Summary
यहां, हम चूहों पर रोगियों के लिए डिज़ाइन किए गए वाणिज्यिक निरंतर ग्लूकोज मॉनिटर को प्रत्यारोपित करने के लिए एक सरल विधि का वर्णन करते हैं और परिणामों का विश्लेषण करने के लिए स्क्रिप्ट प्रदान करते हैं।
Abstract
चूहे एक सामान्य मॉडल जीव हैं जिनका उपयोग मधुमेह मेलेटस जैसे चयापचय रोगों का अध्ययन करने के लिए किया जाता है। ग्लूकोज के स्तर को आमतौर पर पूंछ-रक्तस्राव द्वारा मापा जाता है, जिसके लिए चूहों को संभालने की आवश्यकता होती है, तनाव का कारण बनता है, और अंधेरे चक्र के दौरान चूहों को स्वतंत्र रूप से व्यवहार करने पर डेटा प्रदान नहीं करता है। चूहों में अत्याधुनिक निरंतर ग्लूकोज माप के लिए माउस के महाधमनी आर्क में एक जांच डालने की आवश्यकता होती है, साथ ही एक विशेष टेलीमेट्री सिस्टम भी। इस चुनौतीपूर्ण और महंगे तरीके को ज्यादातर प्रयोगशालाओं ने नहीं अपनाया है। यहां, हम एक सरल प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं जिसमें बुनियादी शोध के एक भाग के रूप में चूहों में लगातार ग्लूकोज को मापने के लिए लाखों रोगियों द्वारा उपयोग किए जाने वाले व्यावसायिक रूप से उपलब्ध निरंतर ग्लूकोज मॉनिटर का उपयोग शामिल है। ग्लूकोज-सेंसिंग प्रोब को त्वचा पर एक छोटे से चीरे के माध्यम से माउस के पीछे चमड़े के नीचे की जगह में डाला जाता है और कुछ सीवन का उपयोग करके कसकर रखा जाता है। डिवाइस को माउस की त्वचा पर झुकाया जाता है ताकि यह सुनिश्चित हो सके कि यह जगह पर बना रहे। डिवाइस 2 सप्ताह तक ग्लूकोज के स्तर को माप सकता है और चूहों को संभालने की आवश्यकता के बिना पास के रिसीवर को डेटा भेजता है। दर्ज किए गए ग्लूकोज के स्तर के बुनियादी डेटा विश्लेषण के लिए स्क्रिप्ट प्रदान की जाती हैं। यह विधि, सर्जरी से कम्प्यूटेशनल विश्लेषण तक, लागत प्रभावी है और चयापचय अनुसंधान में संभावित रूप से बहुत उपयोगी है।
Introduction
मधुमेह मेलेटस (डीएम) एक विनाशकारी बीमारी है जो उच्च रक्त शर्करा के स्तर की विशेषता है। टाइप 1 डीएम अग्न्याशय में इंसुलिन उत्पादक बीटा कोशिकाओं पर एक ऑटोइम्यून हमले का परिणाम हो सकता है। दूसरी ओर, टाइप 2 डीएम और गर्भकालीन डीएम, ग्लूकोज के स्तर में वृद्धि के जवाबमें पर्याप्त इंसुलिन का स्राव करने के लिए बीटा कोशिकाओं की विफलता की विशेषता है। माउस डीएम का अध्ययन करने के लिए उपयोग किया जाने वाला एक सामान्य मॉडल जीव है क्योंकि इसमें समान शरीर विज्ञान है, और इसका सामान्य ग्लूकोज स्तर मनुष्यों के करीब है। इसके अलावा, विशिष्ट माउस उपभेद प्रमुख सिग्नलिंग मार्गों में उत्परिवर्तन या विशिष्ट आहार के संपर्क के बाद डीएम विकसित कर सकते हैं, जो रोग मॉडलिंग 2,3,4 को सक्षम बनाता है।
