Name: Esrar Biyokütlesinden Esrar Destekli Esrar Asidinin Ultrasonik Destekli Ekstraksiyonu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-05-27T13:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 46 s
Description: Öğrenin, ultrasonik destekli ekstraksiyon ile Cannabis spp. biyokütlesinden CBD'nin verimli izolasyonunu. Bu yöntem, zamandan ve maliyetten tasarruf sağlayarak endüstriyel uygulamalar için optimize edilmiş yeşil bir süreç sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu araştırma, Colorado Eyalet Üniversitesi-Pueblo'daki Esrar Araştırma Enstitüsü, Kore hükümeti (MSIT) (2021-DD-UP-0379) tarafından finanse edilen Kore İnovasyon Vakfı hibesi ve Chuncheon şehri (Kenevir Ar-Ge ve sanayileşme, 2020-2021) tarafından desteklenmiştir.

1. Bitki materyali hazırlama
<ol><li>Kiraz Şarabı salkımını, tarlada yetişen, güneyden kuzeye bir konfigürasyonda ekilmiş, merkezde 1 m aralıklarla ve 1,2 m aralıklarla sıralanmış bitkilerden elde edin (yetiştirme Longmont, Colorado, ABD'de bulunur).</li>
	<li>Çiçeklenme 35 ° C'de 48 saat boyunca hava ile kurulayın. 177 μm'lik bir taşlama makinesi kullanarak salkımları öğütün.</li>
	<li>Toz haline getirilmiş malzemeyi No. 80 ağ eleğinden geçirin. Elde edilen tozu gelecekte kullanmak üzere oda sıcaklığında kapalı bir torbada saklayın.</li>
</ol>2. Ultrason ekstraksiyonu
<ol><li>0.5 g Esrar salkım tozunu 50 mL'lik konik bir tüpe tartın. Kaba 40 mL çözücü (örneğin, deiyonize suda% 50 etanol) ekleyin.</li>
	<li>Ekstraksiyon kabını 40 kHz'de ve oda sıcaklığında ayarlanmış ultrasonik banyoya yerleştirin (sonikasyon gücü 100 W'dir).</li>
	<li>Ultrasonik banyoda 30 dakika boyunca ekstraksiyon gerçekleştirin, banyonun sıcaklığını 25 ° C'den 30 ° C'ye yükseltin.</li>
	<li>Ekstraksiyon sıvısını bir santrifüj tüpüne boşaltın.</li>
	<li>Sıvıyı 15 dakika boyunca 15 °C'de 3.000 x g'de santrifüj yapın. Süpernatantı vakum altında 8 μm'lik bir filtre kağıdından süzün.</li>
</ol>3. Yüksek performanslı sıvı kromatografisi (HPLC) kantitatif analizi
<ol><li>Yedi kanabinoid standardını seyreltin: kanabikromen (CBC), CBD, CBDA, kanabinol (CBN), tetrahidrokanabinolik asit (THCA), Δ8-THC ve Δ9-THC,% 100 metanol içinde 100, 50, 25 ve 12.5 μg / mL çalışma konsantrasyonlarına. 5 kHz'de ayarlanmış ultrasonik bir banyoda 40 dakika boyunca karıştırın ve sonikleştirin ve 100 W sonikasyon gücü</li>
	<li>Standartları 0,45 μm politetrafloroetilen (PTFE) şırınga filtresinden süzün. Numune süpernatantını (adım 2.5'ten itibaren) 0,45 μm PTFE şırınga filtresinden süzün.</li>
	<li>Analiz edilecek numuneyi HPLC otomatik numune alma cihazına 1,5 mL'lik bir şişede koyun ve bir seferde 10 μL yükleyin.</li>
	<li>HPLC'yi Tablo 1'de sağlanan koşullara ve parametrelere göre çalıştırın. Üretilen standart eğriden 50-200 μg / mL'de kanabinoid konsantrasyonları elde edin.</li>
	<li>μg kanabinoid elde etmek için ekstraksiyon işleminde kullanılan çözücünün (40 mL) hacmi ile çarpın. Kannabinoid μg'sini 1000'e bölerek mg kanabinoide dönüştürün.</li>
	<li>mg / g kuru ağırlık elde etmek için ekstraksiyonda kullanılan bitki materyalinin orijinal ağırlığı (0,5 g) ile bölün.</li>
</ol>4. Yanıt yüzeyi metodolojisini kullanarak optimizasyon
<ol><li>Bir veri analiz aracı kullanarak Tablo 4'te gösterildiği gibi 12 faktöriyel nokta ve üç merkez noktası ile 15 deneysel çalışmadan oluşan modeli oluşturun.</li>
	<li>Tepki yüzeyi metodolojisini ve merkezi kompozit tasarımı kullanarak ekstraksiyon parametrelerini, ekstraksiyon süresini (T), çözücü konsantrasyonunu (S) ve numune/solvent oranını (R) optimize edin. T, S ve R değişkenlerinin aralığını sırasıyla 5-30 dakika, %20-%100 ve 60-100 (1:X) olarak ayarlayın.</li>
	<li>Lipofilik ekstraktın toplam verimini ve ekstrakte edilen CBD ve CBDA'nın verimlerini yanıt faktörleri (RF) olarak seçin.</li>
</ol>

