of+the+orthotopic+lung+transplantation+model+in+rats+with+brain-dead+donors%5BTitle%5D)+AND+%22Archivos+de+Bronconeumolog%C3%ADa%22%5BJournal%5D)">Technical modifications of the orthotopic lung transplantation model in rats with brain-dead donors.</a> Archivos de Bronconeumología. 47 (10), 488-494 (2011).</li>
<li>Gielis, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+murine+model+of+lung+ischemia+and+reperfusion+injury%3A+tricks+of+the+trade%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">A murine model of lung ischemia and reperfusion injury: tricks of the trade.</a> Journal of Surgical Research. 194 (2), 659-666 (2015).</li>
<li>Rajab, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Techniques+for+lung+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Lung+Research%22%5BJournal%5D)">Techniques for lung transplantation in the rat.</a> Experimental Lung Research. 45 (9-10), 267-274 (2019).</li>
<li>Iskender, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+Warm+Versus+Cold+Ischemic+Donor+Lung+Preservation+on+the+Underlying+Mechanisms+of+Injuries+During+Ischemia+and+Reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Effects of Warm Versus Cold Ischemic Donor Lung Preservation on the Underlying Mechanisms of Injuries During Ischemia and Reperfusion.</a> Transplantation. 102 (5), 760-768 (2018).</li>
<li>Lin, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Five-year+update+on+the+mouse+model+of+orthotopic+lung+transplantation%3A+Scientific+uses%2C+tricks+of+the+trade%2C+and+tips+for+success%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Thoracic+Disease%22%5BJournal%5D)">Five-year update on the mouse model of orthotopic lung transplantation: Scientific uses, tricks of the trade, and tips for success.</a> Journal of Thoracic Disease. 4 (3), 247-258 (2012).</li>
<li>Song, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standardization+of+bronchoalveolar+lavage+method+based+on+suction+frequency+number+and+lavage+fraction+number+using+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicological+Research%22%5BJournal%5D)">Standardization of bronchoalveolar lavage method based on suction frequency number and lavage fraction number using rats.</a> Toxicological Research. 26 (3), 203-208 (2010).</li>
<li>Chang, J. E., Kim, H. J., Yi, E., Jheon, S., Kim, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduction+of+ischemia-reperfusion+injury+in+a+rat+lung+transplantation+model+by+low-concentration+GV1001%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Cardio-Thoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Reduction of ischemia-reperfusion injury in a rat lung transplantation model by low-concentration GV1001.</a> European Journal of Cardio-Thoracic Surgery. 50 (5), 972-979 (2016).</li>
<li>De Backer, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Study+of+the+variability+in+upper+and+lower+airway+morphology+in+Sprague-Dawley+rats+using+modern+micro-CT+scan-based+segmentation+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Anatomical+Record%22%5BJournal%5D)">Study of the variability in upper and lower airway morphology in Sprague-Dawley rats using modern micro-CT scan-based segmentation techniques.</a> Anatomical Record. 292 (5), Hoboken. 720-727 (2009).</li>
<li>Nelson, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+of+isolated+ex+vivo+lung+perfusion+in+a+rat+model%3A+lessons+learned+from+developing+a+rat+EVLP+program%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Method of isolated ex vivo lung perfusion in a rat model: lessons learned from developing a rat EVLP program.</a> Journal of Visualized Experiments. (96), e52309(2015).</li>
<li>Suzuki, H., Fan, L., Wilkes, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+obliterative+bronchiolitis+in+a+murine+model+of+orthotopic+lung+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Development of obliterative bronchiolitis in a murine model of orthotopic lung transplantation.</a> Journal of Visualized Experiments. (65), e3947(2012).</li>
<li>Jia, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+of+acute+lung+injury+by+targeting+MG53-mediated+cell+membrane+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Treatment of acute lung injury by targeting MG53-mediated cell membrane repair.</a> Nature Communications. 5, 4387(2014).</li>
<li>Kim, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pegylated-Catalase+Is+Protective+in+Lung+Ischemic+Injury+and+Oxidative+Stress%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Thoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Pegylated-Catalase Is Protective in Lung Ischemic Injury and Oxidative Stress.</a> Annals of Thoracic Surgery. , (2020).</li>
<li>Beal, E. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((D-Ala%282%29%2C+D-Leu%285%29%5D+Enkephalin+Improves+Liver+Preservation+During+Normothermic+Ex+Vivo+Perfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">D-Ala(2), D-Leu(5)] Enkephalin Improves Liver Preservation During Normothermic Ex Vivo Perfusion.</a> Journal of Surgical Research. 241 (2), 323-335 (2019).</li>
<li>Akateh, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrahepatic+Delivery+of+Pegylated+Catalase+Is+Protective+in+a+Rat+Ischemia%2FReperfusion+Injury+Model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Intrahepatic Delivery of Pegylated Catalase Is Protective in a Rat Ischemia/Reperfusion Injury Model.</a> Journal of Surgical Research. 238, 152-163 (2019).</li>
</ol>

