Name: Bir Murin Modelinde Glioblastomun İki Fotonlu İntravital Mikroskobu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-03-01T14:15:00.000+00:00
Duration: 7 min 25 s
Description: Keşfedin, iki fotonlu intravital mikroskopi kullanarak murin modelde glioblastoma tedavisinde nanopartikül dağılımını ve ilaç teslimatını gerçek zamanlı görüntüleme yöntemini.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Stanford Wu Tsai Nörobilim Mikroskopi Servisi'ne, Stanford In Vivo Görüntülemede Yenilikler Merkezi'ne (SCi3) - küçük hayvan görüntüleme merkezine, NIH S10 Paylaşılan Enstrümantasyon Hibesi'ne (S10RR026917-01, PI Michael Moseley, Ph.D.) ve Porter Drive'daki Stanford Klinik Öncesi Görüntüleme Tesisi'ne bu proje için ekipman ve altyapı sağladıkları için teşekkür ederiz. Bu çalışma, Ulusal Çocuk Sağlığı ve İnsani Gelişme Enstitüsü'nün R01HD103638 numaralı hibesi ile desteklenmiştir. Schnitzer Group, Stanford Üniversitesi'ne teşekkür ederiz; Zuo laboratuvarı, Santa Cruz Üniversitesi; ve Nörovasküler Görüntüleme Laboratuvarı, Boston Fotonik Merkezi, Boston Üniversitesi, iki foton görüntüleme ve kraniyal pencere modelleri üzerine eğitim tartışmaları için.

Farelerde 2P-IVM Kullanarak Beyin Tümörlerinde Nanopartiküllerin Gerçek Zamanlı Takibi

