Chirurgische Induktion von Endolymphatischer Hydrops durch Obliteration des Ductus endolymphaticus

Summary

Dieses Video zeigt, wie man chirurgisch behindern das Meerschweinchen ist Ductus endolymphaticus zu endolymphatischen Hydrops zu produzieren.

Abstract

Chirurgische Induktion von endolymphatischen Hydrops (ELH) beim Meerschweinchen durch Verödung und Obstruktion des Ductus endolymphaticus ist ein gut anerkanntes Tiermodell der Erkrankung und ein wichtiges Korrelat für den menschlichen Morbus Menière. Im Jahre 1965, Robert Kimura und Harold Schuknecht zum ersten Mal beschrieben ein intradural Ansatz zur Obstruktion der Ductus endolymphaticus (Kimura 1965). Obwohl wirksame, entstehen diese Technik, die das Eindringen des Gehirns Schutzhülle erfordert, ein unerwünschtes Niveau der Morbidität und Mortalität in der Tier-Themen. Folglich entwickelt Andrews und Böhmer extraduralen Ansatz, der vorhersehbar produziert weniger von den Komplikationen des zentralen Nervensystems (ZNS) Penetration. (Andrews und Böhmer 1989) verbunden

Die extraduralen hier beschriebene Ansatz erfordert zuerst eine Mittellinienschnitt in der Region den Hinterkopf auf die zugrunde liegenden muskulären Schicht freizulegen. Wir arbeiten nur auf der rechten Seite. Nach entsprechender Rücknahme der darüberliegenden Gewebe, wird ein horizontaler Schnitt in der Muskulatur des rechten Hinterhaupt nach rechts temporo-occipital Nahtlinie freizulegen. Der Knochen sofort inferio-lateral der Naht (Abb. 1) wird dann mit einem otologischer gebohrt, bis der Sinus sigmoideus sichtbar. Medial Zurückziehen des Sinus sigmoideus zeigt das Operculum des Ductus endolymphaticus, der Saccus endolymphaticus Häuser. Drilling medial des Operculum in den Bereich des Saccus endolymphaticus zeigt die Ductus endolymphaticus, die dann mit Knochenwachs Obstruktion und letztlich ELH produzieren verpackt ist.

In den folgenden Wochen wird das Tier zeigen die progressive, fluktuierende Schwerhörigkeit und histologischen Nachweis der ELH.

Protocol

Teil 1: Anästhesie und Vorbereitung für die Chirurgie

1. Ein Erwachsener, weiblich ist Duncan-Hartley Meerschweinchen von Charles River International Laboratories, Inc. (Wilmington, MA) mit Ketamin 60 mg / kg und Xylazin 12 mg / kg intramuskulär.
2. Petroleum Schmierstoff wird auf die Augen aufgetragen, um das Tier aus Verletzung der Hornhaut durch Austrocknung zu schützen.
3. Das Tier ist von der Oberseite des Kopfes bis zu den Schultern und zwischen den Ohren rasiert.
4. Die rasierten Bereich wird in einem sterilen Mode zunächst mit 7,5% PVP-Jod um 70% Ethylalkohol, gefolgt vorbereitet.
5. Das Tier wird auf einen OP-Tisch mit wärmenden Decke und auf eine Plattform, die den Kopf und beugt den Hals erhebt platziert. Der Kopf des Tieres wird vom Operateur weg gerichtet ist. Ausreichende Flexion der Hals ist erforderlich, um ausreichend Setzen Sie die Crista occipitalis.
6. Das Tier wird in einem sterilen Mode drapiert.

Teil 2: Inzision und Freilegung des knöchernen Hinterhaupt

1. Bupivacain und Adrenalin (Marcain) 0,25% liegt an der prospektiven Inzisionsstelle (Mittellinie dorsal Hautschnitt entlang der Hinterhauptbein) angewendet. Dies führt dazu, lokale Vasokonstriktion, die Begrenzung Blutungen und bietet dauerhaften postoperativen Analgesie nach dem Tier erwacht.
2. Midline dorsalen Hautschnitt auf der Kopfhaut entlang den Hinterkopf gemacht.
   
   Abbildung 1: Hautschnitt wird entlang der dorsalen Mittellinie gemacht, wie oben gezeigt.
3. Um sich eine ausreichende Belichtung wird die Haut seitlich, indem Sie einen kleinen gebogenen hemostat auf jeder Seite des Schnittes eingefahren.
4. Ein horizontaler Schnitt entlang der Nackenmuskulatur hat, um die knöchernen Hinterhaupt aussetzen. In diesem Stadium kann das Tier trotz ausreichender Betäubung durch Durchtrennung des N. occipitalis major zucken. Durchtrennung des Rückenmarks besteht die Gefahr, mit horizontaler Schnitt in die subokzipitalen Region. Diese Komplikation kann durch Sicherstellung, dass darunter liegende Knochen ist immer unter dem Skalpell fühlte vermieden werden.
5. Mit dem Subokzipitalmuskulatur eingeschnitten, um die Knochen, ist ein Drittel hemostat verwendet werden, um die überlegene Muskelkraft Rand zurückzuziehen. Diese hemostat wird anstelle von der OP-Assistenz statt.
6. Ein Lempert Raspatorium wird verwendet, um die temporo-occipital Naht aussetzen.