BAW, YGL ve JLK, Ulusal Sağlık Enstitüleri (NIH) hibesi R01HL143000 ile desteklenmektedir. BAW, Savunma Bakanlığı (DOD) hibesi W81XWH1810787 ile desteklenmektedir. SMB, NIH hibesi R01DK123475 aracılığıyla desteklenir. JM, NIH hibeleri AR061385, AR070752, DK106394 ve AG056919'un yanı sıra DOD hibesi W81XWH-18-1-0787 tarafından desteklenmektedir.

Bu yazıda, prosedürü optimize etmek için bir sıçan akciğer nakli protokolünde birkaç kritik adımda müdahale ettik. Sıçan akciğer transplantasyonu için çeşitli kelepçeleme teknikleri bildirilmiş olsa da 1,2,3,4,5,6,7,8,9,15, mikrocerrahlar için işlem hala öznel ve zor olabilir.<sup...

Otuz yılı aşkın bir süredir, araştırmacılar sıçan akciğer nakli modellerini değiştirmekte ve geliştirmektedir, böylece üretilen veriler daha tutarlı ve gerçek klinik durumu daha yansıtmaktadır. Laboratuvarımızın bu modeli uyguladığı dönemde, dört iyileştirme alanı belirledik: anastomozlar için kelepçeleme teknikleri, alıcının 4. interkostal boşluğunun tanımlanması, alıcının prosedürü sırasında akciğer şişirmesi ve yara kapanması ve analiz için örneklerin toplanması.
Anastomozlar için kelepçeleme tekniği modifikasyonları, donör akciğerin 1,2,3,4,5,6 işlem süresini kısaltarak ve anastomoz prosedürünü mikrocerrah için daha hızlı ve teknik olarak daha kolay hale getirerek tüm transplantasyon prosedürünü iyileştirebilir. Nakledilen akciğere gerekli kan ve hava akışını sağlamak için uygun boyutta manşetlerin kullanılması kritik olmakla birlikte, pulmoner ven (PV), pulmoner arter (PA) veya bronş (Br) için manşetlerin boyutunun nasıl seçilmesi gerektiği konusunda sınırlı rehberlik vardır5,7,8,9. PV, PA ve Br'nin çapları donör ve alıcı sıçanların vücut ağırlığı ile ilişkili olduğundan, manşet boyutunun vücut ağırlığına dayanmasını öneriyoruz. Bu rapor, nakledilen akciğere kan ve hava beslemesini optimize etmeye yarayan bir sıçanın vücut ağırlığına (180 g ila 270 g'ın üzerinde) dayanan manşetler için bir boyut kılavuzu sunmaktadır (Tablo 1).
Yeni bir mikrocerrah, donör prosedürü sırasında bir donör akciğeri başarılı ve kolay bir şekilde temin edebilirken, alıcının prosedürü sırasında akciğerin nakli daha karmaşıktır ve mikrocerrahın deneyimine bağlıdır. Alıcının sol akciğerine erişmek için 4. interkostal boşluğu bulma girişimleri, biraz öznellik taşıyan ve işlem süresini artırabilen daha zor adımlardan biridir. Bu nedenle, göğüs ölçümlerini vekalbin çarpıntılarını kullanarak 4. interkostal boşluk yerinin belirlenmesine yardımcı olacak basit ve objektif bir yöntem sunarak 4,5,6,10,11,12 diseke edilecek doğru alanı göğüs duvarını bulmayı amaçlıyoruz.
Ayrıca, organda potansiyel bir yaralanma kaynağı olan donör akciğer enflasyonunda bir iyileşme öneriyoruz. Donör akciğer, reperfüzyon başlayana kadar söndürülür. 4. interkostal boşluğu dikerken, donör akciğer genellikle PEEP'i 2 cmH 2 O'dan 6 cmH2O'ya yükselterek şişirilir. Aşırı enflasyondan kaynaklanan akciğer hasarını en aza indirmek için, basit çift düğümlü 4. kaburganın 5. kaburganın altına üç adet 6-0 naylon dikişin yerleştirildiği bir teknik öneriyoruz. Yara kapanma zamanı geldiğinde, üç dikişin uçları her iki elde hemostatlarla tutulur, yara her iki taraftan yukarı çekilerek bir kerede kapatılır ve PEEP hemen 2 cmH2O'ya düşürülür. Bu şekilde, akciğerin mümkün olan en kısa sürede genişlemesine izin verilir10.
Bir deneyin sonunda, araştırmacı genellikle her nakilden birçok analiz türü için birçok örnek türü toplamak ister. Örneğin, dondurulmuş doku, formalin sabit dokusu, pulmoner ödemi belirlemek için ıslak-kuru ağırlık oranı için doku ve bronkoalveloler lavaj (BAL) sıvısı, naklin ne kadar iyi gittiğini değerlendirmek için kullanılabilir. BAL sıvısını toplamanın geleneksel yöntemi, hem alıcının doğal loblarından hem de donörün nakledilen lobundan13,14,15 karışık bir havuzlanmış numuneye izin verir. Bunun üstesinden gelmek için, nakledilen ve doğal akciğerlerin durumu hakkında daha kesin bir fikir verebilecek hilar alanları sıkıştırmak için bir yöntem sunuyoruz. Ek olarak, akciğerlerin her iki tarafından BAL sıvısını toplamak için kullanılan PBS'nin hacmi dikkate alınması önemlidir, çünkü BAL sıvısı, konsantrasyonla ölçülen sitokinler ve kemokinler gibi çok sayıda çözünür faktör içerir. Akciğer kapasitesinin tahmini hacmine aşılanan sıvının hacmini normalleştirmek, karşılaştırmaya yardımcı olabilir. Sağ tarafta dört lob ve sol tarafta bir lob ile, sıçanın beş lobunun her biri farklı bir hacme ve yüzey alanına sahiptir16. Backer ve ark. tarafından akciğer loblarının hacim ölçümü üzerine yapılan önceki bir araştırmaya göre, tüm akciğerin toplam hacminin sağ loblarının hacmi% 63 (4400 mm 3) ve sol lob% 37'dir (2500 mm3). Bu nedenle, BAL sıvısını toplamak için kullanılan PBS hacminin, sağ akciğer için% 63 ve sol akciğer için% 37 ile çarpılan tidal hacmin (7.2 mL / kg) iki katı olarak hesaplanmasını öneririz. Bu yaklaşımı kullanarak, vücut ağırlığı ve zamanlama10,16 gibi değişkenleri daha iyi kontrol edebilirsiniz.
Sonuçta, bu raporda, sıçan akciğer transplantasyonunun standart deneysel modelinde, prosedürü daha verimli hale getirebilecek ve her deneyden daha doğru ve bol miktarda veri üretme yeteneğini artırabilecek birkaç değişiklik göstereceğiz.