<ol><li>Hemphill, J. K., Turner, J. C., Mahlberg, P. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cannabinoid+content+of+individual+plant+organs+from+different+geographical+strains+of+Cannabis+sativa+L%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Natural+Products%22%5BJournal%5D)">Cannabinoid content of individual plant organs from different geographical strains of Cannabis sativa L.</a> Journal of Natural Products. 43 (1), 112-122 (1980).</li>
<li>Baldino, L., Scognamiglio, M., Reverchon, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Supercritical+fluid+technologies+applied+to+the+extraction+of+compounds+of+industrial+interest+from+Cannabis+sativa+L.+and+to+their+pharmaceutical+formulations%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Supercritical+Fluids%22%5BJournal%5D)">Supercritical fluid technologies applied to the extraction of compounds of industrial interest from Cannabis sativa L. and to their pharmaceutical formulations: A review.</a> Journal of Supercritical Fluids. 165, 104960(2020).</li>
<li>Daniel, R. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Supercritical+extraction+strategies+using+CO2+and+ethanol+to+obtain+cannabinoid+compounds+from+cannabis+hybrid+flowers%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+CO2+Utilization%22%5BJournal%5D)">Supercritical extraction strategies using CO2 and ethanol to obtain cannabinoid compounds from cannabis hybrid flowers.</a> Journal of CO2 Utilization. 30, 241-248 (2019).</li>
<li>Azmir, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Techniques+for+extraction+of+bioactive+compounds+from+plant+materials%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Food+Engineering%22%5BJournal%5D)">Techniques for extraction of bioactive compounds from plant materials: A review.</a> Journal of Food Engineering. 117 (4), 426-436 (2013).</li>
<li>Ohl, C. D., Kurz, T., Geisler, R., Lindau, O., Lauterborn, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bubble+dynamics%2C+shock+waves+and+sonoluminescence%5BTitle%5D)+AND+%22Philosophical+Transactions+of+the+Royal+Society+A%3A+Mathematical%2C+Physical+and+Engineering+Sciences%22%5BJournal%5D)">Bubble dynamics, shock waves and sonoluminescence.</a> Philosophical Transactions of the Royal Society A: Mathematical, Physical and Engineering Sciences. 357 (1751), 269-294 (1999).</li>
<li>Castro-Puyana, M., Marina, M. L., Plaza, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Water+as+green+extraction+solvent%3A+Principles+and+reasons+for+its+use%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Green+and+Sustainable+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Water as green extraction solvent: Principles and reasons for its use.</a> Current Opinion in Green and Sustainable Chemistry. 5, 31-36 (2017).</li>
<li>Herrera, M. C., De Castro, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasound-assisted+extraction+of+phenolic+compounds+from+strawberries+prior+to+liquid+chromatographic+separation+and+photodiode+array+ultraviolet+detection%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Chromatography+A%22%5BJournal%5D)">Ultrasound-assisted extraction of phenolic compounds from strawberries prior to liquid chromatographic separation and photodiode array ultraviolet detection.</a> Journal of Chromatography A. 1100 (1), 1-7 (2005).</li>
<li>Mason, T. J., Paniwnyk, L., Lorimer, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+uses+of+ultrasound+in+food+technology%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasonics+Sonochemistry%22%5BJournal%5D)">The uses of ultrasound in food technology.</a> Ultrasonics Sonochemistry. 3 (3), 253-260 (1996).</li>
<li>Soares, V. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasound+assisted+maceration+for+improving+the+aromatization+of+extra-virgin+olive+oil+with+rosemary+and+basil%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Research+International%22%5BJournal%5D)">Ultrasound assisted maceration for improving the aromatization of extra-virgin olive oil with rosemary and basil.</a> Food Research International. 135, 109305(2020).</li>
<li>Kshitiz, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasound+assisted+extraction+%28UAE%29+of+bioactive+compounds+from+fruit+and+vegetable+processing+by-products%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasinics+Sonochemistry%22%5BJournal%5D)">Ultrasound assisted extraction (UAE) of bioactive compounds from fruit and vegetable processing by-products: A review.</a> Ultrasinics Sonochemistry. 70, 105325(2017).</li>
<li>Mudge, E. M., Murch, S. J., Brown, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leaner+and+greener+analysis+of+cannabinoids%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+and+Bioanalytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Leaner and greener analysis of cannabinoids.</a> Analytical and Bioanalytical Chemistry. 409 (12), 3153-3163 (2017).</li>
<li>De Vita, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+different+methods+for+the+extraction+of+cannabinoids+from+cannabis%5BTitle%5D)+AND+%22Natural+Product+Research%22%5BJournal%5D)">Comparison of different methods for the extraction of cannabinoids from cannabis.</a> Natural Product Research. 34 (20), 2952-2958 (2020).</li>
<li>Rožanc, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Different+Cannabis+sativa+extraction+methods+result+in+different+biological+activities+against+a+colon+cancer+cell+line+and+healthy+colon+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Plants%22%5BJournal%5D)">Different Cannabis sativa extraction methods result in different biological activities against a colon cancer cell line and healthy colon cells.</a> Plants. 10 (3), 566(2021).</li>
<li>Karğili, U., Aytaç, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Supercritical+fluid+extraction+of+cannabinoids+%28THC+and+CBD%29+from+four+different+strains+of+cannabis+grown+in+different+regions%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Supercritical+Fluids%22%5BJournal%5D)">Supercritical fluid extraction of cannabinoids (THC and CBD) from four different strains of cannabis grown in different regions.</a> The Journal of Supercritical Fluids. 179, 105410(2022).</li>
