Name: Kemirgen Modellerinde Oral Gavaja Alternatif Bir Yöntem Olarak Mikropipet Kılavuzluğunda İlaç Uygulamasının Kullanımı (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-07-26T13:40:00.000+00:00
Duration: 2 min 44 s
Description: Öğrenin, fare modellerinde oral gavaja alternatif olarak mikropipet kılavuzluğunda ilaç uygulamasını. Bu yöntem stresi azaltır ve deneysel önyargıyı en aza indirerek hayvan refahını artırır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Mikropipet Kılavuzluğunda İlaç Uygulaması ile Araştırma Hayvanı Stresinin Azaltılması

<ol><li>Vandenberg, L. N., Welshons, W. V., Vom Saal, F. S., Toutain, P. -L., Myers, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Should+oral+gavage+be+abandoned+in+toxicity+testing+of+endocrine+disruptors%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Health%22%5BJournal%5D)">Should oral gavage be abandoned in toxicity testing of endocrine disruptors.</a> Environ Health. 13 (1), 46(2014).</li>
<li>Craig, M. A., Elliott, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mice+fed+radiolabeled+protein+by+gavage+show+sporadic+passage+of+large+quantities+of+intact+material+into+the+blood%2C+an+artifact+not+associated+with+voluntary+feeding%5BTitle%5D)+AND+%22Contemp+Top+Lab+Anim+Sci%22%5BJournal%5D)">Mice fed radiolabeled protein by gavage show sporadic passage of large quantities of intact material into the blood, an artifact not associated with voluntary feeding.</a> Contemp Top Lab Anim Sci. 38 (5), 18-23 (1999).</li>
<li>Turner, P. V., Brabb, T., Pekow, C., Vasbinder, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Administration+of+substances+to+laboratory+animals%3A+routes+of+administration+and+factors+to+consider%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Assoc+Lab+Anim+Sci%22%5BJournal%5D)">Administration of substances to laboratory animals: routes of administration and factors to consider.</a> J Am Assoc Lab Anim Sci. 50 (5), 600-613 (2011).</li>
<li>Gulin, J. E. N., Bisio, M., García-Bournissen, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Refining+drug+administration+in+a+murine+model+of+acute+infection+with+Trypanosoma+cruzi%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim+Res%22%5BJournal%5D)">Refining drug administration in a murine model of acute infection with Trypanosoma cruzi.</a> Lab Anim Res. 36, 37(2020).</li>
<li>Bonnichsen, M., Dragsted, N., Hansen, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+welfare+impact+of+gavaging+laboratory+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Anim+Welf%22%5BJournal%5D)">The welfare impact of gavaging laboratory rats.</a> Anim Welf. 14 (3), 223-227 (2005).</li>
<li>Brown, A. P., Dinger, N., Levine, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress+produced+by+gavage+administration+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Contemp+Top+Lab+Anim+Sci%22%5BJournal%5D)">Stress produced by gavage administration in the rat.</a> Contemp Top Lab Anim Sci. 39 (1), 17-21 (2000).</li>
<li>Scarborough, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+validation+of+the+micropipette-guided+drug+administration+%28MDA%29+method+in+the+maternal+immune+activation+model+of+neurodevelopmental+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Behav+Immun%22%5BJournal%5D)">Preclinical validation of the micropipette-guided drug administration (MDA) method in the maternal immune activation model of neurodevelopmental disorders.</a> Brain Behav Immun. 88, 461-470 (2020).</li>
<li>Germann, P. G., Ockert, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Granulomatous+inflammation+of+the+oropharyngeal+cavity+as+a+possible+cause+for+unexpected+high+mortality+in+a+Fischer+344+rat+carcinogenicity+study%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim+Sci%22%5BJournal%5D)">Granulomatous inflammation of the oropharyngeal cavity as a possible cause for unexpected high mortality in a Fischer 344 rat carcinogenicity study.</a> Lab Anim Sci. 44 (4), 338-343 (1994).</li>
<li>Martins, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+gelatin+flavors+for+oral+dosing+of+C57BL%2F6J+and+FVB%2FN+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Assoc+Lab+Anim+Sci%22%5BJournal%5D)">Comparison of gelatin flavors for oral dosing of C57BL/6J and FVB/N mice.</a> J Am Assoc Lab Anim Sci. 61 (1), 89-95 (2022).</li>
<li>Huynh, N., Arabian, N., Lieu, D., Asatryan, L., Davies, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Utilizing+an+orally+dissolving+strip+for+pharmacological+and+toxicological+studies%3A+A+simple+and+humane+alternative+to+oral+gavage+for+animals%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Utilizing an orally dissolving strip for pharmacological and toxicological studies: A simple and humane alternative to oral gavage for animals.</a> J Vis Exp. (109), e53770(2016).</li>