<table><tbody><tr><td>12 Gauge anjiyo-kateter</td><td>BD</td><td>382277</td><td></td></tr><tr><td>14 Gauge anjiyo-kateter</td><td>B. Braun</td><td>4251717-02</td><td></td></tr><tr><td>16 Gauge anjiyo-kateter</td><td>B. Braun</td><td>4252586-02</td><td></td></tr><tr><td>18 Gauge anjiyo-kateter</td><td>B. Braun</td><td>4251679-02</td><td></td></tr><tr><td>20 Gauge anjiyo-kateter</td><td>B. Braun</td><td>4252527-02</td><td></td></tr><tr><td>4-0 ipek sütür</td><td>Cerrahi Uzmanlıklar A.Ş.</td><td>SP116</td><td></td></tr><tr><td>6-0 naylon sütür</td><td>AD Cerrahi</td><td>S-N618R13</td><td></td></tr><tr><td>7-0 naylon sütür</td><td>AD Cerrahi</td><td>S-N718SP13</td><td></td></tr><tr><td>8-0 naylon sütür</td><td>AD Cerrahi</td><td>XXS-N807T6</td><td></td></tr><tr><td>Betadine Sprey</td><td>Avrio Health LP</td><td>UPC</td><td></td></tr> 367618160039 <tr><td>Makası</td><td>VWR</td><td>MSPP-023326</td><td></td></tr><tr><td>Castroviejo mikro diseksiyon yaylı makas</td><td>Roboz Cerrahi Alet Co</td><td>RS-5668</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5 - İnce Forseps</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>11254-20</td><td></td></tr><tr><td>Elektrokoter</td><td>Macan</td><td>MV-7A</td><td></td></tr><tr><td>Endotrakeal entübasyon kiti</td><td>Kent Scientific</td><td>ETI-MSE</td><td></td></tr><tr><td>Forseps</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>11027-12</td><td></td></tr><tr><td>Halsted-sivrisinek kanama durdurucu</td><td>Roboz Cerrahi Alet Co</td><td>RS-7112</td><td></td></tr><tr><td>Heparin</td><td>Fresnius Tıbbi Bakım</td><td>C504701</td><td></td></tr><tr><td>İnsülin şırınga</td><td>Yaşam Teknolojileri</td><td>B328446</td><td></td></tr><tr><td>İzofluran</td><td>Piramal Kritik Bakım</td><td>NDC 66794-017-25</td><td></td></tr><tr><td>İzopropil Alkol Çubukları</td><td>BD</td><td>326895</td><td></td></tr><tr><td>Ketamin</td><td>Hikma İlaç PLC</td><td>NDC 0413-9505-10</td><td></td></tr><tr><td>Dieffenbach Bulldog Kelepçe</td><td>Dünyası Hassas Aletler</td><td>WPI14117</td><td></td></tr><tr><td>İğne tutucu / Forseps, Kavisli</td><td>Micrins</td><td>MI1542</td><td></td></tr><tr><td>İğne tutucu / Forseps, Düz</td><td>Micrins</td><td>MI1540</td><td></td></tr><tr><td>Perfadex Plus (Organ Koruma Solüsyonu)</td> <td>XVIVO Perfusion AB</td><td>REF # 19950</td><td></td></tr><tr><td>PhysioSuite</td><td>Kent Bilimsel</td><td>PS-MSTAT-RT</td><td>SpO2 ve kalp atışını kontrol etmek için kullanılır</td></tr><tr><td>Retraktör</td><td>Roboz Cerrahi Alet Co</td><td>RS-6560</td><td></td></tr><tr><td>Salin</td><td>PP Pharmaceuticals LLC</td><td>NDC 63323-186-10</td><td></td></tr><tr><td>Makas</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>14090-11</td><td></td></tr><tr><td>SomnoSuite Küçük Hayvan Anestezi Sistemi</td><td>Kent Scientific</td><td>SS-MVG-Modülü</td><td></td></tr><tr><td>Steril&nbsp; Pamuklu Gazlı Bez Ped</td><td>Fisherbrand</td><td>22-415-469</td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi Mikroskop</td><td>Leica</td><td>M500-N w / OHS</td><td></td></tr><tr><td>Şırınga 5 mL</td><td>BD</td><td>309646</td><td></td></tr><tr><td>Vannas-Tübingen Yaylı Makas</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>15008-08</td><td></td></tr><tr><td>Ksilazin</td><td>Korn İlaç A.Ş</td>. <td>NDC 59399-110-20</td><td></td></tr><tr><td>Yaşargil Kelepçe</td><td>Aesculap, Inc</td><td>FT351T</td><td>Bronşları kelepçelemek için kullanılır</td></tr><tr><td>Yaşargil Kelepçe</td><td>Aesculap, Inc</td><td>FT261T</td><td>Hilum</td></tr><tr><td>Yaşargil Kelepçe Aplikatörü</td><td>Aesculap, Inc</td><td>FT484T</td><td></td></tr> kelepçelemek için kullanılır</tbody></table>