रक्त शर्करा को आमतौर पर चूहों में चूहों में मापा जाता है जो चूहों के लिए डिज़ाइन किए गए ग्लूकोमीटर का उपयोग करके माउस की पूंछ की नोक से रक्त की एक छोटी बूंद (1-2 μL) निकालते हैं। यह विधि तनाव का कारण बनती है और माउस को संभालने की आवश्यकता होती है, जो ग्लूकोज के स्तर को प्रभावित करता है और स्वतंत्र रूप से व्यवहार करने वाले चूहों में रक्त शर्करा के स्तर के माप को प्रतिबंधित करता है या जब शोधकर्ता5 के करीब नहीं होता है। चूहों के रक्तस्राव से आस-पास के चूहों को तनाव हो सकता है, विशेष रूप से उसी पिंजरे के चूहों के लिए जिनके ग्लाइकेमिया को अभी तक मापा नहीं गया है, इस प्रकार परिणामों को प्रभावित करता है। चूहे हैंडलर के आधार पर अलग-अलग प्रतिक्रिया देते हैं, और ग्लूकोज को मापने वाला व्यक्ति चूहों के ग्लूकोज के स्तर को प्रभावित कर सकता है। ये नुकसान सावधानीपूर्वक प्रयोगात्मक डिजाइन की मांग करते हैं और प्रयोगों के बीच कुछ विसंगतियों को रेखांकित करते हैं।
अत्याधुनिक टेलीमेट्री6 का उपयोग करके चूहों के महाधमनी चाप में ग्लूकोज सेंसर प्रत्यारोपित करके बिना रक्तस्राव के स्वतंत्र रूप से चलने वाले चूहों में ग्लूकोज को मापना संभव है। परिणामी माप बहुत अच्छे हैं और लंबे समय तक बनाए रखा जा सकता है, लेकिन इन सेंसरों को प्रत्यारोपित करना चुनौतीपूर्ण है, और टेलीमेट्री प्रणाली महंगी है, जिससे इस पद्धति को मध्यम रूप से अपनाया जाता है और गैर-विशिष्ट प्रयोगशालाओं में कोई अपनाने की आवश्यकता नहीं होती है। चमड़े के नीचे या अन्य ग्लूकोज सेंसर जो चूहों और उनके शरीर विज्ञान के आयामों के अनुरूप हैं, हाल के वर्षों में विकसित किए गए हैं, लेकिन इन्हें फिर से अत्यधिक कुशल विशेषज्ञों की आवश्यकता होती है और कुछ मामलों में महंगा 6,7,8,9,10 है।
वाणिज्यिक निरंतर ग्लूकोज मॉनिटर (सीजीएम) जो मूल रूप से डीएम रोगियों के ग्लूकोज स्तर की निगरानी के लिए विकसित किए गए थे, प्रत्यारोपित जांच की तुलना में कम लागत और तकनीकी विशेषज्ञता आवश्यकताओं के साथ स्वतंत्र रूप से चलने वाले चूहों में ग्लूकोज को मापने का एक और विकल्प प्रदान करते हैं। इस तरह की जांच का उपयोग कुछ प्रयोगशालाओं 5,11,12,13,14,15 द्वारा बुनियादी अनुसंधान में किया गया है, जिसमें हमारे सहयोगी भी शामिल हैं जिन्होंने इस प्रोटोकॉल 16 का उपयोग कियाथा। इन उपकरणों में आमतौर पर एक सेंसर, एक माउंटिंग डिवाइस, एक रिसीवर और एक सॉफ्टवेयर एप्लिकेशन शामिल होता है। सेंसर में एंजाइमेटिक ग्लूकोसेंसर, चिपकने वाला टेप, एक ऊर्जा स्रोत, अल्पकालिक मेमोरी और एक वायरलेस संचार मॉड्यूल का मार्गदर्शन करने वाला एक कैनुला है जो डेटा को स्टोर करता है और रिसीवर को भेजता है। रिसीवर वर्तमान ग्लूकोज के स्तर को दिखा सकता है और डेटा को सर्वर पर भेज सकता है; यह रिसीवर एक सेलफोन हो सकता है। सॉफ्टवेयर एप्लिकेशन रोगी के ग्लाइकेमिया पर रोगी और चिकित्सा देखभाल टीम के लिए डेटा प्रदान करता है। रोगियों में, सेंसर माउंटिंग डिवाइस का उपयोग करके आसानी से जुड़ा होता है। त्वचा के खिलाफ माउंटिंग डिवाइस को दबाकर कैनुला को चमड़े के नीचे डाला जाता है, और सेंसर चिपकने वाला टेप की मदद से जगह पर रहता है।
