Name: Kemirgenlerde Heterotopik Kalp Kapağı Transplantasyonu için Basitleştirilmiş Bir Model (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-09-21T14:30:00.000+00:00
Duration: 6 min 33 s
Description: Öğrenin, kemirgenlerde aortik kapak yaprakçıklarının böbrek kapsülü altına heterotopik transplantasyonu için basitleştirilmiş bir yöntem. Bu teknik, kalp kapağı transplantasyon immünbiyolojisini incelemeyi kolaylaştırır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Şekil 1, biorender.com ile oluşturulmuştur. Bu çalışma kısmen TKR'ye AATS Vakfı Cerrahi Araştırmacı Programı, Güney Carolina Tıp Üniversitesi Pediatri Bölümü tarafından TKR'ye düzenlenen Çocuk Mükemmellik Fonu, TKR'ye bir Emerson Gül Kalp Vakfı hibesi, Senatör Paul Campbell'ın TKR'ye Hayırseverliği, JHK ve BG'ye Nih-nhlbi Kurumsal Doktora Sonrası Eğitim Hibeleri (T32 HL-007260), ve Güney Carolina Tıp Üniversitesi Tıp Fakültesi MAH'a Stajyer Öncesi FLEX Araştırma Fonu.

Çalışma, Ulusal Sağlık Enstitüleri Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Kılavuzu'nu takiben Hayvan Araştırmaları Komitesi tarafından onaylandı.
1. Hayvan modeli hakkında bilgi (Sıçanlar)
<ol><li>Tüm cerrahi prosedürler için 20 kata kadar büyütmeye sahip bir ameliyat mikroskobu kullanın ( Malzeme Tablosuna bakınız).</li>
	<li>Deney için gerektiğinde nakiller için sinjenik (Lewis-Lewis gibi) veya allojenik (Lewis-Brown Norveç gibi) suşlar kullanın.</li>
	<li>Deneysel soru için uygun olan 5-7 haftalık ve vücut ağırlığı 100-200 g arasındaki sıçanları kullanın.</li>
</ol>2. Kürkün çıkarılması, cildin hazırlanması ve anestezi
<ol><li>Tüm işlemleri steril koşullar altında gerçekleştirin. NOT: Adım, özel bir cerrahi alanda ve steril koşullar altında gerçekleştirilir.</li>
	<li>Sıçanları anestezik bir indüksiyon odasına yerleştirin ve oksijende% 5 izofluran ile anesteziyi indükleyin. İşlem boyunca oksijende% 3.5 izofluran ile anesteziyi sürdürün.</li>
	<li>Donör operasyonu için, kürk makaslarını kullanarak sıçanın kürkünü göbek kemiğinden sternal çentiğe. Alıcı operasyonu için, saçları kaburgalardan pelvise kadar posterior aksiller çizgideki cerrahi alan üzerinden kesin. Daha sonra, cildi cerrahi bir dezenfektan ile hazırlayın.</li>
	<li>Prosedüre başlamadan önce cerrahi bir anestezi düzlemi edinin. Sıçanın ayak parmaklarını forseps ile sıkıca sıkıştırarak yeterli anestezi derinliğini onaylayın. Sıçan ağrıya çekilirse, anesteziyi gerektiği gibi titre edin.</li>
	<li>İşlem boyunca solunum hızını ve anestezi derinliğini klinik olarak izleyin; izofluran seviyesi, 55-65 nefes / dak solunum hızını korumak için gerektiği gibi ayarlanır.</li>
</ol>3. Donör operasyonu
<ol><li>Sıçanı adım 2'de belirtildiği gibi hazırlayın ve anestezi altına alın. Diseksiyon makası kullanarak cildi ksifoidden sternal çentiğe. Kalbe optimal erişim sağlanana kadar sternumun her iki tarafındaki kaburgaları keserek sternektomi yapın.</li>
	<li>Sol atriyuma 100 U/100 g enjeksiyonla sıçanı heparize edin.</li>
	<li>Donörü exsanguination yoluyla kurban edin.</li>
	<li>Büyük damarların görselleştirilmesini iyileştirmek için timusu tüketin. Daha sonra, kalbi innominat arter seviyesine kadar yükselen aort ile blok halinde çıkarın.</li>
</ol>4. Aort kapak broşürlerinin hazırlanması
<ol><li>Donör kalbini kardiektomiden hemen sonra steril bir Petri kabına yerleştirin. Donör kalbini buz gibi soğuk bir soğuk hava deposu tamponunda inceleyin (bkz.</li>
	<li>Forseps ve Vannas yay makası kullanarak, aort kapağına proksimal 1 mm'lik bir ventriküler manşet ile sadece aort kökü kalana kadar donör kalbi diseke edin.</li>
	<li>Üç broşürü de görselleştirmek için sol ve koroner olmayan sinüsler arasındaki Valsalva Sinüsünü açmak için uzunlamasına bir kesim yaparak aort kapağını açın. NOT: Kesim, Valsalva Sinüsünün tüm uzunluğu olmalıdır. Gerçek boyutlar sıçanın boyutuna bağlıdır.</li>
	<li>Her aort kapak broşürünü ayrı ayrı tüketin. Spesifik olarak, broşürün kenarını kavramak için künt forseps kullanın ve bir komisüsten annulusa ve daha sonra bir komissureye doğru keserek broşürü çıkarmak için Vannas yaylı makas kullanın. NOT: Kapak endotel hücrelerinin bozulmasını en aza indirmek için broşürün sadece kenarını kavramaya özellikle dikkat edin.</li>