<ol><li>Denk, W., Strickler, J. H., Webb, W. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two-photon+laser+scanning+fluorescence+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Two-photon laser scanning fluorescence microscopy.</a> Science. 248 (4951), 73-76 (1990).</li>
<li>Wang, Z., McCracken, S., Williams, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transpupillary+two-photon+in+vivo+imaging+of+the+mouse+retina%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Transpupillary two-photon in vivo imaging of the mouse retina.</a> J Vis Exp. 168, 61970(2021).</li>
<li>Zhang, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+two-photon+microscopy+reveals+the+contribution+of+Sox9%2B+to+kidney+regeneration+in+a+mouse+model+with+extracellular+vesicle+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">In vivo two-photon microscopy reveals the contribution of Sox9+ to kidney regeneration in a mouse model with extracellular vesicle treatment.</a> J Biol Chem. 295 (34), 12203(2020).</li>
<li>Jang, W. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two-photon+microscopy+of+Paneth+cells+in+the+small+intestine+of+live+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Two-photon microscopy of Paneth cells in the small intestine of live mice.</a> Sci Rep. 8 (1), 14174(2018).</li>
<li>Ihler, F., Bertlich, M., Weiss, B., Dietzel, S., Canis, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two-photon+microscopy+allows+imaging+and+characterization+of+cochlear+microvasculature+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Res+Int%22%5BJournal%5D)">Two-photon microscopy allows imaging and characterization of cochlear microvasculature in vivo.</a> Biomed Res Int. 2015, 154272(2015).</li>
<li>Matsuura, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravital+imaging+with+two-photon+microscopy+reveals+cellular+dynamics+in+the+ischeamia-reperfused+rat+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Intravital imaging with two-photon microscopy reveals cellular dynamics in the ischeamia-reperfused rat heart.</a> Sci Rep. 8 (1), 15991(2018).</li>
<li>Veres, T. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intubation-free+in+vivo+imaging+of+the+tracheal+mucosa+using+two-photon+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Intubation-free in vivo imaging of the tracheal mucosa using two-photon microscopy.</a> Sci Rep. 7 (1), 694(2017).</li>
<li>Zong, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Large-scale+two-photon+calcium+imaging+in+freely+moving+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Large-scale two-photon calcium imaging in freely moving mice.</a> Cell. 185 (7), 1240-1256.e30 (2022).</li>
<li>Takasaki, K., Abbasi-Asl, R., Waters, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Superficial+bound+of+the+depth+limit+of+two-photon+imaging+in+mouse+brain%5BTitle%5D)+AND+%22eNeuro%22%5BJournal%5D)">Superficial bound of the depth limit of two-photon imaging in mouse brain.</a> eNeuro. 17 (1), (2019).</li>
<li>Birkner, A., Konnerth, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deep+two-photon+imaging+in+vivo+with+a+red-shifted+calcium+indicator%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Deep two-photon imaging in vivo with a red-shifted calcium indicator.</a> Methods Mol Biol. 1929, 15-26 (1929).</li>
<li>Busche, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+two-photon+calcium+imaging+of+hippocampal+neurons+in+Alzheimer+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">In vivo two-photon calcium imaging of hippocampal neurons in Alzheimer mouse models.</a> Methods Mol Biol. 1750, 341-351 (2018).</li>
<li>Li, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+sensitive+two-photon+probe+to+selectively+detect+monoamine+oxidase+B+activity+in+Parkinson%27s+disease+models%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">A sensitive two-photon probe to selectively detect monoamine oxidase B activity in Parkinson's disease models.</a> Nat Commun. 5, 3276(2014).</li>
<li>Madden, K. S., Zettel, M. L., Majewska, A. K., Brown, E. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+tumor+imaging%3A+live+imaging+of+glioma+by+two-photon+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harb+Protoc%22%5BJournal%5D)">Brain tumor imaging: live imaging of glioma by two-photon microscopy.</a> Cold Spring Harb Protoc. 2013 (3), (2013).</li>
<li>Ricard, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phenotypic+dynamics+of+microglial+and+monocyte-derived+cells+in+glioblastoma-bearing+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Phenotypic dynamics of microglial and monocyte-derived cells in glioblastoma-bearing mice.</a> Sci Rep. 6, 26381(2016).</li>
<li>Soubéran, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+VEGF+blockade+on+the+dynamics+of+the+inflammatory+landscape+in+glioblastoma-bearing+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neuroinflammation%22%5BJournal%5D)">Effects of VEGF blockade on the dynamics of the inflammatory landscape in glioblastoma-bearing mice.</a> J Neuroinflammation. 16 (1), 191(2019).</li>
<li>Zhang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+vivo+reveals+specific+nanoparticle+target+binding+in+a+syngeneic+glioma+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Nanoscale%22%5BJournal%5D)">Real-time vivo reveals specific nanoparticle target binding in a syngeneic glioma mouse model.</a> Nanoscale. 14 (15), 5678-5688 (2022).</li>
<li>Wartchow, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+with+cyclic+AMP+activators+reduces+glioblastoma+growth+and+invasion+as+assessed+by+two-photon+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Treatment with cyclic AMP activators reduces glioblastoma growth and invasion as assessed by two-photon microscopy.</a> Cells. 10 (3), 556(2021).</li>
<li>Jiang, L. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Label-free+detection+of+fibrillar+collagen+deposition+associated+with+vascular+elements+in+glioblastoma+multiforme+by+using+multiphoton+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Microsc%22%5BJournal%5D)">Label-free detection of fibrillar collagen deposition associated with vascular elements in glioblastoma multiforme by using multiphoton microscopy.</a> J Microsc. 265 (2), 207-213 (2017).</li>
<li>Chen, Z., Ross, J. L., Hambardzumyan, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravital+2-photon+imaging+reveals+distinct+morphology+and+infiltrative+properties+of+glioblastoma-associated+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Intravital 2-photon imaging reveals distinct morphology and infiltrative properties of glioblastoma-associated macrophages.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 116 (28), 14254-14259 (2019).</li>
<li>Zhang, Y. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Labeling+human+mesenchymal+stem+cells+with+gold+nanocages+for+in+vitro+and+in+vivo+tracking+by+two-photon+microscopy+and+photoacoustic+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Theranostics%22%5BJournal%5D)">Labeling human mesenchymal stem cells with gold nanocages for in vitro and in vivo tracking by two-photon microscopy and photoacoustic microscopy.</a> Theranostics. 3 (8), 532-543 (2013).</li>
<li>Schindelin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fiji%3A+an+open-source+platform+for+biological-image+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Fiji: an open-source platform for biological-image analysis.</a> Nat Methods. 9 (7), 676-682 (2012).</li>
<li>Hoeferlin, G. F., Menendez, D. M., Krebs, O. K., Capadona, J. R., Shoffstall, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+thermal+damage+from+robot-drilled+craniotomy+for+cranial+window+surgery+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Assessment of thermal damage from robot-drilled craniotomy for cranial window surgery in mice.</a> J Vis Exp. 189, 64188(2022).</li>
<li>Holtmaat, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((high-resolution+imaging+in+the+mouse+neocortex+through+a+chronic+cranial+window%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">high-resolution imaging in the mouse neocortex through a chronic cranial window.</a> Nat Protoc. 4 (8), 1128-1144 (2009).</li>
<li>Heo, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+soft%2C+transparent%2C+freely+accessible+cranial+window+for+chronic+imaging+and+electrophysiology%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">A soft, transparent, freely accessible cranial window for chronic imaging and electrophysiology.</a> Sci Rep. 6, 27818(2016).</li>
<li>Kim, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+optical+access+to+an+estimated+one+million+neurons+in+the+live+mouse+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Long-term optical access to an estimated one million neurons in the live mouse cortex.</a> Cell Rep. 17 (12), 3385-3394 (2016).</li>
<li>Kılıç, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+cranial+windows+for+long+term+multimodal+neurovascular+imaging+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Physiol%22%5BJournal%5D)">Chronic cranial windows for long term multimodal neurovascular imaging in mice.</a> Front Physiol. 11, 612678(2021).</li>
<li>Helm, P. J., Ottersen, O. P., Nase, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+optical+properties+of+the+mouse+cranium-implications+for+in+vivo+multi+photon+laser+scanning+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Analysis of optical properties of the mouse cranium-implications for in vivo multi photon laser scanning microscopy.</a> J Neurosci Methods. 178 (2), 316-322 (2009).</li>
<li>Lu, W., Sun, Q., Wan, J., She, Z., Jiang, X. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cationic+albumin-conjugated+pegylated+nanoparticles+allow+gene+delivery+into+brain+tumors+via+intravenous+administration%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Cationic albumin-conjugated pegylated nanoparticles allow gene delivery into brain tumors via intravenous administration.</a> Cancer Res. 66 (24), 11878-11887 (2006).</li>
<li>Zhang, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LDLR-mediated+peptide-22-conjugated+nanoparticles+for+dual-targeting+therapy+of+brain+glioma%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">LDLR-mediated peptide-22-conjugated nanoparticles for dual-targeting therapy of brain glioma.</a> Biomaterials. 34 (36), 9171-9182 (2013).</li>
<li>Xin, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+anti-glioblastoma+efficacy+by+PTX-loaded+PEGylated+poly%28%C9%9B-caprolactone%29+nanoparticles%3A+In+vitro+and+in+vivo+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Pharm%22%5BJournal%5D)">Enhanced anti-glioblastoma efficacy by PTX-loaded PEGylated poly(ɛ-caprolactone) nanoparticles: In vitro and in vivo evaluation.</a> Int J Pharm. 402 (1-2), 238-247 (2010).</li>
<li>Valable, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+MRI+tracking+of+exogenous+monocytes%2Fmacrophages+targeting+brain+tumors+in+a+rat+model+of+glioma%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroimage%22%5BJournal%5D)">In vivo MRI tracking of exogenous monocytes/macrophages targeting brain tumors in a rat model of glioma.</a> Neuroimage. 40 (2), 972(2008).</li>
<li>Jia, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phototheranostics%3A+Active+targeting+of+orthotopic+glioma+using+biomimetic+proteolipid+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Nano%22%5BJournal%5D)">Phototheranostics: Active targeting of orthotopic glioma using biomimetic proteolipid nanoparticles.</a> ACS Nano. 13 (1), 386-398 (2021).</li>
<li>Asan, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+correlates+of+gray+matter+volume+changes+in+magnetic+resonance+morphometry+identified+by+two-photon+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Cellular correlates of gray matter volume changes in magnetic resonance morphometry identified by two-photon microscopy.</a> Sci Rep. 11, 4234(2021).</li>
</ol>

Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması olmadığını beyan ederler.

Floresan etiketli demir oksit NP'lerin tümör iletimini değerlendirmek için bir kraniyal pencereden 2P-IVM kullanarak gerçek zamanlı in vivo NP takibi için bir yöntem sunuyoruz. Bu prosedür için cerrahi teknik, sabit bir el ve ileri deneysel cerrahi beceriler gerektirir. Canlı hayvan deneyimine geçmeden önce karkaslar veya hayaletler kullanarak pratik yapmanız önerilir. Alternatif olarak, Hoeferlin ve ark. termal hasarı azaltmak, cerrahi teknik değişkenliğini en aza indirmek ve cerrahiyi standartlaştırmak için robotik bir matkap uyguladı22.
Pencerenin boyutu başka bir kritik parametreyi temsil eder. Daha büyük bir pencere, tümörün daha büyük bir kısmının 2P-IVM ile görüntülenmesini sağlayacaktır. Literatürde 3-7 mm arasındaki boyutlar tanımlanmıştır23. Bununla birlikte, daha büyük pencereler beyin eğriliğine uyum sağlayamaz ve bu da bölgesel basıncın artmasına neden olabilir24. Bu kısıtlamanın üstesinden gelmek için, bunun yerine "cam kafatası" olarak adlandırılan bir kafatası kullanılabilir25. Geleneksel cam pencerelerle karşılaştırıldığında, bu yöntem beyin eğriliğini barındıran ve böylece korteks üzerindeki odak basıncını azaltırken daha büyük pencerelerin oluşturulmasına izin veren kavisli cam kullanır. Bu tip kavisli cam ticari olarak mevcut değildir ve yalnızca 2P-IVM'de sınırlı uygulamalara sahiptir, çünkü kavisli yüzey yansıma artefaktlarına neden olarak pencerenin görüntülenebilecek alanını sınırlar. Diğer bir alternatif ise silikon bazlı bir pencere24'tür. Bir yandan bu yöntem, oluşturulacak pencerenin boyutu ve biçimi konusunda daha fazla esneklik sunar. Ek olarak, pencere arızası ve iltihaplanma oranları açısından klasik cam pencerelerle karşılaştırılabilir sonuçlar bildirilmiştir. Öte yandan, polimer esaslı pencerelerde 2 fotonlu görüntüleme kalitesinin cam pencerelere göre daha hızlı düştüğü ve uzun süreli uygulamalar için uygun olmadığı gösterilmiştir26. İnceltilmiş bir kafatası kraniyal penceresi başka bir alternatifi temsil eder. Klasik cam pencereden daha az invaziv olmakla birlikte, burada tarif edilenle aynı tekniği kullanarak GBM hücre implantasyonuna izin vermez. Ek olarak, tutarlı bir kafatası kalınlığı elde etmek zordur ve sonuç olarak bu, 2P-IVM27'de önemli artefaktlara neden olabilir.
Hücre hattı ve implante edilen GBM hücrelerinin miktarı, çalışma zaman çizelgesini planlarken göz önünde bulundurulması gereken diğer önemli hususlardır. C6 sıçan glioma hücre hattı, GBM araştırmalarında en yaygın kullanılan hücre hatlarından biridir. Sıçanlarda ve farelerde, intrakraniyal implantasyonlar için 5 x 104 ve 5 x 106 arasında hücre sayıları bildirilmiştir 27,28,29,30,31. Genel bir kural olarak, daha fazla sayıda hücre implante edilirken, daha hızlı tümör büyümesi beklenir. Bu protokolde 1 x 105 hücre implante edildi ve implantasyon sonrası 11. ve 12. günlerde görüntüleme yapıldı. Xin ve ark. BALB / c çıplak farelere 1 x 105 C6 hücresi implante etti ve implantasyondan sonraki 7. günde MRG'de ileri GBM tespit ettiğini ve 15 gün sonra mortalitenin arttığını bildirdi30. Buna karşılık, Jia ve ark. daha fazla sayıda hücre (1 x 106) ve aynı fare suşu kullandı ve MRG'de 7. günde, GBM dokusunda soluk bir Evans mavisi lekesi ile gösterildiği gibi, hafifçe bozulmuş bir kan-beyin bariyeri (BBB) ile küçük bir tümör kitlesi tespit etti32. 14. günde, Evans mavi lekesi 7. günden daha güçlüydü ve bu da BBB'nin oldukça bozulduğunu gösteriyor. Buna karşılık, tümör büyümesi, hayvanların deneyde ne kadar süre tutulabileceğini de etkiler. Bu, uzunlamasına görüntüleme çalışmaları için hayvan refahının önemli bir hususudur. Kronik kraniyal pencerelerin implantasyondan sonra 6 aya kadar görüntüleme için uygun olduğu bildirilmiştir26.
Bu protokolde kullanılan nanopartiküller demir oksit ve florofor bileşenlerinden oluşmaktadır. Olası uygulamalar arasında yeni terapötik ilaçların, hücresel terapötiklerin tümör iletiminin araştırılması ve tümör damar sistemi ve tümör mikroçevresi üzerindeki müdahaleler yer alır. Farklı ilaç adayları ve kombinasyon tedavileri hücresel ve moleküler düzeyde değerlendirilebilir. NP'lerin demir oksit bileşeni, 2P-IVM'ye ek olarak MRI veya manyetik parçacık görüntüleme ile multimodal görüntülemeye izin verir. MRG klinik olarak anlamlı bir görüntüleme yöntemini temsil ederken, anatomik çözünürlüğü intravital mikroskopiden daha düşüktür33.
Bu yöntemin de belirli sınırlamaları vardır. Fare beyin atlasına göre beyin koordinatları C57BL/6J fareler için standartlaştırılmıştır ve fare türüne, cinsiyetine ve yaşına bağlı olarak ayarlanmalıdır. Ayrıca, iki fotonlu görüntüleme ile yalnızca yaklaşık 450 μm'lik sınırlı bir derinliğe erişilebilir9. Bu nedenle, 2P-IVM ile tümörün sadece kısmi karakterizasyonu mümkündür ve tümör özelliklerindeki bölgesel farklılıklar gözden kaçabilir. Ek olarak, NP yönetimini takip eden yalnızca iki zaman noktası dahil edildi. İntravenöz uygulamadan sonra daha fazla zaman noktası içeren gelecekteki çalışmalar, tümör mikroçevresindeki NP'lerin uzay-zamansal davranışının daha ayrıntılı bir analizine izin verecektir.
Sonuç olarak, bir GBM fare modelinde 2P-IVM kullanarak floresan etiketli demir oksit nanopartiküllerinin tümör iletimini değerlendirdik. Bu yöntem, çeşitli araştırma alanlarına uyacak şekilde kolayca değiştirilebilir ve sinirbilim alanında in vivo beyin görüntüleme için önemli bir araçtır.