sıcak iskemi / reperfüzyon hasarının bir sıçan akciğer transplantasyon modeli: sonuçları iyileştirmek için optimizasyonlar

A Rat Lung Transplantation Model of Warm Ischemia/Reperfusion Injury: Optimizations to Improve Outcomes

Sıçan akciğer nakli ile ilgili deneyimlerimizden, iyileştirilmesi gereken birkaç alan bulduk. Pulmoner ven (PV), pulmoner arter (PA) veya bronş (Br) için uygun manşet boyutlarını seçme yöntemlerine ilişkin mevcut literatürdeki bilgiler çeşitlidir, bu nedenle sıçan akciğer transplantasyonu sırasında uygun manşet boyutunun belirlenmesi deneme yanılma egzersizi haline getirilmiştir. Kelepçeleme tekniğini, damarın veya bronşun boyutuna uygun en küçük etkili manşeti kullanacak şekilde standartlaştırarak, transplantasyon prosedürünü daha güvenli, daha hızlı ve daha başarılı hale getirebiliriz. PV, PA ve Br'nin çapları sıçanın vücut ağırlığı ile ilişkili olduğundan, ağırlığa dayalı bir kılavuz kullanarak uygun bir boyut seçmek için bir strateji sunuyoruz. Akciğer hacmi vücut ağırlığı ile de ilişkili olduğundan, sıcak iskemi sırasında donör akciğer enflasyonu için uygun hava hacmini seçerken ve bronkoalveoler lavaj (BAL) sıvı toplanması sırasında aşılanacak uygun PBS hacmi için bu ilişkinin de göz önünde bulundurulmasını öneririz. Ayrıca 4. interkostal boşluk diseksiyonu, yara kapatma ve hem doğal hem de transplante loblardan örnek toplama yöntemlerini de tanımladık.

