Summary
αvβ3 integrin आसंजन प्रोटीन का एक प्रकार है कि अत्यधिक सक्रिय endothelial कोशिकाओं angiogenesis के दौर से गुजर पर व्यक्त किया है । इस प्रकार, integrin की अखंडता का मूल्यांकन ऑन्कोलॉजी में बहुत रुचि है । यहाँ, हम ६८Ga-लेबल radiopeptides और इसकी जैविक प्रभावशीलता का आकलन करने के लिए एक विधि तैयार करने के लिए एक विधि का परिचय.
Abstract
αvβ3 integrin ट्यूमर सेल माइग्रेशन और angiogenesis में शामिल एक heterodimeric आसंजन अणु है । integrin angiogenic ट्यूमर endothelial कोशिकाओं है, जहां यह आम तौर पर एक कम एकाग्रता है में व्यक्त की है । αvβ3 की यह विशिष्ट अभिव्यक्ति यह antiangiogenic और इमेजिंग दवाओं के लिए एक वैध अगोचर बनाता है । एक कार्यात्मक इमेजिंग रूपरेखा के रूप में, पोजीट्रान उत्सर्जन टोमोग्राफी (पीईटी) nanomolar पैमाने पर अपनी अनूठी उच्च संवेदनशीलता के कारण vivo मेंजैव रासायनिक और शारीरिक परिवर्तन के बारे में जानकारी प्रदान करता है । इसलिए, radiometal-आधारित पालतू radiopharmaceuticals ट्यूमर angiogenesis के गैर इनवेसिव ठहराव के लिए महान ध्यान प्राप्त किया है । यह पेपर एक नया radiometal-angiogenesis के मूल्यांकन के लिए लेबल पेप्टाइड तैयार करने के लिए एक प्रणालीगत प्रोटोकॉल प्रदान करता है । इस प्रोटोकॉल में radiochemical विश्वसनीयता, lipophilicity, सेल के लिए, सीरम स्थिरता और pharmacokinetic गुण के बारे में जानकारी होती है । ६८Ga-RGD-पेप्टाइड प्रतिनिधि पालतू लाइगैंडों की ओर αvβ3 integrin में से एक है । यहां, हम एक ६८Ga-RGD-पेप्टाइड और इसकी जैविक प्रभावकारिता के मूल्यांकन तैयार करने के लिए एक प्रोटोकॉल परिचय ।
Introduction
Angiogenesis एक जैविक प्रक्रिया है कि नए रक्त वाहिकाओं के विकास की विशेषता है । कई angiogenetic कारकों में, αvβ3 integrin इनवेसिव के साथ जुड़ा हुआ है, क्योंकि integrin अत्यधिक angiogenic ट्यूमर वाहिकाओं में व्यक्त की है, लेकिन सामान्य ऊतक1में अनुपस्थित है।
Radiolabeled रिसेप्टर बाइंडिंग पेप्टाइड्स arginine glycine aspartate (RGD) डोमेन, जो αvβ3 integrin रिसेप्टर्स की ओर एक उच्च आत्मीयता है, होनहार angiogenesis इमेजिंग एजेंटों2,3 माना जाता है , 4 , 5 , 6 , 7. कई radiopharmaceuticals पालतू और उसके जैविक गुणों के लिए बनाया गया है विभिंन पशु मॉडल में मांय किया गया है8,9,10,11। एक रेडियोन्यूक्लाइड के संदर्भ में, ६८Ga अंय radioisotopes पर कई फायदे हैं । सबसे पहले, यह उपयोगकर्ताओं के लिए एक उच्च पहुंच है और आर्थिक रूप से लाभप्रद है क्योंकि एक साइक्लोट्रॉन की आवश्यकता नहीं है । दूसरे, ६८Ga आधारित radiopharmaceuticals एकल-फोटॉन उत्सर्जन गणना टोमोग्राफी (SPECT), और अधिक सटीक ठहराव की अनुमति के साथ तुलना में उच्च स्थानिक संकल्प का उत्पादन । अंत में, ६७.