Summary
이 연구는 60 분 동안 신장 동맥의 일시적인 경피 양자 풍선 카테터 폐색과 24 시간 동안 재관류를 사용하여 돼지에 있는 신장 허혈 -침전 손상의 높게 재현 가능한 큰 동물 모형을 제시합니다.
Abstract
급성 신장 손상 (AKI) 이환율과 수술 후 사망률에 대 한 높은 위험과 관련 된. 허혈 재관전 부상 (IRI)은 AKI의 가장 흔한 원인입니다. 이 임상 시나리오를 모방하기 위해, 이 연구는 신장 동맥의 일시적인 경피적인 양자 간 풍선 카테터 폐색을 사용하여 돼지에 신장 IRI의 매우 재현 가능한 큰 동물 모델을 제시합니다. 신장 동맥은 대퇴동맥과 경동맥을 통해 풍선 카테터를 도입하고 동맥의 근위 부분으로 발전시킴으로써 60분 동안 가려져 있습니다. 요이뇨 대비는 대동맥에 주입되어 신장 혈관의 어떤 소형성을 평가하고 동맥 폐색의 성공을 확인합니다. 이것은 풍선 카테터의 끝에서 펄스 파형의 평탄화에 의해 더욱 확인된다. 풍선은 수축되고 양측 신장 동맥 폐색의 60 분 후에 제거되고, 동물은 24 시간 동안 복구할 수 있습니다. 연구의 끝에서, 혈장 크레아티닌과 혈액 요소 질소 크게 증가, eGFR 및 소변 출력 크게 감소 하는 동안. 요분 조정의 필요성은 최소화되며 신장 기능에영향을 미치지 않습니다. 양측 신장 동맥 폐색은 회향 성 신부 전혈의 임상 시나리오를 더 잘 모방하고 경피적 접근법은 염증 반응의 영향과 복강경과 같은 개방적인 접근법으로 볼 수 있는 감염의 위험을 최소화합니다. 이 임상적으로 관련된 돼지 모델을 만들고 재현하는 기능은 인간에게 임상 번역을 용이하게합니다.
Introduction
급성 신장 손상(AKI)은 유의한 이환율 및 사망률1,2와관련된 외과 환자 중 일반적으로 진단된 상태입니다. 사용 가능한 데이터는 AKI가 전 세계 모든 입원 환자의 절반에도 영향을 미칠 수 있으며 중환자실1,3에서환자에서 50 %의 사망률을 유발할 수 있음을 보여줍니다. 그것의 높은 보급에도 불구하고, 현재 AKI 치료는 액체 관리 및 투석과 같은 예방 전략에 국한된 남아 있습니다. 따라서AKI4,5,6에 대한 대체 요법을 탐구하는 데 지속적인 관심이있습니다.
AKI는 전형적으로 신장 전, 내재, 및 신장 후4,5,6로분류된다. AKI를 가진 외과 환자의 대다수는 신장 의 허혈-재퍼퓨전 상해 (IRI)의 결과로 저혈당때문에 전 신장 원인과 연관됩니다2. 임상적으로, 소변 출력감소, 신장 기능 감소로 인해 크레아티닌 수치가 증가. 신장은 고신진대사 비율 기관이고 허혈에 영향을 받기 쉽습니다. 신장 IRI의 매우 재현 가능한 큰 동물 모델은 AKI의 병리생리학및 잠재적 치료 접근법5에대한 더 나은 통찰력을 얻기 위해 필요하다.
신장 저구혈 의 임상 시나리오를 모방하기 위해 회심 동맥 폐색의 모형은 적당한 것으로 간주됩니다. 이전에 기술된 모델은 반자 신장의 절제술 유무에 관계없이 일방적인 신장 동맥 폐색을 수반하여 충분한 임상 적용성을 제공하지 않는다7,8. 이 모형은 AKI를 일으키는 원인이 되기에 충분하더라도, 그(것)들은 상해의 모형 또는 기간의 관점에서 실제 임상 시나리오와 유사하지 않습니다.
