Name: Bitki Tırnak biyosentezi keşfedin Arabidopsis eceriferum Mutants (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-05-31T22:16:00.000+00:00
Duration: 11 min 2 s
Description: Keşfedin bitki kütikülü biyosentezini Arabidopsis eceriferum mutantları kullanarak. İleri ve ters genetik yaklaşımlarla kütikül oluşum genlerini analiz edin ve tarımsal uygulamalar için değerli bilgiler elde edin.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

I. Görsel ekranlar ve Ters Genetik Yaklaşımlar Tırnak Mutants belirlenmesi. Model bitki Arabidopsis thaliana Tırnak mutantlar &quot;ibaresi yer almayacak balmumu&quot; anlamına gelen &quot;eceriferum&quot; mutant denir. Görsel ekranlar olabilir, yani sadece mutant bakarak, mutantlar, koyu yeşil parlak kaynaklanıyor ise yabani tip bitkilerin çiçeklenme kök beyazımsı olduğunu görebilirsiniz. Bu tür görsel ekran izole edildi mutantlar biri, bu bir eceriferum4 veya cer4 denilen. Ilginç manikür mutantlar keşfetmenin bir başka yolu, ters bir genetik yaklaşım ile ilgi seçiminde aday genler ve daha sonra bu gen ile eğitim tesisi hatları bozulur. Bu mutantlar TDNA şimdi MAH1 dediğimiz, bu durumda, bir sitokrom P450 ilgi gen kesintiye var. PCR sonuçları (videoda gösterildiği gibi) TDNA ekleme ilgi gen olduğunu teyit edebiliriz. Iki gen-spesifik primerler yabanıl tip DNA yükseltmek için kullanıldığında, bir ürün, ama TDNA kesmeleri durumunda, bu mutant gibi, orada herhangi bir ürün yoktur. Tersine, TDNA ve gen için spesifik primerler kullanılarak, bir ürünün sadece mutant görülür. Biz anne ve baba kopya genin bozulmuş olan homozigot mutant hatları, bak. Geninin bir kopyasını TDNA tarafından bozulur ve diğer kopya hala yabani tip ise, PCR sonuçları karıştırılır. II. Kimyasal Bileşimi Cutlicle Wax belirleme Gaz Kromatografisi kullanma. Biz, gaz kromatografisi kullanılarak mum kimyasal bileşimi analiz eder. İlk olarak, çözünür balmumu bileşikleri kloroform daldırma bitki yüzeyinden kaldırılır. Sonra, ısıtmalı ve gaz akışı üzerinden gönderilen olacak örnekleri gaz kromatografi kolonunun içine enjekte edilir. Farklı bileşikler, bileşiklerin ayrılması, sütun duvarlara daha az ya da sopa ve sütunun diğer ucundaki diğer ardına çıkıyor. Bileşikleri alev iyonizasyon dedektörü üzerinden geçerken, biz doruklarına bakın. Her tepe alıkonma zamanı farklı bileşikler için karakteristik olan, kütle spektrometresi, Arabidopsis balmumu bileşenleri her belirledik. Ana zirve mevcut C29 Alkan, keton C29 ve C29 ikincil alkol. Küçük doruklarına ikincil alkoller, yağ asitleri, aldehitler ve esterler. Standardına göre doruklarına altında kalan alan, her bileşiğin ne kadar mevcut söyler. Bu manikür mutantlar gaz kromatogramlar bakarken, bir mah1 ikincil alkoller ve ketonlar yoksun cer4, birincil alkoller ve esterler yoksun nasıl fark edebilirsiniz. Bu fenotipleri bize ilgi bitki gen fonksiyonu hakkında çok şey söyleyebilir. Örneğin, biz cer4 doğrultusunda hangi genin mutasyona uğramış tanımadan önce, fenotip biyosentetik birincil alkol dalında bir sorun olduğunu anlattı. Bu gen moleküler kimliği Kunst laboratuarında incelenmiştir sonra, bu kimyasal fenotip ile iyi uyum sağlar, yağ açil redüktazlar bir gen ailesinin bir parçası olduğunu keşfetti. III. Tırnak Kristalleri Yapısı belirleme Cryo-SEM Koyu yeşil, parlak bir fenotip veya kök yabani tip beyazımsı bir görünüm varsa, Arabidopsis manikür mutantlar çalışmada, biz görebilirsiniz. Biz bitkinin yüzeyinde manikür bakmak ve görsel fenotip temelinde tanımlamak için taramalı elektron mikroskobu kullanın. SEM çalışması için bir vakum gerektirir ve onları donmuş tutmak olmadan numunelerin kuru ve çökeceğini çünkü manikür sağlam tutmak için bitkilerin donma ve sıvı azot sıcaklığında görüntülemek cryo-SEM kullanın. Cer4 ve mah1 örnekleri, yabani tip kontrolleri ile birlikte disseke ve SEM saplama donmuş. Örnekleri mikroskop soğuk sahne aktarıldığında, yabani tip Arabidopsis kök manikür yüzeyinde kristalleri ile kaplı olduğunu görebilirsiniz. Kök beyazımsı bir görünüm veren bu kristaller kapalı saçılma ışığıdır. Burada cer4 kök; parlak görünüyordu hatırlıyor? Yüzeyde kristaller yoksundur. Bir bitkinin manikür saf balmumu bileşik izole etmek ve laboratuvarda recrystallize, kristaller, bitkiler üzerinde bulunanlara aynı şekiller oluşturmak İnsanlar deneyler yaptık. Arabidopsis, bileşiklerin bir karışımından oluşan kristaller ve durumun daha karmaşık olduğunu düşünüyorum. Örneğin, kimyasal analiz cer4, birincil alkoller ve bunların türev esterleri sadece küçük bir bileşenin eksik olduğunu bize gösteriyor, ama ce kristallerr4 kök gitti. Mah1 durumunda, bu sitokrom P450 enzim mutasyon etkisi mutant bitkiler, mum, ikincil alkoller ve ketonlar iki temel bileşeni eksikliği, henüz mah1 bitkilerin kristalleri normalde formu. Arabidopsis manikür mutantlar hakkında daha fazla bilgi edinmek için lütfen gidin <a href="http://arjournals.annualreviews.org/doi/abs/10.1146/annurev.arplant.59.103006.093219" target="_blank">Bitki Biyoloji Yıllık Gözden</a> Geçirme .

