Name: Wistar Albino Sıçanlarında Femur Osteotomi Modeli Geliştirme Protokolü (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-08-31T12:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 43 s
Description: Keşfedin femur osteotomi modelini Wistar albino sıçanlarında kırık iyileşmesini incelemek ve osteoanabolik ilaçların etkinliğini değerlendirmek için. Bu yöntem kemik iyileşme mekanizmalarını anlamaya yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar, araştırma finansmanı için Hindistan Hükümeti AYUSH Bakanlığı, Homeopati Araştırmaları Merkez Konseyi'ne (CCRH) teşekkür eder. Yazarlar, Central Animal Facility, AIIMS, New Delhi'nin hayvan deneylerine olan yardımları ve destekleri için ve CMET, AIIMS, Yeni Delhi'nin fotoğraf ve videografideki yardım ve destekleri için teşekkür eder.

Hayvan deneyleri, Kurumsal Hayvan Etiği Komitesi (IAEC), AIIMS, Yeni Delhi, Hindistan'dan (286/IAEC-1/2021) etik onay alındıktan sonra yapılmıştır.
1. Preoperatif prosedür
<ol><li>Ev erkek Wistar albino sıçanları, her biri 150-200 g ağırlığında, ayrı ayrı kafeslerde bir Merkezi Hayvan Tesisi'nde (CAF) 6-8 haftalıktır. Bu, birden fazla sıçan kafesleri paylaştığında cerrahi / kırık bölgesi yaralanması olmamasını sağlar.</li>
	<li>Sıçanları% 50 ±% 5 bağıl neme sahip nem kontrollü bir ortamda 23 ° C ± 2 ° C sıcaklıkta tutun, 12 saatlik karanlık / açık döngüye maruz bırakın ve gıdaya (standart yarı sentetik diyet) ad libitum erişimi verin: pelet diyeti (kuru) ve su. Standart yarı sentetik diyetin bileşimi aşağıdaki gibidir: kavrulmuş Bengal gram unu (% 60), buğday unu (% 22), kazein (% 4), yağsız süt tozu (% 5), rafine yağ (% 4), nişasta ile tuz karışımı (% 4.8) ve nişasta ile vitamin kolin karışımı (% 0.2).</li>
	<li>Sıçanları ameliyattan önce en az 48 saatlik bir süre boyunca iklimlendirin.</li>
	<li>Her sıçanı dijital bir tartım terazisinde tartın ve ağırlığı not edin.</li>
	<li>Cerrahi işleme başlamadan 15 dakika önce sıçanlara intraperitoneal (IP) sefuroksim (100 mg / kg vücut ağırlığı), tramadol (25 mg / kg vücut ağırlığı) ve ketamin (75 mg / kg vücut ağırlığı) ile ksilazin (10 mg / kg vücut ağırlığı) kombinasyonu enjeksiyonları uygulayın. Göz kuruluğunu önlemek için her iki göze de oftalmik merhem uygulayın.</li>
	<li>Saçları sağ alt ekstremiteden, yan bölgeden diz eklemine kadar, topikal bir epilasyon kremi uygulamasıyla çıkarın. NOT: Farklı parametrelerin temel analizi için her sıçanın kuyruk damarından kan (0,5 mL) toplanabilir. Ameliyattan sonra her 2 haftada bir tekrar kan toplanabilir.</li>
</ol>2. Açık osteotomi yoluyla tam transvers kırık oluşturmak için cerrahi prosedür
NOT: İşlemi gerçekleştirmek için ameliyat masası ve optimum ortam sıcaklığı (26 °C) ile belirlenmiş bir ameliyathane kullanın.
<ol><li>Balmumu bloğunu (2,5 cm derinliğe kadar balmumu içeren 30 cm x 30 cm x 4 cm'lik alüminyum tepsi) ameliyat masasına yerleştirin ve steril örtülerle örtün. Balmumu bloğu, ameliyat sırasında hayvanın pozisyonunda herhangi bir değişikliği önler.</li>
	<li>Anestezinin başlangıcını onaylayın (ayak parmağı sıkışma kaybını kontrol ederek). Anestezi uygulanan sıçanı sol lateral pozisyonda steril bir örtü üzerine yerleştirin. Bir asistandan sağ alt ekstremiteyi (diz ve kalça) uzatmada tutmasını isteyin. Femuru desteklemek için sağ bacağın altında steril sert bir destek (mermer blok) bulundurun. Cerrahi bölgeyi alkol ve betadin ile temizleyin.</li>
	<li>Kesi bölgesine (sağ uyluğun lateral yönü) lokal anestezi (0.25 mL% 1 lignokain) enjekte edin, başka bir steril örtüde bir delik açın ve ameliyat için sıçanın sadece sağ bacağını maruz bırakın.</li>
	<li>Sağ uyluğun lateral tarafına 1 cm'lik dikey bir deri kesisi verin ve 15 numaralı cerrahi bıçakla ihtiyaca göre uzatın.</li>
	<li>Metzenbaum makası kullanarak derin fasyayı ayırarak vastus lateralis kasını açığa çıkarın. Vastus lateralis'i, femur şaftına ulaşılana kadar arter forseps kullanarak kas lifleri doğrultusunda bölün.</li>
	<li>Kemiği, periosteal asansörü kullanarak ona bağlı kaslardan kurtarın.</li>
	<li>Vazovagal refleksi önlemek için periost içine ve çevresine lokal anestezi (0.2 mL% 1 lignokain) enjekte edin.</li>
	<li>No.15 cerrahi bıçağı kullanarak femur şaftının orta üçte birinde bir girinti oluşturun ve yapılan girintiye bir keski yerleştirerek (keski kaymasın diye) ve keskiye bir çekiçle hafifçe dokunarak şaftın orta-üçte birinde kemiği kırın (tam kırık). Temiz bir kırılma sağlamak için kemiği kırarken kemiği desteklemek için steril sert desteği (mermer blok) kullanın. NOT: Steril sert destek genellikle altındaki kaslarda önemli bir yaralanmaya neden olmaz.</li>