	<li>Broşür eksizyonunu takiben numuneleri, alıcı sıçana implante edilmeye hazır olana kadar buz gibi soğuk depo tampon çözeltisinde saklayın. Tüm broşürleri soğuk hava deposundan 4 saat içinde implante edin.</li>
</ol>5. Alıcının çalışması
<ol><li>Sıçanı adım 2'de belirtildiği gibi hazırlayın ve anestezi altına alın. Ameliyatı gerçekleştirmek için 36-38 ° C'de tutulan bir ısıtma yastığı kullanın.</li>
	<li>Buprenorfin (deri altından 0.03 mg/kg) ameliyattan önce tüm alıcı sıçanlara ve ağrıyı hafifletmek için gerektiğinde ameliyat sonrası her 6-12 saatte bir uygulayın.</li>
	<li>Sol böbreğe erişmek için sıçanı sağ lateral yaslanmış pozisyona yerleştirin. NOT: Sol böbrek, sağ böbreğe göre daha kaudal pozisyonda olması nedeniyle tercih edilir.</li>
	<li>Makas kullanarak yan taraftaki cildi uzunlamasına 1 inç üzerinde kesin. NOT: İşlem sırasında böbreğin karın boşluğuna geri çekilmesini önlemek için yeterli gerginlik sağlamak için kesi böbreğin boyutundan daha küçük kalmalıdır.</li>
	<li>Benzer şekilde, altta yatan karın duvarını kesin.</li>
	<li>Böbreği dışsallaştırın<ol>
<li>Başparmak ve işaret parmağını kullanarak, böbreğin kaudal kutbunu karın ve cilt insizyonundan kaldırmak için kavisli forseps kullanırken dorsal ve ventralal olarak hafif basınç uygulayın. Böbreğin kraniyal ucunu benzer şekilde dışsallaştırın.</li>
		<li>Alternatif olarak, böbrek perirenal yağın kavranması ve hafif gerginlikle yukarı doğru çekilmesiyle dışsallaştırılabilir. NOT: Böbreği veya böbrek damarlarını doğrudan kavramamaya dikkat edin.</li>
		<li>Böbrek dışsallaştırıldıktan sonra, böbreğe damlatılmış ılık salin ile nemli tutun.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Bir alt kapsüler cep oluşturun.<ol>
<li>Bir set künt forseps kullanarak böbrek kapsülüne hafifçe basınç uygulayın, böylece böbrek kapsülü altta yatan parankimden açıkça ayırt edilebilir. Aynı anda başka bir künt forseps seti kullanarak, kapsülü dikkatlice kavrayın ve kapsülde bir delik oluşturmak için yavaşça yukarı doğru çekin. NOT: Kapsülün hassas doğası nedeniyle, bu insizyonu oluşturmak için minimum kuvvet gereklidir.</li>
		<li>Aort kapak broşürünü yerleştirmek için ~ 2 mm'lik bir alan oluşturulana kadar insizyonu uzatmak için künt forseps kullanmaya devam edin.</li>
		<li>Bir forseps seti ile insizyonun kenarını kaldırırken ve böbrek kapsülünün altında künt bir probu ilerletirken, kapak broşüründen biraz daha büyük sığ bir subkapsüler cep geliştirin.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Aort kapağını subkapsüler cebe nakledin.<ol>
<li>Aort broşürünü soğuk hava deposundan alın ve cerrahi alana yerleştirin.</li>
		<li>Kenar fibröz kapsülü kaldırırken, aort broşürünü künt forseps ile subkapsüler cebe ilerletin. NOT: Dokunun insizyondan yeterince uzakta olduğundan emin olun, böylece kapsülün altına sıkıca sabitlenir. Altta yatan parankimin zarar görmesini veya fibröz kapsülün daha fazla yırtılmasını önlemek için özen gösterilmelidir.</li>
		<li>Böbrek kapsülündeki kesi açık bırakılabilir.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Kesi kenarlarına uygulanan karşı traksiyonu kullanarak böbreği nazikçe anatomik konumuna geri itin.</li>
	<li>Karın insizyonunu çalışan steril bir cerrahi dikişle kapatın. Cildi zımbalarla kapatın.</li>
	<li>Ameliyat sonrası bakım<ol>
<li>İşlemi takiben, sıçanı yiyecek ve suya erişimi olan bir ısıtma yastığı üzerinde temiz bir kafese yerleştirin.</li>
		<li>Rutin yara iyileşmesini ve ağrı veya sıkıntı belirtilerini değerlendirmek için hayvanı günlük olarak izleyin. Zımbaları 7-10 gün sonra çıkarın.</li>
	</ol>
</li>
</ol>6. Analiz için doku toplanması
<ol><li>Transplantasyondan sonra seçilen son noktalarda, ekssanguinasyon ile hayvanı ötenazileştirin. Spesifik olarak, medyan bir laparotomi yapın ve abdominal aortu oksijende% 5 izofluran altında transekte edin.</li>
	<li>Böbreği mobilize edin ve böbrek arterini, damarı ve üreteri makasla keserek eksize edin. NOT: Nakledilen broşürü içeren alanı kavramamaya dikkat edin.</li>
	<li>Böbreği gece boyunca formalin içine yerleştirin, parafine gömün ve istenen boyama için bölümlere ayırın. Örneği, böbrek kapsülü önden bakan ve böbrek parankimi arkaya bakan olacak şekilde yönlendirin.</li>
</ol>

