22 Mayıs 2026
Sol kalp hastalığına bağlı pulmoner hipertansiyonun preklinik modelinde Doppler ultrasonografi kullanılarak diyastolik fonksiyonun değerlendirilmesi için bir protokol sunulmaktadır.
Araştırmamız, korunmuş ejeksiyon fraksiyonu ile kalp yetmezliği ve hastalığın ortaya çıkardığı önemli cinsiyet farklılıkları üzerine odaklanmaktadır. Diyastolik disfonksiyon, HFpEF'in ayırt edici özelliğidir ve indeksleri 2D ekokardiyografi olmadan Doppler sonografisiyle değerlendirilebilir; bu durum pahalıdır ve gelişmiş ekipman gerektirir. Başlamak için, EKG izleme pedine bağlı tableti açın.
Mevcut uygulamalardan RS Monitör'ü seçin. Sonra öndeki yuvarlak düğmeye basarak EKG pedini açın. Kullanıcı arayüzünün sağ alt köşesindeki ayarlara dokun.
Deneysel ayarlar menüsünden ön ayarları seçin. Kaydedilmiş ön ayarlar altındaki açılır menüye dokun, sonra Rat CV'yi seç ve sağ alt köşedeki OK tuşuna tıkla. Sonra, EKG pedini %70 etil alkolle temizleyerek EKG jel kalıntılarını temizleyin.
Elektrokardiyogram için yüksek iletken elektrot jeli ve Doppler için suda çözünebilen hipoalerjenik ultrason jeli elde edinin. Anestezi edilmiş hayvanı invaziv olmayan EKG pedinin üzerine yatırın, burun uygun boyutta burun konisine yerleştirilir ve buharlaştırıcı çıkışı %1,5 ila %2 olarak ayarlanır. Pamuk uçlu aplikatör kullanarak, dört patinin dorsal yüzeyine ve arka patilerin plantar tarafına az miktarda elektrot jeli uygulayın. Pençeleri, ekg pedinin elektrot temas yüzeyine bantla sabitleyin, böylece jel ile pad arasında yeterli temas sağlansın.
Sonra göğüs ve karın tüylerini temizlemek için nazik bir depilatör krem kullanın. Cilt tahrişini önlemek için kalan kremleri silin. İzoelektrik baz çizgisinin ve P, QRS ve T-dalga formlarının bilgisayar monitöründe net şekilde gösterildiğinden emin olun.
İlgilendiğiniz hayvanı ve verileri tanımlayan yeni bir klasör oluşturun. Büyük mavi kutunun ön ve arkasındaki güç anahtarlarını kullanarak darbe Doppler verici-alıcı cihazını açın. Sonra Doppler sinyal işlemcisini açın.
Sonra, Doppler sinyal işleme iş istasyonu yazılımını açın. Kurulum'a tıklayın ve System Setup'u seçin. Deney için 20 megahertz prob frekansını seçin.
Genç bir fare veya fareyi araştırırken 20 megahertz probu takın. Daha yaşlı, daha büyük veya obez fareler için 10 megahertz prob kullanın. Her iki prob da bağlıysa, verici-alıcı modülünün önündeki anahtarı kullanarak frekanslar arasında ihtiyaç duyulan şekilde geçiş yapabilirsiniz.
Elde taşınan prob dönüştürücüsünün verici modülündeki kanal A veya B prizine bağlı olduğundan emin olun. Elde taşınan probu çalıştırmak için ilgili kanalı seçin. Yön anahtarını sıfır akış taban çizgisinin üzerindeki proba doğru akışı göstermek için TWD olarak ayarlayın.
Sonra fareler için aralık 2,5 ila 3,5 milimetre, fareler için ise dört ila altı milimetre olarak ayarlanın. Fazlı hız çıkışını sönümlü sinyale doğru düzleştirmek için filtreyi 15'e ayarlayın. Kullanıcı arayüzünün sol üst köşesinde Go tuşuna basın.
Açılır pencerede, hayvan türü, cinsiyet, doğum tarihi, edinme tarihindeki yaş ve kilo dahil olmak üzere ilgili edinim bilgilerini girin. Dizin açılır menüsünden istenen önceden oluşturulmuş klasörü seçin ve OK tuşuna tıklayın. EKG taban çizgisini eksen ölçek çubuğunu yukarı veya aşağı sürükleyerek ve R-dalgaları net görünene kadar ayarlayın. Doppler ölçümleri yapmak için, önce anestezi altındaki hayvanın göğsü ve karnının substernal ve epigastrik bölgesine az miktarda ultrason jeli uygulanır.
Doppler probu orta hattını diyaframın hemen altında, göğsün hemen altına yerleştirin; baş, hayvanın sol kulağına doğru cephalad bakacak şekilde yerleştirilir. Probu küçük dairesel hareketlerle ve artan yarıçapla yavaş yavaş kan akışını tarasın. Probu diyaframın altındaki cilde her zaman nazik basıncı kalın.
Mitral akış tespit edilmezse, aralık kadranını 0,5 milimetrelik adımlarla ayarlayarak geçirici dalga formu belirlenene kadar ayarlayın. Doppler dalgası formu ile elektrokardiyogramın ekranda aynı anda gösterildiğinden emin olun. Doğru akış belirlendikten sonra ayak pedalını kullanarak anlık görüntüler oluşturun ve en iyi veri kalitesi kaydedilene kadar tekrarlayın.
