July 12th, 2024
Şeffaf zebra balığı embriyolarının yumurta sarısına ksenotransplantasyon için basit, hızlı bir evreleme yöntemi ile optimize edilmiş bir protokol tarif ediyoruz. Enjeksiyon sonrası analizler, akış sitometrisi ile ksenotransplante edilen hücrelerin sağkalımını ve hastalık yükünün değerlendirilmesini içerir.
Normal ve malign hematopoezin kontrolü hakkında moleküler içgörü kazanmaya ve daha sonra bu içgörüleri kan kanserlerinin tedavisi için yeni tedaviler geliştirmek için kullanmaya çalışıyoruz. Tümör ksenogreftleri, genetik bir değişikliğin veya tedavinin tümör davranışı üzerindeki etkisini değerlendirmek için vazgeçilmez bir araçtır. Bununla birlikte, fare ksenogreftleri pahalıdır, zaman alıcıdır ve kapsamı sınırlıdır.
Tümör ksenotransplantasyonu için zebra balığı kullanmak tüm bu dezavantajların üstesinden gelir. Bu protokolde, ksenotransplantasyon için verimi artıran kolay ve hızlı bir montaj süreci gösteriyoruz. Ayrıca, inokulumun kalitesini bilmek için hücre boyamayı ve ardından hastalık yükünü değerlendirerek veya nicelleştirerek tümör ilerlemesini değerlendirmek için akış sitometrisini kullanıyoruz.
Bu yaklaşımı, insan kanserlerinin büyük çoğunluğunu yönlendiren Ras / MAP kinaz kaskadının işlevini bloke etmenin yeni yollarını belirlemek için kullanmayı amaçlıyoruz. Ve bunu, Ras / MAP kinaz kaskadının katalitik aktivitesini engellemeye çalışarak değil, daha ziyade, modifiye ettiği kansere neden olan substratları fosforile etme yeteneğini önleyerek yapacağız.
Bu protokol, şeffaf zebra balığı embriyolarının sarısına ksenotransplantasyon için bir yöntem tanımlamaktadır ve hızlı aşamalandırma tekniğini kullanmaktadır. Çalışma, akış sitometrisi kullanılarak hücre hayatta kalma ve hastalık yükünü değerlendirmek için enjeksiyon sonrası analizler içermektedir.
Rapid xenotransplantation analysis in transparent zebrafish embryos enables high-throughput, cost-effective in vivo tumor modeling for early-stage oncology discovery. This approach accelerates hypothesis testing and disease burden quantification, supporting predictive confidence in target validation and mechanistic de-risking. The method's scalability and quantitative outputs position it as a valuable asset for portfolio triage and preclinical decision-making.
This zebrafish xenotransplantation method integrates into the discovery-to-preclinical continuum, bridging early target validation, lead identification, and translational research.