<li>Hoggatt, A. F., Hoggatt, J., Honerlaw, M., Pelus, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+spoonful+of+sugar+helps+the+medicine+go+down%3A+a+novel+technique+to+improve+oral+gavage+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Assoc+Lab+Anim+Sci%22%5BJournal%5D)">A spoonful of sugar helps the medicine go down: a novel technique to improve oral gavage in mice.</a> J Am Assoc Lab Anim Sci. 49 (3), 329-334 (2010).</li>
<li>Neto, T., Faustino-Rocha, A. I., Gilda Costa, R. M., Medeiros, R., Oliveira, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+quick+and+low-intensity+method+for+oral+administration+to+large+numbers+of+mice%3A+A+possible+alternative+to+oral+gavage%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">A quick and low-intensity method for oral administration to large numbers of mice: A possible alternative to oral gavage.</a> Lab Anim. 56 (2), 185-190 (2022).</li>
<li>Küster, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Voluntary+ingestion+of+antiparasitic+drugs+emulsified+in+honey+represents+an+alternative+to+gavage+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Assoc+Lab+Anim+Sci%22%5BJournal%5D)">Voluntary ingestion of antiparasitic drugs emulsified in honey represents an alternative to gavage in mice.</a> J Am Assoc Lab Anim Sci. 51 (2), 219-223 (2012).</li>
<li>Gonzales, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alternative+method+of+oral+administration+by+peanut+butter+pellet+formulation+results+in+target+engagement+of+BACE1+and+attenuation+of+gavage-induced+stress+responses+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem+Behav%22%5BJournal%5D)">Alternative method of oral administration by peanut butter pellet formulation results in target engagement of BACE1 and attenuation of gavage-induced stress responses in mice.</a> Pharmacol Biochem Behav. 126, 28-35 (2014).</li>
<li>Teixeira-Santos, L., Albino-Teixeira, A., Pinho, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+alternative+method+for+oral+drug+administration+by+voluntary+intake+in+male+and+female+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">An alternative method for oral drug administration by voluntary intake in male and female mice.</a> Lab Anim. 55 (1), 76-80 (2021).</li>
<li>Schalbetter, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oral+application+of+clozapine-N-oxide+using+the+micropipette-guided+drug+administration+%28MDA%29+method+in+mouse+DREADD+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim+%28NY%29%22%5BJournal%5D)">Oral application of clozapine-N-oxide using the micropipette-guided drug administration (MDA) method in mouse DREADD systems.</a> Lab Anim (NY). 50 (3), 69-75 (2021).</li>
<li>Vanhecke, D., Bugada, V., Buch, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Refined+tamoxifen+administration+in+mice+by+encouraging+voluntary+consumption+of+palatable+formulations%29%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">Refined tamoxifen administration in mice by encouraging voluntary consumption of palatable formulations).</a> bioRxiv. , (2023).</li>
<li>Heraudeau, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micropipette-guided+drug+administration+%28MDA%29+as+a+non-invasive+chronic+oral+administration+method+in+male+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Micropipette-guided drug administration (MDA) as a non-invasive chronic oral administration method in male rats.</a> J Neurosci Methods. 398, 109951(2023).</li>
<li>Sfanos, K. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compositional+differences+in+gastrointestinal+microbiota+in+prostate+cancer+patients+treated+with+androgen+axis-targeted+therapies%5BTitle%5D)+AND+%22Prostate+Cancer+Prostatic+Dis%22%5BJournal%5D)">Compositional differences in gastrointestinal microbiota in prostate cancer patients treated with androgen axis-targeted therapies.</a> Prostate Cancer Prostatic Dis. 21 (4), 539-548 (2018).</li>
<li>Shrestha, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Profiling+the+urinary+microbiome+in+men+with+positive+versus+negative+biopsies+for+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22J+Urol%22%5BJournal%5D)">Profiling the urinary microbiome in men with positive versus negative biopsies for prostate cancer.</a> J Urol. 199 (1), 161-171 (2018).</li>