Pulmoner ödemi ölçmek için ıslak-kuru ağırlık oranı hesaplandı. Donörün doğal lobu, nakledilen lob ve alıcının doğal lobu protokolde açıklandığı gibi toplandı ve ıslak ağırlık için hemen tartıldı, 48 saat boyunca 60 ° C'de kurutuldu ve daha sonra kuru ağırlık için tekrar tartıldı. Islak-kuru ağırlık oranının artması, pulmoner ödemin göstergesi olacaktır. Sonuçlarımız, nakledilen lobun ıslak-kuru ağırlık oranında donörün veya alıcının doğal lobuna kıyasla anlamlı bir artış olduğunu göstermekte...

Burada, sonuçları iyileştirmeye hizmet eden bir sıçan akciğer nakli modeline optimizasyonlar sunuyoruz. Vücut ağırlığına göre manşetler için bir boyut kılavuzu, 4. interkostal boşluğu belirlemek için bir ölçüm stratejisi ve yara kapatma ve BAL (bronkoalveoler lavaj) sıvı ve doku toplama yöntemleri sunuyoruz.

Sıcak iskemi / reperfüzyon hasarının bir sıçan akciğer transplantasyon modeli: sonuçları iyileştirmek için optimizasyonlar

From our experience with rat lung transplantation, we have found several areas for improvement. Information in the existing literature regarding methods ...

Bu protokol, metodolojinin geliştirilmesine yardımcı olmak ve güvenilir akciğer transplantasyonuna sahip olmak için dört temel alanı tanımlamaktadır. Birincisi, tekrarlanabilir bir kelepçeleme tekniğidir. İkincisi, dördüncü interkostal boşluğun, yaranın tamamen kapatılmasının ve daha sonra analiz için numunelerin nasıl geri kazanılacağı ve elde edileceğinin doğru ve tekrarlanabilir bir şekilde tanımlanmasıdır.Bu teknikler, moleküler mekanizmalar üzerinde çalışmak ve terapötik müdahaleler geliştirmek için güvenilir bir akciğer nakli yöntemi geliştirilmesine yardımcı olur. Kalp atış hızı/oksijen doygunluğu izleme ekipmanını açarak ve kartı 42 santigrat dereceye kadar ısıtarak cerrahi cihaz kurulumuna başlayın. Ayrıca, izofluran evaporatörünü önceden ısıtmak için havalandırma ve anestezi makinesini açın.Bir anestezi şırıngasını 10 mililitre sıvı izofluran ile doldurun ve şırıngayı havalandırma ve anestezi makinesine monte edin. Ardından, cerrahi mikroskobu tercihlere göre ayarlanmış yükseklik ve odak ile açın ve elektrokoter cihazını başlatın. Aynı şekilde, cerrahi aletleri hazırlayın ve yerleştirin.Birinci tabloya başvurarak sıçanın vücut ağırlığına göre manşetleri yapmak için kullan

a-rat-lung-transplantation-model-warm-ischemiareperfusion-injury

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Obliteratif bronşiolit akciğer transplantasyonu uzun süreli yaşam için anahtar engel ve sağlam bir preklinik model eksikliği obliteratif bronşiolit immünopatogenezi inceleyerek engellemektedir. Diğer solid organ nakli aksine, vaskülarize fare akciğer transplantasyonu vardır ancak son zamanlarda geliştirilmiştir. Burada fare ortotopik tek-akciğer transplantasyonu sonrası bağımsız geliştirilen obliteratif bronşiolit modeli gösterilmektedir.