이 논문의 목적은 혈관 조영술 하에서 풍선 카테터 폐색에 의해 신장 동맥의 경피 양자 임시 폐색의 돼지 모델을 제시하는 것입니다. 양측 신장 동맥 폐색은 신장 저구혈의 임상 시나리오를 모방하고, 이어서 레퍼퓨전용 풍선의 후속제거(9,10)를한다. 카테터삽입, 카테터 안내, 혈관조영술 및 혈역학 모니터링을 포함한 기술 적인 단계가 설명됩니다. 이 방법은 신장 동맥의 고도로 통제되고 복제 가능한 폐색을 허용할 뿐만 아니라, 경피적인 접근법은 개방적인 접근법에 비해 신체에 대한 모욕의 양을 제한함으로써 염증 반응의 영향을 최소화합니다.
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Protocol
모든 생체 내 연구는 동물 관리 및 사용에 대한 국립 보건원의 지침에 따라 수행되었으며 보스턴 아동 병원의 동물 관리 및 사용 위원회 (의정서 18-06-3715)에 의해 승인되었습니다. 모든 동물은 실험실 동물의 관리 및 사용에 대한 가이드에 따라 인도적 치료를 받았습니다. 도 1은 마취, 수술 준비 및 이 연구의 1차 결과 측정을 위한 시간점을 포함하는 타임라인을 보여줍니다.
1. 유도, 마취 및 삽관
- 불필요한 스트레스와 불편함을 방지하기 위해, 스타일마민/졸라제팜 4-6 mg/kg과 자일라진 1.1-2.2 mg/kg의 혼합물과 이소플루란 3%의 근육 주입에 의해 돼지를 진정시킵니다.
- 95%의 에탄올로 영역을 소독한 후 20 G IV 캐뉼라로 정맥접근을 얻기 위해 귀 정맥을 꾸미는 다. 유지 보수 주입을 시작합니다 (5 mL / kg / h에서 0.9 % NaCl).
- 마취 적 수분이 확인되면 내막 관 (40-50kg의 돼지의 경우 크기 7)으로 돼지를 삽관하십시오. 12 호흡 / 분의 주파수로 풍선 환기를 수행하고 수술 극장에 돼지를 수송.
- 동물을 수술대에 놓습니다. FiO2 0.50, 10mL/kg 조수 부피, 연속 카포그래피 하에서 12호흡/분 의 주파수로 기계적 양압 환기를 즉시 시작합니다.
- 연속 모니터링을 위해 귀 또는 아래입술에 펄스 산소계를 놓습니다.
- 공기 가열 패드를 사용하여 normothermia (37 °C)를 유지합니다.
- 전신 마취를 유지하기 위해, 내막관을 통해 0.5-4 %에서 이소플루란 투여를 유지하십시오. 절차 전반에 걸쳐 심전도, 동맥 혈압, 온도 및 카포노그래피를 지속적으로 모니터링하여 마취의 깊이를 측정합니다.
- 폴리 카테터를 삽입하여 동물의 유체 상태를 확인하고 배수 백에서 소변을 수집하여 소변 출력을 모니터링합니다.
참고: 여성 돼지는 쉽게 카테터화를 허용하는 요도의 해부학적 특징으로 인해 남성보다 선호됩니다.
2. 외과 준비 및 혈관 접근
- 멸균 방식으로 동물을 드레이프.
- 베타딘을 적용한 다음 95% 에탄올을 3회 동안 적용하여 목의 오른쪽 측면 부위를 소독합니다.
- 오른쪽 경동맥과 오른쪽 경정맥의 카테터화에 대한 컷다운을 수행한다. 흉골 근육을 측면으로 철회하고 오른쪽 경동맥과 오른쪽 경정맥으로 해부하십시오.
- 동맥과 정맥 모두에 5F 혈관 조영술 칼집을 삽입합니다. 실크 2-0 봉합사로 고정하십시오.
