Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

Chirurgische Inductie van endolymphatic hydrops door Vernietiging van de endolymfatische Duct

Published: January 22, 2010 doi: 10.3791/1728

Summary

Deze video laat zien hoe operatief de cavia's endolymfatische kanaal belemmeren om endolymfatische hydrops te produceren.

Abstract

Chirurgische inductie van endolymphatic hydrops (ELH) in de cavia door de vernietiging en obstructie van de endolymfatische kanaal is een goed geaccepteerd diermodel van de aandoening en een belangrijke correleren voor de ziekte van de mens van Menière. In 1965, Robert Kimura en Harold Schuknecht voor het eerst beschreven een intradural aanpak voor obstructie van de endolymfatische kanaal (Kimura 1965). Hoewel effectief, deze techniek, die de penetratie van de beschermende van de hersenen die nodig heeft, gemaakt een ongewenst niveau van morbiditeit en mortaliteit in het dier onderwerpen. Bijgevolg, Andrews en Böhmer ontwikkelde een extradurale aanpak, die voorspelbaar produceert minder van de complicaties geassocieerd met het centrale zenuwstelsel (CZS) penetratie. (Andrews en Böhmer 1989)

De extradurale beschreven aanpak hier eerst vraagt ​​om een ​​middellijn incisie in de regio van de achterhoofdsknobbel tot de onderliggende spierlaag bloot te leggen. We werken alleen aan de rechterkant. Na een passende terugtrekken van de bovenliggende weefsel wordt een horizontale incisie gemaakt in de musculatuur van het recht achterhoofdsknobbel tot de juiste temporo-occipitale sutuur lijn bloot te leggen. Het bot direct inferio-laterale de hechting lijn (figuur 1) wordt dan geboord met een otologische boren totdat het sigmoïd sinus zichtbaar. Mediale terugtrekken van de sigmoid sinus onthult de operculum van de endolymfatische buis, die de endolymfatische zak huizen. Boren mediaal van de operculum in het gebied van de endolymfatische zak onthult de endolymfatische kanaal, die vervolgens wordt verpakt met been was tot obstructie en uiteindelijk ELH te produceren.

In de volgende weken, zal het dier aan te tonen van de progressieve, fluctuerende gehoorverlies en histologisch bewijs van ELH.

Protocol

Deel 1: Anesthesie en voorbereiding voor de operatie

  1. Een volwassen, vrouwelijke Duncan-Hartley cavia van Charles River International Laboratories, Inc (Wilmington, MA) is verdoofd met ketamine 60 mg / kg en xylazine 12 mg / kg intramusculair.
  2. Petroleum smeermiddel wordt toegepast op de ogen om het dier te beschermen tegen het hoornvlies letsel door drogen.
  3. Het dier wordt geschoren van de bovenkant van het hoofd naar de schouders en tussen de oren.
  4. Het geschoren gebied is voorbereid in een steriele wijze eerst met 7,5% povidonjood, gevolgd door 70% ethyl alcohol.
  5. Het dier wordt geplaatst op een operatietafel met een warming deken en op een platform dat het hoofd en buigt de nek verheft. Het hoofd van het dier weg is aangestuurd vanuit de chirurg. Voldoende flexie van de nek is nodig om adequaat te ontmaskeren de achterhoofdsknobbel nok.
  6. Het dier is gehuld in een steriele manier.

Deel 2: incisie en blootstelling van het benige occiput

  1. Bupivacaïne plus epinefrine (Marcaine) 0,25% wordt toegepast langs de toekomstige incisie site (middellijn dorsale huid incisie langs de achterhoofdsknobbel). Dit veroorzaakt plaatselijke vasoconstrictie, het beperken van bloeden, en biedt duurzame postoperatieve analgesie nadat het dier wakker.
  2. Middellijn dorsale huid incisie wordt gemaakt op de hoofdhuid aan de achterhoofdsknobbel.
    Figuur 1
    Figuur 1: De huid incisie wordt gemaakt aan de dorsale middellijn, zoals hierboven weergegeven.
  3. Te winnen adequate blootstelling, is de huid lateraal teruggetrokken door het plaatsen van een kleine gebogen hemostat aan elke kant van de incisie.
  4. Een horizontale incisie gemaakt langs de nekspier aan de benige occiput bloot te leggen. In dit stadium van het dier kan twitch ondanks adequate verdoving als gevolg van doorsnijding van de grotere achterhoofd zenuw. Ruggenmerg doorsnijding is een gevaar met horizontale insnijding in de suboccipitale regio. Deze complicatie kan worden voorkomen door ervoor te zorgen dat de onderliggende bot altijd wordt gevoeld onder de scalpel.
  5. Met de suboccipitale spieren ingesneden tot op het bot, is een derde hemostat wordt gebruikt om de superieure spier rand trekken. Dit hemostat is op zijn plaats gehouden door het chirurgisch assistent.
  6. Een Lempert periostale lift wordt gebruikt om de temporo-occipitale hechtdraad bloot te leggen.

Deel 3: Boren van de temporo-occipitale hechting

  1. Bij blootstelling van de temporo-occipitale hechting (figuur 2), een otologische boor met 1,5 mm Diamantschijf wordt gebruikt om inferio-lateraal te boren om de hechting.
  2. Onder de buitenste tabel van de schedel, zullen de sponsachtige textuur van de diploë (De tussenliggende poreus bot tussen de tafels van de schedel) zichtbaar worden. Zodra de diploë is weg geboord, de binnenste tabel van de schedel, verschijnt samen met een vage blauwe tint, dat is het sigmoïd sinus.
  3. De marges van de sigmoid sinus worden gedefinieerd, zonder het penetreren van de schip.
  4. Zodra het bot bovenliggende het sigmoïd sinus voldoende is verdund, is hoger vergroting gebruikt en een rechte pick wordt gebruikt om voorzichtig te verwijderen op het bot bovenliggende het sigmoïd sinus.

