Средней мозговой артерии (СМА) лигирование является методика исследования координационного ишемии мозга на животных моделях. В этом методе, средней мозговой артерии, предоставляемые трепанации черепа и лигируют путем прижигания. Этот метод дает очень воспроизводимые инфаркта объемов и увеличение послеоперационной выживаемости по сравнению с другими методами.
Фокусное ишемии головного мозга является одним из наиболее распространенных типа инсульта у пациентов. Из-за клиническое значение имело длительных усилий по разработке подходящих животных моделей для изучения событий, которые разворачиваются в течение ишемического инсульта. Эти методы включают в себя временной или постоянной, фокусное или глобальной ишемии моделей с использованием различных моделей на животных, наиболее распространенными из которых являются грызуны.
Постоянные перевязки MCA метод, который также упоминается в качестве pMCAo в литературе широко используется в качестве координационного модели ишемии у грызунов 1-6. Этот метод был впервые описан для крыс Тамура и соавт. в 1981 г. 7. В этом протоколе трепанации черепа был использован для доступа MCA и проксимальных регионов окклюзии путем электрокоагуляции. Инфаркты включают главным образом коры, а иногда и полосатой регионам в зависимости от расположения окклюзии. Эта техника в настоящее время хорошо известны и используются во многих лабораториях 8-13. Раннее использование этой техники привело к определению и описанию "инфаркт основные» и «полутени» 14-16, и она часто используется для оценки потенциальных нейропротекторное соединений 10, 12, 13, 17. Хотя первоначальные исследования проводились на крысах, постоянные перевязки MCA успешно применяется у мышей с небольшими изменениями 18-20.
Эта модель дает воспроизводимые инфарктов и повышение после выживаемости. Около 80% ишемических инсультов у людей происходят в области MCA 21 и таким образом, это является очень актуальной моделью развития инсульта исследований. В настоящее время наблюдается нехватка эффективных методов лечения доступны для пациентов, перенесших инсульт, и, следовательно, есть потребность в хороших моделей для тестирования потенциальных фармакологических препаратов и оценить физиологическое результатов. Этот метод может также использоваться для изучения внутриклеточных механизмов реагирования гипоксии в естественных условиях.
Здесь мы представляем хирургии MCA лигирования в C57/BL6 мыши. Мы описываем предоперационной подготовки, MCA перевязки хирургии и 2,3,5 Triphenyltetrazolium хлорида (ТТК) окрашивания для количественного определения инфаркта томов.
Постоянные перевязки MCA метод дает очень воспроизводимые инфаркта объемов и увеличение послеоперационной выживаемости по сравнению с другими методами. Легкости и малой длительности (~ 30 мин) Процедура сделать его еще более практичным. Метод широко используется в обеих мышей и крыс.
<…The authors have nothing to disclose.
Хирургическая техника, изначально приобретенные в лаборатории д-р Уильям Д. Хилл в Медицинском колледже штата Джорджия. Авторы также хотели бы поблагодарить д-ра Дэвида А. Ремпе и Ланда Prifti для использования вскрытия камеры. Это исследование было поддержано NS041744 NIH, NS051279, F31 NS064700 и AHA 30815697D.
NAME | COMPANY AND CATALOGUE NUMBER |
---|---|
A. Solutions and Chemicals | |
Povidone-Iodine Solution, Surgical Scrub | Aplicare, 82-209 |
70% Ethanol | Koptec, V1001 |
2,3,5 Triphenyltetrazolium chloride (TTC) | Sigma, T8877 |
4% Paraformaldehyde | Electron Microscopy Sciences, 159SP |
Phosphate Buffered Saline, pH:7.4 | Made and sterilized in the lab. |
Mineral Oil | PML Microbiologicals, R6570 |
Isofluorane | The Butler Company, 029405 |
Buprenorphine (0.3mg/ml) | Hospira, NDC 0409-2012-32 |
Artificial tears | The Butler Company, 007312 |
Recovery Gel | Clear H2O, 72-01-5022 |
B. Surgical Materials and Equipment | |
C57/BL6 mouse, 10-12 weeks old | The colony was bred in the university vivarium |
100% oxygen tank | Airgas |
Anesthetic Vaporizer and Flow meter | Surgivet, Model 100 |
Heating Pad with Rectal Probe | Fine Science Tools, TR200 |
Dissecting microscope | Zeiss, Stemi 2000 |
Heating panel | Petco Services Ltd. 0307-013 |
Small Vessel Cauterizer Set | Fine Science Tools, 18000-00 |
Mini Peristaltic Pump | Harvard Apparatus, MPII |
1ml syringe | BD, 329650 |
18G needle | Becton Dickinson, 305196 |
Surgical 5.0 Nylon Suture | Ethilon, 698H |
Sectioning Block | Kent Scientific, 1mm |
Single Edge Razor Blades | Electron Microscopy Sciences, 71962 |
Label Tape | Scienceware, Bel-art Products F13463-2075 |
Gauze Sponges | Kendall Curity 2252, Johnson and Johnson 6415 |
Cotton Tip Applicators | Puritan 806-WCL |
C. Surgery Tools | |
Surgical Spring Scissors | Fine Science Tools 15003-08 |
Microdissecting forceps angled | Fine Science Tools 5/45 |
Microdissecting forceps curved | Fine Science Tools 5 Ti |
Fine straight scissors | Fine Science Tools 14568-12 |
Curved bone rongeur | Fine Science Tools 16021-14 |
Hartman Hemostat Curved | Fine Science Tools 13003-10 |
Table 1. The list of materials, tools and chemicals used for the MCA ligation procedure. A. Solutions and Chemicals, B. Surgical Materials and Equipment, C. Surgery Tools.