<li>Sushma, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+ultrasound-assisted+extraction+%28UAE%29+process+for+the+recovery+of+bioactive+compounds+from+bitter+gourd+using+response+surface+methodology+%28RSM%29%5BTitle%5D)+AND+%22Food+and+Bioproducts+Processing%22%5BJournal%5D)">Optimization of ultrasound-assisted extraction (UAE) process for the recovery of bioactive compounds from bitter gourd using response surface methodology (RSM).</a> Food and Bioproducts Processing. 120, 120-122 (2022).</li>
<li>David, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potency+of+%CE%949-THC+and+Other+Cannabinoids+in+Cannabis+in+England+in+2005%3A+Implications+for+Psychoactivity+and+Pharmacology%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Forensic+Sciences%22%5BJournal%5D)">Potency of Δ9-THC and Other Cannabinoids in Cannabis in England in 2005: Implications for Psychoactivity and Pharmacology.</a> Journal of Forensic Sciences. 11, 129(2008).</li>
<li>Agarwal, C., Máthé, K., Hofmann, T., Csóka, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasound-assisted+extraction+of+cannabinoids+from+Cannabis+Sativa+L.+optimized+by+response+surface+methodology%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Food+Science%22%5BJournal%5D)">Ultrasound-assisted extraction of cannabinoids from Cannabis Sativa L. optimized by response surface methodology.</a> Journal of Food Science. 83 (3), 700-710 (2018).</li>
<li>Oroian, M., Ursachi, F., Dranca, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+ultrasonic+amplitude%2C+temperature%2C+time+and+solvent+concentration+on+bioactive+compounds+extraction+from+propolis%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasonics+Sonochemistry%22%5BJournal%5D)">Influence of ultrasonic amplitude, temperature, time and solvent concentration on bioactive compounds extraction from propolis.</a> Ultrasonics Sonochemistry. 64 (2020), 105021(2020).</li>
<li>Garrett, E. R., Hunt, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiochemical+properties%2C+solubility%2C+and+protein+binding+of+%CE%949-tetrahydrocannabinol%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmaceutical+Sciences%22%5BJournal%5D)">Physiochemical properties, solubility, and protein binding of Δ9-tetrahydrocannabinol.</a> Journal of Pharmaceutical Sciences. 63 (7), 1056-1064 (1974).</li>
<li>Metcalf, D. G. Chemical Abstracts. United States patent. , US10555914 267166 (2020).</li>
<li>Lazarjani, M. P., Young, O., Kebede, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Processing+and+extraction+methods+of+medicinal+cannabis%3A+a+narrative+review%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cannabis+Research%22%5BJournal%5D)">Processing and extraction methods of medicinal cannabis: a narrative review.</a> Journal of Cannabis Research. 3 (1), 1-15 (2021).</li>
<li>Lewis-Bakker, M. M., Yang, Y., Vyawahare, R., Kotra, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extractions+of+medical+cannabis+cultivars+and+the+role+of+decarboxylation+in+optimal+receptor+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Cannabis+and+Cannabinoid+Research%22%5BJournal%5D)">Extractions of medical cannabis cultivars and the role of decarboxylation in optimal receptor responses.</a> Cannabis and Cannabinoid Research. 4 (3), 183-194 (2019).</li>
<li>Brighenti, V., Pellati, F., Steinbach, M., Maran, D., Benvenuti, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+new+extraction+technique+and+HPLC+method+for+the+analysis+of+non-psychoactive+cannabinoids+in+fibre-type+Cannabis+sativa+L.%28hemp%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmaceutical+and+Biomedical+Analysis%22%5BJournal%5D)">Development of a new extraction technique and HPLC method for the analysis of non-psychoactive cannabinoids in fibre-type Cannabis sativa L.(hemp).</a> Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 143, 228-236 (2017).</li>
<li>FDA. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.cfsanappsexternal.fda.gov/scripts/fdcc/?set=SCOGS">https://www.cfsanappsexternal.fda.gov/scripts/fdcc/?set=SCOGS</a> (2021).</li>
<li>Rae, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estimation+of+ultrasound+induced+cavitation+bubble+temperatures+in+aqueous+solutions%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasonics+Sonochemistry%22%5BJournal%5D)">Estimation of ultrasound induced cavitation bubble temperatures in aqueous solutions.</a> Ultrasonics Sonochemistry. 12, 325-329 (2005).</li>
<li>Moreno, T., Montanes, F., Tallon, S. J., Fenton, T., King, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extraction+of+cannabinoids+from+hemp+%28Cannabis+sativa+L.%29+using+high+pressure+solvents%3A+An+overview+of+different+processing+options%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Supercritical+Fluids%22%5BJournal%5D)">Extraction of cannabinoids from hemp (Cannabis sativa L.) using high pressure solvents: An overview of different processing options.</a> Journal of Supercritical Fluids. 161, 104850(2020).</li>
<li>Zhang, Q. W., Lin, L. G., Ye, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Techniques+for+extraction+and+isolation+of+natural+products%3A+a+comprehensive+review%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Medicine%22%5BJournal%5D)">Techniques for extraction and isolation of natural products: a comprehensive review.</a> Chinese Medicine. 13 (20), 1-26 (2018).</li>
<li>Fathordoobady, F., Singh, A., Kitts, D. D., Singh, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemp+%28Cannabis+sativa+L.%29+extract%3A+Anti-microbial+properties%2C+methods+of+extraction%2C+and+potential+oral+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Reviews+International%22%5BJournal%5D)">Hemp (Cannabis sativa L.) extract: Anti-microbial properties, methods of extraction, and potential oral delivery.</a> Food Reviews International. 35 (7), 664-684 (2019).</li>
</ol>