Figuur 2
Figuur 2 Het gebied gedeeltelijk worden geboord ligt over de temporo-occipitale hechtdraad.

Deel 4: Obstructie van de Duct

  1. De skeletonized sigmoïd sinus is mediaal teruggetrokken naar de operculum onthullen.
  2. Een 0,5 mm Diamantschijf wordt gebruikt om te boren mediaal van de operculum en in de endolymfatische zak en kanaal.
  3. De endolymfatische buis wordt vervolgens gevuld met bot was met behulp van een rechte kiezen.
  4. De schedel defect wordt dan versterkt met Gelfoam (Pfizer, New York, NY).
  5. 4-0 Polysorb (Verenigde Staten Surgical, Norwalk, CT) hechtdraad wordt gebruikt om de spier samen te brengen. Er is dan een naadloze overgang naar een subcutane hechting techniek voor het sluiten van de huid incisie. Met deze sluiting is het niet nodig om daarna te verwijderen hechtingen en is er geen risico dat het dier zal klauw op de site en uit een hechting te trekken.

Deel 5: Post-operatieve zorg

De cavia wordt in een couveuse op lichaamstemperatuur te houden en gecontroleerd interval van 30 minuten tot wakker en in staat om een ​​borstbeen positie te behouden. Het dier is gecontroleerd op ademhaling en lichaam kleur. Dit centrum maakt gebruik van enrofloxacine (0,2 ml met 22,7 mg / ml, subcutaan) en buprenorfine (0,05 ml op 0.3mg/mL, subcutaan) voor post-operatieve infectie profylaxe en pijnbestrijding, respectievelijk. Analgeticum wordt eenmaal gegeven op de dag van de operatie en twee keer op post-operatieve dag een en twee. Hoewel antibiotica zijn niet nodig voor aseptische surgery, een vijf-dagen, twee keer per dag loop van profylactische antibiotica kan givenonce op post-operatieve dag drie.

Complicaties en Management

  1. Respiratoire depressie De chirurg moet zich altijd bewust van ademhalingen het dier is. Als de ademhaling vertraagt ​​of stopt, stop dan met chirurgie en visueel te inspecteren voor de thoracale beweging. Als het dier ervaart ademhalingsmoeilijkheden of zware ademhaling, controleer dan of de mond en luchtwegen niet zijn afgesloten.
  2. Sigmoid sinus penetratie Gebruik Gelfoam en compressie, samen met de zuigerkop tot bloeden is gestopt.
  3. Dural penetratie Bedek het defect met Gelfoam.
  4. Vestibulaire beschadigingen Boor niet meer dan 1 mm lateraal van de sigmoid sinus. Daarmee risico's verwonden de achterste halfronde gracht, die tot nietigheid van alle gegevens voor de cavia.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

In de weken na chirurgische obstructie van de endolymfatische buis, het dier te onderwerpen ervaringen wisselend perceptief gehoorverlies, zoals gemeten door de auditieve evoked response hersenstam. Een monster van auditieve hersenstam respons (ABR) opname wordt getoond in figuur 3. Het linker oor dient als een niet geopereerde controle.
Figuur 3
Figuur 3: ABR drempel niveau op 16 kHz van een cavia 28 weken na de operatie. De drempel voor de linker (niet geopereerde) oor is 30 dB SPL en voor het recht (uitgevoerd) oor is bijna 70 dB.

Histologisch onderzoek van het slakkenhuis toont ook uitzetting van Membrane Reissner's (figuur 4).
Figuur 4
Figuur 4: uitzetting van Membraan Reissner s is een typische bevinding ELH. Meetbaar uitzetting van het basilair membraan kan wel of niet aanwezig zijn.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Experimenten op dieren werden uitgevoerd in overeenstemming met de richtlijnen en voorschriften uiteengezet door de Institutional Animal Care en gebruik Comite aan de Case Western Reserve University in te stellen.

Acknowledgments

Dit werk werd mede ondersteund door een subsidie ​​van de American Society otologische aan CAM en door een subsidie ​​van de Universitaire Ziekenhuizen Case Medical Center te KNA en CAM. We willen graag Jeff Churney bedanken Focus Medical Group, Inc (Hinckley, OH) voor het verstrekken van ons met een microscoop camera. Video productie diensten geleverd door het parkeerprogramma van Fusion Creative Marketing, Inc (Valdosta, GA) Wij danken Jonathan Frankel en Alex Levitt op CWRU voor hun commentaar tijdens de voorbereiding van de video.

References

  1. Andrews, J. C., Bohmer, A. The surgical approach to the endolymphatic sac and the cochlear aqueduct in the guinea pig. Am J Otolaryngol. 10, 61-66 (1989).
  2. Kimura, R., Schuknecht, H. Membranous hydrops in the inner ear of the guinea pig after obliteration of the endolymphatic sac. Pract Otolaryngol. , (1965).

Tags

Geneeskunde Guinea Pig Endolymfatische hydrops de ziekte van Menière chirurgische inductie endolymfatische kanaal
Chirurgische Inductie van endolymphatic hydrops door Vernietiging van de endolymfatische Duct
Play Video
PDF DOI

Cite this Article

Megerian, C. A., Heddon, C., Melki,More

Megerian, C. A., Heddon, C., Melki, S., Momin, S., Paulsey, J., Obokhare, J., Alagramam, K. Surgical Induction of Endolymphatic Hydrops by Obliteration of the Endolymphatic Duct. J. Vis. Exp. (35), e1728, doi:10.3791/1728 (2010).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter