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Articles by Joshua A. Clanton in JoVE
JoVE General
Lineage Kennzeichnung von Zebrafisch-Zellen mit Laser Uncagable Fluorescein Dextran
1Department of Biological Sciences, Vanderbilt University, 2Department of Chemical and Systems Biology, Stanford University
Dieses Protokoll zeichnet ein Weg, um Etiketten und Spurenelemente das Schicksal der kleinen Gruppen von Zellen Zebrafischembryonen mit UV-Uncaging der Käfig Fluorescein, durch whole mount Immunomarkierung, um das Signal aus dem uncaged Fluoreszein verstärken gefolgt.
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Licht Und Melatonin Planen Neuronale Differenzierung in Den Habenular Kernen
Die Bildung des embryonalen Gehirns erfordert die Produktion, Migration und Differenzierung von Neuronen rechtzeitig und koordiniert werden. Ankopplung an die Tageslänge konnte die Entwicklung der Neuronen im Embryo synchronisiert werden. Hier halten wir die Wirkung von Licht und Melatonin auf die Differenzierung der embryonalen Nervenzellen im Zebrafisch. Wir untersuchen die Bildung von Neuronen in den Habenular Kernen, eine gepaarte Struktur gefunden nahe der dorsalen Fläche des Gehirns neben dem Pineal Organ. Halten von Embryonen in ständiger Dunkelheit bewirkt eine vorübergehende Ansammlung von Habenular Vorläuferzellen, die zu späten Differenzierung und dauerhafte Reduzierung der neuronalen Prozessen (Neuropil). Da ständige Dunkelheit die Anhäufung der Neurendocrine Hormon Melatonin in Embryonen Verzögerungen, suchten wir eine Verbindung zwischen Melatonin Signalisierung und Habenular Neurogenese. Ein pharmakologischer Block von Melatonin-Rezeptoren verzögert die Neurogenese und verringert Neuropil ebenso Konstante Dunkelheit, während Zusatz von Melatonin Embryonen in ständiger Dunkelheit rechtzeitige Neurogenese und Neuropil wiederherstellt. Wir schließen, dass Licht und Melatonin die Differenzierung von Nervenzellen und die Bildung von neuronalen Prozessen in den Habenular Kernen zu planen.