Yazarlar rakip çıkarlar olmadığını beyan ederler.

Bir çözücünün polaritesi, bileşiklerin etkili bir şekilde ekstraksiyonunda kritik bir rol oynar. Asidik kanabinoidler doğada hafif polar olduklarından, büyük ölçüde karboksilik asit köstebeği nedeniyle, metanol veya etanol gibi polar bir çözücünün en etkili olacağı varsayılmaktadır. Garrett ve Hunt19, THC kullanarak yaptıkları çalışmada, sulu etanoldeki çözünürlüğün, çözeltideki yüzde etanol ve çözeltinin iyonik mukavemetine dayandığını göstermiştir. Mevcut çalışmada iyonik mukavemet incelenmemiş ...

Endüstriyel kenevir (Cannabis spp.), çeşitli bitki dokularında (çiçekler, yapraklar ve saplar) asidik kanabinoidler üretir ve çiçekte bulunan en yüksek konsantrasyon1'dir. Esrar endüstrisi bu bileşikleri çıkarmak için çeşitli yöntemler kullanır. Böyle bir yöntem, etanolün en yaygın kullanıldığı polar olmayan ve / veya polar bir çözücü kullanan çözücü ekstraksiyonudur. Bununla birlikte, tek başına çözücü ekstraksiyonu kabiliyetinde sınırlıdır; Bu nedenle, mikrodalga destekli ekstraksiyon (MAE) ve ultrasonik destekli ekstraksiyon (BAE) gibi arttırıcı ekstraksiyon teknikleri, verimi artırmak için tasarlanmıştır. Ek olarak, yüksek konsantrasyonlu kanabidiol (CBD), süperkritik sıvı teknolojileri kullanılarak ekstrakte edilebilir2.
Ekstraksiyon dinamik bir işlemdir ve verimliliğini etkileyen çeşitli faktörler, yani nem içeriği, partikül boyutu ve çözücü3. Özellikle, BAE tekniği için verimlilik sıcaklık, basınç, frekans ve zaman4 tarafından yönetilir.
Ultrasonik yardımlı ekstraksiyon, ultrasonik dalgaların parçacıkları çalkalamak için bir sıvıdan geçirildiği işlemdir. Karıştırma işlemi sırasında, bitki materyalleri akustik kavitasyon, sıkıştırma ve genleşme döngüleri yaşar ve bu da çözelti içinde çöken kabarcıklar oluşturarak aşırı sıcaklık ve basınçoluşumuna neden olur 5. Basınç ve sıcaklık değişimleri, çözücülerin fiziksel özelliklerini değiştirir, bu da ekstraksiyonun etkinliğinin artmasına neden olabilir6. Ek olarak, kavitasyon, organik ve inorganik bileşiklerin bitki matrisinden sızmasına yol açan moleküler etkileşimleri bozabilir7. İşlem iki ana fiziksel fenomen türünü içerir: (1) hücre duvarı boyunca difüzyon ve (2) duvarı kırdıktan sonra hücresel içeriğin durulanması8. Bununla birlikte, BAE'nin kullanımı tuzakları olmadan değildir; BAE'nin 9,10 bileşiklerini bozabileceğine dair birkaç rapor var. Ek olarak, kavitasyon bölgelerinde üretilen sıcaklıklar, kanabinoidlerin dekarboksilasyonu için gerekli olanların üzerindedir. Bununla birlikte, Mudge ve ark.11 BAE'yi kullandı ve CBD veya tetrahidrokanabinolün (THC) büyük dekarboksilasyonunu gözlemlemedi, böylece BAE'nin kanabinoidlerin ekstraksiyonu için etkili ve yeşil bir yöntem olduğunu gösterdi.
De Vita ve ark.12 , MAE ve BAE yöntemlerinin kullanımını özel olarak incelemiş ve her yöntem için en uygun koşulları uygularken, BAE'nin bitki materyalinde bulunan asidik ve nötr CBD ve THC'den daha fazlasını çıkardığını bulmuştur. Benzer şekilde, Rožanc ve ark.13 , çoklu ekstraksiyon yöntemlerini (BAE, soxhlet, maserasyon ve süperkritik sıvı) karşılaştırdı ve ekstraktların biyolojik aktivitesini inceledi. Rožanc, tüm yöntemlerin kanabinoidlerin çıkarılmasında etkili olduğunu göstermiştir; Bununla birlikte, süperkritik sıvı ve BAE, kanabidiolik asidin (CBDA) çıkarılmasında en etkili olanıydı. Ek olarak, BAE ekstraksiyonu, 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil (DPPH) testi ile ölçüldüğünde en yüksek biyolojik aktiviteye sahipti. Rožanc'ın çalışması ayrıca, ekstraksiyon işlemlerinin ham ekstraktların üretilmesinde etkili olmasına rağmen, ekstraktların biyolojik aktivitesini etkileyen kanabinoid olmayan bileşiklerin bir kısmının kaldığını göstermiştir. Ek olarak, bu bileşikler, bireysel kanabinoid bileşiklerinin ham ekstraktlardan izolasyonunu ve saflaştırılmasını zorlaştırabilir13.
Nötr kanabinoidleri çıkarmak için süperkritik sıvı ekstraksiyonu (SFE) teknikleri kullanılmıştır. Birkaç çalışma, SFE artı etanol gibi organik bir çözücünün, nötr kanabinoidlerin 2,3 daha yüksek ekstraksiyon verimliliğine neden olduğunu göstermiştir. Basınç, asidik kanabinoidleri ekstrakte edebilen seviyelere yükseltildiğinde, kannabinoid olmayan içerik de artmıştır. Bu nedenle, bu yüksek basınçlar, kannabinoidler için SFE'nin seçiciliği azaldığı ve ek işlem sonrası işlem yapılması gerektiğinden, endüstriyel işleme için pratik değildir. Sonuç olarak, dekarboksilasyon SFE'den önce yapılmalıdır, bu da kanabinoid kayıplarına% 18'e kadar neden olabilir2. SFE'deki verimliliği artırmak için, nihai ekstraktın saflığını arttırmak için katı faz ekstraksiyonu gibi tekniklerle birleştirilmiştir14. Bununla birlikte, nihai ürün olarak yüksek saflığa sahip olmasına rağmen, sadece nötr kanabinoidler elde edilir.
Geleneksel olarak, analitik laboratuvarda, kanabinoidler 9: 1 metanol: kloroform karışımında ekstrakte edildi. Bununla birlikte, Mudge ve ark.11 , BAE kullanırken etkili ekstraksiyonun tek çözücülerle gerçekleştirilebileceğini göstermiştir. Çalışma,% 80 metanolün, geleneksel 9: 1 metanol: kloroform ekstraksiyonu kadar etkili olduğunu ve böylece daha yeşil çözücülerin etkili olabileceğini göstermiştir. Bu nedenle, BAE, düşük sermaye maliyeti, azaltılmış ekstraksiyon süresi ve daha düşük enerji kullanımı ve çözücü hacimleri dahil olmak üzere çeşitli avantajlara sahip olması nedeniyle potansiyel kullanımı açısından incelenmiştir. Bununla birlikte, BAE durumunda, polar çözücüler kullanıldığında, klorofil ve diğer kanabinoid olmayanlar ekstrakte edilebilir, bu da7 renginde bir soruna neden olabilir. Sonuç olarak, asidik kanabinoidleri ticari ölçekte elde etme potansiyelini incelemek için BAE, endüstriyel kenevir çeşidi Cherry Wine kullanılarak kullanılmıştır. Vişne Şarabı, The Wife ve Charlotte's Cherry çeşitleri arasında bir haç olan C. sativa ve C. indica'nın bir melezidir. Vişne Şarabı çeşidi, düşük tetrahidrokanabinolik asit (THCA) seviyelerine sahip yüksek CBDA üreten bir suştur (% 15 ila% 25 CBD). Varietal, 7 ila 9 haftalık çiçeklenmeye sahip bir C. indica baskın suştur.
En uygun BAE ekstraksiyon protokolünü oluşturmak için iki yaklaşım benimsenmiştir: bir seferde geleneksel bir faktör (OFT) optimizasyonu ve Merkezi Kompozit Tasarım (CCD) 15 kullanan bir Deney Tasarımı (DoE) yaklaşımı. DoE için, cbda / cbd ekstraksiyonu, numune / çözücü oranına, ekstraksiyon süresine ve faktör olarak çözücü konsantrasyonuna dayanarak optimize edildi ve elde edilen veriler Yanıt Yüzeyi Metodolojisi (RSM) ile analiz edildi. Sonuç olarak, açıklanan protokol, en yüksek miktarda CBDA / CBD'yi çıkarmak için en uygun yöntemi özetlemektedir.