<ol><li>Van Der Linde, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Birth+prevalence+of+congenital+heart+disease+worldwide%3A+A+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Birth prevalence of congenital heart disease worldwide: A systematic review and meta-analysis.</a> Journal of the American College of Cardiology. 58 (21), 2241-2247 (2011).</li>
<li>Jacobs, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reoperations+for+pediatric+and+congenital+heart+disease%3A+An+analysis+of+the+Society+of+Thoracic+Surgeons+%28STS%29+congenital+heart+surgery+database%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%3A+Pediatric+Cardiac+Surgery+Annual%22%5BJournal%5D)">Reoperations for pediatric and congenital heart disease: An analysis of the Society of Thoracic Surgeons (STS) congenital heart surgery database.</a> Seminars in Thoracic and Cardiovascular Surgery: Pediatric Cardiac Surgery Annual. 17 (1), 2-8 (2014).</li>
<li>Syedain, Z. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pediatric+tri-tube+valved+conduits+made+from+fibroblast-produced+extracellular+matrix+evaluated+over+52+weeks+in+growing+lambs%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Pediatric tri-tube valved conduits made from fibroblast-produced extracellular matrix evaluated over 52 weeks in growing lambs.</a> Science Translational Medicine. 13 (585), 1-16 (2021).</li>
<li>Khan, M. S., Samayoa, A. X., Chen, D. W., Petit, C. J., Fraser, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contemporary+experience+with+surgical+treatment+of+aortic+valve+disease+in+children%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Contemporary experience with surgical treatment of aortic valve disease in children.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 146 (3), 512-521 (2013).</li>
<li>Boyd, R., Parisi, F., Kalfa, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((State+of+the+art%3A+Tissue+engineering+in+congenital+heart+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">State of the art: Tissue engineering in congenital heart surgery.</a> Seminars in Thoracic and Cardiovascular Surgery. 31 (4), 807-817 (2019).</li>
<li>Feins, E. N., Emani, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expandable+valves%2C+annuloplasty+rings%2C+shunts%2C+and+bands+for+growing+children%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%3A+Pediatric+Cardiac+Surgery+Annual%22%5BJournal%5D)">Expandable valves, annuloplasty rings, shunts, and bands for growing children.</a> Seminars in Thoracic and Cardiovascular Surgery: Pediatric Cardiac Surgery Annual. 23, 17-23 (2020).</li>
<li>Lintas, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TCT-795+Human+cell+derived+off-the-shelf+tissue+engineered+heart+valves+for+next+generation+transcatheter+aortic+valve+replacement%3A+a+proof-of-concept+study+in+adult+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">TCT-795 Human cell derived off-the-shelf tissue engineered heart valves for next generation transcatheter aortic valve replacement: a proof-of-concept study in adult sheep.</a> Journal of the American College of Cardiology. 70 (18), 271(2017).</li>
<li>Blum, K. M., Drews, J. D., Breuer, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-engineered+heart+valves%3A+A+call+for+mechanistic+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering+Part+B%3A+Reviews%22%5BJournal%5D)">Tissue-engineered heart valves: A call for mechanistic studies.</a> Tissue Engineering Part B: Reviews. 24 (3), 240-253 (2018).</li>
<li>Bernstein, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+growth+after+pediatric+heart+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Cardiac growth after pediatric heart transplantation.</a> Circulation. 85 (4), 1433-1439 (1992).</li>
<li>Delmo Walter, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adaptive+growth+and+remodeling+of+transplanted+hearts+in+children%5BTitle%5D)+AND+%22Europeon+Journal+of+Cardiothoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Adaptive growth and remodeling of transplanted hearts in children.</a> Europeon Journal of Cardiothoracic Surgery. 40 (6), 1374-1383 (2011).</li>
<li>Simon, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Growth+of+the+pulmonary+autograft+after+the+Ross+operation+in+childhood%5BTitle%5D)+AND+%22Europeon+Journal+of+Cardiothoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Growth of the pulmonary autograft after the Ross operation in childhood.</a> Europeon Journal of Cardiothoracic Surgery. 19 (2), 118-121 (2001).</li>
<li>Oei, F. B. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+size-matching+heterotopic+aortic+valve+implantation+model+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">A size-matching heterotopic aortic valve implantation model in the rat.</a> Journal of Surgical Research. 87 (2), 239-244 (1999).</li>
<li>Oei, F. B. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+valve+dysfunction+resulting+from+cellular+rejection+in+a+novel+heterotopic+transplantation+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+International%22%5BJournal%5D)">Heart valve dysfunction resulting from cellular rejection in a novel heterotopic transplantation rat model.</a> Transplant International. 13, SUPPL. 1 (2000).</li>
<li>El Khatib, H., Lupinetti, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antigenicity+of+fresh+and+cryopreserved+rat+valve+allografts%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Antigenicity of fresh and cryopreserved rat valve allografts.</a> Transplantation. 49 (4), 765-767 (1990).</li>
<li>Yankah, A. C., Wottge, H. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Allograft+conduit+wall+calcification+in+a+model+of+chronic+arterial+graft+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiac+Surgery%22%5BJournal%5D)">Allograft conduit wall calcification in a model of chronic arterial graft rejection.</a> Journal of Cardiac Surgery. 12 (2), 86-92 (1997).</li>
<li>Moustapha, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aortic+valve+grafts+in+the+rat%3A+Evidence+for+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascualr+Surgery%22%5BJournal%5D)">Aortic valve grafts in the rat: Evidence for rejection.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascualr Surgery. 114 (6), 891-902 (1997).</li>
<li>Légaré, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+of+allograft+heart+valve+failure+in+a+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascualr+Surgery%22%5BJournal%5D)">Prevention of allograft heart valve failure in a rat model.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascualr Surgery. 122 (2), 310-317 (2001).</li>
<li>Legare, J. F., Lee, T. D. G., Creaser, K., Ross, D. B., Green, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((T+lymphocytes+mediate+leaflet+destruction+and+allograft+aortic+valve+failure+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22The+Annals+of+Thoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">T lymphocytes mediate leaflet destruction and allograft aortic valve failure in rats.</a> The Annals of Thoracic Surgery. 70 (4), 1238-1245 (2000).</li>
<li>Niimi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+technique+for+heterotopic+cardiac+transplantation+in+mice%3A+Experience+of+3000+operations+by+one+surgeon%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Heart+and+Lung+Transplantation%22%5BJournal%5D)">The technique for heterotopic cardiac transplantation in mice: Experience of 3000 operations by one surgeon.</a> Journal of Heart and Lung Transplantation. 20 (10), 1123-1128 (2001).</li>
<li>Burgin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kidney+Subcapsular+Allograft+Transplants+as+a+Model+to+Test+Virus-Derived+Chemokine-Modulating+Proteins+as+Therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+molecular+biology%22%5BJournal%5D)">Kidney Subcapsular Allograft Transplants as a Model to Test Virus-Derived Chemokine-Modulating Proteins as Therapeutics.</a> Methods in molecular biology. 2225, Clifton, N.J. 257-273 (2021).</li>
<li>Foglia, R. P., DiPreta, J., Donahoe, P. K., Statter, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fetal+allograft+survival+in+immunocompetent+recipients+is+age+dependent+and+organ+specific%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Fetal allograft survival in immunocompetent recipients is age dependent and organ specific.</a> Annals of Surgery. 204 (4), 402-410 (1986).</li>
<li>Cunha, G. R., Baskin, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+sub-renal+capsule+transplantation+in+developmental+biology%5BTitle%5D)+AND+%22Differentiation%22%5BJournal%5D)">Use of sub-renal capsule transplantation in developmental biology.</a> Differentiation. 91 (4-5), 4-9 (2016).</li>
<li>Hori, J., Joyce, N., Streilein, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epithelium-deficient+corneal+allografts+display+immune+privilege+beneath+the+kidney+capsule%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Opthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Epithelium-deficient corneal allografts display immune privilege beneath the kidney capsule.</a> Investigative Opthalmology & Visual Science. 41 (2), 443-452 (2000).</li>
<li>Mandel, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((transplantation+of+organ+cultured+fetal+pig+pancreas+in+non-obese+diabetic+%28NOD%29+mice+and+primates+%28Macaca+fascicularis%29%5BTitle%5D)+AND+%22Xenotransplantation%22%5BJournal%5D)">transplantation of organ cultured fetal pig pancreas in non-obese diabetic (NOD) mice and primates (Macaca fascicularis).</a> Xenotransplantation. 2 (3), 128-132 (1995).</li>
<li>Ricordi, C., Flye, M. W., Lacy, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+subcapsular+transplantation+of+clusters+of+hepatocytes+in+conjunction+with+pancreatic+islets%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Renal subcapsular transplantation of clusters of hepatocytes in conjunction with pancreatic islets.</a> Transplantation. 45 (6), 1148-1150 (1988).</li>
<li>Shultz, L. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subcapsular+transplantation+of+tissue+in+the+kidney%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harbor+Protocols%22%5BJournal%5D)">Subcapsular transplantation of tissue in the kidney.</a> Cold Spring Harbor Protocols. 2014 (7), 737-740 (2014).</li>
<li>Vanden Berg, C. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+subcapsular+transplantation+of+PSC-derived+kidney+organoids+induces+neo-vasculogenesis+and+significant+glomerular+and+tubular+maturation+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">Renal subcapsular transplantation of PSC-derived kidney organoids induces neo-vasculogenesis and significant glomerular and tubular maturation in vivo.</a> Stem Cell Reports. 10 (3), 751-765 (2018).</li>
<li>Mitchell, R. N., Jonas, R. A., Schoen, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathology+of+explanted+cryopreserved+allograft+heart+valves%3A+Comparison+with+aortic+valves+from+orthotopic+heart+transplants%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Thoracic+and+Cardiovasular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Pathology of explanted cryopreserved allograft heart valves: Comparison with aortic valves from orthotopic heart transplants.</a> Journal of Thoracic and Cardiovasular Surgery. 115 (1), 118-127 (1998).</li>
<li>Valante, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+aortic+valve+after+heart+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Thoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">The aortic valve after heart transplantation.</a> Annals of Thoracic Surgery. 60, SUPPL. 2 (1995).</li>
<li>O'Brien, M. F., Stafford, E. G., Gardner, M. A. H., Pohlner, P. G., McGiffin, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+aortic+valve+replacement+with+viable+cryopreserved+and+fresh+allograft+valves%2C+with+a+note+on+chromosomal+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">A comparison of aortic valve replacement with viable cryopreserved and fresh allograft valves, with a note on chromosomal studies.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 94 (6), 812-823 (1987).</li>
<li>Ng, T. F., Osawa, H., Hori, J., Young, M. J., Streilein, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Allogeneic+neonatal+neuronal+retina+grafts+display+partial+immune+privilege+in+the+subcapsular+space+of+the+kidney%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">Allogeneic neonatal neuronal retina grafts display partial immune privilege in the subcapsular space of the kidney.</a> The Journal of Immunology. 169 (10), 5601-5606 (2002).</li>
<li>Heslop, B. F., Wilson, S. E., Hardy, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antigenicity+of+aortic+valve+allografts%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Antigenicity of aortic valve allografts.</a> Annals of Surgery. 177 (3), 301-306 (1973).</li>
<li>Steinmuller, D., Weiner, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evocation+and+persistence+of+transplantation+immunity+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Evocation and persistence of transplantation immunity in rats.</a> Transplantation. 1 (1), 97-106 (1963).</li>
<li>Billingham, R. E., Brent, L., Brown, J. B., Medawar, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time+of+onset+and+duration+of+transplantation+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Plastic+and+Reconstructive+Surgery%22%5BJournal%5D)">Time of onset and duration of transplantation immunity.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 24 (1), 410-413 (1959).</li>
<li>Tector, A. J., Boyd, W. C., Korns, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aortic+valve+allograft+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Aortic valve allograft rejection.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 62 (4), 592-601 (1971).</li>
<li>Sugimura, Y., Schmidt, A. K., Lichtenberg, A., Akhyari, P., Assmann, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rat+model+for+the+in+vivo+assessment+of+biological+and+tissue-engineered+valvular+and+vascular+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering+Methods+%28Part+C%29%22%5BJournal%5D)">A rat model for the in vivo assessment of biological and tissue-engineered valvular and vascular grafts.</a> Tissue Engineering Methods (Part C). 23 (12), 982-994 (2017).</li>
</ol>

