Indução cirúrgica da hidropisia endolinfática por obliteração do ducto endolinfático

Summary

Este vídeo mostra como cirurgicamente obstruem o ducto endolinfático cobaia para produzir hydrops endolinfático.

Abstract

Indução cirúrgica de hidropisia endolinfática (ELH) na cobaia por obliteração e obstrução do ducto endolinfático é um modelo animal bem-aceito da doença e uma importante correlação para as doenças humanas de Meniere. Em 1965, Robert Kimura e Harold Schuknecht descrita pela primeira vez uma abordagem intradural para a obstrução do ducto endolinfático (Kimura, 1965). Apesar de eficaz, esta técnica, que requer a penetração da cobertura protetora do cérebro, decorrentes de um nível indesejável de morbidade e mortalidade nos indivíduos animal. Conseqüentemente, Andrews e Bohmer desenvolveu uma abordagem extradural, que previsivelmente produz menos das complicações associadas com o sistema nervoso central (SNC) de penetração. (Andrews e Bohmer 1989)

A abordagem extradural descrito aqui primeiro exige uma incisão mediana na região do occipital para expor a camada subjacente muscular. Operamos apenas no lado direito. Após retração do tecido apropriado sobrejacente, uma incisão horizontal é feita na musculatura da região occipital direito de expor a linha de sutura direito temporo-occipital. O osso imediatamente inferio-lateral da linha de sutura (Fig. 1) é então perfurado com uma broca otológico até o seio sigmóide torna-se visível. Retração medial do seio sigmóide revela o opérculo do ducto endolinfático, que abriga o saco endolinfático. Perfuração medial do opérculo até a área do saco endolinfático revela o ducto endolinfático, que depois é embalado com cera óssea a produzir obstrução e, finalmente, ELH.

Nas semanas seguintes, o animal irá demonstrar a progressiva, perda auditiva flutuante e evidência histológica de ELH.

Protocol

Parte 1: Anestesia e preparação para a cirurgia

1. Um adulto, do sexo feminino Duncan-Hartley cobaia de Charles River International Laboratories, Inc. (Wilmington, MA) é anestesiados com cetamina 60 mg / kg e xilazina 12 mg / kg por via intramuscular.
2. Lubrificante petróleo é aplicada para os olhos para proteger o animal de lesão da córnea devido à secagem.
3. O animal é raspado a partir do topo da cabeça até os ombros e entre as orelhas.
4. A área depilada é preparado de forma estéril, em primeiro lugar com 7,5% iodopovidona seguido por álcool etílico 70%.
5. O animal é colocado sobre uma mesa de operação com manta para aquecimento e para uma plataforma que eleva a cabeça e flexiona o pescoço. A cabeça do animal é direcionado para longe do cirurgião. Flexão adequada do pescoço é necessária a fim de expor adequadamente a crista occipital.
6. O animal é coberto de forma estéril.

Parte 2: Incisão e exposição do osso occipital

1. Bupivacaína adrenalina (Marcaine) 0,25% é aplicada ao longo do local da incisão prospectivo (incisão na pele da linha média dorsal ao longo da região occipital). Isso faz com que a vasoconstrição local, limitando o sangramento, e fornece analgesia pós-operatória com duração depois que o animal acorda.
2. Linha média dorsal incisão na pele é feita sobre o couro cabeludo ao longo do occipital.
   
   Figura 1: incisão da pele é feita ao longo da linha média dorsal, como mostrado acima.
3. Para obter uma exposição adequada, a pele fica retraída lateralmente, colocando uma pequena hemostat curvas em cada lado da incisão.
4. Uma incisão horizontal é feita ao longo do músculo do pescoço para expor o occipital óssea. Nesta fase o animal pode se contorcer, apesar anestesia adequada, devido à transecção do nervo occipital maior. Transecção da medula espinhal é um perigo com incisão horizontal na região suboccipital. Esta complicação pode ser evitada garantindo que o osso subjacente é sempre senti debaixo da lâmina de bisturi.
5. Com a musculatura suboccipital incisão ao osso, um hemostat terceiro é usado para retirar a borda do músculo superior. Este hemostat é mantida no lugar pelo assistente cirúrgico.
6. Um elevador Lempert periosteal é usada para expor a sutura têmporo-occipital.