- 셀딩거 기술을 사용하여 5F 혈관조영소 덮개를 왼쪽 대퇴동맥에 삽입합니다.
- 셀딩거 기술을 수행하려면 중공 바늘을 사용하여 대퇴 동맥을 펑크. 루멘을 통해 부드러운 팁 가이드 와이어를 삽입하고 대퇴 동맥으로 진행합니다.
- 바늘을 제거하는 동안 손으로 가이드 와이어를 고정합니다. 혈관 조영술 칼집을 대퇴 동맥에 전달하여 가이드 와이어를 철회하십시오. 필요한 경우 초음파 지침을 사용합니다.
3. 신장 허혈 -재관성 부상의 유도
- 전신 항응고(표적 활성 응고 시간(ACT) > 300s)를 달성하기 위해 정맥내 200IU/kg 나트륨 헤파린을 투여한다.
- 신장 동맥을 식별하기 위해 형광체 아래에 요도 조영제를 주입하여 혈관 조영술을 수행하십시오.
참고: 대조적으로 유발된 신증후군에 대한 위험을 줄이려면 요오드 조영제를 정상 식염수로 1:1 용액으로 희석합니다. 동등한 투약을 보장하기 위해 모든 동물에 대한 복용량을 타부레이팅. - 신장 동맥을 식별하고 가이드 카테터에서 가이드 와이어를 수동으로 진행합니다.
- 오른쪽 경동맥(도1A)을통해 좌측 신장 동맥에 5F JL4 가이딩 카테터를 배치한다.
- 좌측 대퇴동맥(도1A)을통해 오른쪽 신장 동맥에 두 번째 5F JL4 가이딩 카테터를 배치한다.
- 가이드와이어를 사용하여 각 신장 동맥에서 5F 경피성 경피성 혈관 성형술(PTA) 팽창 카테터를 연출합니다.
참고: 풍선을 열기구 인플레이션 후 신장 동맥의 가지 나 담보가 특허를 남기지 않도록 근위 신장 동맥에 풍선을 배치하는 것이 바람직하다. - 각 풍선 카테터를 제자리에 배치하고 압력 라인을 각 카테터에 연결합니다.
- 압력 모니터에 동맥 펄스 파형의 존재를 확인하여 카테터의 올바른 위치를 확인하십시오.
- 각 풍선을 팽창시키고 풍선 내부약 2.5 atm의 압력을 목표로(그림 1B).
- 신장에 혈류의 중단을 확인하기 위해 풍선 카테터의 끝에서 펄스 파형의 평탄화를 관찰한다.
- 요오드 조영 매체(1:1 희석)를 주입하고 신장 혈관의 어떤 소동을 확인합니다.
참고: 팽창된 풍선의 시각화를 위해 팽창된 조영제로 풍선을 채울 수도 있습니다. 그러나, 이 방법은 신장 동맥의 폐색을 확인하기 위하여 평탄화하는 펄스 파형만큼 민감하지 않습니다. - 60분 동안 폐색한 후, 신장 동맥에서 풍선 카테터를 조심스럽게 수축하고 제거합니다.
- 혈관 조영술 (1:1 희석 된 콘트라스트 배지 사용)을 수행하여 신장 동맥 가관성 및 신장 침전(도 1C)의확립을 확인합니다.
- 왼쪽 대퇴 동맥에서 5F 혈관 조영술 칼집을 제거합니다.
- 카테터라이제이션 부위에 30분 간 단단한 압력을 가하십시오.
- ACT가 정상화 될 때까지 프로타민 (3 mg / kg)의 투여에 의해 헤파린의 효과를 반전시면 됩니다.
- 수술 후 기간 동안 소변을 샘플링하려면 피부에 중단된 스티치를 사용하여 실크 2-0 봉합사로 폴리 카테터에 튜브를 고정하십시오.
- 오른쪽 경동맥에 혈관 조영술 칼집과 오른쪽 경정맥을 제자리에 두고 연구 전반에 걸쳐 혈액 샘플링을 허용하기 위해 중단된 스티치를 사용하여 실크 2-0 봉합사로 고정하십시오.