İki fotonlu intravital mikroskopi (2P-IVM), canlı doku1'in görüntülenmesini sağlayan bir floresan görüntüleme tekniğidir.
İlk olarak 1990'larda geliştirilen 2P-IVM, çeşitli klinik öncesi modellerde retina2, böbrek3, ince bağırsak4, koklea5, kalp6, trakea7 ve beynin in vivo analizi için kullanılmıştır 8,9. Sinirbilim alanında, 2P-IVM, uyanık hayvanlarda sağlıklı beynin gerçek zamanlı görüntülenmesi için bir teknik olarakönem kazanmıştır 10 ve Alzheimer11, Parkinson12 ve glioblastoma (GBM) gibi sinir sistemi hastalıklarını incelemenin yanı sıra13,14,15,16.
2P-IVM, GBM'nin gelişimi sırasında tümör mikroçevresini incelemek için zarif bir çözüm sunar. Daha önceki bazı çalışmalar in vitro17 ve ex vivo modeller18'e odaklanırken, diğerleri GBM'yi incelemek için ortotopik19 ve ksenotropik20 in vivo modelleri uyguladı. Madden ve ark. bir fare modelinde CNS-1 sıçan glioma hücre hattının doğal görüntülemesini gerçekleştirdi13. Ortotopik bir GL261-DsRed murin modeli kullanarak, Ricard ve ark. 2P-IVM14'te tümör bölgesindeki kan damarlarını geliştirmek için intravenöz bir florofor uygulaması gerçekleştirdi.
Burada, GBM'nin ortotopik bir fare modelinde floresan etiketli demir oksit nanopartiküllerinin (NP) tümör iletimini izlemek için 2P-IVM uyguluyoruz. Bir kraniyal pencere kullanarak, bu yöntem beyindeki NP'lerin gerçek zamanlı uzay-zamansal dağılımını ayrıntılı olarak incelememizi sağlar.

<table><tbody><tr><td>% 0.9 sodyum klorür infüzyon çözeltisi</td><td>Baxter Corp</td><td>533-JB1301P</td><td></td></tr><tr><td> Dulbecco'nun Modifiye Eagle Medium</td><td>Invitrogen</td><td>11965-092</td><td></td></tr><tr><td>1 mL şırıngalar</td><td>BD</td><td>Luer-Lok şırınga, REF309628</td><td></td></tr><tr><td>% 10 & nbsp; FBS</td><td>Thermo fisher</td><td>Cytiva SH30910.03HI</td><td></td></tr><tr><td>%10 DMSO</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D8418-50ML</td><td></td></tr><tr><td>2-foton mikroskobu</td><td>Prairie Technologies, Bruker</td><td>Prairie Ultima IV</td><td></td></tr><tr><td>Alkol aplikatörleri, %70</td> <td>Medline Industries, LP</td><td>MDS093810</td><td></td></tr><tr><td>Alkol, sprey şişesi</td><td>Decon Labs Inc</td><td>Decon SaniHol, 04-355-122</td><td></td></tr><tr><td>Alüminyum folyo</td><td>Reynold Markaları</td><td>Reynold Wrap yapışmaz alüminyum folyo</td><td></td></tr><tr><td>Anestezi makinesi</td><td>Patterson Scientific</td><td>SAS3</td><td></td></tr><tr><td>Anestezi izleme&nbsp;</td><td>Kent Bilimsel&nbsp;</td><td>MouseSTAT Jr. Kemirgen Pulsoksimetre</td><td></td></tr><tr><td>Antibiyotik-Antimikotik (100x), sıvı</td><td>Invitrogen</td><td>15240-096</td><td></td></tr><tr><td>Betadine aplikatörleri</td><td>Professional Disposables International, Inc</td><td>S41125</td><td></td></tr><tr><td>Biyopsi zımbası, 5 mm&nbsp;</td><td>Miltex</td><td>Boyut 5</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorfin sürekli salımlı</td><td>Zoo Pharm</td><td>Bup SR Lab, 1.0 mg/mL</td><td>Bunun yerine jenerik bir ilaç kullanılabilir.</td></tr><tr><td>C6 sıçan glioma hücre hattı</td><td>ATCC (Amerikan Doku Kültürü Koleksiyonu)</td> <td>CCL-107</td><td></td></tr><tr><td>Kanüller</td><td>BD</td><td>16 G, 1.1 / 2 ", 30 G, 1"</td><td></td></tr><tr><td>Carprofen</td><td>Pfizer&nbsp;</td><td>Rimadyl, 50 mg/ml</td><td>yerine jenerik bir ilaç kullanılabilir.</td></tr><tr><td>Cefazoline</td><td>Sagent Pharmaceuticals</td><td>25021-101-10, 1 g/flakon</td><td>Bunun yerine jenerik bir ilaç kullanılabilir.</td></tr><tr><td>Hücre süzgeci, 40 & m</td><td>Fisher Scientific</td><td>87711</td><td></td></tr><tr><td>Pamuk uçlu aplikatörler, 6" &nbsp;</td><td>Dyad Medical Sourcing, LLC</td><td>HCS1005</td><td></td></tr><tr><td>Dental çimento</td><td>Stoelting Co</td><td>51459</td><td>Dental çimento kiti, şeffaf, 2 bileşenli</td></tr><tr><td>Deksametazon</td><td>Bimeda</td><td>138RX, 2 mg/mL</td><td>Bunun yerine jenerik bir ilaç kullanılabilir.</td></tr><tr><td>DietGel</td><td>ClearH2O</td><td>Kurtarma, 72-06-502</td><td></td></tr><tr><td>Örtü&nbsp;</td><td>Kardinal Sağlık</td><td>Bio Kalkan Wrap Matkap</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Saeyang Microtech</td><td>Escort Pro, B08350</td><td></td></tr><tr><td>Matkap uçları&nbsp;</td><td>Hager & Meissinger GmbH</td><td>REF310104001001005</td><td>Boyut 005, ABD 1/4</td></tr><tr><td>FIJI görüntüleme analiz yazılımı</td><td>Ulusal Sağlık Enstitüsü</td><td>https://imagej.net/software/fiji/</td><td></td></tr> <tr><td>Forseps</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-812-41</td><td></td></tr><tr><td>Gazlı Bez</td><td>Fisher HealthCare</td><td>Steril Pamuklu Gazlı Bez Ped, 4 x 4", 22-415-469</td><td></td></tr><tr><td>Jel Köpük&nbsp;</td><td>Ethicon Inc.&nbsp;</td><td>Surgifoam emilebilir jelatin sünger, Ref. 1972</td><td></td></tr><tr><td>Germinator&nbsp;</td><td>Cellpoint Bilimsel&nbsp;</td><td>Germinator 500, No. 11688</td><td></td></tr><tr><td>Cam lameller, 5 mm çaplı</td><td>Fisher Scientific</td><td>Menzel Kapak camı&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Steril olmayan eldivenler</td><td>Fisher Scientific</td><td>Nitril pudrasız tıbbi muayene eldivenleri</td><td></td></tr><tr><td>Eldivenler, steril</td><td>Medline Industries, LP</td><td>MDS104070</td><td></td></tr><tr><td>Epilasyon kremi</td><td>Kilise & Dwight</td><td>Nair Saç çıkarıcı losyon&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Hamilton şırınga</td><td>Hamilton Company Inc</td><td>Gastight #1701, 10 & L</td><td></td></tr><tr><td>Ca'sız HBSS, Mg</td><td>Fisher Scientific</td><td>PI88284</td><td></td></tr><tr><td>Kafa çubuğu</td><td>Hongway</td><td>5 mm iç çap O-ringler</td><td></td></tr><tr><td>Isıtma yastığı</td><td>Stoelting Co.&nbsp;</td><td>Kemirgen ısıtıcı X2</td><td></td></tr><tr><td>İnsülin şırıngaları</td><td>Exel International Medical Products&nbsp;</td><td>29G x 1/2 ve Başbakan;</td><td></td></tr><tr><td>Demir oksit nanopartikülleri</td><td>Covis Pharma GmbH</td><td>Feraheme ferumoksitol enjeksiyonu, 510 mg / 17 mL, 59338077501</td><td></td></tr><tr><td>Isofluran</td><td>Dechra</td><td>26675-46-7</td><td></td></tr><tr><td>Fareler</td><td>Jackson Laboratories</td><td>NSG, Strain 005557</td><td></td></tr><tr><td>Mikroskop (cerrahi)</td><td>Seiler Medical</td><td>Seiler IQ Q-100-220</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Nanopartiküller Özel</td><td></td><td>Floresein izotiyosiyanat ile etiketlenmiş demir oksit nanopartikülleri (Ferumoxytol)</td></tr><tr><td>Oftalmik merhem</td><td>Başlıca ilaçlar</td><td>Lubrifresh PM gece merhemi, 203964</td><td></td></tr><tr><td>Oksijen</td><td>Linde Gazı & Ekipman A.Ş. &nbsp;</td><td>Yüksek Basınçlı Çelik K Tarzı Silindir, 249CF, 2000PSIG, CGA 540</td><td></td></tr><tr><td>Plastik bardaklar</td><td>Georgia-Pacirif Tüketici Ürünleri</td><td>Dixie Porsiyon Kupası, 2 oz., Plastik, Şeffaf, PK2400</td><td></td></tr><tr><td>Polietilen boru</td><td>Braintree Scientific</td><td>50-195-5494</td><td></td></tr><tr><td>Ölçekli</td><td>Ohaus Corp</td><td>CR2200</td><td></td></tr><tr><td>Neşter</td><td>Integra Yaşam Bilimleri Üretim A.Ş.</td><td>Integra Miltex Paslanmaz çelik tek kullanımlık neşter</td><td></td></tr><tr><td>Makas</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-804-18</td><td></td></tr><tr><td>Mastik</td><td>Henkel Corp</td><td>Loctite 4014</td><td></td></tr><tr><td>Tek kullanımlık laboratuvar önlüğü</td><td>Yüksek Teknoloji Dönüşümleri</td><td>17-444-081</td><td></td></tr><tr><td>Stereotaktik çerçeve</td><td>Stoelting Co.&nbsp;</td><td>Stoelting Yeni Standart TM</td><td></td></tr><tr><td>Steril Vakumlu Şişe Üstü Filtrasyon Sistemleri</td><td>Fisher Scientific</td><td>S2GPU05RE, MilliporeSigma NO.:S2GPU05RE</td><td></td></tr><tr><td>Strafor kutu</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi eldivenler</td><td>Kardinal Sağlık</td><td>19-163-108</td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi yapıştırıcı, 3M Vetbond doku yapıştırıcısı</td><td>3M Hayvan Bakım Ürünleri</td><td>1469SB</td><td></td></tr><tr><td>Kuyruk ven kateter</td><td>Özel</td><td></td><td>Sillikon tüp ile bağlantılı iki adet 30 G kanülden oluşur&nbsp;</td></tr><tr><td>TrypLE Express (1x), fenol kırmızısı yok</td><td>Invitrogen</td><td>12604-039</td><td></td></tr><tr><td>Ultraviyole meşale</td><td>Bahar güneş ışığı teknolojisi</td><td>Consciot</td><td></td></tr></tbody></table>