Veri kalitesinden memnun kaldığınızda dur tuşuna tıklayarak veri edinmeyi durdurun. Dosya'ya tıklayın ve açılır menüden Aç' seçeneğini seçin. Analiz için önceden oluşturulmuş klasörden en kaliteli veri dosyasını seçin.
Analiz üzerine basın ve ardından Analiz Modu'na basın. İkinci adımı seçin, genel kurulum ve veri tipini Doppler'a ayarlayın. Sonra sinyali mitral girişe ayarlayın.
Uygun hayvan modelini seçin ve varsayılan ölçüm isimleri altında tüm ölçüm isimlerini seçin. Analiz kontrol açılır menüsünden beşinci adım, R-peak editörünü seçin. Display beat ve R-peak işaretleyicilerini etkinleştirin ve otomatik hesaplama tuşuna tıklayın.
Sonra analiz kontrol menüsünden step 6, beat editörü seçin. Display beat ve R-peak işaretleyicilerini etkinleştirin ve select all beat'e tıklayın. Sonra, yedinci adımı seçin: işaret düzenleyici.
Analiz işaretlerini göster ve mevcut işaret altında istenen parametreyi seçin. Verinin tamlığı için verilen parametrelerin mevcut olduğundan emin olun. Sekizinci adımı, ölçüm sonuçlarını seçin.
Verileri bir Excel dosyasına kopyalayıp kaydetmek için sonuçları panoya kopyala. Buharlaştırıcıyı kapattıktan sonra bantı hayvanın patilerinden çıkarın. Sonra hayvanı elektrot pedinden çıkarın.
Hayvandan kalan depilyatör krem ve elektrot jelini temizleyin. Sonra hayvanı su ve yiyeceğe ücretsiz erişimle kafesine geri taşıyarak iyileşme için verin. Diyastolik fonksiyonun en doğru değerlendirilmesi için, mitral ve aort valfinin açılıp kapanmasıyla ilgili antegrad ve retrograd akış desenleri, aynı kalp döngüsü içinde birden fazla döngü boyunca görselleştirilmelidir.
Biphasik transmitral akış deseninden erken dolgu zirvesi, atriyal kasılma zirvesi, bu iki zirve arasındaki oran ve erken doldurma zirvesinin yavaşlama süresi dahil olmak üzere birden fazla indeks belirlendi. İzovolümik gevşeme süresi veya IVRT, kemirgenlerde diyastolik işlev bozukluğunun iyi bir göstergesiydi. Akciğer hipertansiyon sol kalp hastalığı ZS F1 sıçan modelinde yaşlanma sırasında IVRT'nin arttığı.
Bu değişiklik 16 haftalıkken bile tespit edilebilir. 24 haftalık obez erkek fareler, zayıf kontrol bölgelerinde önceki zaman noktalarına kıyasla daha yüksek IVRT gösterdi. Bu protokol, araştırmacının E/A oranı, IVRT veya E-dalga yavaşlama süresi dahil olmak üzere HFpEF'in yerleşik ekokardiyografik endekslerini incelemesine olanak tanır.
Bu teknikte kalbin 2B görselleştirilmesi yoktur ve diyastolik fonksiyonun bazı belirteçleri yüke bağlıdır; bu durum kontrol edilmesi zordur. Bu, diyastolik disfonksiyon belirtileri gösteren kardiyopulmoner hastalıklarda hastalık ilerlemesini güvenilir şekilde tespit eden düşük maliyetli bir tekniktir.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Bu makale, sol kalp hastalığına bağlı pulmoner hipertansiyon (PH) rodent modellerinde diyastolik disfonksiyonun değerlendirilmesi için düşük maliyetli ve erişilebilir bir protokol sunmaktadır. Yöntem, transmitral akış paternlerini ve diyastolik fonksiyon indekslerini değerlendirmek için iki boyutlu (2D) ekokardiyografiye olan ihtiyacı ortadan kaldırarak atımlı dalga Doppler ultrasonunu kullanmakta ve klinik öncesi kardiyovasküler araştırmalar için pratik bir alternatif sağlamaktadır.
Preklinik modellerde diyastolik disfonksiyonun güvenilir bir şekilde değerlendirilmesi, kardiyovasküler ilaç keşfinde hedef doğrulaması ve mekanizmaya dayalı risk azaltma süreçleri için kritik öneme sahiptir. Puls dalga Doppler protokolü, sol kalp hastalığına bağlı pulmoner hipertansiyon rodent modellerinde diyastolik indekslerin maliyet etkin ve tekrarlanabilir ölçümüne olanak tanıyarak erken aşama portföy kararlarını destekler. Bu yaklaşım, gelişmiş görüntüleme altyapısının mevcut olmadığı durumlarda ölçeklenebilir, kantitatif uç nokta ihtiyacını karşılamaktadır.
Doppler tabanlı bu yöntem, kardiyovasküler araştırmalarda mekanistik çalışmalar ile translasyonel biyobelirteç geliştirme arasında bir köprü kurarak, erken keşiften preklinik aşamaya kadar uzanan süreçle uyum sağlar.