- 2층 연속 스티치를 사용하여 실크 2-0 봉합사로 목 절개를 닫습니다.
- 통증을 최소화하기 위해 절개 부위에 부피바카인(3 mg/kg)을 투여한다.
- 허혈이 끝난 후 총 2시간 동안 5mL/kg/h에서 0.9%의 NaCl으로 동물에게 수분을 공급합니다.
- 수술 후 통증을 최소화하기 위해 동물의 뒷면에 펜타닐 패치(25-50 μg/h)를 놓습니다.
- 수술 후 통증을 최소화하기 위해 부프레노르핀(0.005-0.1 mg/kg)의 근육 내 주사를 투여하십시오.
- 동물을 모니터링하고 깨어날 때까지 기계적 환기에 유지합니다.
4. 동물 회복
- 깨어난 후 온도 조절실에서 동물을 수용하십시오.
- 동물을 한 쪽에서 다른 쪽으로 계속 돌리면 완전한 의식과 앰비트 능력을 되찾습니다.
- 물과 음식 광고 리비툼을 제공합니다.
5. 기능 평가
- 원하는 프로토콜에 따라 혈액과 소변 샘플을 수집합니다.
참고: 본 연구에서, 다음과 같은 시간 포인트가 지정되었다: 기준선 (1 h 다음 수화 프로토콜의 개시 및 신장 동맥의 폐색 전), 허혈의 끝, 및 재관류 (2 h, 6 h, 24 h). - 동맥과 정맥 혈액 샘플을 수집합니다. 후속 분석을 위해 리튬 헤파린 또는 EDTA 코팅 된 vacutainers에 보관하십시오.
참고: 경동맥과 경정맥의 카테터에서 직접 혈액을 그립니다. - 폴리 카테터에서 소변 샘플을 수집하고 분석을 위해 15 mL 튜브에 저장합니다.
참고: 폴리 카테터에 연결된 배수 봉투에서 소변을 수집합니다. - 소변 출력을 확인하기 위해 배수 백을 비우고 소변을 1 시간 동안 수집하십시오.
참고: 배수 백이 폴리 카테터에 연결되지 않은 6 h 시간 지점에서 폴리 카테터에 연결된 튜브를 30 분 동안 닫은 다음 60 mL 주사기로 소변을 수집하여 소변 출력을 결정합니다.
6. 안락사
- 재관류 기간이 끝나면, 전술한 바와 같이 마취및 모니터를 수행한다.
- 5mL/kg/h에서 0.9% NaCl로 수분을 계속 공급하십시오.
- 혈액 샘플링과 폴리 카테터를 위해 동맥과 정맥 카테터를 사용하여 소변 출력을 결정합니다. 최종 혈액 및 소변 샘플을 수집하고 소변 출력을 계산합니다.
- 심포니에서 중간 골반까지 크기 10 블레이드를 사용하여 15cm 미드라인 복강경 절개를 수행합니다.
- 직선 측면 리트랙터를 사용하여 복부 피부를 후퇴시킵니다.
- 좌우 레트로페리톤을 노출하기 위해 복벽의 측면 복막 부착물을 해부한다.
- 신장 동맥과 정맥을 식별하고 무뚝뚝하게 해부합니다.
- 신장 동맥과 정맥을 2-0 실크 봉합사를 사용하여 리게이트하고 조직학적 및 대사 분석을 위한 전체 조직 표본을 수집하기 위해 양측 신장절제술을 수행합니다.
- 안락사의 바람직한 방법으로 동물을 안락사 (예를 들어, 황전, 펜토바르비탈)
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Representative Results
기능 분석
이 연구의 대표적인 결과는 6마리의 동물에서 발생하며, 표시된 데이터는 평균의 표준 오차± 의미입니다. 신장 기능은 소변 출력, 추정 된 사구 여과 율 (eGFR), 플라즈마 크레아틴 및 혈액 우레아 질소 (BUN)를 결정함으로써 평가됩니다. 신장 기능의 바이오마커는 휴대용 화학 분석기를 사용하여 평가됩니다. eGFR은 다음 공식에 따라 계산됩니다: eGFR =1.879 × BW1.092/PCr0.6 (BW: 킬로그램의 체중; PCr: mg/dL의 플라즈마 크레아티닌)10,11.