bir murin modelinde glioblastomun İki fotonlu İntravital mikroskobu

Two-Photon Intravital Microscopy of Glioblastoma in a Murine Model

İntravenöz olarak uygulanan kanser terapötiklerinin beyin tümörlerine verilmesi, kan-beyin bariyeri ile sınırlıdır. Beyin tümörlerinde makromoleküllerin birikimini ve dağılımını in vivo olarak doğrudan görüntülemek için bir yöntem, klinik öncesi modellerde ilaç dağıtımını anlama ve optimize etme yeteneğimizi büyük ölçüde artıracaktır. Bu protokol, bir fare glioblastoma (GBM) modelinde iki fotonlu intravital mikroskopi (2P-IVM) ile intravenöz olarak uygulanan floresan etiketli nanopartiküllerin gerçek zamanlı in vivo takibi için bir yöntemi açıklar.
Protokol, deney hayvanlarının anestezi ve analjezisi, bir kraniyal pencere oluşturma, GBM hücre implantasyonu, bir kafa çubuğu yerleştirme, 2P-IVM çalışmaları yürütme ve uzun süreli takip çalışmaları için cerrahi sonrası bakım dahil olmak üzere prosedürün çok aşamalı bir tanımını içerir. Temsili 2P-IVM görüntüleme seansları ve görüntü analizi gösteriyoruz, bu teknolojinin avantaj ve dezavantajlarını inceliyoruz ve potansiyel uygulamaları tartışıyoruz.
Bu yöntem, in vivo preklinik beyin görüntüleme alanındaki farklı araştırma soruları için kolayca değiştirilebilir ve uyarlanabilir.