<table><tbody><tr><td>Asetonitril</td><td>J.K.Baker</td><td>9017-88</td><td>çözücü</td></tr><tr><td>Kannabikromen</td><td>Cerilliant</td><td>C-143</td><td>Kannabinoidler standart</td></tr><tr><td>Kannabidiol</td><td>Cerilliant</td><td>C-045</td><td>Kannabinoidler standart</td></tr><tr><td>Kannabidiolik asit</td><td>Cerilliant</td><td>C-144</td><td>Kannabinoidler standart</td></tr><tr><td>Kannabidivarin</td><td>Cerilliant</td><td>C-140</td><td>Kannabinoidler standart</td></tr><tr><td>Cannabigerol</td><td>Cerilliant</td><td>C-141</td><td>Kannabinoidler standart</td></tr><tr><td>Kannabinol</td><td>Cerilliant</td><td>C-046</td><td>Kannabinoidler standart</td></tr><tr><td>Santrifüj</td><td>Hanil Scientific Inc</td><td>Supra 22K</td><td>Santrifüj</td></tr><tr><td>Kiraz Şarabı kenevir</td><td>CFH, Ltd.</td><td>-</td><td>Çiçek ekstraksiyon malzemesi</td></tr><tr><td>Damıtılmış su</td><td>TEDIA</td><td>WS2211-001</td><td>çözücü</td></tr><tr><td>Etanol</td><td>TEDIA</td><td>ES1431-001</td><td>çözücü</td></tr><tr><td>Filtre kağıdı</td><td>Whatman</td><td>#2</td><td>Filtreli</td></tr><tr><td>Öğütücü</td><td>Daesung Artlon</td><td>DA280-S</td><td>Frezeleme</td></tr><tr><td>HPLC</td><td>Shimadzu</td><td>LC-10 sistemi</td><td>Kannabinoid Analizi</td></tr><tr><td>Metanol</td><td>TEDIA</td><td>MS1922-001</td><td>çözücü</td></tr><tr><td>Minitab 16.2.0</td><td>Minitab Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Şırınga filtreleri</td><td>Whatman</td><td>6779-1304</td><td>Filtreleme</td></tr><tr><td>Tetrahidrokannabivarin</td><td>Cerilliant</td><td>T-094</td><td>Kannabinoidler standart</td></tr><tr><td>Trifloroasetik asit</td><td>Sigma-aldrich</td><td>302031-1L</td><td>HPLC akış çözücü</td></tr><tr><td>Untrasonic banyosu</td><td>Jinwoo</td><td>4020P</td><td>Ultrasonik ekstraksiyon</td></tr><tr><td>Zorbax Eclipse plus C18 HPLC sütunu</td><td>Agilent</td><td>9599990-902</td><td>HPLC sütunu</td></tr> <tr><td>ve Delta; 8 - Tetrahidrokanabinol</td><td>Serilliant</td><td>T-032</td><td>Kannabinoidler standardı</td></tr> <tr><td>ve Delta; 9 - Tetrahidrokanabinol</td><td>Serilliant</td><td>T-005</td><td>Kannabinoidler standardı</td></tr> <tr><td>ve Delta; 9 - Tetrahidrokanabinolik asit</td><td>Cerilliant</td><td>T-093</td><td>Kannabinoidler standardı</td></tr></tbody></table>