양측 신장 동맥 폐색60분 에 이어 소변 생산량은 0.5mL/kg/h± 0.5mL/kg/h에서 0.2mL/kg/h ±로 0.1mL/kg/h(p < 0.01)로 크게 감소하였다. 이 감소는 6h (1.2 mL / kg/h ± 0.1 mL/kg/h; p = 0.02 대 기준선) 및 24 h (1.3 mL / kg / h ± 0.4 mL / kg / h; p = 0.02 대 기준선)에서 유의했습니다. 유사하게, eGFR에서 현저한 감소가 관찰되었고, 2.5mL/kg/h에서 0.1mL/kg/h± 0.7mL/kg/h± 0.1 mL/kg/h(p < 0.001)에서, ± 0.1m로 떨어졌습니다. L/kg/h (p < 0.001), 1.2 mL/kg/h ± 0.1 mL/kg/h (p < 0.001) 및 0.9 mL/kg/h ± 0.1 mL/kg/h (p < 0.001) 2h, 각각 6h 및 24 h 재관전(그림2A-B).
플라즈마 크레아티닌은 2h (2.7 mg/dL ± 0.2 mg/dL에서 크게 증가하였다. p < 0.01), 6h (3.7 mg/dL ± 0.3 mg/dL; p < 0.001) 및 24h (5.6 mg/dL ± 0.7 mg/dL; p < 0.001) 기준선에 비해 재퍼퓨전(1.1 mg/dL ± 0.1 mg/dL). BUN은 기준선에서 0.8 mg/dL ± 6.5 mg/dL로 증가했으며, 3.3 mg/dL ± 3.3 mg/dL(p < 0.001) 및 36.2 mg/dL ± 2.9 mg/dL(p < 0.001)으로 각각 6시간 및 24시간 재퍼퓨전(2C)으로 증가하였다.
총 해부학 및 히스토로지
양측 신장 허혈60분 말과 24시간 레퍼퓨전(그림3A)의끝에 두 신장에 고르게 분포된 명백한 괴사 및 출혈 부위가 있었다. 마슨의 트리크롬 염색은 신장 피질의 근위 투굴에 위치한 컨물류 응고 괴사를 밝혀냈습니다. (그림3B). 플라스틱 임베디드 섹션(1 μm)도 히스토로지(도3C)의중요한 세부 사항을 제공하기 때문에 평가되었다. 모든 매슨의 트리크롬 슬라이드는 세포 괴사, 브러시 테두리 손실, 주조 형성 및 튜블러 팽창에 대해 평가되었습니다. 이어서, 급성 관 괴사(ATN)에 대한 반정량 적 채점 시스템은 다음과 같이 구현되었다: 0 없음; 10% 미만인 경우; 2 11%-25% 사이; 3 26%- 45% 사이경우; 4 사이 경우 46%-75%; 및 5 이상이면 76%를 초과합니다. ATN 득점은 신장 피질(4.5점 ± 0.3득점)에서 상당한 부상을 입었으며, 메둘라에서 상당한 부상을 입었습니다(점수 2.7± 0.4).