	<li>Pille çalışan bir elektrikli matkap yardımıyla tutulan steril bir K-teli (1,0 mm) kullanarak kırığı dahili olarak sabitleyin. K-telini kırık bölgesinden distal fragmanın medüller kanalına geçirin. Ardından, pille çalışan elektrikli matkabı kullanarak K-telini femur distal ucundan delin. NOT: Kullanmadan önce elektrikli matkabın yüzeyini alkolle dezenfekte edin. K-teli sabitlendikten sonra eldivenleri değiştirin.</li>
	<li>Kırığı indirgedikten sonra, K-telini distal uçtan proksimal parçanın kanalına doğru trokanterik bölgede satın alınana kadar ilerletin. Bir tel kesici kullanarak deriden çıkıntı yapan K-telinin distal kısmını kesin.</li>
	<li>Pense kullanarak K-telinin ucunu yaklaşık 90 ° 'ye bükün ve pim bölgesi pansumanı için betadin'e batırılmış bir gazlı bez bandajı kullanın. K-teli, kırığı azaltılmış bir konumda tutmak için intramedüller bir atel görevi görür.</li>
	<li>3-0 naylon dikiş kullanarak cildi kapatmadan önce tam hemostaz sağlayın. Herhangi bir kanamayı durdurmak için steril gazlı bez veya arter forseps kullanarak kanama bölgesine baskı uygulayın.</li>
	<li>Yarayı betadin ile temizleyin ve steril gazlı bez ve mikrogözenek yapışkan bant ile örtün.</li>
</ol>3. Postoperatif bakım
<ol><li>Sıçanları kafeslerine geri döndürün, normal ambulasyona izin verin ve işlemden sonraki 5 gün boyunca intraperitoneal olarak antibiyotikler (enjeksiyon sefuroksim 100 mg / kg) ve analjezikler (enjeksiyon tramadol 25 mg / kg / gün) feda edilene kadar standart bir yarı sentetik diyet vermeye devam edin. NOT: Sıçanlar, belirli bir ilacı test etmek için tedavi ve kontrol gruplarına ayrılabilir. İlaç suda çözünürse, gavage yoluyla oral olarak verilebilir. Kullanılacak ilacın dozunu hesaplamak için bireysel hayvanların ağırlığı not edilebilir. Hayvan gruplarının homojenliğini sağlamak için dahil etme ve dışlama kriterleri takip edilebilir.</li>
	<li>Hayvanları ameliyat öncesi döneme benzer koşullar altında bireysel kafeslerde barındırın. Ameliyat sonrası ağrı, yara enfeksiyonu, dikişlerin kayması veya herhangi bir karın şişmesi veya rahatsızlığı belirtisi aramak için her gün cerrahi bölgeyi kontrol edin.</li>
	<li>Kemik iyileşmesini haftada bir kez kırık bölgenin röntgeni ile değerlendirin.</li>
</ol>4. Radyolojik prosedür
<ol><li>X-ışınından önce, sıçanları intraperitoneal ketamin (50 mg / kg vücut ağırlığı) ve ksilazin (5 mg / kg vücut ağırlığı) enjeksiyonu ile uyuşturun.</li>
	<li>Aşağıdaki maruz kalma ayarlarıyla kırık uzuvun röntgenini çekmek için diz eklemi yarı esnek tutulurken, sıçanın kalça eklemini bükülmüş ve kaçırılmış bir pozisyonda tutun: Ref. kVp ≈ 62; Referans mAS = 6.4; ve otomatik pozlama ayarları (Referans mA=160). NOT: X-ışınları başlangıçta (ameliyattan 1 gün sonra) ve daha sonra kurban edilene veya 5 haftaya kadar haftada bir kez alındı.</li>
</ol>5. Hayvan ötenazisi ve nasır alımı
<ol><li>Sıçanları, sırasıyla yumuşak ve sert köprüleme nasırlarının radyolojik görünümüne dayanarak, daha önce belirlenmiş iki zaman noktasında, aşırı dozda karbondioksit (1 dakika boyunca 7-8 L / dak akış hızında% 100 CO2 uygulayın, ardından 4-5 dakikalık bir bekleme süresi uygulayın) feda edin.</li>
	<li>Cildi femura paralel olarak kesin ve nasır dokusuna zarar vermemek için üstteki kasları dikkatlice ayırın.</li>
	<li>Kalça eklemi ve nasır dokusu arasındaki kemiği çekiç ve keski kullanarak kırın. Benzer şekilde, nasır ve diz eklemi arasındaki kemiği kırın. K-telini çıkarın ve kan pıhtılarını ve yumuşak dokuyu çıkarmak için kemik parçasını tuzlu suda temizleyin.</li>
	<li>Nasırı hemen% 10 nötr tamponlu formalin (numune başına 20 mL) içeren etiketli bir kaba aktarın ve oda sıcaklığında (RT) 3 gün boyunca saklayın.</li>
</ol>6. Kemik ve nasır dokusunun kireçlenmesi
<ol><li>Nasır dokusunu formalinden alın ve kemik dokusunun dekalsifikasyonu için% 20 ETDA çözeltisinde, pH 7'de RT'de tutun.</li>
	<li>Yaklaşık 3 hafta boyunca her 2 günde bir taze EDTA solüsyonunu değiştirin ve nasır dokusunu rahatsız etmeden kemiği bir iğneyle dürterek kemik dekalsifikasyonunu kontrol edin. Optimal dekalsifikasyon, kemik dokusunun normal kumlu hissinin kaybı ile gösterilir.</li>
	<li>Tamamen kireçlenmeden sonra, nasırın sagital bölümünü kesin ve nasır dokusunun parafin bloklarını hazırlayın. Histopatolojik16 ve diğer karşılaştırmalı analizler17 için nasır dokusunun 4 μm kalınlığındaki kesitlerini kesin.</li>
</ol>