७१ मिनट आधा ६८Ga के जीवन छोटे पेप्टाइड्स या प्रोटीन की तैयारी के लिए पर्याप्त हो सकता है ।
६८Ga के साथ एक स्थिर परिसर का निर्माण करने के लिए, कई chelators विकसित किया गया है । प्रतिनिधि chelators हैं 1, 4, 8, 11-tetraazacyclotetradecanetetraacetic एसिड (तेत), 1, 4, 7, 10-tetraazacyclododecane-1, 4, 7, 10-tetraacetic एसिड (DOTA), 1, 4, 7-triazacyclononane-1, 4, 7-triacetic एसिड (नोटा), diethylenetriaminepentaacetic एसिड (DTPA), और एन, N'-डि (2-hydroxybenzyl) ethylenediamine-n, N'-diacetic एसिड (HBED) । नोटा ६८Ga (लॉग स्थिरता स्थिरांक ३०.९८)12,13,14के साथ एक अत्यधिक स्थिर परिसर बनाने के लिए सूचित किया गया है ।
वर्तमान अध्ययन का उद्देश्य एक नए radiopeptide के विकास के लिए एक संक्षिप्त प्रोटोकॉल प्रदान करना है (चित्रा 1). एक उदाहरण के रूप में, हम ६८Ga-लेबल RGD-पेप्टाइड्स और एक xenograft मॉडल में इन एनालॉग के जैविक मूल्यांकन के लिए वर्तमान तरीकों को तैयार करते हैं ।
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Protocol
कोरिया इंस्टीट्यूट ऑफ रेडियोलॉजिकल एंड मेडिकल साइंसेज एनिमल स्टडीज समिति द्वारा अनुमोदित प्रोटोकॉल के तहत अनुसंधान पशुओं के देखभाल और उपयोग के लिए दिशानिर्देशों के अनुपालन में सभी पशु प्रयोगों का आयोजन किया गया । सभी रिएजेंट और सॉल्वैंट्स खरीदा और आगे की शुद्धि के बिना इस्तेमाल किया गया । नोटा-RGD-पेप्टाइड्स को साहित्य विधियों के अनुसार तैयार किया गया15.
चेतावनी: ६८Ga पोजीट्रान और गामा किरणों दोनों का उत्सर्जन करता है । रेडियोधर्मी पदार्थों के साथ प्रत्यक्ष या अप्रत्यक्ष संपर्क सहित सभी प्रयोगों, प्रशिक्षित और अनुमति प्राप्त कर्मियों द्वारा ही किया जाना चाहिए. जब रेडियोधर्मी सामग्री, उचित सुरक्षा उपकरण, परिरक्षण, विकिरण dosimeter बिल्ला और अंगूठियां हैंडलिंग, और एक सर्वेक्षण मीटर इस्तेमाल किया जाना चाहिए ।
1. Radiolabeling RGD- ६८जीएसीएल3 के साथ पेप्टाइड्स
नोट: ६८ga (t1/2 = ६८ min, β+ = ८९%, और EC = 11%) ६८ga/६८जीई जनरेटर से प्राप्त किया गया था ।
- Elute ने जनरेटर से ६८जीएसीएल3 को ०.०५ मीटर एचसीएल के 4 एमएल के साथ गुजारा ।