그림 1. 실험 모델에 대한 설명입니다. (A) 여성 요크셔 돼지 (40-60 kg)는 진정및 삽관되었다. 왼쪽 대퇴 동맥과 오른쪽 경동맥은 5F 혈관 조영술 칼집으로 카테터화되었습니다. 오른쪽 경정맥선과 폴리 오줌 카테터도 배치되었다. 신장 동맥의 선택적 카테터화는 5F 다목적 가이드 카테터를 사용하여 수행되었다. (B) 신장 동맥의 폐색은 신장 동맥의 근접 부분에서 팽창된 5F 경피성 경피성 경피성 혈관 성형술(PTA) 팽창카테터를 사용하여 수행되었고, 60분 동안 신장으로의 혈류를 완전히 가려냈다. 폐색의 확인은 대오르타에서 요오디드 콘트라스트 배지의 주입에 의해 획득되었고 신장혈관의 임의의 오퍼픽션을 확인함으로써 서 입수하였다. (C) 60분 동안 폐색후 풍선이 수축되어 조심스럽게 제거되었습니다. 혈관 조영술은 신장 동맥 가부장제 및 신장 침전의 확립을 확인하기 위해 수행되었다. 동물은 다음 24 시간 동안 생리적 조건하에서 신장을 재퍼퓨즈할 수 있었고, 그 후 안락사되었다. 혈액 및 소변 샘플은 폐색 후 2, 6 및 24 h에서 양측 신장 허혈 전후에 바로 수집되었습니다 (삼각형으로 표시된 시간점). 이 그림은 Doulamis 외11에서수정되었습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 2. 신장 허혈 -레퍼퓨전 부상 전후의 신장 기능. (A) 소변 출력; (B) 추정 사구체 여과 속도 (eGFR); (C) 혈장 크레아티닌 및 (D) 혈액 우레아 질소 (BUN). 모든 결과는 각 시간별 평균 및 표준 편차로 표시됩니다. 소변 출력 및 허혈-재퍼퓨전 상해다음eGFR에서 유의한 감소를 볼 수 있다. 이에 따라, 플라즈마 크레아티닌과 BUN에서 상당한 증가가 주목된다. 데이터는 벤자민과 호흐버그의 거짓 발견율(n=6)을 통해 양방향 반복 측정ANOVA에 의해 분석되었다. *p < 0.05 vs 기준선; **p < 0.01 vs 기준선; p < 0.001 vs 기준선. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 3. 신장 허혈-레퍼퓨전 손상 에 이어 24 시간의 레퍼퓨전에서 신장 해부학 및 신장 조직 부상. (A) 왼쪽 신장의 총 해부학은 양측 신장 동맥 폐색60분 과 24h의 레퍼퓨전을 따르는 경색 과 적출혈 부위를 나타내는 창백한 부위를 나타낸다. (B) 차량의 신장 피질은 주로 근위 투굴의 광범위한 응고 괴사를 나타내며, 60분 동안 허혈과 24h의 재관류(Masson's Trichrome, 오리지널 배율 20x)를 따라다닌다. (C) 이 1 μm 플라스틱(araldite-epon) 임베디드 섹션은 주로 소기관(Toluidine blue, Original 배율 40x)의 붓기 및 퇴행성 변화와 함께 매트릭스로 구성된 컨물류 관 괴사를 보다 자세하게 보여줍니다. 스케일 바 = 200 μm. 이 그림은 Doulamis 외11에서수정되었습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
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Discussion
AKI는 전 세계6,12의입원 성인 환자의 최대 50%에 영향을 미치는 일반적인 임상 장애이다. 임상적으로 관련있는 동물 모형은 질병의 병리생리학 및 잠재적인 치료 표적을 추가로 조사하기 위하여 필요합니다. AKI를 복제하는 몇몇 뮤린 모형이 있더라도, 이들은 완전히 그들의 각각의 임상 시나리오 및 인간 신장의 해부학을 모방하지 않습니다. 이 연구는 인간에게 번역할 수 있도록 임상적으로 관련된 돼지 모델을제안합니다(13).
여기서, 프로토콜은 임상적으로 관련될 뿐만 아니라 개방적인 접근과 수반되는 감염에 대한 염증 반응 및 리스크를 최소화하는 경피적인 접근을 기술합니다. 또한 최적의 혈역학 적 제어를 달성하고 신장 저구체 주입(11)을피하기 위해 모든 동물에 일관된 수화 프로토콜을 사용해야한다는 점을 강조해야합니다. 이것은 동물이 마취될 때 쉽게 행할 수 있지만 물이 광고 리비텀을 제공될 때 회복 기간 동안 항상 정확하게 수행 될 수는 없습니다.