Parte 3: Perfuração da sutura têmporo-occipital

1. Após a exposição da sutura têmporo-occipital (Figura 2), uma broca de 1,5 mm otológica diamante rebarba é usado para perfurar inferio-lateralmente à sutura.
2. Abaixo da tabela externa do crânio, a textura esponjosa do diploe (O osso esponjoso intervir entre as tabelas do crânio) se tornará visível. Uma vez que o diploe foi perfurado de distância, a tabela interna do crânio aparece, junto com uma tonalidade azul fraca que é o seio sigmóide.
3. As margens do seio sigmóide são definidas sem penetrar na embarcação.
4. Uma vez que o osso que cobre o seio sigmóide foi suficientemente diluída, maior ampliação é utilizado e uma pick reta é usado para remover cuidadosamente o osso que cobre o seio sigmóide.

Figura 2 A área a ser perfurado parcialmente recobre a sutura têmporo-occipital.

Parte 4: obstrução do ducto

1. O seio sigmóide esqueletizado é retraído medialmente para revelar o opérculo.
2. A 0,5 milímetro de diamante rebarba é usado para perfurar medial do opérculo e no saco endolinfático e duto.
3. O ducto endolinfático é então embalado com cera de osso usando uma picareta em linha reta.
4. O defeito do crânio é então reforçado com Gelfoam (Pfizer, New York, NY).
5. 4-0 Polysorb sutura (Estados Unidos Surgical, Norwalk, CT) é usado para trazer o músculo juntos. Há então uma transição suave para uma técnica de sutura subcutânea para o fechamento da incisão na pele. Com este encerramento não há necessidade de remover suturas mais tarde e não há risco de que o animal garra no local e retirar uma sutura.

Parte 5: cuidados pós-operatórios

A cobaia é colocado em uma incubadora para manter a temperatura corporal e verificado em intervalos de 30 minutos até que desperto e capaz de manter uma posição esternal. O animal é inspecionado para a taxa de respiração e cor do corpo. Este centro utiliza enrofloxacina (0,2 mL a 22,7 mg / mL, por via subcutânea) e buprenorfina (0,05 mL em 0.3mg/mL, por via subcutânea) no pós-operatório profilaxia de infecções e controle da dor, respectivamente. Analgésico é administrado uma vez no dia da cirurgia e duas vezes no dia pós-operatório de um e dois. Embora os antibióticos não são necessários para su assépticargery, um de cinco dias, duas vezes ao curso de um dia de antibióticos profiláticos pode ser givenonce de pós-operatório de três dias.

Complicações e Gestão

1. Depressão respiratória O cirurgião deve sempre estar ciente de respiração do animal s. Se a respiração diminui ou pára, interromper a cirurgia e inspecionar visualmente para o movimento do tórax. Se o animal está passando por dificuldade respiratória ou respiração difícil, verifique se a boca e das vias aéreas não estão ocluídos.
2. Sigmóide seio Gelfoam Use penetração e de compressão juntamente com a ponta de sucção até que o sangramento é interrompido.
3. Penetração dural cobrir o defeito com Gelfoam.
4. Dano vestibular Não perfurar mais de 1 mm lateral ao seio sigmóide. Fazê-lo riscos ferindo o canal semicircular posterior, o que invalidaria todos os dados para a cobaia.

Discussion

Nas semanas seguintes a obstrução cirúrgica do ducto endolinfático, o tema animais experiências perda auditiva flutuante neurossensorial medida pela audiometria de tronco cerebral evocados. A amostra de resposta auditiva de tronco cerebral de gravação (ABR) é mostrado na Figura 3. A orelha esquerda serve como um controle não operados.

Figura 3: limiares ABR a 16 kHz a partir de uma cobaia 28 semanas pós-cirurgia. O limite para o ouvido (não operados) deixou é de 30 db SPL e para o ouvido (operado) o direito está perto de 70 dB.

Exame histológico da cóclea também mostra distensão da membrana de Reissner (Figura 4).

Figura 4: Distensão da membrana de Reissner s é um achado típico na ELH. Mensuráveis ​​distensão da membrana basilar pode ou não estar presentes.