Yazarlar, araştırmanın potansiyel bir çıkar çatışması olarak yorumlanabilecek herhangi bir ticari veya finansal ilişkinin yokluğunda yapıldığını beyan etmektedir.

Önemi ve potansiyel uygulamaları Mekanik ve biyoprotez kalp kapakları, kapak replasmanı gerektiren yetişkin hastalarda rutin olarak kullanılırken, bu kapaklar büyüme potansiyelinden yoksundur ve bu nedenle pediatrik hastalar için yetersiz kalmaktadır. Kalp kapağı transplantasyonu, yenidoğanlar ve konjenital kalp hastalığı olan bebekler için büyüyen kalp kapağı replasmanları sağlamak için tasarlanmış deneysel bir operasyondur. Bununla birlikte, geleneksel kalp nakillerinin transplant immünobiyolojisind...

Konjenital kalp kusurları, insanlarda en sık görülen konjenital sakatlıktır ve her yıl 1000 canlı doğan çocuktan 7'sini etkilemektedir1. Çeşitli mekanik ve biyoprotez kapakların rutin olarak implante edildiği yetişkin hastaların aksine, pediatrik hastaların şu anda kapak replasmanı için iyi bir seçeneği yoktur. Bu geleneksel implantlar, alıcı çocuklarda büyüme potansiyeline sahip değildir. Sonuç olarak, kalp kapağı implantlarını çocuklar büyüdükçe art arda daha büyük versiyonlarla değiştirmek için morbid yeniden operasyonlar gereklidir, etkilenen çocuklar genellikle yaşamları boyunca beş veya daha fazla açık kalp ameliyatına ihtiyaç duyarlar 2,3. Çalışmalar, müdahale veya ölümden kurtulma özgürlüğünün bebekler için daha büyük çocuklardan daha zayıf olduğunu, protez kalp kapakçıkları olan bebeklerin% 60'ının ilk ameliyatlarından sonraki 3 yıl içinde yeniden ameliyat veya ölümle karşı karşıya kaldığını göstermiştir4. Bu nedenle, pediatrik hastalarda büyüyebilen ve işlevini koruyabilen bir kalp kapağı vermek için acil bir ihtiyaç vardır.
On yıllar boyunca, büyüyen kalp kapağı replasmanları sağlama girişimleri doku mühendisliği ve kök hücrelere odaklanmıştır. Ancak bu kapakların kliniğe çevrilmesi girişimleri şu ana kadar başarısız olmuştur 5,6,7,8. Bunu ele almak için, bir kalp kapağı transplantasyonu, kendi kendini onarma ve trombogenezden kaçınma yeteneğine sahip büyüyen kalp kapağı replasmanları sağlamak için daha yaratıcı bir operasyon olarak önerilmektedir. Tüm kalbin nakli yerine, sadece kalp kapağı nakledilir ve daha sonra geleneksel kalp nakillerine veya Ross pulmoner imzası 9,10,11'e benzer şekilde alıcı çocukla birlikte büyür. Ameliyat sonrasında, alıcı çocuklar, kapağın büyümesi artık gerekli olmadığında, nakledilen kapak yetişkin boyutunda bir mekanik protez ile değiştirilene kadar immünsüpresyon alacaktır. Bununla birlikte, kalp kapağı nakli greftlerinin nakil biyolojisi keşfedilmemiştir. Bu nedenle, bu yeni nakil türünü incelemek için hayvan modellerine ihtiyaç vardır.
Aort kapağının abdominal aort 12,13,14,15,16,17,18 içine heterotopik transplantasyonu için daha önce birkaç sıçan modeli tanımlanmıştır. Bununla birlikte, bu modeller yasaklayıcı bir şekilde zordur ve genellikle eğitimli cerrahların başarılı bir şekilde çalışmasını gerektirir. Ek olarak, pahalı ve zaman alıcı19. Kalp kapağı nakillerinin immünobiyolojisini incelemek için daha basit bir hayvan modeli oluşturmak için yeni bir sıçan modeli geliştirilmiştir. Tek aort kapak broşürleri eksize edilir ve renal subkapsüler boşluğa yerleştirilir. Böbrek, dolaşımdaki bağışıklık hücrelerine erişimi olan yüksek oranda vaskülarize olduğu için özellikle nakil reddini incelemek için uygundur20,21. Diğerleri pankreas, karaciğer, böbrek ve kornea 22,23,24,25,26,27 gibi diğer allogreft nakillerinin transplantasyon biyolojisini incelemek için renal subkapsüler bir model kullanmış olsa da, bu pozisyonda kalp dokusunun transplantasyonunun ilk tanımıdır. Burada, kalp kapağı transplantasyonunun transplantasyon immünolojisinin incelenmesinde ileriye doğru önemli bir adım sağlayan transplantasyon tekniği açıklanmaktadır.

<table><tbody><tr><td>% 0.9 Sodyum Klor, USP</td><td>Baxter</td><td>NDC 0338-0048-04</td><td></td></tr><tr><td>4-0 Poliglaktin 910</td><td>Ethicon</td><td>J415H%</td><td></td></tr><tr><td>7.5 Povidon-İyot</td><td>CareFusion</td><td>29904-004</td><td></td></tr>% <tr><td>70 ETOH</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP82031GAL</td><td></td></tr><tr><td>Anestezi indüksiyon odası</td><td>Harvard Aparatı</td><td>75-2030</td><td>Hava geçirmez indükton odası sıçanlar</td></tr><tr><td>Anestezi makinesi</td><td>Harvard Aparatı</td><td>75-0238</td><td>Pasif Süpürücü Anestezi Maskeli Mobil Anestezi Sistemi</td></tr><tr><td></td><td>Harvard Aparatı</td><td>59-8255</td><td>Sıçan anestezi maskesi</td></tr><tr><td>Kahverengi Norveç Sıçanlar (BN/Crl)</td><td>Charles Nehri</td><td>Suş Kodu 091</td><td>Erkek, 5-7 hafta, 100-200 g</td></tr><tr><td>Buprenorfin Hidroklorür, 0.3 mg/mL</td><td>PAR İlaç</td><td>NDC 42023-179-05</td><td>0.03 mg / kg, deri altından uygulanır</td></tr><tr><td>Elektrikli saç kesme makineleri</td><td>WAHL</td><td>79434</td><td></td></tr><tr><td>Elektrikli Isıtma Yastığı</td><td>Harvard Aparatı</td><td>72-0492</td><td>36-38 ° C'de muhafaza edilir; C</td></tr><tr><td>Heparin</td><td>Sagent İlaç</td><td>NDC 25021-400-10</td><td>Sol atriyuma 100U / 100g enjeksiyon</td></tr><tr><td>İnsülin Şırıngası, 1 mL</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-841-33</td><td></td></tr><tr><td>İris forseps kavisli</td><td>Dünya Hassas Aletler</td><td>15917</td><td></td></tr><tr><td>İris forseps düz</td><td>Dünya Hassas Aletler</td><td>15916</td><td></td></tr><tr><td>İzofluran, USP</td><td>Piramal Yoğun Bakım</td><td>NDC 66794-017-25</td><td>Oksijende% 5 izofluransta indüklenir ve oksijende% 3.5 izofluran ile korunur</td></tr><tr><td>Lewis Sıçanları (LEW / Crl)</td> <td>Charles River</td><td>Strain Code 004</td><td>Erkek, 5-7 hafta, 100-200 g</td></tr><tr><td>Mikro forseps</td><td>World Precision Instruments</td><td>500233</td><td>Dumont #5</td></tr><tr><td>Mikro makas</td><td>World Precision Instruments</td><td>501930</td><td>Yaylı Vannas Makas</td></tr><tr><td>İğne Sürücü</td><td>Dünyası Hassas Aletler</td><td>500226</td><td>Ryder İğne Sürücü</td></tr><tr><td>Çalışma mikroskobu</td><td>AmScope</td><td>SM-3BZ-80S</td><td>3.5x - 90x Stereo Mikroskop</td></tr><tr><td>Petri Dish</td><td>Fisher Scientific</td><td>FB0875714</td><td></td></tr><tr><td>Petrolatum oftalmik merhem</td><td>Dechra</td><td>NDC 17033-211-38</td><td></td></tr><tr><td>Cilt zımbaları</td><td>Ethicon</td><td>PXR35</td><td>Proximate 35</td></tr><tr><td>Steril pamuklu çubuklar</td><td>Puritan</td><td>25-806 1WC</td><td></td></tr><tr><td>Steril gazlı bez süngerler</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-037-902</td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi Makas</td><td>Dünyası Hassas Aletler</td><td>1962C</td><td>Metzenbaum Makas</td></tr><tr><td>Wisconsin Üniversitesi Tamponu (Servator B)</td><td>S.A.L.F S.p.A.</td><td>6484A1</td><td>4 &°C'de saklanır; Ç</td></tr></tbody></table>