Teil 3: Bohren der temporo-occipital Naht

1. Bei der Belichtung des temporo-occipital-Naht (Abb. 2), ein otologischer Bohrer mit 1,5 mm Diamantbohrer wird verwendet, um inferio-seitlich zu bohren, um die Naht.
2. Unterhalb der äußeren Tabelle des Schädels, wird die schwammige Struktur des Diploe (Die dazwischenliegende Spongiosa zwischen Tabellen des Schädels) sichtbar werden. Sobald die Diploe ist weg gebohrt wurden, wird die innere Tabelle des Schädels, zusammen mit einem schwachen blauen Farbe, die den Sinus sigmoideus ist.
3. Die Ränder der Sinus sigmoideus sind ohne Durchdringung des Schiffes festgelegt.
4. Sobald der Knochen über dem Sinus sigmoideus ausreichend verdünnt wurde, ist eine stärkere Vergrößerung genutzt und einen geraden Pick wird verwendet, um vorsichtig die Knochen über dem Sinus sigmoideus.

Abbildung 2: Das Gebiet um teilweise gebohrt werden überlagert die temporo-occipital Naht.

Teil 4: Behinderung der Duct

1. Die skelettierten Sinus sigmoideus ist medial des Operculum offenbaren eingefahren.
2. Ein 0,5 mm Diamantbohrer wird verwendet, um Drill medial des Operculum und in den Saccus endolymphaticus und Kanal.
3. Der Ductus endolymphaticus wird dann mit Knochen Wachs mit einem geraden Pick verpackt.
4. Der Schädel Defekt wird dann mit Gelfoam (Pfizer, New York, NY) verstärkt.
5. 4-0 POLYSORB (United States Surgical, Norwalk, CT) Naht wird verwendet, um den Muskel zusammen zu bringen. Es gibt dann einen nahtlosen Übergang zu einer subkutanen Nahttechnik für die Schließung der Hautschnitt. Mit diesem Abschluss ist es nicht erforderlich, um Nähte danach zu entfernen und es besteht keine Gefahr, dass das Tier Kralle an der Stelle und ziehen Sie eine Naht.

Teil 5: post-operative Betreuung

Das Meerschweinchen ist in einem Inkubator gelegt, um die Körpertemperatur zu erhalten und überprüft alle 30 Minuten, bis wach und in der Lage einer Sternal Position aufrecht zu erhalten. Das Tier ist für Atemfrequenz und Wagenfarbe inspiziert. Dieses Zentrum nutzt Enrofloxacin (0,2 ml bei 22,7 mg / ml, subkutan) und Buprenorphin (0,05 ml bei 0.3mg/mL, subkutan) zur postoperativen Infektionsprophylaxe und Schmerz zu kontrollieren, bzw.. Schmerzstillende wird einmal am Tag der Operation und zweimal am Tag nach der Operation ein und zwei gegeben. Obwohl Antibiotika sind nicht für die aseptische su notwendigrgery, eine Fünf-Tage-, zweimal am Tag natürlich von prophylaktischen Antibiotika kann givenonce am Tag nach der Operation drei sein.

Komplikationen und Management

1. Atemdepression Der Chirurg sollte immer bewusst sein, das Tier s Atmung. Wenn die Atmung verlangsamt oder stoppt, schalten Chirurgie und visuell für Thorax-Bewegung zu untersuchen. Wenn das Tier erlebt Atembeschwerden oder Atemnot, überprüfen Sie, dass die Mund-und Atemwege sind nicht verschlossen.
2. Sinus sigmoideus Eindringen Verwenden Gelfoam und Kompression zusammen mit dem Saug-Spitze bis die Blutung gestoppt ist.
3. Dural Eindringen Abdeckung des Defektes mit Gelfoam.
4. Vestibular Schäden Bohren Sie nicht mehr als 1 mm lateral des Sinus sigmoideus. Sonst riskieren Sie Verletzungen des hinteren Bogenganges, die alle Daten für die Meerschweinchen ungültig machen würden.

Discussion

In den Wochen nach chirurgischer Verschluss des Ductus endolymphaticus, erfährt das Tier unter schwankenden Hörverlust durch akustisch evozierte Hirnstamm Reaktion gemessen. Eine Probe des auditorischen Hirnstamm Reaktion (ABR) Aufnahme ist in Abbildung 3 dargestellt. Das linke Ohr dient als nicht operierte Kontrolle.

Abbildung 3: ABR Schwellenwerte bei 16 kHz aus einem Meerschweinchen 28 Wochen nach der Operation. Die Schwelle für die linke (nicht operierten) Ohr ist 30 db SPL und für das Recht (betrieben) Ohr liegt bei 70 dB.

Die histologische Untersuchung der Cochlea zeigt auch Dehnung der Reissner-Membran (Abbildung 4).

Abbildung 4: Erweiterung der Reissner s Membrane ist ein typischer Befund bei ELH. Messbare Überdehnung der Basilarmembran kann oder auch nicht vorhanden sein.