<ol><li>Wang, T., Zhang, X., Bikle, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteogenic+differentiation+of+periosteal+cells+during+fracture+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cellular+Physiology%22%5BJournal%5D)">Osteogenic differentiation of periosteal cells during fracture healing.</a> Journal of Cellular Physiology. 232 (5), 913-921 (2017).</li>
<li>Fakhry, M., Hamade, E., Badran, B., Buchet, R., Magne, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+mechanisms+of+mesenchymal+stem+cell+differentiation+towards+osteoblasts%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Molecular mechanisms of mesenchymal stem cell differentiation towards osteoblasts.</a> World Journal of Stem Cells. 5 (4), 136-148 (2013).</li>
<li>Bishop, J. A., Palanca, A. A., Bellino, M. J., Lowenberg, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+compromised+fracture+healing%5BTitle%5D)+AND+%22JAAOS+-+Journal+of+the+American+Academy+of+Orthopaedic+Surgeons%22%5BJournal%5D)">Assessment of compromised fracture healing.</a> JAAOS - Journal of the American Academy of Orthopaedic Surgeons. 20 (5), 273-282 (2012).</li>
<li>Fong, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predictors+of+nonunion+and+reoperation+in+patients+with+fractures+of+the+tibia%3A+an+observational+study%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Musculoskeletal+Disorders%22%5BJournal%5D)">Predictors of nonunion and reoperation in patients with fractures of the tibia: an observational study.</a> BMC Musculoskeletal Disorders. 14 (1), 103(2013).</li>
<li>Ramoutar, D. N., Rodrigues, J., Quah, C., Boulton, C., Moran, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Judet+decortication+and+compression+plate+fixation+of+long+bone+nonunion%3A+Is+bone+graft+necessary%5BTitle%5D)+AND+%22Injury%22%5BJournal%5D)">Judet decortication and compression plate fixation of long bone nonunion: Is bone graft necessary.</a> Injury. 42 (12), 1430-1434 (2011).</li>
<li>Goulet, J. A., Senunas, L. E., DeSilva, G. L., Greenfield, M. L. V. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autogenous+iliac+crest+bone+graft%3A+Complications+and+functional+assessment%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Orthopaedics+and+Related+Research%22%5BJournal%5D)">Autogenous iliac crest bone graft: Complications and functional assessment.</a> Clinical Orthopaedics and Related Research. 339, 76-81 (1997).</li>
<li>Stevenson, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systematic+review+and+economic+evaluation+of+alendronate%2C+etidronate%2C+risedronate%2C+raloxifene+and+teriparatide+for+the+prevention+and+treatment+of+postmenopausal+osteoporosis%5BTitle%5D)+AND+%22Health+Technology+Assessment%22%5BJournal%5D)">A systematic review and economic evaluation of alendronate, etidronate, risedronate, raloxifene and teriparatide for the prevention and treatment of postmenopausal osteoporosis.</a> Health Technology Assessment. 9 (22), 1(2005).</li>
<li>Haffner-Luntzer, M., Kovtun, A., Rapp, A. E., Ignatius, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+in+bone+fracture+healing+research%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Molecular+Biology+Reports%22%5BJournal%5D)">Mouse models in bone fracture healing research.</a> Current Molecular Biology Reports. 2 (2), 101-111 (2016).</li>
<li>Mills, L. A., Simpson, A. H. R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+models+of+bone+repair%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Bone+and+Joint+Surgery.+British+Volume%22%5BJournal%5D)">In vivo models of bone repair.</a> The Journal of Bone and Joint Surgery. British Volume. 94 (7), 865-874 (2012).</li>
<li>Houdebine, L. -M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transgenic+Animal+Models+in+Biomedical+Research%5BTitle%5D)+AND+%22Target+Discovery+and+Validation+Reviews+and+Protocols%3A+Volume+1%2C+Emerging+Strategies+for+Targets+and+Biomarker+Discovery%22%5BJournal%5D)">Transgenic Animal Models in Biomedical Research.</a> Target Discovery and Validation Reviews and Protocols: Volume 1, Emerging Strategies for Targets and Biomarker Discovery. Sioud, M. , Humana Press. Totowa, NJ. (2007).</li>
<li>Histing, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+animal+bone+healing+models%3A+Standards%2C+tips+and+pitfalls+results+of+a+consensus+meeting%5BTitle%5D)+AND+%22Bone%22%5BJournal%5D)">Small animal bone healing models: Standards, tips and pitfalls results of a consensus meeting.</a> Bone. 49 (4), 591-599 (2011).</li>
<li>Bonnarens, F., Einhorn, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+of+a+standard+closed+fracture+in+laboratory+animal+bone%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Research%22%5BJournal%5D)">Production of a standard closed fracture in laboratory animal bone.</a> Journal of Orthopaedic Research. 2 (1), 97-101 (1984).</li>
<li>Klein, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+healing+process+in+open+osteotomy+model+and+open+fracture+model%3A+delayed+healing+of+osteotomies+after+intramedullary+screw+fixation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Research%22%5BJournal%5D)">Comparison of healing process in open osteotomy model and open fracture model: delayed healing of osteotomies after intramedullary screw fixation.</a> Journal of Orthopaedic Research. 33 (7), 971-978 (2015).</li>
<li>Kolios, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Do+estrogen+and+alendronate+improve+metaphyseal+fracture+healing+when+applied+as+osteoporosis+prophylaxis%5BTitle%5D)+AND+%22Calcified+Tissue+International%22%5BJournal%5D)">Do estrogen and alendronate improve metaphyseal fracture healing when applied as osteoporosis prophylaxis.</a> Calcified Tissue International. 86 (1), 23-32 (2010).</li>
<li>Holstein, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+the+establishment+of+defined+mouse+models+for+the+study+of+fracture+healing+and+bone+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Trauma%22%5BJournal%5D)">Advances in the establishment of defined mouse models for the study of fracture healing and bone regeneration.</a> Journal of Orthopaedic Trauma. 23, 5 Suppl 31-38 (2009).</li>
<li>Umiatin, U., Dilogo, I. H., Sari, P., Wijaya, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histological+analysis+of+bone+callus+in+delayed+union+model+fracture+healing+stimulated+with+pulsed+electromagnetic+fields+%28PEMF%29%5BTitle%5D)+AND+%22Scientifica%22%5BJournal%5D)">Histological analysis of bone callus in delayed union model fracture healing stimulated with pulsed electromagnetic fields (PEMF).</a> Scientifica. 2021, 4791172(2021).</li>
<li>Han, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+osteogenic+potential+of+human+bone+callus%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">The osteogenic potential of human bone callus.</a> Scientific Reports. 6, 36330(2016).</li>
<li>Haffner-Luntzer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+mouse+model+to+study+fracture+healing+of+the+proximal+femur%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Research%22%5BJournal%5D)">A novel mouse model to study fracture healing of the proximal femur.</a> Journal of Orthopaedic Research. 38 (10), 2131-2138 (2020).</li>
<li>Aurégan, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+rat+model+of+femur+fracture+for+bone+and+mineral+research%3A+An+improved+description+of+expected+comminution%2C+quantity+of+soft+callus+and+incidence+of+complications%5BTitle%5D)+AND+%22Bone+%26+Joint+Research%22%5BJournal%5D)">The rat model of femur fracture for bone and mineral research: An improved description of expected comminution, quantity of soft callus and incidence of complications.</a> Bone & Joint Research. 2 (8), 149-154 (2013).</li>
<li>Li, Z., Helms, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drill+hole+models+to+investigate+bone+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Drill hole models to investigate bone repair.</a> Methods in Molecular Biology. 2221, 193-204 (2021).</li>
<li>Handool, K. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+a+closed+rat+tibial+fracture+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Orthopaedics%22%5BJournal%5D)">Optimization of a closed rat tibial fracture model.</a> Journal of Experimental Orthopaedics. 5 (1), 13(2018).</li>
<li>Kobata, S. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+of+bone+infection+after+open+fracture+using+a+chitosan+with+ciprofloxacin+implant+in+animal+model%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Cirurgica+Brasileira%22%5BJournal%5D)">Prevention of bone infection after open fracture using a chitosan with ciprofloxacin implant in animal model.</a> Acta Cirurgica Brasileira. 35 (8), 202000803(2020).</li>
</ol>