यह चूहों में ग्लूकोज के स्तर को मापने के लिए एक वाणिज्यिक सीजीएम डिवाइस को अनुकूलित करने के लिए एक विस्तृत प्रोटोकॉल है। यह प्रोटोकॉल वर्णन करता है कि ग्लूकोज सेंसर को शल्य चिकित्सा से कैसे सम्मिलित करें और इसे माउस से संलग्न करें। बुनियादी डेटा विश्लेषण और डेटा विज़ुअलाइज़ेशन के लिए स्क्रिप्ट प्रदान की जाती हैं। संभावित नुकसान, समस्या निवारण और मानक परिणामों के उदाहरण प्रदान किए जाते हैं। नीचे दिया गया प्रोटोकॉल एक निश्चित सीजीएम के लिए विशिष्ट है, लेकिन आसानी से अन्य प्रकार के वाणिज्यिक सीजीएम के लिए अनुकूलित किया जा सकता है क्योंकि वे उपलब्ध हो जाते हैं।
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Protocol
प्रयोगों को हिब्रू विश्वविद्यालय की संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति (आईएसीयूसी) द्वारा अनुमोदित किया गया था।
नोट: सभी उपकरणों को निष्फल किया जाना चाहिए, और प्रवेशनी की हैंडलिंग एक बाँझ तकनीक का उपयोग करके की जानी चाहिए। नीचे दिया गया प्रोटोकॉल एक विशिष्ट सीजीएम के लिए ठीक है। प्रोटोकॉल को अन्य सीजीएम के लिए अनुकूलित किया जा सकता है।
1. प्रक्रिया से पहले एनाल्जेसिक प्रशासन
- शरीर के 5 मिलीग्राम / किलोग्राम वजन पर मेलॉक्सिकैम के साथ 5% डेक्सट्रोज और 0.45% खारा का उपयोग करें।
2. संज्ञाहरण प्रशासन
- ढक्कन को कसकर बंद करते हुए, प्रेरण कक्ष में माउस रखें। इंडक्शन चैंबर में एनेस्थीसिया के प्रेरण को 500 एमएल / मिनट की प्रवाह दर पर 3% आइसोफ्लुरेन पर सेट करें।
- एक बार जब माउस अनुत्तरदायी हो जाता है, तो माउस को कक्ष से हटा दें, और नाक शंकु को माउस में फिट करें। एक इंटरडिजिटल चुटकी के साथ संज्ञाहरण स्तर की पुष्टि करें। 30 ग्राम वजन वाले माउस में एकाग्रता को 1% -1.5% आइसोफ्लुरेन और प्रवाह दर को 100 एमएल / मिनट पर सेट करें।
- एनेस्थीसिया के दौरान सूखापन को रोकने के लिए आंखों पर नेत्र मरहम लगाएं।
3. सेंसर तैयारी
- सेंसर के टेप और कैनुला साइड (चित्रा 1 ए) को उजागर करने के लिए सेंसर माउंटिंग डिवाइस पर सेंसर माउंट करें। सतर्क रहें क्योंकि सुई को कैनुला में डाला जाता है और उजागर किया जाता है।
- कैनुला के दोनों किनारों पर टेप पर दो 5-0 टेपर पॉइंट सीवन (चित्रा 1 ए)।
4. बालों को हटाने और कीटाणुशोधन
- माउस के पीछे की मध्य रेखा पर लगभग 4 सेमी x 4 सेमी का क्षेत्र शेव करें।
- बालों को पूरी तरह से हटाने के लिए शेव किए गए क्षेत्र में एक डिपिलेटरी क्रीम का प्रशासन करें।
- त्वचा को पोंछें, और 2% क्लोरहेक्सिडिन ग्लूकोनेट और 70% आइसोप्रोपिल अल्कोहल युक्त एंटीसेप्टिक समाधान का उपयोग करके इसे कीटाणुरहित करें।