- एक 5 मिलीलीटर प्रतिक्रिया शीशी में सूखी ६८जीएसीएल3 (३३३ kBq, 1 मिलीलीटर) के लिए 30 मिनट के लिए ८० ° c पर नाइट्रोजन गैस के साथ पर्ज करें ।
- 1 मीटर सोडियम एसीटेट (१०० µ l, pH 5-6) में RGD-पेप्टाइड (१०० µ g) का सॉल्यूशन जोड़ें ६८जीएसीएल3 से step १.२ वाली रिएक्शन शीशी में डालें ।
- 5 मिनट के लिए ८० ° c पर प्रतिक्रिया मिश्रण गर्मी । फिर, यह कमरे के तापमान के नीचे ठंडा ।
- क्रूड प्रोडक् ट्स को उच् च निष् पादन लिक्विड क्रोमैटोग्राफी (HPLC) के साथ शुद्ध करे । निम्न प्रणाली का उपयोग करें: एक सी-18 कॉलम, ०.५ मिलीलीटर की एक प्रवाह दर/मिनट, acetonitrile के एक ढाल ढलान 1.17% लैंडलाइंस (5%-४०% 30 मिनट में), और रेफरेंस घटकों: एक = ०.१% trifluoroacetic एसिड (TFA) में acetonitrile, बी = ०.१% TFA पानी में ।
नोट: HPLC एक photodiode सरणी डिटेक्टर और एक रेडियोधर्मिता डिटेक्टर के साथ सुसज्जित है. ६८Ga-RGD-पेप्टाइड १२.५ मिनट (चित्रा 2) के एक प्रतिधारण समय पर एकत्र किया गया था । - एक ठोस चरण निष्कर्षण प्रणाली का उपयोग कर परिणामी ६८Ga-RGD-पेप्टाइड शुद्ध ।
- एक C18 रिवर्स चरण कारतूस के माध्यम से समाधान दर्रा और खारा के 2 मिलीलीटर के साथ धो लो ।
- ९५% इथेनॉल के ०.७ मिलीलीटर के साथ Elute ६८Ga-RGD-पेप्टाइड । 20 मिनट के लिए नाइट्रोजन गैस के तहत ८० डिग्री सेल्सियस पर विलायक निकालें और उपयोग करने से पहले फॉस्फेट बफर खारा (पंजाब) के साथ पुनर्गठन ।
- एक ०.२२ µm बाँझ फिल्टर के माध्यम से radiolabeled उत्पाद फ़िल्टर और बाँझ खारा समाधान के 1 मिलीलीटर में तैयार.
- रेडियो-थिन-लेयर क्रोमैटोग्राफी (टीएलसी) द्वारा radiochemical यील्ड की जांच करें ।
- एक पल पतली परत क्रोमैटोग्राफी प्लेट (ITLC, लंबाई में 10 सेमी) पर स्पॉट 1 µ एल । एक eluent (जलीय ०.१ एम साइट्रिक एसिड, पीएच ५.०) से युक्त कक्ष में थाली विकसित मौके से 9 सेमी दूर तक ।
नोट: ६८ga-RGD-पेप्टाइड के लिए अवधारण फ़ैक्टर 0 है और प्रतिक्रिया नहीं ६८ga3 + के लिए अवधारण फ़ैक्टर 1 है ।
- एक पल पतली परत क्रोमैटोग्राफी प्लेट (ITLC, लंबाई में 10 सेमी) पर स्पॉट 1 µ एल । एक eluent (जलीय ०.१ एम साइट्रिक एसिड, पीएच ५.०) से युक्त कक्ष में थाली विकसित मौके से 9 सेमी दूर तक ।
- MBq/nmol के रूप में गैर-रेडियोधर्मिता के लिए संगत रेडियोधर्मिता के अनुपात से अंतिम विशिष्ट गतिविधि की गणना.
नोट: १०० µ के इंजेक्शन के बाद तैयार की ६८ga-RGD-पेप्टाइड HPLC करने के लिए, गैर रेडियोधर्मी घटक की मात्रा मानक अंशांकन रेडियोधर्मी Ga-RGD-पेप्टाइड का उपयोग कर वक्र से गणना की गई थी.