bitki tırnak biyosentezi keşfedin arabidopsis eceriferum mutants

Use of Arabidopsis eceriferum Mutants to Explore Plant Cuticle Biosynthesis

Bitki manikür su korunması birincil bir rolü vardır bitkiler üzerinde mumsu dış kaplama, ama aynı zamanda patojen mikroorganizma girişine karşı önemli bir bariyer. Kütikül &quot;kütin&quot; olarak adlandırılan sert bir çapraz bağlı polimer ve mühürler bitki yüzeyinde koruyucu bir balmumu tabakası oluşur. Manikür mumsu tabaka, sarmaşık yaprağı parlak bir film ya da bir üzüm veya lahana yaprağı sayesinde, balmumu saçılma kristalleri ışık yüzeyi tozlu bir dış kaplama olarak görünen birçok bitki açıktır. Manikür anlayış, karasal ortamda bitkilerin önemli bir uyum olduğundan bitki manikür oluşumunda yer alan genler hem de tarım ve ormancılık uygulamaları vardır. Bugün, ileri ve geri genetik yaklaşımlar tarafından belirlenen bitki manikür mutantların analizi göstereceğiz.

Bitki manikür, suyun korunması birincil bir rol vardır ancak bitkiler üzerindeki patojen mikroorganizma girişine karşı önemli bir bariyer bir balmumu dış kaplama. Bu video, ileri ve geri genetik yaklaşımlar tarafından belirlenen bitki manikür mutant analizi göstermektedir.

Bitki Tırnak biyosentezi keşfedin Arabidopsis eceriferum Mutants

Bitki kütikülü, bitkilerin üzerinde bulunan ve temel olarak suyun korunmasında rol oynayan, ancak aynı zamanda ... girişine karşı da önemli bir bariyer teşkil eden balmumu benzeri dış bir örtüdür.