kemirgenlerde heterotopik kalp kapağı transplantasyonu için basitleştirilmiş bir model

A Simplified Model for Heterotopic Heart Valve Transplantation in Rodents

Çocuklarda büyüyebilecek kalp kapağı replasmanları için acil bir klinik ihtiyaç vardır. Kalp kapağı transplantasyonu, antikoagülasyona gerek kalmadan somatik büyüme yeteneğine sahip dayanıklı kalp kapakçıkları sağlama potansiyeline sahip yeni bir nakil türü olarak önerilmektedir. Bununla birlikte, kalp kapağı nakillerinin immünobiyolojisi keşfedilmemiş kalmakta ve bu yeni nakil türünü incelemek için hayvan modellerine duyulan ihtiyacı vurgulamaktadır. Abdominal aort içine heterotopik aort kapak transplantasyonu için önceki sıçan modelleri, teknik olarak zor ve maliyetli olmalarına rağmen tanımlanmıştır. Bu zorluğun üstesinden gelmek için, kalp kapağı nakli immünobiyolojisini incelemek için pratik ve daha basit bir yöntem olarak kemirgenlerde bir renal subkapsüler nakil modeli geliştirilmiştir. Bu modelde, tek bir aort kapak broşürü toplanır ve renal subkapsüler boşluğa yerleştirilir. Böbreğe kolayca erişilebilir ve nakledilen doku, iyi vaskülarize edilmiş ve çeşitli doku boyutlarını barındırabilen bir subkapsüler boşlukta güvenli bir şekilde bulunur. Ayrıca, tek bir sıçan üç donör aort broşürü sağlayabildiğinden ve tek bir böbrek nakledilen doku için birden fazla bölge sağlayabildiğinden, belirli bir çalışma için daha az sıçan gereklidir. Burada, kalp kapağı transplantasyonunun transplantasyon immünolojisinin incelenmesinde ileriye doğru önemli bir adım sağlayan transplantasyon tekniği açıklanmaktadır.

Sıçan modeli için deneysel tasarımın grafiksel bir tasviri sağlanmıştır (Şekil 1). Ek olarak, donörün kalbinden diseke edilmiş bir aort kökü ve implantasyon için hazırlanan bireysel bir aort kapak broşürü de Şekil 2'de gösterilmiştir. Daha sonra, implantasyon için böbrek kapsülü altındaki aort kapak broşürünün konumunun temsili bir görüntüsü Şekil 3A'da ve alıcı sıçan içinde 3, 7 ve 28 gün sonra gösterilmiştir (...

Bu protokol, kalp kapaklarının alloreaktivitesinin incelenmesine izin vermek için renal kapsülün altına aort kapak broşürlerinin transplantasyonu için basit ve etkili bir yöntem tanımlamaktadır.

Kemirgenlerde Heterotopik Kalp Kapağı Transplantasyonu için Basitleştirilmiş Bir Model

There is an urgent clinical need for heart valve replacements that can grow in children. Heart valve transplantation is proposed as a new type of ...

Kalp kapağı transplantasyonu, antikoagülasyon gerektirmeden somatik büyüme yeteneğine sahip, dayanıklı kalp kapakçıkları sağlama potansiyeline sahip yeni bir nakil türü olarak önerilmektedir. Bu teknik, kalp kapağı nakli immünobiyolojisini incelemek için önceki yöntemlerden pratik ve daha basittir. Sıçanı uyuşturduktan sonra, cildi ksifoidden sternal çentiğe, kesmek için diseksiyon makaslarını kullanın.Ve kalbe optimal erişim sağlanana kadar sternuma yanal olan her iki taraftaki kaburgaları keserek sternektomi yapın. Heparin'i sol atriyuma enjekte edin. Sakralizasyon sonrası, büyük damarların görselleştirilmesini iyileştirmek için timüsü tüketin.Daha sonra innominat arter seviyesine kadar yükselen aort ile blok halindeki kalbi çıkarın. Donör kalbi kardiektomiden hemen sonra steril bir Petri kabına yerleştirdikten sonra, buz gibi soğuk, soğuk bir depo tamponunda, forseps ve Vannas Yay Makasını kullanarak kalbi diseke edin ve sadece aort kökü aort kapağına bir milimetre ventriküler manşet proksimalinde kalana kadar kalbi diseke edin. Aort kapağını açmak için, üç broşürü de görselleştirmek için sol ve koroner olmayan sinüsler arasındaki Valsalva sinüsünü açmak için uzunlamasına bir ke

a-simplified-model-for-heterotopic-heart-valve-transplantation

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Fare heterotopik kalp transplantasyonu modeli ret ve immün yanıt mekanizmaları eğitim için önemli bir yöntem olduğu birçok araştırmacı tarafından kanıtlanmıştır. Ancak, söz konusu teknikleri hala zorlu. Standart teknikler değiştirerek 1000 nakli ile daha fazla başarı elde ettiler.