esrar biyokütlesinden esrar destekli esrar asidinin ultrasonik destekli ekstraksiyonu

Ultrasonic-Assisted Extraction of Cannabidiolic Acid from Cannabis Biomass

Endüstriyel kenevir (Cannabis spp.), potansiyel tıbbi yararları olan birçok ilgi çekici bileşiğe sahiptir. Bu bileşiklerden, kanabinoidler, özellikle asidik kanabinoidler olmak üzere ilgi odağına gelmiştir. Odak, psikotropik aktivite eksikliği nedeniyle asidik kanabinoidlere yöneliyor. Kenevir bitkileri, düşük düzeyde psikotropik kanabinoid üreten kenevir bitkileri ile asidik kanabinoidler üretir. Bu nedenle, asidik kanabinoid ekstraksiyonu için kenevir kullanımı, kanabinoidler için bir kaynak olarak ekstraksiyondan önce dekarboksilasyon ihtiyacını ortadan kaldıracaktır. Solvent bazlı ekstraksiyonun kullanımı, asidik kanabinoidlerin elde edilmesi için idealdir, çünkü süperkritik CO2 gibi çözücülerdeki çözünürlükleri, çözünürlük sabitlerine ulaşmak için gereken yüksek basınç ve sıcaklık nedeniyle sınırlıdır. Çözünürlüğü artırmak için tasarlanmış alternatif bir yöntem ultrasonik destekli ekstraksiyondur. Bu protokolde, çözücü polaritesinin (asetonitril 0.46, etanol 0.65, metanol 0.76 ve su 1.00) ve konsantrasyonunun (% 20,% 50,% 70,% 90 ve% 100) ultrasonik destekli ekstraksiyon verimliliği üzerindeki etkisi incelenmiştir. Sonuçlar, suyun en az etkili olduğunu ve asetonitrilin incelenen en etkili çözücü olduğunu göstermektedir. Etanol, en düşük toksisiteye sahip olduğu ve genellikle güvenli (GRAS) olarak kabul edildiği için daha fazla incelenmiştir. Şaşırtıcı bir şekilde, sudaki% 50 etanol, kenevirden en yüksek miktarda kanabinoid çıkarmak için en etkili etanol konsantrasyonudur. Kannabidiolik asit konsantrasyonundaki artış,% 100 etanol ile karşılaştırıldığında% 28 ve% 100 asetonitril ile karşılaştırıldığında% 23 idi. Uygulamamız için %50 etanolün en etkili konsantrasyon olduğu belirlenirken, yöntemin alternatif çözücülerle de etkili olduğu gösterilmiştir. Sonuç olarak, önerilen yöntemin asidik kanabinoidlerin ekstraksiyonu için etkili ve hızlı olduğu düşünülmektedir.

Kullanılan çözücüler polarite indeksinin ortasından (0.460 - ACN) polar (1.000 - su) arasında değişmektedir. Tablo 2'den, suyun kannabinoidler için etkili bir ekstraksiyon maddesi yapmadığı görülebilir, ki bu beklenmedik bir durum değildir, çünkü kanabinoidler hidrofobiklikleri nedeniyle suda sınırlı çözünürlüğe sahiptir13. Suyun aksine, diğer çözücüler benzer CBD ve CBDA ekstrakte değerlerine sahipti, en az polar çözücü asetonitril (ACN) iki alkole kıyasla daha yüksek ekstraksiyo...

Ultrasonik yardımlı ekstraksiyon (BAE), çözücülerin ekstraksiyon verimliliğini arttırır ve Esrar spp. biyokütlesine uygulandığında, ekstraksiyon için gereken süreyi azaltır. Bu, bozulma nedeniyle maliyeti ve potansiyel kanabinoid kaybını azaltır. Ek olarak, BAE düşük çözücü kullanımı nedeniyle yeşil bir yöntem olarak kabul edilir.