Yazarların hiçbirinde çıkar çatışması veya başka finansal açıklamalar bulunmamaktadır.

Bu yöntem, Wistar albino sıçanlarında kırık osteotomi modeli geliştirmek için gereken ayrıntıları açıkça açıklamaktadır. Bu model, umut verici bir osteoanabolik ilacın kırık iyileşmesindeki osteojenik etkisini değerlendirmek ve kemik iyileşmesinin inceliklerini anlamak için kullanılabilir. Bu yöntemin göze çarpan özelliği, basit olması ve çok fazla zamana veya sofistike ekipmana ihtiyaç duymamasıdır. Bu yöntemde, deneyler için kemirgen modeli olarak yetişkin erkek Wistar albino sıçanları seçilmiştir. Cinsiyet hormonları ...

Kemik, kemik oluşturan hücrelerden, osteoblastlardan ve kemik emici hücrelerden, osteoklastlardan oluşan yoğun bir bağ dokusudur. Kırık iyileşmesi, osteoblastların ve osteoklastların koordineli etkisiyle kemik defektlerinin yenilenmesiyle sonuçlanan fizyolojik bir süreçtir1. Kırık olduğunda, kırık bölgesinde osteoblastik ve osteoklastik aktivite kemik iyileşmesini belirleyen önemli faktörlerden bazılarıdır2. Kırık iyileşmesi normal seyrinden saptığında, gecikmiş bir birleşme, malunion veya birleşmeme ile sonuçlanır. 9 ay boyunca kırığın birleşme başarısızlığı olduğunda, son 3 ay içinde onarımın ilerlemesi olmadan bir kırığın birleşmediği söylenir3. Tüm kırıkların yaklaşık %10-15'inde nonunion 4'e kadar ilerleyebilecek bir onarım gecikmesiyaşanır. Tüm kırıklarda birleşmeme oranı %5-%10'dur ve tutulan kemiğe ve kırık bölgesine bağlı olarak değişir5.
Kırık kaynamamasının tedavisinde mevcut rejim cerrahi ve/veya tıbbi modaliteleri içermektedir. Şu anda, gecikmiş veya kırıkların birleşmemesi, kemik grefti gibi cerrahi stratejilerle aşılabilir. Bununla birlikte, kemik greftlemenin greft dokusunun mevcudiyeti, donör bölge ağrısı, morbidite ve enfeksiyon gibi sınırlamaları ve komplikasyonları vardır6. Tıbbi tedavi, kemik morfogenetik proteini (BMP) ve teriparatid (parathormon analogu) gibi osteoanabolik ilaçları içerir. Şu anda kullanılan osteoanabolik ajanlar, kırıkların onarımını arttırma potansiyeline sahiptir, ancak fahiş maliyetler veya istenmeyen yan etkiler gibi kısıtlamalara sahiptir7. Bu nedenle, kemik iyileşmesi için uygun maliyetli, cerrahi olmayan alternatifleri belirleme kapsamı vardır. Bir ilacın kemik iyileşme potansiyeli başlangıçta in vitro çalışmalarla belirlenebilir, ancak kavramın nihai kanıtı için in vivo çalışmalara ihtiyaç vardır. Kemik iyileşmesini arttırdığı bilinen bir ilaç in vitro olarak değerlendirilmeli ve umut verici bulunursa in vivo hayvan modeli çalışmaları için kullanılabilir. İlaç in vivo modelde kemik oluşumunu ve yeniden şekillenmesini teşvik ettiğini kanıtlarsa, bir sonraki aşamaya (yani klinik çalışmalara) geçebilir.
Hayvanlarda kırık iyileşmesini değerlendirmek, insan denemelerinden geçmeden önce kemik iyileşmesi için tanıtılan yeni bir ajanı değerlendirmek için ileriye doğru atılmış mantıklı bir adımdır. Kırık iyileşmesi ile ilgili in vivo hayvan modeli çalışmaları için, kemirgenler giderek daha popüler bir model haline gelmiştir8. Kemirgen modelleri, düşük işletme maliyetleri, sınırlı alan ihtiyacı ve kemik iyileşmesi için daha az zaman harcanması nedeniyle artan ilgi yaratmıştır9. Ek olarak, kemirgenler, kemik iyileşmesi ve yenilenmesinin moleküler mekanizmaları üzerine çalışmalara izin veren geniş bir antikor ve gen hedefleri spektrumuna sahiptir10. Bir fikir birliği toplantısı, çeşitli küçük hayvan kemik iyileştirme modellerini kapsamlı bir şekilde vurguladı ve kemik iyileşmesini etkileyen farklı parametrelere odaklandı, ayrıca birkaç küçük hayvan kırığı modeli ve implantı vurguladı11.
Temel kırılma modelleri genel olarak açık veya kapalı modellere ayrılabilir. Kapalı kırık modelleri, kemik üzerinde üç veya dört noktalı bir bükme kuvveti kullanır ve geleneksel bir cerrahi yaklaşım gerektirmez. İnsanlarda uzun kemik kırıklarına benzeyen eğik veya spiral kırıklara yol açarlar, ancak kırık yerinin ve boyutlarının standardizasyonunun olmaması bunlarda kafa karıştırıcı bir faktör olarak hareket edebilir12. Açık kırık modelleri, kemiğin osteotomisi için cerrahi erişim gerektirir, kırık bölgesinde daha tutarlı bir kırık paterni elde edilmesine yardımcı olur, ancak kapalı modellere kıyasla gecikmiş iyileşme ile ilişkilidir13. Kırık iyileşmesini incelemek için kullanılan kemik seçimi, boyutları ve erişilebilirlikleri nedeniyle esas olarak tibia ve femur olarak kalır. Kırık yerinin seçimi genellikle diyafiz veya metafizdir. Metafiz bölgesi, osteoporotik deneklerde kırık iyileşmesinin çalışıldığı durumlarda özel olarak seçilir, çünkü metafiz osteoporozdan daha fazla etkilenir14. İntramedüller pimler ve eksternal fiksatörler gibi çeşitli implantlar kırık 11,15'i stabilize etmek için kullanılabilir.
Bu çalışmanın amacı, araştırmacıların sadece femur kırığını takiben nasır gelişimini anlamalarına yardımcı olmakla kalmayıp, aynı zamanda potansiyel bir ilacın hareket ettiği mekanizmayı anlayarak kemik iyileştirici özelliklere sahip olup olmadığını belirlemeye yardımcı olabilecek basit ve takip edilmesi kolay bir kemirgen modeli geliştirmekti.