5. पृष्ठीय त्वचा की तैयारी
- तेज कैंची का उपयोग करके रीढ़ के ऊपर मुंडा क्षेत्र के केंद्र में 2 मिमी चीरा लगाएं (चित्रा 1 बी)।
- संक्षेप में, एक छोटे चमड़े के नीचे की जेब बनाने के लिए त्वचा के नीचे एक कुंद किनारे के साथ छोटे बल डालें ताकि कैनुला को चमड़े के नीचे की जेब में आसानी से डाला जा सके (चित्रा 1 बी)।
- चीरे के प्रत्येक तरफ त्वचा के माध्यम से चरण 3.2 से एक सीवन पास करें (चित्रा 1 सी)।
6. सेंसर सम्मिलन
- सेंसर माउंटिंग डिवाइस से सेंसर को पूरी तरह से हटा दें (कैनुला सुई से शून्य है), और आसपास के टेप को खुद से चिपकने से बचाने के लिए सेंसर को बल के साथ पकड़ें।
- सावधानी से कैनुला को चमड़े के नीचे की जेब में डालें।
- प्रत्येक तरफ सीवन खींचें, और सेंसर को मजबूती से संलग्न करने के लिए उन्हें कस ें और बांधें, इस प्रकार समय के साथ चिपकने वाला टेप ढीला होने के बाद कैनुला को चमड़े के नीचे की जेब से बाहर फिसलने से रोका जा सके।
7. सेंसर अटैचमेंट और ट्यूरिंग
- आंतरिक सीवन को बांधकर और सेंसर के चारों ओर चिपकने वाले टेप का उपयोग करके सेंसर को पीछे की ओर मजबूती से संलग्न करें।
- सेंसर के टेप की सीमा को त्वचा से जोड़ते हुए, सेंसर के चारों ओर आठ असंतुलित सीवन बनाएं (चित्रा 1 डी)।
8. रीडर की सक्रियता
- एक बार सेंसर डालने के बाद, रीडर को चालू करके, स्टार्ट न्यू सेंसर दबाकर और निर्माता के निर्देशों के अनुसार सेंसर को स्वाइप करके रीडर को सक्रिय करें।
- सीजीएम स्थापित करने के कुछ मिनट बाद ही पहली रीडिंग ली जा सकती है। इस सीजीएम के मामले में, पहली रीडिंग 60 मिनट के बाद ली जा सकती है।
9. परिणाम पढ़ना
- पाठक को माउस के करीब रखें (इसे छूने की कोई आवश्यकता नहीं है)। सेंसर में संग्रहीत सभी डेटा पाठक को प्रेषित किए जाते हैं।
नोट: ऐतिहासिक डेटा बचत क्षमता की अवधि में विभिन्न सीजीएम डिवाइस भिन्न हो सकते हैं। इस सीजीएम के मामले में, दो रीडिंग के बीच अधिकतम 8 घंटे संग्रहीत किया जा सकता है।
10. सेंसर को हटाना
- माउस को एनेस्थेटाइज करें (अनुभाग 2 देखें)।
- तेज कैंची का उपयोग करके सेंसर को माउस के पीछे से जोड़ने वाले टांके को काटें।
- सेंसर को धीरे से हटाकर चीरे पर सीवन को निकालें और काट लें।
- यदि आवश्यक हो, तो माउस के पीछे चीरा बंद करने के लिए एकल सीवन का उपयोग करें।
11. डेटा विश्लेषण
- डेटा डाउनलोड: सीजीएम निर्माता द्वारा प्रदान किए गए निर्देशों के अनुसार डेटा डाउनलोड करें।
नोट: प्रत्येक सीजीएम का एक अलग प्रारूप होता है, जो उपयोगकर्ता के लिए आसानी से सुलभ हो सकता है या नहीं भी हो सकता है। सीजीएम चुनने में यह एक महत्वपूर्ण विचार है। - प्रदान किए गए सॉफ़्टवेयर के साथ विश्लेषण के लिए, Github (https://github.com/mika-littor/CGM-in-Mice-Analysis.git) पर रीडमी फ़ाइल में दिए गए निर्देशों के अनुसार डेटा को स्वरूपित करें।