Esrar Biyokütlesinden Esrar Destekli Esrar Asidinin Ultrasonik Destekli Ekstraksiyonu

Industrial hemp (Cannabis spp.) has many compounds of interest with potential medical benefits. Of these compounds, cannabinoids have come to the center ...

Bu protokol, malzemenin hazırlanmasından, çözücü ekstraksiyonundan ve CBD içeriğinin ölçülmesinden başlayarak CBD ekstraksiyonunun tüm sürecini gösterir. Optimize edilmiş çözücü ve çözücü konsantrasyonunu önererek, bu yöntem gereksiz işlemleri ortadan kaldırır ve endüstriyel amaçlar için verimli çözücü ekstraksiyonuna yardımcı olabilir. Tarlada yetişen bitkilerden Kiraz Şarabı salkımını elde ederek başlayın.Hava, salkımları 48 saat boyunca 35 santigrat derecede kurutur. 177 mikrometreye ayarlanmış bir taşlama makinesi kullanarak salkımları öğütün. Toz haline getirilmiş malzemeyi 80 numaralı ağ eleğinden geçirin ve tozu oda sıcaklığında kapalı bir torbada saklayın.50 mililitrelik konik bir tüpte, esrar salkımının 0.5 gram ağırlığındadır. Deiyonize suda hazırlanan 40 mililitre% 50 etanol ekleyin. Ekstraksiyon kabını 40 kilohertz set oda sıcaklığında ayarlanmış bir ultrasonik banyoya yerleştirin.Ekstraksiyonu 30 dakika boyunca gerçekleştirin, banyonun sıcaklığını 25 ila 30 santigrat derece arttırın. Sonikasyondan sonra, ekstraksiyon sıvısını bir santrifüj tüpüne boşaltın. Sıvıyı 15 dakika boyunca 15 santigrat derecede 3000 kez G'de santrifüj yapın.Süpernatantı vakum altında 8 mikrometrelik bir filtre kağıdından süzün. Kannabinoid standartlarını% 100 metanol içinde mililitre başına 100, 50, 25 ve 12.5 mikrogram çalışma konsantrasyonlarına seyreltin. 40 kilohertz ve 100 watt sonikasyon gücünde ayarlanmış ultrasonik bir banyoda beş dakika boyunca karıştırın ve sonikleştirin.Standartları ve esrar numunesi süpernatantını 0,45 mikrometrelik politetrafloroetilen şırınga filtresinden filtreleyin. Numuneleri 1,5 mililitrelik şişelere koyun ve HPLC otomatik numune alma cihazına yerleştirin. Numunenin 10 mikrolitresini yükleyin ve bu tabloda gösterilen parametreleri kullanarak HPLC'yi çalıştırın.Standart bir eğri oluşturun ve mililitre başına 50 ila 200 mikrogram arasında kanabinoid konsantrasyonları elde edin. Ekstraksiyon işleminde kullanılan çözücünün hacmiyle çarparak kannabinoidlerin ağırlığını mikrogram cinsinden hesaplayın, değeri 1.000'e bölerek miligramlara dönüştürün. Bu değeri, kuru ağırlığın gramı başına miligram elde etmek için ekstraksiyonda kullanılan bitki materyalinin ağırlığına bölün.HPLC analizi,% 100 çözücüler kullanıldığında, asetonitrilin bireysel kanabinoidlerin ekstraksiyonu için en uygun olduğunu göstermiştir. Bununla birlikte, etanol, hepsinin en düşük toksisitesi nedeniyle daha fazla incelenmiştir. Sulu etanolün ekstrakte edilen kanabinoidlerin konsantrasyonu üzerindeki etkisinin değerlendirilmesi, maksimum ekstraksiyonun% 50 etanolde gözlendiğini göstermiştir.CBDA'nın ekstraksiyonu için mutlak etanol üzerinde% 39.7'lik bir artış vardı. THCA seviyesi de% 20.3 oranında azaltıldı Deney tasarımı yaklaşımını kullanarak, CBDA artı CBD'nin çıkarılması optimize edildi. Yanıt yüzeyi metodolojisi analizi, ideal parametreleri 30 dakikalık ekstraksiyon, suda% 53,4 etanol ve 1 ila 100 numune-çözücü oranı olarak doğruladı.Maserasyon yöntemine kıyasla ultrasonik destekli ekstraksiyon yöntemi kullanılarak daha yüksek miktarda CBDA elde edildi. Ekstrakte edilen CBD miktarı da ultrasonik yöntem kullanılarak iki katına çıkarıldı ve kanabinoid ekstraksiyonu için daha yüksek verimlilik gösterdi. Numunenin çözücü oranını, ekstraksiyon süresini ve çözücü konsantrasyonunu hatırlamak önemlidir.bu çalışma tarafından optimize edilmiştir. Bu prosedür, diğer kanabinoidlerin kenevirden çıkarılması için gerçekleştirilebilir.

ultrasonic-assisted-extraction-cannabidiolic-acid-from-cannabis

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Biyokimya

Bitki biyokütle yakıt, yem, gıda ve malzemelerin çeşitli dahil olmak üzere birden fazla ürün için bir yenilenebilir kaynak sunuyor. Bu yazıda tütün ağacı (Nicotiana glauca) ve bir Biorefinery boru hattı için kavak olarak uygun kaynaklarının özelliklerini incelemek.