2. इन विट्रो सेल् फी
नोट: उपसाला ८७ घातक तंत्रिकाबंधार्बुद (U87MG) मानव ग्लियोब्लास्टोमा कोशिकाओं Dulbecco के संशोधित ईगल मीडिया (DMEM), 10% भ्रूण गोजातीय सीरम और 1% पेनिसिलिन-streptomycin के साथ पूरक में बड़े हो गए थे । कोशिकाओं 5% सह2के एक humidified वातावरण में ३७ डिग्री सेल्सियस पर १५० मिमी व्यंजन में बड़े हो रहे थे । कोशिकाओं को काटा या trypsinization द्वारा विभाजित किया गया: ०.२५% (डब्ल्यू/वी) trypsin और ०.०२% (डब्ल्यू/वी) ethylenediaminetetraacetic एसिड (EDTA) में पंजाबियों में ३७ ° c 3-5 मिनट के लिए ।
- बीज U87MG कोशिकाओं में 6-अच्छी तरह से प्लेटें 1 x 106 कोशिकाओं के घनत्व पर/
- ६८Ga-RGD-पेप्टाइड (१११ kBq) के साथ कोशिकाओं को ३७ ° c 30, ६०, ९०, और १२० मिनट के लिए तैयार करें । तपसिल में नमूनों की तैयारी ।
- trypsinization द्वारा पंजाब और फसल के 2 मिलीलीटर के साथ 2x कोशिकाओं को धो लें । ०.२५% (डब्ल्यू/वी) trypsin और ०.०२% (डब्ल्यू/वी) ethylenediaminetetraacetic एसिड (EDTA) पंजाब में ३७ ° c पर 3-5 मिनट के लिए उपयोग करें ।
- एक γ-काउंटर में सेल निलंबन (५०० µ एल) और उपाय लीजिए ।
- % द्वारा कक्षों द्वारा यौगिक की प्रतिशत की गणना करें (कक्षों/कुल गणना में गिना जाता है) ।
3. इन विट्रो में सीरम स्थिरता
- हौसले से तैयार माउस सीरम के ५०० µ एल जोड़ें, मानव सीरम के ५०० µ एल, और पंजाब के ५०० µ एल. 2 एच के लिए ३७ डिग्री सेल्सियस पर मिश्रण की मशीन ।
- निर्दिष्ट समय अंतराल (30, ६०, ९०, और १२० मिनट) पर ITLC द्वारा मूल्यांकन करें । स्पॉट 1-2 µ एल मिश्रण के aliquot ITLC प्लेट (मोबाइल चरण: ०.१ एम साइट्रिक एसिड) । चरण १.७ में के रूप में थाली विकसित करना ।
नोट: ६८Ga3 + विलायक सामने के साथ कदम की उंमीद है, जबकि लेबल यौगिक मूल पर रहेगा ।
4. Lipophilicity का निर्धारण
- ६८Ga-RGD-पेप्टाइड (३.७ MBq, ३.७ µ l) को octanol-पंजाबन प्रणाली (1:1, v/वी, कुल 1 मिलीलीटर) में जोड़ें ।
- कमरे के तापमान पर 5 मिनट के लिए जोरदार शीशियों मिश्रण और कमरे के तापमान पर 5 मिनट के लिए १०,००० x g पर केंद्रापसारक ।
- प्रत्येक परत से १०० µ एल नमूने ले लो और एक γ-काउंटर के साथ रेडियोधर्मिता को मापने. रिपोर्ट की गई लॉग P मान तीन नमूनों की औसत पर आधारित है ।
5. ट्यूमर मॉडल
नोट: बालब नग्न चूहों (6-8 सप्ताह पुराना है, महिला, n = 23) इस अध्ययन के लिए इस्तेमाल किया गया । चूहों बाद में पालतू अध्ययन के लिए इस्तेमाल किया गया (n = 3) और वितरण (n = 20) जब ट्यूमर मात्रा २००-३०० mm3 (1-2 सप्ताह आरोपण के बाद) तक पहुंच गया ।
- 28 जी, 1/2 इंच इंसुलिन सीरिंज में ट्यूमर कोशिकाओं को लोड करें ।
- U87MG कोशिकाओं (5 x 106) १०० µ में पंजाब के बाएं हाथ क्षेत्र में इंजेक्षन ।
- सेल इंजेक्शन के दौरान ऑक्सीजन गैस में 2% isoflurane के साथ माउस को Anesthetize ।