<li>Peiffer, L. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Composition+of+gastrointestinal+microbiota+in+association+with+treatment+response+in+individuals+with+metastatic+castrate+resistant+prostate+cancer+progressing+on+enzalutamide+and+initiating+treatment+with+anti-PD-1+%28pembrolizumab%29%5BTitle%5D)+AND+%22Neoplasia%22%5BJournal%5D)">Composition of gastrointestinal microbiota in association with treatment response in individuals with metastatic castrate resistant prostate cancer progressing on enzalutamide and initiating treatment with anti-PD-1 (pembrolizumab).</a> Neoplasia. 32, 100822(2022).</li>
<li>Jones, C. B., Peiffer, L. B., Davis, C. M., Sfanos, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Examining+the+effects+of+4He+exposure+on+the+gut-brain+axis%5BTitle%5D)+AND+%22Radiat+Res%22%5BJournal%5D)">Examining the effects of 4He exposure on the gut-brain axis.</a> Radiat Res. 197 (3), 242-252 (2022).</li>
<li>Walker, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+less+stressful+alternative+to+oral+gavage+for+pharmacological+and+toxicological+studies+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+Appl+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">A less stressful alternative to oral gavage for pharmacological and toxicological studies in mice.</a> Toxicol Appl Pharmacol. 260 (1), 65-69 (2012).</li>
<li>Miguelena Chamorro, B., Swaminathan, G., Mundt, E., Paul, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Towards+more+translatable+research%3A+Exploring+alternatives+to+gavage+as+the+oral+administration+route+of+vaccines+in+rodents+for+improved+animal+welfare+and+human+relevance%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim+%28NY%29%22%5BJournal%5D)">Towards more translatable research: Exploring alternatives to gavage as the oral administration route of vaccines in rodents for improved animal welfare and human relevance.</a> Lab Anim (NY). 52 (9), 195-197 (2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>200 ve mikro; L pipet uçları</td><td>Mettler Toledo</td><td>17005860</td><td></td></tr><tr><td>AB SCIEX Üçlü QTRAP 5500 kütle spektrometrik dedektörü</td><td>Sciex</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Akkermansia muciniphila suşu muc genomik DNA</td><td>Amerikan Tipi Kültür Koleksiyonu</td><td>BAA-835D-5</td><td></td></tr><tr><td>Amonyum asetat</td><td>Sigma&ndash; Aldrich</td><td>5.43834</td><td></td></tr><tr><td>C57BL / 6J fareler</td><td>Jackson Laboratuvarları</td><td>Suş # 000664</td><td></td></tr><tr><td> C. scindens suşu 35704</td><td>Amerikan Tipi Kültür Koleksiyonu</td><td>35704</td><td></td></tr><tr><td>Sefoksitin</td><td>Sagent&nbsp;</td><td>NDC25021-109-10</td><td></td></tr><tr><td>Mısır yağı</td><td>MedChemExpress</td><td>HY-Y1888</td><td></td></tr><tr><td>DMSO</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D2650</td><td></td></tr><tr><td>etanol</td><td>Fisher Scientific</td><td>AC611050040</td><td></td></tr><tr><td>Formik asit</td><td>Sigma&ndash; Aldrich</td><td>5.33002</td><td></td></tr><tr><td>FVB / NJ fareler</td><td>Jackson Laboratuvarları</td><td>Suşu # 001800</td><td></td></tr><tr><td>Gliserol</td><td>Sigma ve ndash; Aldrich</td><td>G5516</td><td></td></tr><tr><td>Hekzan</td><td>Fisher Scientific</td><td>02-002-996</td><td></td></tr><tr><td>LC-MS sınıfı su</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-650-357</td><td></td></tr><tr><td>Metanol</td><td>Fisher Scientific</td><td>02-003-340</td><td></td></tr><tr><td>Microtainer serum ayırıcı tüp</td><td>Becton Dickinson</td><td>02-675-185</td><td></td></tr><tr><td>Moleküler biyoloji sınıfı su</td><td>Corning</td><td>46-000-CI</td><td></td></tr><tr><td>NSG fareleri</td><td>Jackson Laboratuvarları</td><td>Suşu # 005557</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Corning</td><td>21-031-CV</td><td></td></tr><tr><td>Qubit DNA HS kiti</td><td>Invitrogen</td><td>Q32851</td><td></td></tr><tr><td>Rasemik&nbsp; equol-d4</td><td>Santa Cruz Biyoteknoloji</td><td>sc-219827</td><td></td></tr><tr><td>Güçlendirilmiş Clostridial agar</td><td>Anaerob Sistemleri</td><td>AS-6061</td><td></td></tr><tr><td>Takviyeli Clostridial et suyu</td><td>Anaerob Sistemleri</td><td>AS-606</td><td></td></tr><tr><td>S-equol</td><td>MedChemExpress</td><td>HY-100583</td><td></td></tr><tr>LC-MS <td>Cayman Chemical</td><td>10010173</td><td></td>Single<td>için S-equol referans standardı</td></tr><tr><td> kanal pipeti</td><td>Rainin</td><td>17008652</td><td></td></tr><tr><td>Streptococcus tükürük genomik DNA</td><td>Amerikan Tipi Kültür Koleksiyonu</td><td>BAA-1024D-5</td><td></td></tr><tr><td>Şekerli yoğunlaştırılmış süt</td><td>California Çiftlikleri</td><td>B09TGQ7WV8</td><td></td></tr><tr><td>VSL # 3</td><td>VSL # 3</td><td>B07WX1LVHL</td><td></td></tr> ve <tr><td>beta; -glukuronidaz Helix pomatia</td><td>Sigma&ndash; Aldrich</td><td>G7017</td><td></td></tr></tbody></table> İkinci El