Burada kraniyal pencere cerrahisi uyguladık ve GBM'nin NSG fare modelinde C6 hücrelerini aşıladık (n=5). Pencerenin oluşturulmasında yer alan tüm bileşenler arasında uygun bir sızdırmazlık (Şekil 1A), pencerelerin uzun süreli görüntüleme için dayanıklılığını sağlayacak ve ayrıca morbiditeyi azaltacaktır. İn vivo 2P-IVM için uyarlanmış aşamayı kullanarak (Şekil 2), anestezi altındaki hayvanları herhangi bir büyük hareket artefaktı olmadan 2 saate kadar görüntüleyebildik. GBM taşıyan farelerde nanopartiküllerin intravenöz uygulamasından yaklaşık 10 dakika sonra, 2P-IVM, FITC etiketli nanopartiküllerin intravasküler lokalizasyonu ile tutarlı olarak, tümör bölgesindeki damarların yeşil, floresan sinyalini gösterir. Kan damarlarının dışında sadece az miktarda yeşil floresan sinyal not edilir, bu da NP'lerin başlangıç ekstravazasyonunu gösterir (Şekil 3A). Ekstravasküler boşluktan kaynaklanan FITC sinyalinde ileri ekstravazasyona paralel bir artış görülür (Şekil 3B).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66304/66304fig01.jpg"> Şekil 1. Kraniyal pencere yerleştirme, kraniyotomi, implantasyon ve görüntüleme. (A) Bir kraniyal pencerenin anatomik yerleşiminin kesiti. Başlık çubuğu metal içermediğinden, iki fotonlu intravital mikroskopiye ek olarak manyetik rezonans görüntüleme veya manyetik parçacık görüntüleme yapmak mümkündür. (B) Kraniyotomi (solda), hücre implantasyonu (ortada) ve 2-foton intravital mikroskopisinin (sağda) genel görünümü (üst sıra) ve ayrıntılı bir görünümü (alt sıra). Kafatası açıldıktan sonra yüzeysel kanama meydana gelir (solda) ve hızla yeniden emilir (ortada). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66304/66304fig01large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66304/66304fig02.jpg"> Şekil 2. Sahnenin bilgisayar destekli tasarımı (CAD). Bir ısırma çubuğu, kafa çubuğu stabilizasyonu ve yükseklik ve açı ayarlamaları için vidalar dahil olmak üzere in vivo 2-foton intravital mikroskopi için kullanılan sahnenin CAD'i. 3D CAD dosyası Ek Kodlama Dosyası 1'de bulunabilir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66304/66304fig02large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66304/66304fig03.jpg"> Şekil 3. İn vivo 2-foton intravital mikroskopi görüntüleri. İntravenöz nanopartikül uygulamasından (A) 10 dakika ve (B) 24 saat sonra elde edilen görüntüler. GBM hücreleri kırmızı spektrumda (solda) floresan sinyalleri yayarken, beyin dokusundaki nanopartiküller yeşil renkte (sağda) görselleştirilir. # ekstravaze NP'leri, * bir kan damarını gösterir. Sadece sınırlı sayıda partikül ekstravazasyona uğramıştır ve NP uygulamasından 10 dakika sonra tümör hücrelerinin yakınında görülebilir. GBM hücrelerinin bölgesinde bol miktarda partikül görülebilir, bu da NP uygulamasından 24 saat sonra ekstravazasyonu düşündürür. Nanopartiküller, floresein izotiyosiyanat (FITC) ve demir oksit nanopartiküllerinden (Ferumoxytol) oluşur. Ölçek çubukları 100 μm'yi temsil eder. Kısaltmalar: 2P-IVM: 2-foton intravital mikroskopi, RFP: kırmızı floresan proteini, GBM: glioblastom, FITC: floresein izotiyosiyanat, NP: nanopartiküller. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66304/66304fig03large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
Ek Kodlama Dosyası 1: Sahnenin 3D CAD dosyası. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66304/custom%20stage%203D%20CAD.zip" target="_blank">Bu Dosyayı indirmek için lütfen buraya tıklayın.</a>

Bir fare modelinde floresan etiketli demir oksit nanopartiküllerinin glioblastoma tümör iletiminin iki foton mikroskobu için yeni bir yaklaşım sunuyoruz.

Bir Murin Modelinde Glioblastomun İki Fotonlu İntravital Mikroskobu

The delivery of intravenously administered cancer therapeutics to brain tumors is limited by the blood-brain barrier. A method to directly image the ...

Glioblastoma en yaygın primer beyin kanserlerinden biridir ve hızlı büyüme ve kötü yaşam beklentisi ile ilişkilidir. Glioblastoma için etkili tedaviler geliştirmek, terapötiklerin verilmesi kan beyin bariyeri ile sınırlı olduğu için büyük bir zorluk olmaya devam etmektedir. Beyindeki makromoleküllerin birikimini ve dağılımını doğrudan görüntülemek için bir yöntem, ilaç dağıtımını anlama ve optimize etme yeteneğimizi büyük ölçüde artıracaktır.İki foton mikroskobu, glioblastomun klinik öncesi modelinde nanopartiküllerin gerçek zamanlı dağılımını incelemek için zarif bir çözüm sunar. Bu çalışmada kullanılan nanopartikülü değiştirerek, farklı ilaç adaylarının ve kombinasyon tedavilerinin hücresel ve moleküler düzeyde uygulanmasını araştırmak mümkündür. İki fotonlu intravital mikroskopiye ek olarak, bu nanopartiküllerin demir oksit bileşeni, MRI veya MPI ile multimodal görüntülemeye izin verir.Gelecekte, görüntüleme tesisleri kansere erken teşhisin gerçekleştirilmesinde hizmet edebilir ve böylece malign neoplaziye karşı daha etkili tedavilere yol açabilir. Bunu başarmanın bir yolu, iki fotonlu intravital mikroskopiyi pozitron emisyon tomografisi ve fotoakustik ultrason gibi diğer görüntüleme yöntemleriyle birleştirmektir.

two-photon-intravital-microscopy-of-glioblastoma-in-a-murine-model

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Kanser Araştırmaları

İntrakraniyal GL261 hücrelerin içine C57BL / 6 farelerin implantasyon birçok insan glioblastoma multiforme işaretlerinden özetlemek malign gliomlar üretir. Biz bizi kullanmasına izin stably lusiferaz ifade GL261 hücreleri...