요이분암 대조 매체는 대조적으로 유도된 신장 독성을 피하기 위해 신중하게 사용해야 한다. 이것은 정상 식염수로 1:1 또는 1:2 희석에 의해 달성될 수 있습니다. 본 연구에서는, 인간(3.33mL/kg)9,14에대한 예상 안전 임계값보다 10배 낮은 용량을 사용했다.
그 중에서도, 연구 결과는 체중 및 혈장 크레아티닌 수준10,11에대한 수식을 고려한 신장 기능의 평가를 위해 eGFR을사용한다. GFR의 결정에 대한 이눌린의 사용이 이전에 문서화되었지만, 그 사용은 인룰린 주입 후 심한 저혈압 혈관 경련 반응으로 인해 현재 프로토콜에서 연기되었다는 점에 유의해야합니다. 이 스테로이드 또는 inulin 관리 전에 피 네 프 린을 사용 하 여 피할 수 있습니다. 그러나, 이러한 약물의 사용은 각 연구 디자인에 따라 적절 하지 않을 수 있습니다. 이러한 이유로, 플라즈마 크레아티닌및 체중에 기초하여 eGFR을 추정하는 검증된 포뮬러가11을사용되었다. GFR을 결정하는 또 다른 방법은 공식을 사용하는 것입니다 : (소변 크레아티닌 x 소변 유량) / (혈장 크레아티닌 x 신장 무게).
ATN 점수의 평가를 위해, 매슨의 트리크롬 염색의 사용은 조직 상해를 더 잘 추적할 수 있기 때문에 기존의 헤마톡시린 및 에진 염색에 바람직하다. 또 다른 대안은샘플(11)의더 얇은 슬라이스를 허용하므로 더 큰 세부 사항을 제공하는 플라스틱 임베디드 섹션의 사용일 수 있다. AKI의 이 전임상 모형은 신장 이식, 신장 저구부루와 같은 몇몇 임상 시나리오를 모방하기 위하여 이용될 수 있습니다 (예를 들면, 심근 경색, 동맥류 파열, 대동맥 해부), 신장 허혈및 장기간 심혈관 절차의 고위험에 경피 절차 는 장기간 심근 경증 및 장기적인 심혈관 절차의 연장된 심혈및 심혈관 절차의 연장된 심부시술.
이 연구에는 몇 가지 제한 사항이 있습니다. 이 연구는 여성 동물만 사용했습니다. 이것은 남성 보다는 여성에서 더 적은 외상인 오줌 카테터화와 관련있는 어떤 가능한 효력든지 감소시키기 위하여 행했습니다. 이 제한 이외에, 연구 결과는 젊고, 그렇지 않으면 건강한 동물을 이용하고, 따라서 공존하는 질병과 관련될 수 있는 혼동하는 변수를 제거했습니다. 결론적으로, 현재 연구는 AKI의 부담을 감소시키는 데 사용할 수있는 신장 IRI의 매우 재현 가능한 큰 동물 모델을 설명합니다.
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Disclosures
저자는 경쟁 적인 재정적 이익을 선언하지 않습니다.