kemirgen modellerinde oral gavaja alternatif bir yöntem olarak mikropipet kılavuzluğunda İlaç uygulamasının kullanımı

Use of Micropipette-Guided Drug Administration as an Alternative Method to Oral Gavage in Rodent Models

MDA, fare modellerinde bakteri suşlarının oral yoldan verilmesinde kullanılabilir. C57BL / 6J fareleri, MDA eğitim seansına başlamadan önce kommensal mikrobiyal toplulukları temizlemek için 2 gün boyunca antibiyotiklerle (içme suyunda sefoxitin) tedavi edildi. Şekerli yoğunlaştırılmış süt / su çözeltisi, tedavi uygulamasından önce 3 gün boyunca günde bir kez ardışık olarak uygulandı. Fareler, MDA tedavisi uygulaması sırasında hafif bir tırtık ile kısa bir süre kısıtlandı. 4. günde, fareler bir kez PBS (negatif kontrol, n = 4) veya daha önce şekerli yoğunlaştırılmış süt / su çözeltisinde yeniden süspanse edilmiş anaerobik bir C. scindens kültürü (desA + bakteri, n = 4) ile muamele edildi. Tüm fareler genellikle tedavileri saniyeler içinde aldı ve tüm dozu (100 μL) içti. Anaerobik bakterilerin iletimini ve varlığını doğrulamak için, antibiyotik tedavisinden sonra toplanan dışkı örneklerini PBS veya C. scindens tedavisinden 24 saat sonra toplanan dışkı örnekleriyle karşılaştırdık (Şekil 1). Fekal DNA izole edildi, nicelendirildi ve C. scindens ATCC 35704 desA genine özgü primerler kullanılarak qPCR gerçekleştirmek için 10 ng/μL'ye normalize edildi (Tablo 1). Antibiyotikle tedavi edilen farelerin çok az veya hiç desA + bakteri içermediğini gözlemledik. Beklendiği gibi, C. scindens ile tedavi edilen farelerde, PBS kontrol grubundakilerden önemli ölçüde farklı olan, önemli ölçüde daha yüksek miktarda desA + bakteri gözlemledik (p = 0.0286, Şekil 1).
MDA yöntemi kullanılarak deneysel bir bileşiğin (S-equol) verilmesi. NSG (n = 15) ve FVB / NJ (n = 18) fareleri, tedavi uygulamasından iki gün önce şekerli yoğunlaştırılmış süt / su çözeltisi ile eğitime tabi tutuldu. NSG farelerine, equol üreten bağırsak bakterilerini ve dolayısıyla endojen equol üretimini ortadan kaldırmak için antibiyotik tedavisi (içme suyunda sefoksitin) uygulandı. FVB / NJ fareleri, endojen equol üretimini ortadan kaldırmak için soya içermeyen bir diyetle beslendi. Tüm fareler, tedavileri uygulamak için kısa bir süre hafif tırnağa ile kısıtlandı. Kontrol grubuna mısır yağı ile kombinasyon halinde şekerli yoğunlaştırılmış süt/su çözeltisi, DMSO grubuna (S-equol için araç kontrolü) tatlandırılmış yoğunlaştırılmış süt/su çözeltisi ve mısır yağında DMSO ve equol grubuna tatlandırılmış yoğunlaştırılmış süt/su çözeltisi ve mısır yağında equol verildi. Fareler haftada beş gün MDA tekniği ile toplam 43 gün tedavi edildi. Fareler genellikle tedavileri saniyeler içinde aldı ve tüm dozu (100 μL) içti. Genel olarak, tüm fareler belirli bir günde dozun en az yarısını tüketmiştir (belirli bir günde kısmi doz, ancak bir gün önce veya ertesi gün tam doz). Farelerin hiçbiri çalışma süresince tedaviyi tamamen reddetmedi. Fareleri tırmaladıktan sonra sırt üstü yatırmanın tedavi tüketim süresini iyileştirdiğini ve hayvanın tüm dozu almasını sağladığını gözlemledik.
