内淋巴管闭塞手术诱导的内淋巴积水

Summary

本视频演示了如何手术阻挠豚鼠内淋巴管内淋巴积水。

Abstract

手术诱导的内淋巴积水豚鼠（ELH）闭塞和淋巴管阻塞是一种广为接受的条件和人类美尼尔氏病的一个重要的关联的动物模型。 1965年，罗伯特木村和哈罗德Schuknecht首次描述为淋巴管阻塞硬膜的方法（木村1965年）。虽然有效，这种技术，这需要对大脑的保护层的渗透，在受试动物的发病率和死亡率产生不良的水平。因此，安德鲁斯和Bohmer开发硬膜外方法，可预见的产生与中枢神经系统（CNS）的渗透。（1989年Andrews和Bohmer）相关的并发症少

这里描述的硬膜外方法，首先需要在枕部，露出底层肌层地区正中切口。我们只在右侧。覆组织的适当回缩后，被制作成一个横向切口右枕部肌肉暴露的右颞枕部的缝合线。骨立即inferio外侧缝合线（图1），然后与耳科钻钻，直到乙状窦变得可见。乙状窦内侧回缩揭示了淋巴管，里面有内淋巴囊鳃盖。钻内侧的鳃盖成的区域内淋巴囊揭示了淋巴管，然后用骨蜡产生阻塞，并最终ELH包装。

在接下来的几个星期中，动物会表现出进步，波动性听力损失和ELH组织学证据。

Protocol

第1部分：麻醉和手术的准备

1. 成年后，查尔斯河国际实验室公司（威尔明顿，马萨诸塞州）的女性邓肯 - 哈特利几内亚猪是氯氨酮60毫克/公斤和甲苯噻嗪12毫克/公斤肌肉注射麻醉。
2. 石油润滑油适用于眼睛，以防止由于干燥，角膜损伤的动物。
3. 动物是从头顶到肩膀和耳朵之间剃光。
4. 剃光的面积是prepped先用7.5％碘伏70％的乙醇在无菌时尚。
5. 动物被放置到一个与气候变暖毯的手术台，到了一个平台，提升头部和颈部弯曲。动物的头是远离外科医生。颈部有足够的屈曲是必需的，以便充分暴露枕骨嵴。
6. 该动物是在无菌的时尚披。

第2部分：切口，暴露骨枕

1. 0.25％布比卡因加肾上腺素（Marcaine）是沿准切口部位（枕部沿背中线切开皮肤）。这将导致局部血管收缩，限制出血，和提供持久的手术后镇痛的动物苏醒后。
2. 中线背侧皮肤切口是沿枕部头皮上。
   
   图1：皮肤切口是沿背中线，如上图所示。
3. 为了获得足够的曝光，皮肤回缩横向切口两侧放置在一个小弯止血钳。
4. 一个横向切口，沿颈部肌肉，暴露骨枕。在这个阶段，由于枕大神经切断，尽管有足够的麻醉的动物可能会抽搐。脊髓横断横向切口进入枕下地区的危险。确保底层骨总是觉得下面的手术刀刀片，可避免这种并发症。
5. 枕下肌肉切骨，第三止血用于收回优越的肌肉边缘。止血是手术助理举行。
6. 一个Lempert骨膜电梯是用来揭露颞枕部缝合。

第3部分：钻井颞枕部缝合

1. 颞枕部缝合（图2），耳科钻一个1.5毫米的钻石毛刺曝光后用于钻inferio横向缝合。
2. 下面的头骨外部表，海绵质地的板障（松质骨的头骨的表之间的干预）将变得可见。一旦钻了板障，于颅骨内表出现，伴随着淡淡的蓝色色调，乙状窦。
3. 乙状窦的边缘定义无须穿透容器。
4. 一旦得到了充分的薄覆乙状窦骨，利用更高的放大倍率和直接用于小心取出覆乙状窦骨。

图2钻部分的面积覆盖在颞枕部的缝合。

第4部分：管道阻塞

1. 中间镂空的乙状窦缩回来揭示的鳃盖。
2. 一个0.5毫米的钻石毛刺是用来钻的鳃盖内侧，进入内淋巴囊和管。
3. 淋巴管，然后使用直接与骨蜡包装。
4. 颅骨缺损是加强与明胶海绵（辉瑞公司，纽约，纽约）。
5. 使用4-0 POLYSORB（美国外科，诺瓦克，CT）缝合在一起带来的肌肉。有那么一个无缝地过渡到一个关闭皮肤切口皮下缝合技术。有了这个封闭有没有必要去除缝合之后，是没有风险的，动物爪在现场拉出一期缝合。

第5部分：手术后护理

豚鼠被置于一个孵化器，以保持体温，并在30分钟的时间间隔检查，直至清醒，并能保持胸骨位置。动物是检查呼吸速率和车身颜色。该中心使用恩诺沙星（22.7毫克/毫升，皮下注射0.2毫升）和丁丙诺啡（0.3mg/mL，皮下注射0.05毫升），手术后感染的预防和控制疼痛。一次手术当天，两次手术后一天一个和两个的止痛药。虽然抗生素是没有必要的无菌苏rgery，为期五天，两次预防性应用抗生素的日子当然可能是手术后的第三天givenonce。

并发症及处理

1. 呼吸抑制，外科医生应始终了解动物的小号呼吸。如果呼吸减慢或停止，停止手术，目视检查胸运动。如果动物出现呼吸困难或呼吸困难，检查口和呼吸道不闭塞。
2. 乙状窦渗透使用明胶海绵和压缩吸尖，直到出血已停止。
3. 硬脑膜渗透与明胶海绵覆盖的缺陷。
4. 前庭损害不要超过1毫米，横向到乙状窦钻。这样做的风险打伤后半规管，这将豚鼠的所有数据无效。

Discussion

在手术阻塞淋巴管下面的几个星期，动物受经验波动感音神经性听力损失的，由听觉诱发脑干反应测量。听觉脑干反应（ABR）记录样品如图3所示。左耳作为unoperated控制。

图3：从豚鼠手术28周后，在16千赫的ABR阈值水平。左（unoperated）耳的阈值是30 dB声压级和权（经营）耳至70分贝。

耳蜗的病理组织学检查也表明Reissner变分的膜（图4）腹胀。

图4：腹胀Reissner变分的膜，是一个典型的发现在ELH 。衡量基底膜腹胀可能或可能不存在。