<table><tbody><tr><td>Alkol</td><td>Raman & Weil Pvt. Ltd, Mumbai, Maharashtra, Hindistan</td><td>MFG / MD / 2019/000189</td><td>Sterillium el dezenfektanı</td></tr><tr><td>Arter forseps&nbsp;</td><td>Nebula cerrahi, Gujarat, Hindistan</td><td>G.105.05S</td><td>5", düz</td></tr><tr><td>Bard-Parker kolu&nbsp;</td><td>Nebula cerrahi, Gujarat, Hindistan</td><td>G.103.03</td><td>Boyut numarası 3</td></tr><tr><td>Betadine çözeltisi</td><td>Win-medicare Yeni Delhi, Hindistan</td><td>UP14250000001</td><td>% 10 w / v Povidone iyot çözeltisi</td></tr><tr><td>Kedi pençesi deri ekartörü ve nbsp;</td><td>Nebula cerrahi, Gujarat, Hindistan</td><td>908.S</td><td>Küçük</td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Sisco araştırma laboratuvarları Pvt. Ltd, Maharashtra, Hindistan</td><td>43272</td><td>Disodyum tuzu</td></tr><tr><td>Eosin</td><td>Sigma Aldrich, Merck Life Sciences Pvt Ltd, Mumbai, Maharashtra, Hindistan</td><td>115935</td><td>Boyama solüsyonunu hazırlamak için&nbsp;</td></tr><tr><td>Forseps (düz)</td><td>Nebula cerrahi, Gujarat, Hindistan</td><td>115.06</td><td>6", düz</td></tr><tr><td>Forseps (dişli)</td><td>Nebula cerrahi, Gujarat, Hindistan</td><td>117.06</td><td>6", dişli</td></tr><tr><td>Formaldehit</td><td>Sisco araştırma laboratuvarları Pvt. Ltd, Maharashtra, Hindistan</td><td>84439</td><td>Nötr tamponlu formalini hazırlamak için&nbsp;</td></tr><tr><td>Haematoxylin</td><td>Sigma Aldrich, Merck Life Sciences Pvt Ltd, Mumbai, Maharashtra, Hindistan</td><td>104302</td><td>Boyama solüsyonunu hazırlamak için&nbsp;</td></tr><tr><td>Çekiç</td><td>Bulutsusu cerrahi, Gujarat, Hindistan</td><td>401.M</td><td></td></tr><tr><td>Enjeksiyon Sefuroksim</td><td>Akumentis Healthcare Ltd, Thane, Maharashtra, Hindistan</td><td>48 / UA / SC / P-2013</td><td>Sefuroksim sodyum IP, 1.5 g / şişe ve nbsp;</td></tr><tr><td>Enjeksiyon Ketamin</td><td>Baxter İlaç Hindistan Özel Limited, Gujarat, Hindistan</td><td>G / 28-B / 6</td><td>Ketamin hidroklorür IP, 50 mg / mL ve nbsp;</td></tr><tr><td>Enjeksiyon Ksilazin</td><td>Hint İmmünolojik Limited, Haydarabad, Telangana, Hindistan</td><td>28 / RR / AP / 2009 / F / G</td><td>Ksilazin hidroklorür USP, 20 mg / mL</td></tr><tr><td>Enjeksiyon Lignokain</td><td>Jackson laboratuvarları Pvt Limited, Pencap, Hindistan &nbsp;</td><td>1308-B</td><td>% 2 Lignokain Hidroklorür IP, 21.3 mg / mL</td></tr><tr><td>Enjeksiyon Tramadol ve nbsp;</td><td>Intas Pharmaceuticals Limited, Ahmedabad, Gujarat, Hindistan</td><td>MB / 07/500</td><td>Tramadol hidroklorür IP, 50 mg / mL</td></tr><tr><td>K-tel ve nbsp;</td><td>Nebula cerrahi, Gujarat, Hindistan</td><td>166 (1mm)</td> <td>12 ", çift uçlu</td></tr><tr><td>K-tel ve lrm yerleştirmek için mekanik matkap</td><td>; Bosch, Almanya&nbsp;</td><td>06019F70K4</td><td>GSR 120-LI Profesyonel</td></tr><tr><td>Metzenbaum kesme makası&nbsp;</td><td>Nebula cerrahi, Gujarat, Hindistan</td><td>G.121.06S</td><td>6 ", düz</td></tr><tr><td>İğne tutucu</td><td>Nebula cerrahi, Gujarat, Hindistan</td><td>G.108.06</td><td>6 ", düz</td></tr><tr><td>Oftalmik merhem&nbsp;</td><td>GlaxoSmithKline Pharmaceutical Limited, Bengaluru, Karnataka, Hindistan</td><td>KTK/28a/467/2001</td><td>Neomisin, Polimiksin B sülfat ve Basitrasin çinko oftalmik merhem USP</td></tr><tr><td>Osteotom (keski)</td> <td>Nebula cerrahi, Gujarat, Hindistan</td><td>1001.S.10</td><td>10 mm, düz</td></tr><tr><td>Periosteal asansör&nbsp;</td><td>Nebula cerrahi, Gujarat, Hindistan</td><td>918.10.S</td><td>10 mm, düz</td></tr><tr><td>Pense cum tel kesici</td><td>Nebula cerrahi, Gujarat, Hindistan</td><td>604.65</td><td></td></tr><tr><td>Reynold' s makas</td><td>Nebula cerrahi, Gujarat, Hindistan</td><td>G.110.06S</td><td>6", düz</td></tr><tr><td>Standart yarı sentetik diyet&nbsp;</td><td>Ashirvad Industries, Chandigarh, Hindistan</td><td>Katalog numarası mevcut değil</td><td>Kullanılan malzemelerde sağlanan ayrıntılı bileşim</td></tr><tr><td>Uygulama için betadin tutmak için çelik kap</td><td>Yerel satın alma</td><td>Katalog numarası mevcut</td><td></td>değil</tr><tr><td>Otoklavlama aletleri için kapaklı çelik tepsi</td><td>Yerel satın alma</td><td>Katalog numarası yok</td><td></td></tr><tr><td>Steril gazlı bez</td><td>İdeal Sağlık Endüstrileri, Delhi, Hindistan ve nbsp;</td><td>E(0047)/14/MNB/7951</td><td>Steril, 5cmx5cm, 12 kat</td></tr><tr><td>Destek için steril mermer blok</td><td>Yerel satın alma</td><td>Katalog numarası mevcut değil</td><td>Yerel olarak üretilmiş; otoklavlanabilir</td></tr><tr><td>Şırınga ve iğne (1 mL)&nbsp;</td><td>Becton Dickinson India Pvt. Ltd., Haryana, Hindistan</td><td>REF 303060</td><td>26 G x 1/2 (0.45 mm x 13 mm) iğneli 1 mL steril Şırınga</td></tr><tr><td>ve iğne (2 mL)&nbsp;</td><td>Becton Dickinson India Pvt. Ltd., Haryana, Hindistan</td><td>REF 307749</td><td>24 G x 1 '' (0.55 mm x 25 mm) iğneli 2 mL steril şırınga</td></tr><tr><td>Şırınga ve iğne (10 mL)&nbsp;</td><td>Hindustan Şırıngalar & Tıbbi Cihazlar Ltd. Faridabad, Hindistan&nbsp;</td><td>334-B(H)</td><td>10 mL steril şırınga, 21 G x1,5" (0,80 mm x 38 mm) iğne ile</td></tr><tr><td>Cerrahi bıçaklar (boyut no.15)</td><td>Paramount Surgimed Ltd, Yeni Delhi, Hindistan Medline Industries Inc, IL, ABD</td><td>REF</td> MDS15115E <td>Steril, Tek kullanımlık</td></tr><tr><td>Cerrahi bıçaklar (boyut no.24)</td><td>Paramount Surgimed Ltd, Yeni Delhi, Medline Industries Inc, IL, ABD</td><td>REF</td> MDS15124E <td>Steril, Tek kullanımlık</td></tr><tr><td>Sütürler</td><td>Healthium Medtech Pvt Ltd, Bangalore, Karnataka, Hindistan</td><td>SN 3318</td><td>4-0, 16 mm, 3/8 daire kesme iğnesi, monofilament poliamid sütür&nbsp;</td></tr><tr><td>Alüminyum tepside balmumu bloğu&nbsp;</td><td>Yerel olarak üretilmiştir Katalog</td><td>numarası mevcut değil</td><td>30 cm x 30 cm x 4 cm balmumu içeren alüminyum tepsi (hayvanın kaymasını önlemek için)</td></tr><tr><td>X-ray cihazı</td><td>Philips India Ltd, Gurugram, Haryana</td><td>SN19861013</td><td>Model: Philips Digital Diagnost R 4.2&nbsp;</td></tr></tbody></table>