Dolaşımdaki equol seviyeleri etkili MDA ilaç dağıtımını göstermektedir. Çalışma sonunda ötenaziden sonra NSG farelerinden kan örnekleri alındı ve MDA'nın equol dağıtımının çalışma hayvanlarında dolaşımdaki equol seviyelerine yol açtığını doğruladı. LC / MS / MS testini gerçekleştirmek için equol ile tedavi edilen farelerden birinden yeterli kan elde edemedik. Serum equol seviyeleri, Johns Hopkins Üniversitesi Tıp Fakültesi'ndeki Analitik Farmakoloji Ortak Kaynağı'nda LC / MS / MS ile ölçüldü. Kontrol ve DMSO (equol aracı) gruplarında dolaşımdaki equol gözlemlemedik, equol ile tedavi edilen farelerde ise saptanabilir dolaşımdaki equol vardı (Şekil 2). Daha da önemlisi, bu deneyde hayvan kurban etme tarihlerinin ve zamanlarının farklı olması nedeniyle equol ile tedavi edilen farelerde dolaşımdaki equol seviyelerinde bir miktar değişiklik bekliyoruz.
Bağırsak mikrobiyal toplulukları MDA tedavisinden sonra değişmeden kalır. MDA süt çözeltisinin (equol içeren ve içermeyen) bağırsak mikrobiyotası üzerindeki etkisi FVB / NJ fareleri kullanılarak değerlendirildi. Başlangıçta alınan numunelerin (tedavi yok/MDA yok) ve tedavinin başlamasından 7 gün sonra (eğitim günleri dahil MDA başladıktan 9 gün sonra) alınan numunelerin mikrobiyal bileşimini ölçtük. Daha önce tarif edildiği gibi türe özgü qPCR analizi (Şekil 3) ile değerlendirildiği gibi toplam bakteri yükünde veya çekirdek bağırsak mikrobiyotasının (Akkermansia muciniphila, Bifidobacterium spp., Streptococcus salivarius, Lactobacillus spp.) genel mikrobiyal bileşiminde önemli bir değişiklik gözlemlemedik21,22. Bir kafes, başlangıç ve MDA tedavisi sonrası arasında Lactobacillus'ta önemli bir fark gösterdi; ancak, bu bulgu DMSO araç kontrolünde gözlendi ve tüm kafeslerde tutarlı değildi.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66836/66836fig01.jpg"> 
Şekil 1: MDA, fare bağırsağına dışkı qPCR ile ölçülebilen anaerobik bakteriler verir. C57BL / 6J fareleri, içme suyunda art arda iki gün boyunca antibiyotiklerle tedavi edildi. Fareler daha sonra MDA yöntemi kullanılarak anaerobik bakteri C. scindens ile tedavi edildi. Fekal C. scindens (desA +) bakteri yükü, hem antibiyotik tedavisinden sonra hem de MDA tedavisinden 24 saat sonra (PBS veya C. scindens) desA geni için qPCR ile ölçüldü. (A) Antibiyotik tedavisinden sonra ve MDA tedavisinden 24 saat sonra PBS ve C. scindens ile tedavi edilen fareler arasında C. scindens'e özgü desA gen ölçümü gösterilmiştir.  (B) (A)'da MDA sonrası 24 saat için gösterilen verilerin aynısı bir sütun grafiği olarak gösterilir. İstatistiksel anlamlılık parametrik olmayan Mann-Whitney testi kullanılarak belirlendi. (*) p = 0.0286, hata çubukları = SD. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66836/66836fig01large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66836/66836fig02.jpg"> 