- सुनिश्चित करें कि माउस सही हिंद पैर की उंगलियों के बीच संदंश के साथ चुटकी के बाद पेडल वापसी पलटा के नुकसान से anesthetized किया गया है । एक जानवर जब तक यह पर्याप्त चेतना को कड़ी recumbency बनाए रखने के लिए आ गया है उपेक्षित छोड़ मत करो ।
6. Vivo ठहराव In αvβ3 Integrin का उपयोग पीईटी
- चूहों को ऑक्सीजन में 2% isoflurane के साथ Anesthetize ।
- सुनिश्चित करें कि माउस सही हिंद पैर की उंगलियों के बीच संदंश के साथ चुटकी के बाद पेडल वापसी पलटा के नुकसान से anesthetized किया गया है । एक जानवर जब तक यह पर्याप्त चेतना को कड़ी recumbency बनाए रखने के लिए आ गया है उपेक्षित छोड़ मत करो ।
- सिर को पालतू गैन्ट्री के केंद्र में रखें ।
- नसों में ६८Ga-RGD-पेप्टाइड समाधान (७.४ MBq, २०० µ l) 1 मिनट के लिए पूंछ नस के माध्यम से xenograft माउस मॉडल के लिए प्रशासन ।
- एक ही समय में, एक पालतू १५० मिनट के लिए सूची मोड (गतिशील स्कैन) में स्कैन करते हैं ।
नोट: कच्चे पीईटी डेटा एक प्रयोक्ता द्वारा खंगाला गया समय सीमा निर्धारित (यानी, हर 30 मिनट) । पीईटी स्कैन के बाद, एक सूक्ष्म गणना टोमोग्राफी (सीटी) स्कैन (एक्स-रे के ५० kVp, ०.१६ mA) क्षीणन सुधार के लिए आयोजित किया गया था.
7. पूर्व वीवो पुनर्वितरण
- xenograft माउस मॉडल की पूंछ नस में ६८Ga-RGD-पेप्टाइड (०.३७ MBq, २०० µ l) इंजेक्षन । इंजेक्शन के दौरान ऑक्सीजन गैस में 2% isoflurane के साथ माउस को Anesthetize ।
नोट: बालब/सी नग्न चूहों, के रूप में खंड 5 में वर्णित, चार समूहों में विभाजित किया गया और अलग समय अंक पर बलिदान (n = 5 प्रति समूह) । - जाग ६८Ga-RGD-पेप्टाइड के प्रशासन के तुरंत बाद चूहों और उंहें 30, ६०, ९०, और १२० मिनट postinjection कार्बन डाइऑक्साइड इच्छामृत्यु के साथ बलिदान ।
नोट: ब्याज के ऊतकों निकाले गए । चयनित लक्ष्य थे रक्त, मांसपेशी, दिल, फेफड़े, जिगर, तिल्ली, पेट, आंत, गुर्दे, हड्डी, और ट्यूमर. - ऊतक वजन और एक γ-काउंटर के साथ रेडियोधर्मिता मापने ।
नोट: परिणाम के रूप में व्यक्त किया गया प्रतिशत ऊतक के प्रति ग्राम खुराक इंजेक्शन (% ID/
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Representative Results
केलेशनथेरेपी के साथ ६८जीएसीएल3 का नोटा-RGD-पेप्टाइड के साथ सीधा था, और radiolabeling उपज ९९% थी । चित्र 2में दर्शाए अनुसार प्रतिक्रिया अशुद्धियां सफलतापूर्वक निकाल दी गईं । ६८Ga-RGD-पेप्टाइड की radiochemical शुद्धता ९९% से अधिक थी, और संश्लेषण के अंत में विशिष्ट गतिविधि ९०-१३० MBq/nmol (चित्रा 3) थी ।
६८Ga-RGD-पेप्टाइड के लिए मान के लिए मानों १.४९%, ०.८५%, ०.३६%, और ०.३९% पर 30, ६०, ९०, और १२० मिनट, क्रमशः थे । सीरम स्थिरता से पता चला कि ६८Ga-RGD-पेप्टाइड मानव या माउस सीरम के रूप में के रूप में अच्छी तरह से पंजाब (> ९२% स्थिरता 2 ज) के साथ मशीन के 2 एच के बाद लगभग बरकरार रहे । विभाजन गुणांक (लॉग P) २.