wistar albino sıçanlarında femur osteotomi modeli geliştirme protokolü

Protocol for Developing a Femur Osteotomy Model in Wistar Albino Rats

Kırık iyileşmesi, osteoblastların ve osteoklastların koordineli etkisiyle kemik defektlerinin yenilenmesiyle sonuçlanan fizyolojik bir süreçtir. Osteoanabolik ilaçlar, kırıkların onarımını arttırma potansiyeline sahiptir, ancak yüksek maliyetler veya istenmeyen yan etkiler gibi kısıtlamalara sahiptir. Bir ilacın kemik iyileşme potansiyeli başlangıçta in vitro çalışmalarla belirlenebilir, ancak kavramın nihai kanıtı için in vivo çalışmalara ihtiyaç vardır. Amacımız, araştırmacıların femur şaftının kırılmasını takiben nasır oluşumunun gelişimini anlamalarına yardımcı olabilecek ve potansiyel bir ilacın kemik iyileştirici özelliklere sahip olup olmadığını belirlemeye yardımcı olabilecek bir femur osteotomi kemirgen modeli geliştirmekti. Yetişkin erkek Wistar albino sıçanları, Kurumsal Hayvan Etik Kurulu izninden sonra kullanıldı. Kemirgenler anestezi altına alındı ve aseptik koşullar altında, açık osteotomi kullanılarak femurların şaftlarının ortada üçte birinde tam enine kırıklar oluşturuldu. Kırıklar intramedüller K-teller kullanılarak azaltıldı ve internal olarak sabitlendi ve sekonder kırık iyileşmesinin gerçekleşmesine izin verildi. Ameliyattan sonra 5 gün boyunca intraperitoneal analjezikler ve antibiyotikler verildi. Sıralı haftalık röntgenler nasır oluşumunu değerlendirdi. Sıçanlar radyolojik olarak önceden belirlenmiş zaman noktalarına göre kurban edildi ve kırık nasır gelişimi radyolojik olarak ve immünohistokimya kullanılarak analiz edildi.

Bu çalışma Wistar albino sıçanlarında femur osteotomi modeli geliştirmek amacıyla yapılmıştır. Bu model, kemik iyileşmesini ve umut verici bir osteoanabolik ilacın kemik iyileşmesinde osteojenik etkisini değerlendirmek için kullanılabilir. Standart cerrahi önlemler ve protokoller takip edildi. İşlem için steril önlükler, perdeler ve cerrahi ekipmanlar kullanıldı (Şekil 1). Ekipman (Tablo 1) ameliyattan 48 saat önce sterilize edildi. Hayvanların her zaman ağrısız ve enfeksiyo...

Burada, Wistar albino sıçanlarının femurunun şaftını iyatrojenik olarak kırmak ve nasır gelişimini takip etmek için bir protokol sunuyoruz. Bu femur osteotomi modeli, araştırmacıların kırık iyileşme sürecini değerlendirmelerine ve bir ilacın kırık iyileşmesini nasıl etkileyebileceğini incelemelerine yardımcı olabilir.

Wistar Albino Sıçanlarında Femur Osteotomi Modeli Geliştirme Protokolü

Fracture healing is a physiological process resulting in the regeneration of bone defects by the coordinated action of osteoblasts and osteoclasts. ...

Bu femur osteotomi modeli, araştırmacıların kırık iyileşme sürecini incelemelerine ve bir ilacın kırık iyileşmesini nasıl etkileyebileceğini değerlendirmelerine yardımcı olabilir. Araştırmacıların bir ilacın kemik iyileştirici özelliklere sahip olup olmadığını belirlemelerine ve etki mekanizmasını anlamalarına yardımcı olabilecek basit ve takip edilmesi kolay bir kemirgen modelidir. Esas olarak kırık iyileşmesini gözlemlemeye ve analiz etmeye odaklansa da, hastalık patogenezi hakkında da fikir verebilir.Bu yöntem, sağlık ve hastalıkta kemik iyileşmesi konusunda gelecekteki araştırmalara rehberlik edebilir. Potansiyel osteoanabolik ilaçların etkisini değerlendirmek için kullanılabilir. Uygun bir kırılma hattının indüklenmesi ve bir K-teli ile kırılma fiksasyonu zordur.Birkaç pratik seansı yardımcı olmalıdır. Bu yöntemin basitliği ve tekrarlanabilirliği, görsel gösteriminde açıkça görülmektedir Laboratuvarımdan genç bir sakin olan Pawan Pagaku, prosedürün gösterilmesine yardımcı olacaktır. Başlamak için ameliyat masasına 2,5 santimetre derinliğe kadar balmumu içeren balmumu bloğunu yerleştirin ve steril örtülerle örtün.Sağ uyluğun lateral tarafında bir santimetre dikey deri kesisi ya

protocol-for-developing-a-femur-osteotomy-model-in-wistar-albino-rats

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Kemik onarımı alanındaki klinik öncesi araştırmaların bir kısıtlaması, iyileşen bir kemik lezyonundaki lokal mekanik ortam üzerinde deneysel kontrol eksikliğidir. Fiksatör sertliğini in vivo olarak değiştirme yeteneğine sahip kemik onarımı için eksternal bir fiksatörün tasarımını ve kullanımını rapor ediyoruz.