Şekil 2: MDA tekniği ile equol ile tedavi edilen NSG farelerinde dolaşımdaki equol seviyelerinin analizi. Serum equol seviyeleri, kontrol (n = 5), DMSO (araç, n = 5) ve equol (n = 4) ile tedavi edilen farelerde LC / MS / MS ile ölçüldü. ECOIL ile tedavi edilen farelerin birinden LC / MS / MS gerçekleştirmek için yeterli kan geri kazanılmadı. Bu tedaviler MDA yöntemi kullanılarak uygulandı. Serum equol sadece equol ile tedavi edilen grupta tespit edilebilirdi. Kantitasyon limiti 5 ng/mL<dir. anlaml parametrik olmayan tek y bir anova ve kar kullan belirlendi d p="0.0053," hata sd. href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66836/66836fig02large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66836/66836fig03.jpg"> 
Şekil 3: MDA tedavisinden sonra FVB / NJ farelerinde çekirdek bağırsak bakterileri ve toplam bakteri yükü seviyeleri değişmemiştir. MDA yöntemi kullanılarak tedavi uygulamasından önce ve sonra hedeflenen mikrobiyal topluluklar için qPCR Cq değerlerinde önemli bir değişiklik gözlenmemiştir. Lactobacillus sadece kafes 3'te başlangıç ve MDA tedavisi arasında anlamlı bir fark gösterdi (*, p = 0.0321). Bu bulgu kafesler arasında tutarlı değildi. Kafes numaraları C1-C4 olarak işaretlenmiştir. İstatistiksel anlamlılık, tek yönlü varyans analizi (ANOVA) ve çoklu karşılaştırmalar (Tukey düzeltmesi) kullanılarak belirlendi. Hata çubukları = SD. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66836/66836fig03large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Astar adı</td>
			<td>Astar dizileri</td>
			<td>PCR koşulları</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DesA_CS_F</td>
			<td>5'-GGACAGGGTGTCGGCTTTATG-3'</td>
			<td rowspan="2">93°C 3 dk, 34 döngü (95 °C 30 sn, 54 °C 30 sn)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DesA_CS_R</td>
			<td>5'-TTACTTCACCTTCGCCAGTTTCTG-3'</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tablo 1: desA+ bakterileri (C. scindens) için primerler ve qPCR koşulları.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Astar adı</td>
			<td>Astar dizileri</td>
			<td>PCR koşulları</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>V6_F V6_R</td>
			<td>5'-CAACGCGWRGAACCTTACC-3' 5'-CRACACGAGCTGACGAC-3'</td>
			<td>95 °C, 3 dk 36 döngü 95 °C, 30 sn 53 °C, 30 sn</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>A.muc_F A.muc_R</td>
			<td>5'-CAGCACGTGAAGGTGGGGAC-3' 5'-CCTTGCGGTTCTTCAGAT-3'</td>
			<td>50 °C, 5 dk 95 °C, 10 dk 40 döngü 95 °C, 15 sn 60 °C, 1 dk</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bifido_F Bifido_R</td>
			<td>5'-CGGGTGAGTAATGCGTGACC-3' 5'-TGATAGGACGCACCCCA-3'</td>
			<td>95 °C, 3 dk 36 döngü 95 °C, 30 sn 53 °C, 30 sn</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S. salivarius_F S. salivarius_R</td>
			<td>5'-CACGCCATGCTGGAAGTG-3' 5'-GCGATGAGCCAAGCTGAAG-3'</td>
			<td>95 °C, 10 dk 44 döngü 95 °C, 15 sn 60 °C, 1 dk</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lacto_F Lacto_R</td>
			<td>5'-TGGAAACAGRTGCTAATACCG-3' 5'-GTCCATTGTGGAAGATTCCC-3'</td>
			<td>50 °C, 2 dk 95 °C, 10 dk 40 döngü 95 °C, 15 sn 62 °C, 1 dk</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tablo 2: MDA'nın çekirdek bağırsak mikrobiyotası üzerindeki etkisini ölçmek için kullanılan primerler ve qPCR koşulları. </dir.>