Ortotopik Akciğer Transplantasyonu bir Mürin Modelinde Obliteratif Bronşiolit Gelişimi

Bu çalışmanın amacı, sıçan ortotopik karaciğer nakli modelini insan karaciğer naklini daha iyi temsil edecek ve alıcı sağkalımını iyileştirmek için değiştirmektir. Sunulan yöntem alıcı karaciğeruygun karaciğer arter donör karaciğer ortak karaciğer arter bağlayarak hepatik arter girişini yeniden kurar.

Ortotopik Karaciğer Transplantasyonunun Sıçan Modelinde Arteriyel Reconnection Sonrası Azaltılmış Komplikasyonlar

Bu makale, karaciğer naklinden sonra iskemi-reperfüzyon hasarı ile ilgili temel araştırmaları kolaylaştırmak için sıçanlarda anhepatik fazın (karaciğer iskemisi) bir hayvan modelinin nasıl inşaılacağına dair ayrıntılı bir açıklama sunmaktadır.

Sıçan Karaciğer Nakli Modelinde Hemodinamik Değişiklikleri Simüle Ederek Organ İskemi-Reperfüzyon Yaralanması

Ventilasyonu korurken ve hipoksiden kaçınırken sol akciğer iskemisi reperfüzyonu (IR) hasarı oluşturmak için bir fare cerrahi modeli.

Orotrakeal Entübasyon ve Ventilasyonlu Akciğer İskemisi Reperfüzyon Cerrahisinin Bir Fare Modeli

Burada, sıçan modelinde normotermik ex situ koruma sonrası heterotopik olarak implante edilen bir kalbin değerlendirme protokolünü sunuyoruz.

Normotermik Ex-Situ Perfüze Heterotopik Kalp Transplantasyonunun Sıçan Modeli

Burada, bir sıçan EVLP modeli oluşturmak için gerekli adımları açıklıyoruz ve perfüze akciğerlerle ilişkili inflamatuar profili gösteriyoruz. Amaç, sıçan EVLP modeli hakkındaki bilgi ve deneyimleri yaymak ve bu devrim niteliğindeki teknikle ilişkili biyolojik tepkilerin bütünsel olarak anlaşılmasını sağlamaktır.

Akciğer naklinde translasyonel içgörüler için ex vivo akciğer perfüzyon sıçan modelinin oluşturulması

Protokol, fare modellerinde akciğer iskemi-reperfüzyon hasarını incelemek için kullanılabilecek uygulanabilir, güvenilir ve tekrarlanabilir bir sol pulmoner hiler klempleme yöntemini özetlemektedir.

Akciğer İskemisi Reperfüzyon Hasarının Murin Sol Pulmoner Hiler Klemp Modeli

Amaç, EVLP boyunca 4 saat boyunca tutarlı akciğer fonksiyonunu sürdürebilen sıçanlarda yeni bir ex vivo akciğer perfüzyonu (EVLP) modeli geliştirmek ve endüstriye EVLP'yi kemirgen modellerine uygulamak için sağlam bir yöntem sunacak uygulama özellikleri sağlamaktır.

Dolaşım Ölümü Sonrası Sıçan Akciğerleri için Yeni Bir Ex Vivo Akciğer Perfüzyon Sisteminin Kurulması

Bu protokol, sıçanlarda ortotopik sol akciğer nakli için operasyonel zorluğu azaltmaya ve sağkalım oranlarını iyileştirmeye odaklanan gelişmiş bir tekniği tanımlar.

Sıçanlarda Ortotopik Sol Akciğer Nakli

Bu protokol, kalibre edilmiş bir termal strese geçici olarak maruz kalmayı içeren ve hasarlı akciğer greftlerinin terapötik olarak yenilenmesi için endojen koruyucu mekanizmaları destekleyen bir sıçan ex-vivo akciğer perfüzyon modeli sunar. Yaklaşım ölçeklenebilir ve tekrarlanabilirdir ve akciğer nakli başarısını artırmak için ilaç dışı tedavilerin geliştirilmesini destekler.

Transplantasyon Öncesi Hasarlı Akciğer Greftlerinin Rehabilitasyonu için Ex-vivo Akciğer Perfüzyonu Sırasında Termal Ön Koşullandırma

Öğrenin sıçan akciğer transplantasyonunda standartlaştırılmış kollama tekniğini ve anatomik işaretleri kullanarak. Bu yöntem iskemi-reperfüzyon hasarı ve transplantasyon biyolojisinde moleküler araştırmalar için güvenilir bir model sağlar.

Sıcak iskemi / reperfüzyon hasarının bir sıçan akciğer transplantasyon modeli: sonuçları iyileştirmek için optimizasyonlar

Daha fazla video keşfet