Bio-tabanlı Sanayi Feedstock olarak Tütün Ağacı ve Kavak Değerlendirme transkript ve metabolit profil

Bir örnek kullanarak biyolojik dokulardan lipidlerin, metabolitlerin ve proteinlerin kapsamlı şekilde ekstraksiyonu için bir protokol sunulmuştur.

Tek Bir Numuneden Metabolitlerin, Lipidlerin ve Proteinlerin Kapsamlı Analizi için Basit Fraksiyonlu Ekstraksiyon Metodu

Geçici Contegra ifade Nicotiana benthamiana yaprakları biyosentetik enzimlerin 2,3-oxidosqualene yeni yüksek değerli triterpen ürünleri doğru endojen malzemeleri yönlendirebilirsiniz. Burada olduğunu hızlı (5 gün) hazırlık-ölçekli üretim triterpeneler ve bu güçlü bitki tabanlı platformu kullanan analogları için detaylı bir protokol açıklanan.

Partiye Hazırlık bir ölçekte triterpen üretim için geçici Nicotiana Benthamiana ifadede bırakır

Burada, biz doğal ürünler Kimya Laboratuvarı lisans tanıtmak bir değiştirilmemiş ev espresso makinesi kullanan bir basınçlı sıcak su ayıklama (PHWE) yöntemini kullanır. İki deney sunulmaktadır: PHWE eugenol ve karanfil ve PHWE seselin ve (+) acetyleugenol-epoxysuberosin--dan Avustralya bitki Correa reflexa.

Basınçlı sıcak su ayıklama (PHWE) doğal ürünler Kimya Lisans Laboratuvarı keşfetmek için istihdam

Bu makalede doku lipidomik ve transkriptomik için modüler bir protokol ve inflamasyon ve nöronal aktivitenin altında kalan lipitleri, membran lipitlerini, aşağı akış habercilerini ve lipid fonksiyonu altında bulunan mRNA kodlayıcı enzimleri/reseptörleri hedefleyen nörolojik hastalık fare modellerinde plazma lipidomikleri sunulmaktadır. Örnekleme, numune işleme, ekstraksiyon ve nicelik prosedürleri özetlenmiştir.

Nörolojik Hastalıklarda Lipidomik ve Transkriptomik

Doğal ürünler, yeni ilaçların ve terapötik ajanların gelişimi için umut verici başlangıç noktalarını temsil eder. Bununla birlikte, yüksek kimyasal çeşitlilik nedeniyle, bitkilerden yeni terapötik bileşikler bulmak zor ve zaman alıcı bir iştir. Bitki özlerinden ve fraksiyonlarından antimikrobiyal ve antibiyofilm moleküllerini tanımlamak için basitleştirilmiş bir yaklaşım tanımlıyoruz.

Diş Çürüklerini Önlemek İçin Bitkilerin Özlerinden ve Fraksiyonlarından Yeni Antimikrobiyal ve Antibiyofilm Moleküllerini Tanımlamak için Sistematik Yaklaşım

Derin ötektik solvent bazlı, mikrodalga destekli ön işlem, lignoselülozik fraksiyonasyon ve yüksek saflıkta lignin geri kazanımı için yeşil, hızlı ve verimli bir süreçtir.

Olağandışı Akdeniz Lignoselülozik Kalıntılarından Ultra Hızlı Lignin Ekstraksiyonu

Bu protokol, sıvı kromatografisi-tandem kütle spektrometrisi kullanılarak analiz edilmeden önce trikloroasetik asit (TCA) protein çökeltmesi ve asit hidrolizi yoluyla biyolojik matrislerden protein olmayan amino asitlerin ekstraksiyonunu açıklamaktadır.

Sıvı Kromatografisi-Tandem Kütle Spektrometrisi Analizi için Siyanobakterilerden Protein Dışı Amino Asitlerin Ekstraksiyonu

Esrar sativa'dan glandüler kapitat saplı ve sapsız trikomların uygun ve yüksek verimli izolasyonu ve zenginleştirilmesi için bir protokol sunulmaktadır. Protokol, sadece sıvı azot, kuru buz ve naylon elekler kullanılarak trikomların kuru, tamponsuz ekstraksiyonuna dayanır ve RNA ekstraksiyonu ve transkriptomik analiz için uygundur.

Esrar sativasından Glandüler Kapitat Saplı ve Sapsız Trikomların Susuz İzolasyonu ve Zenginleştirilmesi

Kemirgenlerde gavaj yoluyla oral uygulama, kısıtlama ile ilişkili sıkıntıya neden olabilir. CBD ile zenginleştirilmiş Kenevir ekstraktının oromukozal / bukkal uygulamasını araştırdık, burada sıçanlar 15 gün boyunca ekstrakt ile 3 mg / kg / gün olarak tedavi edildi. Tedaviler, hayvanları tutmak için sevgi dolu bir dokunma tekniği kullanılarak bir mikropipet ile oral olarak uygulandı.

Kemirgenlerde kenevir ürünlerinin uygulanması için alternatif bir yöntem olarak oromukozal

Öğrenin, ultrasonik destekli ekstraksiyon ile Cannabis spp. biyokütlesinden CBD'nin verimli izolasyonunu. Bu yöntem, zamandan ve maliyetten tasarruf sağlayarak endüstriyel uygulamalar için optimize edilmiş yeşil bir süreç sunar.

Esrar Biyokütlesinden Esrar Destekli Esrar Asidinin Ultrasonik Destekli Ekstraksiyonu

Daha fazla video keşfet