Kemirgen Modellerinde Oral Gavaja Alternatif Bir Yöntem Olarak Mikropipet Kılavuzluğunda İlaç Uygulamasının Kullanımı

Oral gavage (OG) with the use of a cannula attached to a syringe is one of the most common methods used to deliver precise dosing of compounds to the ...

use-micropipette-guided-drug-administration-as-an-alternative-method

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Kanser Araştırmaları

Kapsamlı preklinik test merkezi sinir sistemine etkili ilaçların genellikle belirli uygulama yolları ile bağlantılı olarak değerlendirilmesi ve ilaç biodistribution karşılaştıran içerir. Burada, yaygın olarak kullanılan üç sistemik teslimat yöntemleri (intravenöz, intraperitoneal ve sözlü) yanı sıra yerel teslimatı için bir yöntem (konveksiyon gelişmiş teslimat) farelerde gösterilmiştir.

Kemirgen Modeller Merkezi Sinir Sistemi Hastalıkları Tedavisinde Sistemik ve Yerel İlaç Taşıyıcı

Araştırma kemirgenler ile güvenli ve insanca çalışma taşıma ve bağlama yöntemleri bir temel yetkinlik gerektirir. Bu makalede, güvenli işlemek ve etkili fare ve sıçanlara bileşikler yönetmek için gerekli temel ilkeleri sunacak.

Manuel Tutucu ve Fare ve Sıçanlarda Ortak Bileşik İdaresi Rotalar

Intravenöz kendinden-yönetim (IVSA) paradigma kemirgenlerde kötüye ilaçların takviye özelliklerini incelerken altın standart olarak kabul edilir. Bu yazıda güvenilir IVSA verilerini elde etmek için gerekli deney prosedürleri ve cerrahi teknikler özetliyor. Özellikle, titiz kateter implantasyonu ve bakım vurgulanır.

Bir Fare Modelinde İntravenöz Öz Yönetim Yöntemleri

Kaynak: Poland, R. et al. Motive edilmiş davranışın moleküler substratlarını incelemek için kemirgen beyin mikroenjeksiyonu. J. Vis. Uzm. (2015)Bu videoda, hassas ilaç iletimi için bir şırınga ve mikroenjektör hortumundan oluşan su dolu bir mikroenjeksiyon kurulumu kullanılmıştır. Önceden implante edilmiş bir kılavuz kanülü olan bir sıçan, hedefe yönelik beyin mikroenjeksiyonuna tabi tutulur ve bu da uyanık hayvanlarda minimum doku hasarı ile terapötik ajanların doğru bir şekilde uygulanmasını...