चित्र 1: माउस के लिए सेंसर का अनुलग्नक . (A) लाल तीर ों द्वारा चिह्नित दो सीवन सीजीएम सेंसर के निचले हिस्से में प्रवेशनी के दोनों किनारों पर सेंसर टेप के माध्यम से पारित किए जाते हैं, जो एक सफेद तीर द्वारा चिह्नित होते हैं. (बी) तेज कैंची का उपयोग करके रीढ़ के साथ मुंडा क्षेत्र के केंद्र में एक छोटा 2 मिमी चीरा लगाया जाता है। एक कुंद किनारे वाले छोटे बल को त्वचा के नीचे एक छोटी चमड़े के नीचे की जेब बनाने के लिए संक्षेप में डाला जाता है ताकि कैनुला को चमड़े के नीचे डाला जा सके। (C) A से समान सीवन चीरे के प्रत्येक तरफ चमड़े के नीचे से पारित होते हैं। लाल तीर सेंसर से जुड़े सीवन को चिह्नित करते हैं जैसे कि ए में, नीले तीर उस स्थान को चिह्नित करते हैं जहां सीवन माउस के पीछे त्वचा से गुजरते हैं, और काला तीर चीरा दिखाता है। (डी) कैनुला डालने के बाद, सीजीएम को सुरक्षित करने के लिए आंतरिक सीवन को कस दिया जाता है और चीरे के करीब बांध दिया जाता है। सेंसर को फिर त्वचा पर लगाया जाता है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
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Representative Results
सर्जिकल परिणाम।
आठ एचएसडी: आईसीआर चूहों (8 सप्ताह की आयु) के परिणाम 18 सप्ताह के लिए उच्च वसा वाले उच्च सुक्रोज आहार (एचएफएचएस) खिलाए गए और पांच दुबला एचएसडी: आईसीआर चूहों (12 सप्ताह की आयु) को दिखाया गया है। हमारे द्वारा उपयोग किया जाने वाला डिवाइस 8 घंटे तक डेटा संग्रहीत करता है। स्थानीय पशु सुविधा तक पहुंच 07:00-19:00 तक सीमित थी, इस प्रकार देर रात के घंटों के दौरान डेटा संग्रह पर प्रतिबंध लगा दिया गया था, जब चूहे सक्रिय होते हैं। इसलिए, चूहों को शल्य चिकित्सा प्रक्रिया से पहले 7 दिनों के लिए रिवर्स लाइटिंग वाले कमरे में रखा गया था, जिसमें 8:30 और 20:30 के बीच अंधेरे घंटे थे। यह सभी उपकरणों या पशु सुविधाओं के लिए आवश्यक नहीं है, और हम उन उपकरणों का उपयोग करने की सलाह देते हैं जो 12 घंटे से अधिक समय तक जानकारी संग्रहीत कर सकते हैं।
सर्जरी के बाद कोई मृत्यु दर नहीं थी। सर्जरी ने प्रयोग के समय लगभग 10% वजन घटाने का नेतृत्व किया (चित्रा 2 ए)। इसलिए, वजन घटाने के दौरान, सर्जरी के बाद पहले कुछ दिनों में लिए गए माप ों को देखभाल के साथ व्याख्या की जानी चाहिए। वजन घटाने चूहों की भोजन और पानी तक पहुंचने में असमर्थता के कारण नहीं था। सीजीएम माप और पूंछ-टिप रक्त ग्लूकोज माप की तुलना ने उपवास और गैर-उपवास राज्यों में अच्छा समझौता दिखाया (चित्रा 2 बी)। सीजीएम औसतन 11 दिनों के लिए सक्रिय था (चित्रा 2 सी)। इस प्रकार के डिवाइस के लिए दिनों की अधिकतम संख्या 14 दिन है। जब डिवाइस पहले निष्क्रिय हो गया था, तो यह सीजीएम के गिरने के कारण नहीं था।
