Kemirgenlerde Heterotopik Kalp Kapağı Transplantasyonu için Basitleştirilmiş Bir Model

Kalp kapağı transplantasyonu, antikoagülasyon gerektirmeden somatik büyüme yeteneğine sahip, dayanıklı kalp kapakçıkları sağlama potansiyeline sahip yeni bir nakil türü olarak önerilmektedir. Bu teknik, kalp kapağı nakli immünobiyolojisini incelemek için önceki yöntemlerden pratik ve daha basittir. Sıçanı uyuşturduktan sonra, cildi ksifoidden sternal çentiğe, kesmek için diseksiyon makaslarını kullanın.

Ve kalbe optimal erişim sağlanana kadar sternuma yanal olan her iki taraftaki kaburgaları keserek sternektomi yapın. Heparin'i sol atriyuma enjekte edin. Sakralizasyon sonrası, büyük damarların görselleştirilmesini iyileştirmek için timüsü tüketin.

Daha sonra innominat arter seviyesine kadar yükselen aort ile blok halindeki kalbi çıkarın. Donör kalbi kardiektomiden hemen sonra steril bir Petri kabına yerleştirdikten sonra, buz gibi soğuk, soğuk bir depo tamponunda, forseps ve Vannas Yay Makasını kullanarak kalbi diseke edin ve sadece aort kökü aort kapağına bir milimetre ventriküler manşet proksimalinde kalana kadar kalbi diseke edin. Aort kapağını açmak için, üç broşürü de görselleştirmek için sol ve koroner olmayan sinüsler arasındaki Valsalva sinüsünü açmak için uzunlamasına bir kesim yapın.

Her bir aort kapak broşürünü ayrı ayrı tüketmek için, broşürün kenarını kavramak için künt forsepsleri kullanın ve Vannas Yaylı Makas'ı kullanarak broşürü bir komisüsten anulusa ve ardından bir sonraki komissureye doğru keserek kullanın. Eksize edilmiş broşürleri, alıcı sıçana implante edilmeye hazır olana kadar buz gibi soğuk depolama tampon çözeltisinde saklayın, ancak tüm broşürleri soğuk depolamadan sonraki dört saat içinde implante edin. Alıcı sıçan tamamen anestezi altına alındıktan sonra, ısıtma yastığı ile ameliyat boyunca vücut ısısını 36 ila 38 santigrat derecede tutun.

Daha sonra, sol böbreğe erişmek için sıçanı sağ yanal yaslanmış pozisyona yerleştirin. Buprenorfin'i ameliyattan önce alıcı sıçana deri altından uygulayın. Ve makası kullanarak cildi yan kısımdan uzunlamasına bir inç boyunca kesin.

Benzer şekilde, altta yatan karın duvarını kesin. Başparmak ve işaret parmağını kullanarak, kavisli forsepsleri kullanırken dorsal ve ventralal olarak hafif bir basınç uygulayın. Böbreğin kaudal kutbunu karın ve cilt insizyonundan kaldırın.

Böbreğin kraniyal ucunu benzer şekilde dışsallaştırın. Alternatif olarak, böbrek perirenal yağın kavranması ve hafif gerginlikle yukarı doğru çekilmesiyle dışsallaştırılabilir. Dışsallaştırıldıktan sonra, böbreğin üzerine sürülen ılık salin ile böbreği nemli tutun.

Subkapsüler bir cep oluşturmak için, bir set künt forseps kullanarak böbrek kapsülüne hafif basınç uygulayarak başlayın, böylece böbrek kapsülü altta yatan parankimden açıkça ayırt edilebilir. Aynı anda başka bir künt forseps seti kullanarak, kapsülü dikkatlice kavrayın ve kapsülde bir delik oluşturmak için yavaşça yukarı doğru çekin. Künt forsepslerle, aort kapak broşürünü yerleştirmek için yaklaşık iki milimetrelik bir boşluk oluşana kadar insizyonu uzatın.

Bir forseps seti ile insizyonun kenarını kaldırırken ve böbrek kapsülünün altında künt bir probu ilerletirken, kapak broşüründen biraz daha büyük sığ bir subkapsüler cep geliştirin. Aort broşürünü künt forseps ile subkapsül cebe doğru ilerleten kenar fibröz kapsülü kaldırarak alınan aort kapağının transplantasyonunu başlatın. Kesi ve böbrek kapsülü açık bırakılabilir.

Kesi kenarlarına uygulanan kontraksiyonu kullanarak böbreği nazikçe anatomik pozisyonuna geri itin. Karın insizyonunu çalışan steril bir cerrahi dikişle kapatın ve cildi zımbalarla kapatın. İşlemi takiben, sıçanı yiyecek ve suya erişimi olan bir ısıtma yastığı üzerinde temiz bir kafese yerleştirin.

Gerekirse, ağrıyı hafifletmek için alıcı sıçana her altı ila on iki saatte bir Buprenorfin uygulayın. Rutin yara iyileşmesini ve ağrı veya sıkıntı belirtilerini değerlendirmek için hayvanı günlük olarak izleyin. Ve ameliyattan yedi ila on gün sonra zımbaları çıkarın.

Temsili bir görüntü, uygulama için renal kapsülün altındaki aort kapak broşürünün konumunu göstermektedir. Alıcı sıçan içinde üç, yedi ve yirmi sekiz gün sonra, nakledilen dokuyu bulmak ve kurtarmak kolaylaştı. Aort kapak broşürleri, sinjenik hayvanlarda heterotopik transplantasyondan sonra doğal mimarilerini korumuştur.

Alerjenik transplantlarda immün yanıtı karşılaştırmak için bu modelin yararlılığını temel olarak göstermek. Hematoksilin ve eozin boyama ile yapılan histoloji, yedi gün sonra sinjenik transplantasyonlarda kapak broşürlerinin ödemli şişlik belirtisi olmadan yapısal olarak sağlam olduğunu ortaya koymuştur. Transplantasyon sonrası kapak broşürünün yapısal bütünlüğü, düz kas aktin ve CD31 için İmmünohistokimya ile daha da doğrulandı.

Aort kapak broşürleri çok hassastır. Valflere zarar vermeden bunları çok dikkatli bir şekilde kullanmak önemlidir. Renal subkapsüler, kalp kapak transplantasyonu heterotopik kalp kapak transplantasyonunu kolaylaştırır.

Bu, sınırlı mikrocerrahi yetenekleri olan araştırmacıların kalp kapağı transplantasyonunun immünobiyolojisini keşfetmelerini sağlayacaktır.