Müteakip 3D ile İntrakranial İmplantasyonu In Vivo Murin Gliomlar Bioluminescent Görüntüleme

Biz çıplak farelerin ve sonraki seri beyinlerine insan glioblastoma multiforme hücrelerinin hassas, stereotaktik implantasyon için tümleşik bir yöntem...

Stereotaktik intrakranial implantasyon ve<em&gt; In vivo</emGlioblastoma Multiforme bir Mouse Model Sistemde Tümör Xenografts arasında&gt; Bioluminescent Görüntüleme

Bu videoda, implante edilmiş bir kraniyal pencere aracılığıyla bir fare modelinde önceden enjekte edilmiş kanser hücrelerinin intravital görüntülemesini gerçekleştiriyoruz. Bu yüksek çözünürlüklü hızlandırılmış görüntüleme tekniği, canlı faredeki kanser hücrelerinin dinamik davranışının incelenmesini sağlar.

Bir Fare Modelinde Kranial Pencere Tabanlı İntravital Görüntüleme: Bir Murin Modelinin Beynindeki Önceden Enjekte Edilmiş Kanser Hücrelerinin Davranışını İncelemek İçin Bir Görüntüleme Tekniği

Bu videoda, fare modellerinde floresan protein etiketli glioblastoma ksenogreftlerinin in vivo görüntülenmesi için floresan moleküler tomografi veya FMT'yi açıklıyoruz. Teknik, anti-tümör terapötiklerinin moleküler düzeyde etkilerini aydınlatmak için yararlıdır.

Floresan Moleküler Tomografi: Fare Modelinde Floresan Protein Etiketli Glioblastoma Ksenogreftlerinin İn Vivo Görüntülenmesi İçin Bir Görüntüleme Tekniği

Kaynak: Clark, A.J., et al. Glioblastoma için İmmün Yetmezliği Olan Bir Hayvan Modelinin Biyolüminesans Görüntülemesi. J. Vis. Uzm. (2016)Bu video, tümör büyümesini non-invaziv olarak ölçmek için lusiferaz eksprese eden tümör hücreleri ve lusiferin kullanarak, immün yetmezliği olan bir fare modelinde glioblastoma ilerlemesini izlemek için biyolüminesans görüntülemeyi göstermektedir.

Glioblastoma için İmmünkompetan Bir Fare Modelinin Biyolüminesans Görüntülemesi

Biz, tümörün büyüme sırasında oynayan normal biyo-fiziksel kısıtlamalar tekrarıdır intravital iki foton mikroskopi için farelerde kortikal glioblastoma ortotopik bir model oluşturduk. Tümörün yukarıdaki kafatasını yerine bir kronik cam pencere, iki-foton mikroskobu ile zamanla tümörün ilerlemesinin takibini sağlar.

Ortotopik Glioblastoma Fare Modeli Beyin parankim fiziksel kısıtlamaları bakımı ve Intravital İki foton Mikroskopi için uygundur

GL261 glioma hücreleri, glioblastomun yararlı bir immünokompetan hayvan modelini sağlar. Bu protokolün amaçları, in vivo biyolüminesans görüntüleme kullanarak intrakraniyal tümör büyümesini izlemek için uygun teknikleri göstermek ve glioblastom tedavisi için tümör immünolojisi ve immünoterapötik yaklaşımları incelemek için lusiferaz ile modifiye edilmiş GL261 hücrelerinin faydasını doğrulamaktır.

Glioblastoma&#39;nın için bir Immünkompetan Hayvan Modeli Biyoparlaklık Görüntüleme

Orthotopic kafa içi enjeksiyon tümör hücrelerinin Beyin tümör biyolojisi, ilerleme, evrim ve terapötik yanıt çalışmaya kanser araştırmalarında kullanılmıştır. Burada gerçek zamanlı intravital görüntüleme ve miktar tümör preklinik glioblastoma modellerinde kitle sağlayan Floresans moleküler tomografi, tümör xenografts, mevcut.

Floresans moleküler tomografi Glioblastoma Xenografts in Vivo içinde görüntüleme için

Kanserin kötü huylu davranışını anlamak, tümör hücrelerinin makrofajlar gibi tümör mikro çevresinin bileşenleriyle nasıl etkileşime girdiğine dair doğru modeller oluşturmayı gerektirir. Burada, tümörle ilişkili makrofajlar ve mikroglia ile glioblastoma hücre etkileşimini incelemek için iki yöntem tanımlanmıştır ve burada glioblastoma invazyonu üzerindeki etki değerlendirilmektedir.

Coculture Tahliller Glioblastoma Invasion Makrofaj ve Mikroglia Stimülasyon Eğitim için

Bu protokol, vakumla stabilize edilmiş bir görüntüleme penceresi kullanarak sağlam akciğerin gerçek zamanlı olarak uzun süreli yüksek çözünürlüklü, tek hücreli görüntülemesini gerçekleştirmek için çoklu foton mikroskobunun kullanımını açıklar.

Bir Vakum Stabilize Görüntüleme Penceresi ile Akciğer uzun vadeli Yüksek Çözünürlüklü Intravital Mikroskopi

Keşfedin, iki fotonlu intravital mikroskopi kullanarak murin modelde glioblastoma tedavisinde nanopartikül dağılımını ve ilaç teslimatını gerçek zamanlı görüntüleme yöntemini.

Bir Murin Modelinde Glioblastomun İki Fotonlu İntravital Mikroskobu

Daha fazla video keşfet