Acknowledgments
아서 네더 박사의 도움과 지도에 감사드립니다. 이 작품은 리처드 A. 와 수잔 F. 스미스 대통령의 혁신 상, 마이클 B. 클라인과 가족, 시드먼 가족 재단, 마이클 B. 루킨 자선 재단, 케네스 C. 그리핀 자선 연구 기금, 보스턴 투자 위원회에 의해 지원되었다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 0.9% sodium chloride injection, usp, 100 ml viaflex plastic container | Baxter | 2B1302 | For animal hydration |
| Agent contrast 100.0ml injection media btl ioversal 74% | CARDINAL HEALTH | 133311 | For visualizing the vasculature |
| Bard Bardia Closed System Urinary Drainage Bag | BARD Inc | 802001 | For urine collection |
| BD Vacutainer K2 EDTA | BD | 367841 | For blood sample storage |
| BD Vacutainer Lithium Heparin | BD | 366667 | For blood sample storage |
| Betadine | Henry Schein | 6906950 | For skin disinfection |
| Bookwalker retractor | Codman | For skin retraction | |
| Bupivacaine 0.25% | Hospira | Administer at incision site for analgesia | |
| Buprenorphine SR | Zoo Pharm | 10mg/ml bottle, Dose: 0.2mg/kg SC | |
| Cath angio 5.0 Fr x100.0 cm 0.038 in JR4 | MERIT MEDICAL SYSTEM INC | 7523-21 | For identification of the renal arteries |
| Cuffed endotracheal tube | Emdamed | To establish a secure airway for the duration of the operation | |
| EKG Medtronics- Physiocontrol LifePak 20 Oxygen saturation monitor | GE Healthcare Madison WI | For oxygen saturation monitoring | |
| Encore 26 inflator | BOSTON SCIENTIFIC | 710113 | For inflating the balloon catheters |
| Ethanol 95% (Ethyl alcohol) | Henry Schein | For skin disinfection | |
| Fentanyl patch | Mylan | Dose: 25-50mcg/hr, TD | |
| Gold silicone coated Foley | TELEFLEX MEDICAL INC | 180730160 | For urine collection |
| Heparin sodium | LEO Pharma A/S | Dose: 200 IU/kg IV | |
| i33 ultrasound machine | Phillips | Use ultrasonographic guidance for femoral catherization if necessary | |
| Inqwire diagnostic guide wire - 0.035" (0.89 mm) - 260 cm (102") - 1.5 mm j-tip | MERIT MEDICAL SYSTEM INC | 6609-33 | For guiding the balloon catheters to the renal arteries |
| Intravenous catheter, size 20 gauge | Santa Cruz Biotechnology | Inc SC-360097 | For fluid administration |
| Isoflurane | Patterson Veterinary Supply, Inc. | 21283620 | Dose: 3%, INH |
| Metzenbaum blunt curved 14.5 cm - 5(3/4)" | Rudolf Medical | RU-1311-14M | For tissue dissection and cutting |
| Neonatal disposable transducer kit with 30ml/hr flush device and double 4-way stopcocks for continuous monitoring | Argon Medical | 041588505A | For pressure measurement |
| Powerflex pro PTA dilatation catheter 6 x 20 mm - shaft length (135cm) | CARDINAL HEALTH | 4400602X | For occlusion of the renal arteries |
| Pressure monitoring lines mll/mll - 12" clear, mll/mll | Smiths Medical | B1571/MX571 | For pressure measurement |
| Procedure pack | Molnlycke Health Care | 97027809 | Surgical drape, gauze pads, syringes, beaker etc |
| Protamine | Henry Schein | 1044148 | For heparin reversal |
| Scalpel blade - size #10 | Cardinal Health (Allegiance) | 32295-010 | For the skin incisions |
| Stopcock iv 4 way lrg bore rotg male ll adptr strl | Peoplesoft | 1550 | For connecting tubings |
| Straight lateral retractor | Codman | For skin retraction | |
| Suture perma hnd 18in 2-0 braid silk blk | CARDINAL HEALTH 1 | A185H | For suturing incision site and securing catheters |
| Syringe contrast injection 10ml fixed male luer red | MERIT MEDICAL SYSTEM INC | MSS111-R | To administer the contrast agent |
| Syringe medical 60ml ll plst strl ltx free disp | CARDINAL HEALTH 1 | BF309653 | For urine collection and flushing of the angiocath |
| Tilzolan (tiletamine/zolazepam) | Patterson Veterinary Supply, Inc. | 07-893-1467 | Dose: 4-6 mg/kg, IM |
| Xylazine | Putney, INC | Dose: 1.1-2.2 mg/kg, IM |
References
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