९६ था, उच्च lipophilicity का संकेत है । पीईटी प्रमुख अंगों में जिगर, गुर्दे, दिल, मांसपेशी, और ट्यूमर सहित एक प्रारंभिक उच्च तेज दिखाया । हालांकि, देर अवधि में (९०-१५० मिनट), ट्यूमर क्षेत्र स्पष्ट रूप से visualized था । ९० मिनट में ट्यूमर-मांसपेशी अनुपात १७.५७ था और अपरिवर्तित बनी हुई है, काइनेटिक स्थिरता का संकेत है । पूर्व वीवो वितरण से पता चला है कि ट्यूमर में संचित रेडियोधर्मिता ६.१९, ४.९६, ४.४४, और ४.३९ (% आईडी/जी) 30, ६०, ९०, और १२० मिनट में, क्रमशः था । पूर्व vivo प्रयोग के परिणाम में vivo पालतू निष्कर्षों (चित्रा 4) के अनुसार थे ।
चित्रा 1 : प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं का प्रवाह आरेख । यह आंकड़ा radiopharmaceutical के विकास का एक योजनाबद्ध सिंहावलोकन दिखाता है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
चित्रा 2 : HPLC द्वारा ६८Ga-RGD-पेप्टाइड का शुद्धिकरण । ब्लू रेडियोधर्मिता संकेत है और काले पराबैंगनी (यूवी) संकेत है. यूवी तरंग दैर्ध्य ३१४ एनएम है । X-अक्ष समय है और Y-अक्ष अवशोषक इकाई (AU) है । ६८Ga-RGD-पेप्टाइड की अवधारण समय के १२.४ मिनट है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
चित्रा 3 : ६८Ga-RGD-पेप्टाइड और इसके radiochemical शुद्धता की संरचना । ६८Ga-RGD-पेप्टाइड की ITLC ने उच्च radiochemical शुद्धता दिखाई । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
चित्र 4 : पीईटी इमेजिंग (ऊपरी) और पूर्व वीवो के लिए वितरण डेटा ६८ Ga-RGD-पेप्टाइड (कम) । 0 से 5 तक के एसयूवी स्केल पर पीईटी डेटा व्यक्त किया गया । दिखाया गया है वितरण डेटा प्रत्येक समय बिंदु पर पांच चूहों से मानक विचलन मतलब ± हैं । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
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Discussion
वर्तमान अध्ययन में, हमने एक radiopeptide लक्ष्यीकरण αvβ3 integrin और इसके जैविक मूल्यांकन तैयार करने के लिए एक प्रोटोकॉल की शुरुआत की । पारंपरिक दवा विकास एक जटिल प्रक्रिया शामिल है । यह संदर्भ सामग्री की एक बड़ी मात्रा और एक अपेक्षाकृत लंबे समय मूल्यांकन की आवश्यकता है । यद्यपि सुझाई गई पद्धति नाजुक मूल्यांकन प्रक्रिया को प्रतिस्थापित नहीं कर सकती, इस प्रणाली को स्क्रीनिंग प्रयोजनों के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है । यह प्रस्तावित प्रणाली काफी समय और लागत को कम करेगी ।
पिछले एक दशक से अधिक, कई radiolabeled RGD-पेप्टाइड्स इमेजिंग ट्यूमर के लिए radiotracers के रूप में बड़े पैमाने पर अध्ययन किया गया है16. नैदानिक परीक्षणों के लिए होनहार radiopharmaceuticals प्राप्त करने के लिए, औषधि विकास के लिए प्रणालीगत दृष्टिकोण प्रदान किया जाना चाहिए । Radiochemical व्यवहार्यता, उच्च selectivity-लक्ष्य के संबंध में, चयापचय स्थिरता, और उचित फार्माकोकाइनेटिक्स चार प्रमुख चिंताएं हैं । एक नियमित पालतू अध्ययन के लिए, एक उचित radiochemical उपज radiopharmaceuticals