Sıçanlarda Kısmi Heterotopik Hindlimb Transplantasyon Modeli

Sıçanlarda heterotopik hindlimb transplantasyonunun güvenilir ve tekrarlanabilir cerrahi modelini sunuyoruz. Bu teknik, VCA'da koruma veya immün ret üzerine kısa süreli çalışmalar için idealdir. Adım adım açıklama, kursiyerlerin ameliyata hızlı bir şekilde hakim olmasını sağlayacaktır.

Başlamak için, bacağın distal üçte biri olan ayak bileğinin üzerindeki deride çevresel bir kesi yapın. Bipolar kümeser kullanarak saphenöz arteri ve popliteal arterin terminal dalını iskeletleştirin ve dağlayın. Tibial kemik açığa olana kadar gastrocnemius, soleus, tibialis ön ve pazı femoris kaslarını dağlayıp kesin.

Sağ kasık kırışıklığında 2,5 santimetrelik bir kesi yapın ve kasık yağ yastığını parçalara ayrıştırın. Kasık bağını kavramak için bir balık kancası retraktörü kullanın. Kasık yağ yastığını sıkma tokaları ile distally tutun ve femoral damarları açığa çıkarmak için yağ yastığını geri alın.

Femoral damarları parçalara ayırın, Murphy dallarını kişiselleştirin ve 8/0 naylon bağlarla ligat edin. 27.5'lik bir iğne kullanarak penis dorsal damarındaki heparini enjekte ederek donör sıçanı heparinize edin. Kalça çevresindeki deri kesisini tamamlayın.

Biceps femoris ve gluteus superficialis kaslarını dağlamak için bipolar tokmakları kullanın, sonra orta uyluk kemiği uzunluğunda siyatik siniri dağlayın ve kesin. Femur proksimal olarak arka femoral kret seviyesinde ortaya çıkın ve femoral damarları kasık bağı seviyesinde naylon bağlarla lige edin. Femoral arterde ligatürün hemen altında bir arteriotomi gerçekleştirin ve 24 gauge anjiyokatteri yerleştirmek için genişle.

Uyluk kemiğinin ön tarafını ortaya çıkarmak için pedilenin altındaki kalan kası dağlatın ve kesin. Kaval kemiğini proksimal olarak kesmek ve uyluk kemiğini mümkün olduğunca distal olarak kesmek için kemik kesiciyi kullanın. Net bir venöz çıkış elde etmek için kısmi arkaliği iki mililitre heparin salin ile yıkayın.

Mikrovasküler transfere kadar arkalığı steril bir gazlı bezle buza yerleştirin. Kasık yağ yastığını parçalara ayrıştırın ve femoral damarları açığa çıkarmak için kasık yağ yastığını distal olarak yaslayın. Kasık bağını geri çekmek için bir kanca kullanın ve kasık yağ yastığını distal olarak tutmak için sıkma tokaları kullanın.

Femoral damarları parçalara ayırın, Murphy dallarını kişiselleştirin ve gösterildiği gibi naylon bağlarla ligat. Her iki damarı da naylon bağlar kullanarak epigastrik damarların üzerinde ligat edin. Yaklaşık kelepçeleri proksimally yerleştirin, damar lensini genişletin ve heparin salin ile durulayın.

Sol kanatta kalçanın üzerinde bir kesi yapın ve kasık kırışıklığına deri altı bir tünel ile deri altı bir cep oluşturun. Kısmi uzuv ve kasık yağ yastığının proksimal kısmını mikrovasküler transfer için deri altı tünelinden geçirin. Naylon dikişler kullanarak venöz ve arteriyel anastomozları gerçekleştirin.

Her iki yaklaşık kelepçeyi de çıkarın ve uzuvların yeniden uzasını gözlemleyin. Her anastomozun açıklığını değerlendirmek için her iki damarda bir sağım testi gerçekleştirin. Nakledilen uzvun medial tarafında boyuna bir cilt kesisi yapın ve grefti yerleştirin.

Greftin fazla derisini çıkarın ve emilebilir 4/0 dikişler kullanarak yarayı ayrı dikişler ve çalışan bir dikişle kapatın. Nakledilen uzuv ve alıcının kasık yağ pedlerini iki ayrı emilebilir dikiş kullanarak birlikte dikin ve mikrovasküler anastomozun son kontrolünden sonra kasık kırışıklığını kapatın. Heterotopik hindlimb modelinin evrimi çalışmanın sonuna kadar izlendi.

Saç büyümesi ameliyat sonrası ilk hafta gözlendi ve iki hafta sonra büken geri çekilme ortaya çıktı. Vasküler kompozit allotransplantasyon yetmezliği mikrovasküler tromboz nedeniyle ameliyat sonrası ilk haftada ortaya çıkabilir. Venöz tromboz, vakaların% 20'sinde erken ötanazinin nedeniydi ve bunların hepsi ameliyat sonrası beşinci günden önce meydana geldi.

Cilt mavi görünüyordu ve her geçen gün daha da koyulaştı. Kendi kendine sakatlama, anlamsız greftlerde ciddi bir endişe kaynağıdır ve genellikle ameliyat sonrası ikinci ve yedinci gün arasında ortaya çıkar. Greft yüzeyinin üçte birinden daha azıyla sınırlıysa ve sadece ciltle ilgiliyse, emilemez dikişler kullanılarak cerrahi debridman ve dikiş personel veteriner hekimle tartışılabilir.

Kendi kendini sakatlamanın önlenmesi, ameliyat sonrası yedinci güne kadar boyuna dikilmiş bir e-yaka kullanılmasına ve hayvanın cerrahi yaralarındaki herhangi bir kan veya kabuğun temizlenmesine dayanır. Greftin birden fazla katmanının şiddetli otofajisi, hayvanın ötanazisine yol açar. Dermal kistler ameliyat sonrası 14 gün sonra, bazen fistülden önce bir kese nekrotik merkezle ortaya çıktı.

Greft yerleşiminin hayvanın ambülatör olmasını engellememesini ve pedilenin greft inset sırasında bükülmemesini veya sıkı olmamasını sağlamak çok önemlidir. Ekibimiz nakil öncesi temin edilen uzuvlarda koruma çalışmaları yaptı. Farklı sürelerde statik soğuk hava deposunun etkileri ve farklı uzuv perfüzyon protokolleri değerlendirilmiştir.