Ayarlanabilir Sertlik, Sıçan Femur Osteotomi ve Segmental Kemik Hata Modelleri için Eksternal Fiksatör

Boyuna değerlendirilmiş vivo içinde bir semiautomated microcomputed tomografi tabanlı nicel yapısal analizi kullanarak olabilir bir çıplak sıçan vertebral kompresyon Osteoporoz ile ilgili kırık modeli oluşturmak için bu iletişim kuralını hedefidir.

Semiautomated boyuna Microcomputed tomografi tabanlı nicel yapısal analizi bir çıplak sıçan vertebra kırığı Osteoporoz ile ilgili Model

Bu çalışmada yeni geliştirilen eksternal fiksatör oyalama osteogenesis için femoral köstebeğiyle model hangi izni eksternal fiksatör çıkarıldıktan sonra hayvan tarafından ağırlık taşıyan fizyolojik bir tekrarlanabilir ve detaylı iletişim kuralını kullanarak açıklar.

Oyalama Osteogenesis fonksiyonel rejenere uyluk için önde gelen bir fare modeli için verimli ve tekrarlanabilir bir protokol

Vivo memeli modellerinin kritik ölçekli kemik defektleri ortopedik tedavi ve şifa mekanizmaları eğitim araştırmacılar için gereklidir. Burada, bir protokol tekrarlanabilir, gelen bir segmental, femur kusurları eksternal fiksasyon kullanarak stabilize Sıçanlarda oluşturulması için tanıtmak.

Güvenilir ve tekrarlanabilir kritik ölçekli gelen bir Segmental femur kusur manken özel eksternal fiksatör ile stabilize Sıçanlarda

Bu protokol, sıçanların femoral troklear oluğunda delikler açarak ve sonraki ağrı davranışını ve histopatolojik değişiklikleri ölçerek tam kat kıkırdak defektleri (FTCD) modeli oluşturur.

Tam Kat Kıkırdak Defektlerinin Sıçan Modelinin Geliştirilmesi ve Değerlendirilmesi

Burada, sıçan femoral diyafiz dokusunda kutu boşluğu defekti oluşturmak için bir protokol sunuyoruz. Bu model, biyomekanik stres altında biyomalzeme performansını değerlendirebilir ve intramembranöz osteogenez ile ilgili kemik rejenerasyon mekanizmalarını keşfedebilir.

Sıçan Femora'nın Kortikal Kemiğinde Bir Kutu Boşluğu Defekti Modeli Oluşturma

İmplantların bir sıçan modeline yerleştirilmesi, klinik araştırmalar için önemli bir deneysel prosedürdür. Bu çalışma, diyabet ve osteoporozlu sıçan modellerinin tibiasına titanyum implantların implante edilmesi için kapsamlı bir cerrahi protokol sunmaktadır.

Sıçan Tibia Diyabet ve Osteoporoz Modellerinde Cerrahi Kemik İmplantasyon Tekniği

Protokol, elastik terapötik bant kullanarak femur başının steroid kaynaklı osteonekrozu için basit ve uygun maliyetli bir sıçan ağırlık taşıma eğitim modeli oluşturmayı göstermektedir.

Sıçanlarda Femur Başının Steroid ile İndüklenen Osteonekrozunun Gerilimsiz Ağırlık Taşıma Modeli

Bu mevcut protokol, ovariektomi kullanılarak bir sıçan osteosarkopeni modeli oluşturmak için bir prosedürü özetlemektedir.

OVARİLEKTİMİ İLE OSTEOSARKOPENİ İÇİN FARELİ MODEL OLUŞTURULMASI

Bu çalışma, kemik ikame malzemelerinin mekanik ve osteojenik performansını dahili veya dış fiksasyon kullanmadan, yük taşıyıcı koşullarda değerlendirmek için sıçan femur yarı-segmental defekt modeli oluşturmuştur.

Yük taşıyan bölgelerde kemik ikamesi performansını değerlendirmek için sıçanlarda yarı-segmental diyafizal kemik defekti modeli

Çalışma, sıçan radyal kırık modelinde stabil iç fiksasyon için dikişler ve titanyum iğnelerini yenilikçi bir şekilde birleştiriyor. Kırık iyileşmesi mikro-bilgisayarlı tomografi (mikro-BT) ile değerlendirildi ve birincil dorsal kök ganglion (DRG) nöronları izole edilip daha ileri inceleme için kültürlendi.

Fare Radyal Kırıkları İçin Yeni Bir Dahili Fiksasyon Modelinin Geliştirilmesi: Kırık İyileşme Değerlendirmesi ve Dorsal Kök Ganglion İzolasyonu

Keşfedin femur osteotomi modelini Wistar albino sıçanlarında kırık iyileşmesini incelemek ve osteoanabolik ilaçların etkinliğini değerlendirmek için. Bu yöntem kemik iyileşme mekanizmalarını anlamaya yardımcı olur.

Wistar Albino Sıçanlarında Femur Osteotomi Modeli Geliştirme Protokolü

Daha fazla video keşfet