की विश्वसनीयता सुनिश्चित करता है । लक्ष्य प्रोटीन के लिए उच्च अपनत्व (> एनएम) और selectivity (> 100x) के मुद्दों पर भी संतुष्ट हैं । फार्माकोकाइनेटिक्स के संदर्भ में, उंमीदवार पीईटी अनुरेखक तेजी से गैर लक्ष्य ऊतक से उत्सर्जित है और ट्यूमर में एक लंबी प्रतिधारण समय है, एक उच्च लक्ष्य-संदर्भ अनुपात की अनुमति. परीक्षार्थी radiopharmaceuticals को vivo में परेशानी चयापचयों नहीं होनी चाहिए जो गैर-विशिष्ट बाइंडिंग बढ़ा सके और कम कंट्रास्ट इमेजिंग प्रदान कर सके । यह व्यापक विशेषताओं का आकलन महत्वपूर्ण है क्योंकि प्रत्येक शब्द अंय संपत्तियों, जो स्वतंत्र नहीं है प्रभावित करता है ।
इस शोध में पेश किए गए radiopeptide में उपयुक्त औषधि की तरह गुण होते हैं. ६८Ga-RGD-पेप्टाइड ९९% की एक उच्च radiochemical उपज है, चयापचय स्थिरता, और उचित lipophilicity. में vivo प्रयोग में, radiopeptide प्रदर्शन उच्च selectivity (ट्यूमर के लिए संदर्भ अनुपात = १७.५७), और पूर्व वीवो वितरण डेटा भी महत्वपूर्ण ट्यूमर तेज दिखाया (अप करने के लिए ६.१९% आईडी/
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Disclosures
लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।
Acknowledgments
इस काम को कोरियाई सरकार (No. 2017M2A2A6A02019904) द्वारा वित्त पोषित नेशनल रिसर्च फाउंडेशन ऑफ कोरिया (एनआरएफ) अनुदान के एक परमाणु अनुसंधान और विकास कार्यक्रम द्वारा समर्थित किया गया था ।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 68Ga/68Ge generator | ITG Company | - | 10 mCi |
| Hydrogen chloride solution | Sigma-aldrich | 84429 | |
| Sodium acetate | Sigma-aldrich | S2889 | |
| C18 reverse-phase cartridge | Waters | WAT020515 | |
| 0.22-μm sterile filter | Milllipore | SLGV033RS | |
| Radio-TLC scanner | Bioscan | AR2000 | |
| ITLC paper | Agilent | SGI001 | |
| Citric acid | Sigma-aldrich | 251275 | |
| HPLC | Waters | - | Waters 1525 system containing binary pump, photo diode array (Waters 2998), radioactivity detector (Raytest, Gabi) |
| Acetonitrile | J.T. Baker | 14-650-359 | |
| Trifluoroacetic acid | Sigma-aldrich | 302031 | |
| Dulbecco's modified Eagle media | Thermo fisher scientific | 11965092 | |
| fetal bovine serum | Thermo fisher scientific | 16000044 | |
| T175 flasks | Corning | CLS431080 | |
| Trypsin-EDTA (0.25%) | Thermo fisher scientific | 25200072 | |
| penicillin-streptomycin | Thermo fisher scientific | 15240112 | |
| γ-counter | Perkin Elmer | - | 1480 Wizard 3 |
| Insunlin syringe | Becton Dickinson | 326105 | |
| Synringe pump | Harvard Apparatus | 70-4500 | |
| micro-PET/CT | Siemens Inveon | - |
References
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