Bitki kütikülü, suyun korunmasında birincil rol oynayan, ancak aynı zamanda patojenik mikroorganizmaların girişine karşı önemli bir bariyer görevi gören bitkiler üzerindeki mumsu bir dış kaplamadır. Kütikül, kutin adı verilen dayanıklı, çapraz bağlı bir polimerden ve bitkinin yüzeyini mühürleyen koruyucu bir mum tabakasından oluşur. Kütikülün mumsu tabakası birçok bitkide belirgindir; sarmaşık yaprağındaki parlak bir film veya bir üzüm ya da lahana yaprağının yüzeyindeki tozlu bir dış kaplama şeklinde görülür.Kütikül, bitkilerin karasal ortama uyum sağlaması için temel bir adaptasyon olduğu için balmumu içerisinde ışığı dağıtan kristaller bulunur. Bitki kütikül oluşumunda rol oynayan genlerin anlaşılmasının hem tarım hem de ormancılık alanlarında uygulamaları vardır. Bugün, ileri ve ters genetik yaklaşımlarla tanımlanan bitki kütikülü MUS analizini göstereceğiz.Merhaba, ben UVC Botanizma Bölümü'ndeki Lyrica Kunz laboratuvarından Patricia Lam. Bugün, ben ve diğerleri, bitkilerin belirli bir mum tabakasını nasıl oluşturduğunu anlamak için bu bitkilerin nasıl incelenebileceğini size göstereceğiz. Ben Brain Heart Jet'in UVC'deki laboratuvarından Meen; size kütiküler mumun kimyasal bile

use-arabidopsis-eceriferum-mutants-to-explore-plant-cuticle

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Hava bitki organlarının kütikül, bir supramoleküler biopolyester-balmumu meclisi tarafından korunmaktadır. Biz katı hal NMR ve atomik kuvvet mikroskobu ile moleküler ve mikro ölçeklerde domates meyve tırnak etlerini gelen seçici olarak çıkarılmasına epi-ve intracuticular mumlar, sırasıyla izlemek ve mühendislik cuticular biopolyesters çapraz-bağlantı kapasitesi değerlendirmek için protokolleri sunuyoruz.

İzolasyon ve Meyve cuticles biyofiziksel Çalışması

Biz stoma farklılaşma belgeleyen, gelişme birkaç gün içinde epidermis konfokal görüntüleme için bitki kotiledon hareketsiz odası slaytlar ve medya kullanarak bir protokol açıklar. Fluorofor etiketli proteinlerin hücre bölünmesi ve hücre tipi farklılaşması esnasında olası rollerini anlamayı arttırıyor, ifade ve hücre içi lokalizasyonu dinamik izlenebilir.

Uzun süreli, yüksek çözünürlüklü Konfokal Time Lapse Görüntüleme<em&gt; Arabidopsis Kotiledon</emÇimlenme sırasında&gt; Epidermis

Biz Arabidopsis thaliana tohum tohum kat yatak tahlili (SCBA) monte prosedürü sunuyoruz. SCBA genetik ve in vitro keşfetmek için güçlü bir araç olduğu gösterilmiştir nasıl uyuyan tohum ve hafif uyaranlara yanıt olarak endosperm kontrolleri tohum çimlenme. SCBA endosperm embriyonik büyümeyi etkilemek için şüphelenilen her durumda altında uygulanabilir prensip olarak.

Genetiği keşfedin A Tohum Kabuğunun Yatak Deneyi<em&gt; In Vitro</em&gt; Nasıl Endosperminde Denetimler Çimlenme içinde<em&gt; Arabidopsis thaliana</em

Bitki hücre duvarı bileşimi doku tipleri arasında farklılık gösterir ve lignin, selüloz, hemiselülozlar ve pektin içerebilir. Hücre tipi düzeyindeki farklılıkları görselleştirmek için çeşitli boyama teknikleri geliştirilmiştir. Bu makale, yaygın olarak kullanılan hücre duvarı boyama tekniklerinin bir derlemesidir.