Terapötik Bir Ajanın Uyanık Bir Kemirgen Beynine Mikroenjeksiyon Tabanlı Verilmesi

Kaynak: Kanazawa, T., et al. Burundan beyine ilaç dağıtımını değerlendirmek için inhalasyon anestezisi altında intranazal uygulama için yeni yöntemler. J. Vis. Uzm. (2018)Bu video, burundan beyine ilaç dağıtımını sağlamak için anestezi uygulanmış bir farede radyoaktif işaretli ilaçların intranazal uygulamasını göstermektedir. İlaçların nazal epitelden nasıl geçtiğini ve beyne ulaşmak için nöronal yollardan nasıl geçtiğini ve ayrıca siliyer hareketin ilaç tutulmasını ve klerensini nasıl...

Farelerde burundan beyine ilaç iletimi için pipet ve ters kanülasyon yoluyla intranazal ilaç uygulaması

Ya bir kateterin yerleştirilmesi ya da farelerde sağ yan ventrikül içine, bir bolus enjeksiyonu gerçekleştirerek merkezi sinir sistemi ilaçları hedeflemek için bir yöntem açıklanmaktadır. Biz antisens oligonükleotidler teslim odaklanmıştır. Bu teknik, diğer ilaçlara ve sıçanlara, kolaylıkla adapte edilebilir.

Kemirgen Merkezi Sinir Sistemi İlaçların doğrudan Intraventriküler teslim

Kemirgenler, davranışın moleküler alt tabakalarını ve karmaşık psikiyatrik bozuklukları araştırmak için uygun bir modeldir. Uyanık kemirgenlerde beyin mikroenjeksiyonu, hastalık substratlarını aydınlatmak için kullanılabilir. Verimli ve özelleştirilebilir bir beyin mikroenjeksiyon yönteminin yanı sıra motivasyonu ölçen edimsel bir paradigmanın yürütülmesi sunulmaktadır.

Kemirgen Beyin Mikroenjeksiyon Moleküler Alt Tabakalar Motive Davranış Eğitim için

Aşağıdaki protokol daha yaygın olarak kullanılan oral gavaj yönteminin yerine bir oral eritilmesi şeridi (ODS) ile kronik oral ilaç uygulaması için yeni bir yöntem tarif eder. Biz ODS yöntemi kullanarak preklinik oral ilaç dağıtım ağızdan sonda güvenli, rahat ve insancıl bir alternatif temsil ettiğini göstermektedir.

Farmakolojik ve Toksikoloji Araştırmaları bir Oral Çözme Strip kullanmak: Hayvanlar için ağızdan sonda ile Basit ve İnsanca Alternatif

Bu prosedürün genel amacı, beslenme ve obezitenin fare modellerinde kullanılabilecek ilaçların kendi kendine yönetimi için bir yöntem tanımlamaktır.

Beslenme ve Obezitenin Fare Modellerinde İlaçların Kendi Kendine Yönetimi

Kemirgenlerde gavaj yoluyla oral uygulama, kısıtlama ile ilişkili sıkıntıya neden olabilir. CBD ile zenginleştirilmiş Kenevir ekstraktının oromukozal / bukkal uygulamasını araştırdık, burada sıçanlar 15 gün boyunca ekstrakt ile 3 mg / kg / gün olarak tedavi edildi. Tedaviler, hayvanları tutmak için sevgi dolu bir dokunma tekniği kullanılarak bir mikropipet ile oral olarak uygulandı.

Kemirgenlerde kenevir ürünlerinin uygulanması için alternatif bir yöntem olarak oromukozal

Öğrenin, fare modellerinde oral gavaja alternatif olarak mikropipet kılavuzluğunda ilaç uygulamasını. Bu yöntem stresi azaltır ve deneysel önyargıyı en aza indirerek hayvan refahını artırır.

Kemirgen Modellerinde Oral Gavaja Alternatif Bir Yöntem Olarak Mikropipet Kılavuzluğunda İlaç Uygulamasının Kullanımı

Daha fazla video keşfet