Farelerde Heterotopik Kalp Nakli

Sıçangil modeli servikal kalp nakli immünolojik hem de iskemi reperfüzyon yaralanması çalışmasından için uygundur. Biz olmayan bir dikiş manşet tekniği kullanılarak prosedür değiştirilmiş ve bu yaklaşım ile 1.000 'den fazla başarılı nakli gerçekleştirildi.  Burada, videoyu tamamlamak için bu tekniğin ek ayrıntıları.

Modifiye Manşet Tekniği Sıçangiller Servikal Kalp Nakli Modeli

Farelerde kalplerin heterotopik nakli için mikrocerrahi prosedür için, donör toplama ve alıcı damar anastomozu için basitleştirilmiş yöntemler de dahil olmak üzere bir teknik gösterilmiştir.

Heterotopik Fare Kalp NAKLİ için Modifiye Yöntem

Doku mühendisliği kalp kapakçıklarında neotissue oluşumu ve darlık gelişimi altında yatan hücresel ve moleküler mekanizmaları anlamak için, heterotopik kalp kapakçığı nakli bir fare modeli geliştirilmiştir. Bir pulmoner kalp kapak heterotopik kalp nakli tekniği kullanılarak alıcıya nakil oldu.

Heterotopik Kalp Nakli bir Fare Modeli Kullanarak Pulmoner Vana Nakli

Manşet tekniği, küçük damarların teknik olarak zorlayıcı sütür anastomozlarından kaçınarak farelerde heterotopik servikal kalp nakli modelini kısaltır ve kolaylaştırır. Bu video makalesinde gösterilen teknik ayrıntılar, araştırmacıların bu modeli laboratuvarlarında kurmalarına izin vermelidir.

Farelerde Heterotopik Servikal Kalp Nakli

Kombine katı organ ve vaskülarize kompozit allotransplantasyonu incelemek için, servikal dikişsiz manşet tekniği kullanarak farelerde yeni bir heterotopik en blok göğüs duvarı, timus ve kalp nakli modelini açıklıyoruz.

Farelerde A Novel Mikrocerrahi Heterotopik Modeli, En Bloku Göğüs Duvarı, Thymus ve Kalp Nakli

Sıçanlarda heterotopik karın kalp transplantasyonunun bir modelini açıklayarak, basitleştirilmiş bir cerrahi yaklaşıma yol açan mevcut stratejilerde değişiklik ima ediyoruz. Ayrıca, hayati kardiyak kas hücrelerinin kulak içi enjeksiyonu ile yeni bir ret modeli tarif, sıçanlarda daha fazla nakil immünolojik analizler sağlayan.

Sıçanlarda Heterotopik Kalp ve Kardiyak Kas Hücre Nakli için İmmünolojik Model

Heterotopik abdominal fare kalp nakli modelinde kan devresi rekonstrüksiyonu için yeni bir teknik gösterilmiştir.

Abdominal Fare Kalp Nakli Modelinde Kan Devresi Rekonstrüksiyonu

Bu protokolde, kardiyak allogreft rejeksiyon mekanizmasını araştırmak için bir fare kalp nakli modeli kullanılmıştır. Bu heterotopik kalp nakli modelinde, modifiye Manşet tekniği kullanılarak kalp implantasyonunun servikal uçtan uca anastomozu ile operasyon etkinliği artırılır ve kalp greftlerinin sağkalımı sağlanır.

Fare Servikal Heterotopik Kalp Transplantasyon Modeli için Modifiye Manşet Tekniği

Bu çalışma, sıçanlarda yeni başlayanların öğrenebileceği ve uygulayabileceği tekrarlanabilir bir heterotopik abdominal kalp nakli tekniğini göstermektedir. Ek olarak, sıçanlarda yeni bir aort yetersizliği modeli, heterotopik abdominal kalp nakli yapılarak ve hasattan sonra bir kılavuz tel kullanılarak donörün aort kapağına zarar verilerek üretilir.

Modifiye Heterotopik Abdominal Kalp Transplantasyonu ve Sıçanlarda Yeni Bir Aort Yetersizliği Modeli

Bu protokol, sare servikal kalp nakli için basitleştirilmiş ve uçtan yana dikiş anastomozu tekniği sunarak nakil immünolojisini incelemek için sağlam ve tekrarlanabilir bir model sunar.

Nakil İmmünolojisini Çalışmak İçin Uçtan Yana Anastomoz Tekniği Kullanılarak Servikal Heterotopik Fare Kalp Nakli

Öğrenin, kemirgenlerde aortik kapak yaprakçıklarının böbrek kapsülü altına heterotopik transplantasyonu için basitleştirilmiş bir yöntem. Bu teknik, kalp kapağı transplantasyon immünbiyolojisini incelemeyi kolaylaştırır.

Kemirgenlerde Heterotopik Kalp Kapağı Transplantasyonu için Basitleştirilmiş Bir Model

Daha fazla video keşfet