Histokimyasal boyama<em&gt; Arabidopsis thaliana</em&gt; Ortaöğretim Hücre Duvar Elemanları

Lipid poliesterler, bitki kütikülü ve suberin içeren difüzyon bariyerleri olmak üzere iki hücre duvarı modifikasyonunun yapısal bileşenlerini oluşturur. Bu videoda, bütün delipide edilmiş yapraklardan kütini depolimerize etmek için bir yöntem açıklıyoruz. Yöntem, kütin veya suberin biyosentezinde tehlikeye giren mutantların araştırılmasına uygulanabilir.

Bitki Tırnak Lipid Polyester Monomer İzolasyonu ve biçim Analizi

Kromatin immüno-çökeltmesi DNA in vivo olarak Arabidopsis proteinlerin bağlanma yerlerinin tanımlanması için güçlü bir tekniktir. Bu prosedür, kromatin çapraz bağlama ve parçalanma, ilgi konusu proteine ​​karşı seçici antikorlar ile immünopresipitasyon ve bağlı DNA qPCR analizini içermektedir. Biz, Arabidopsis bitkiler için optimize edilmiş basit ChIP tahlili tarif eder.

Arabidopsis Protein-DNA Etkileşimleri Tespiti için Kromatin Immunoprecipitation Deneyi<em&gt; İn Vivo</em

Bu iletişim kuralı Arabidopsis içinde embriyogenez embriyo Desen oluşumu bir mikroskop altında incelenmesi ve ardından ovule izni ile gözlemlemek için bir yöntem özetliyor.

Embriyogenez Arabidopsis olarak karakterize bir yöntem

Arabidopsisthaliana (Arabidopsis) tohumlarının yüzey sterilizasyonu için yüksek verimli bir protokol sağlanır ve sıvı taşıma adımlarını vakum pompası ile inşa edilmiş basit bir emiş cihazı ile optimize eder. Bir günde yüzlerce tohum örneği yüzey sterilize edilebilir.

Arabidopsis Tohumlarının Yüzey Sterilizasyonu için Yüksek Verimli, Sağlam ve Son Derece Esnek Yöntem

Atomik kuvvet mikroskobu girinti protokolü, normal veya kısıtlı büyüme sırasında (yani su açığı altında) bir doku veya organın belirli bir hücresinin hücre duvarının fiziksel özelliklerinin rolünü inceleme imkanı sunar.

Canlı Arabidopsis Köklerinin Epidermal Hücrelerinin Fiziksel Özelliklerini İncelemek için Atomik Kuvvet Mikroskobu

Bu protokol, önceden deneyim veya eğitim gerektirmeyen ve çoğu moleküler biyoloji laboratuvarında kolayca erişilebilen malzemeler kullanılarak çok düşük bir maliyetle yürütülebilen sağlam bir fide aşılama yöntemini açıklamaktadır.

Ölçeklenebilir, esnek ve uygun maliyetli fide aşılama

Bu yazıda stoma gelişimini kontrol eden genleri karakterize etmek için epidermal peeling kullanılmadan iki fenotipleme yöntemi anlatılmaktadır. İlk yöntem, toluidin mavisi O-boyalı bitki epidermisi kullanılarak stoma fenotipinin nasıl analiz edileceğini göstermektedir. İkinci yöntem, stoma ligandlarının nasıl tanımlanacağını ve biyolojik aktivitelerinin nasıl izleneceğini açıklar.

Stomatal Gelişimde Rol Oynayan Genlerin Epidermal Fenotip Skorlaması ile Tanımlanması

Keşfedin bitki kütikülü biyosentezini Arabidopsis eceriferum mutantları kullanarak. İleri ve ters genetik yaklaşımlarla kütikül oluşum genlerini analiz edin ve tarımsal uygulamalar için değerli bilgiler elde edin.

Bitki Tırnak biyosentezi keşfedin Arabidopsis eceriferum Mutants

Daha fazla video keşfet