चित्र 2: सीजीएम को लागू करने के सामान्य परिणाम (ए) सीजीएम सक्रिय होने के दौरान औसत वजन में कमी। एन = 8 चूहे। (बी) हाथ से पकड़े गए ग्लूकोमीटर और सीजीएम डिवाइस द्वारा ग्लूकोज रीडिंग के बीच औसत अंतर। अंतर 0 मिलीग्राम / डीएल से काफी अलग नहीं था। एन = छह चूहों में 10 रीडिंग। (C) n = 8 चूहों में CGM सक्रिय होने का औसत समय। त्रुटि पट्टियाँ माध्य की मानक त्रुटि का प्रतिनिधित्व करती हैं. कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
कच्चा उत्पादन
एक दिन के ग्लूकोज के स्तर को सीजीएम सॉफ्टवेयर (चित्रा 3 ए) द्वारा उत्पादित ग्राफ पर दिखाया गया है। कुछ दिनों के डेटा को प्रदान किए गए कोड (चित्रा 3 बी) का उपयोग करके देखा जा सकता है। हम स्पष्टता के लिए 3 दिनों से डेटा दिखाते हैं।
चित्र 3: डेटा विश्लेषण । (ए) वाणिज्यिक उत्पादन। 18:00 और आधी रात के बीच डेटा एकत्र नहीं किया गया था। छायांकित क्षेत्र रोगियों में नॉरमोग्लाइकेमिया मूल्यों को दर्शाता है, जो 70-100 मिलीग्राम / डीएल के बीच हैं। (बी) प्रदान किए गए कोड का उपयोग करके एक माउस से 3 दिनों का कच्चा आउटपुट डेटा। A और B के बीच y-अक्ष में पैमाने में अंतर पर ध्यान दें। अक्ष पैरामीटर, और अन्य सभी पैरामीटर, कोड में संशोधित किए जा सकते हैं। स्पष्टता के लिए 3 दिनों का डेटा दिखाया गया है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
विश्लेषण
एक बार डेटा निकाले जाने के बाद, विश्लेषण प्रदान किए गए कोड या किसी अन्य कस्टम-निर्मित सॉफ़्टवेयर का उपयोग करके किया जा सकता है। नीचे एक माउस के लिए हर समय बिंदु पर औसत (चित्रा 4 ए, सी) और औसत (चित्रा 4 बी, डी) ग्लूकोज का स्तर है। प्लॉट को चिकना करने के लिए एक स्लाइडिंग विंडो का उपयोग किया जा सकता है। स्पष्टता के लिए केवल दो चूहों को दिखाया गया है।
चित्र 4: प्रदान की गई स्क्रिप्ट का उपयोग करके डेटा विश्लेषण आउटपुट । (ए) एक विशिष्ट माउस में प्रत्येक समय बिंदु पर औसत और (बी) औसत ग्लूकोज का स्तर। छायांकित क्षेत्र ग्लूकोज के स्तर में मानक विचलन को दर्शाता है। (सी) दो चूहों से औसत और (डी) औसत ग्लूकोज का स्तर। स्पष्टता के लिए केवल दो चूहों को दिखाया गया है। एक धराशायी रेखा प्रकाश (20:30-08:30) से अंधेरे (8:30-20:30) में संक्रमण को दर्शाती है। वक्र को चिकना करने के लिए 20 मिनट की स्लाइडिंग विंडो का उपयोग किया गया था। विंडो का आकार, और सभी पैरामीटर, कोड में संशोधित किए जा सकते हैं। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
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Discussion
यह प्रोटोकॉल चूहों में ग्लूकोज के स्तर की निगरानी के लिए एक सरल, सस्ती विधि प्रदान करता है जिसे चुनौतीपूर्ण माइक्रोसर्जरी की आवश्यकता नहीं होती है और इसमें रक्तस्राव या चूहों को संभालना शामिल नहीं होता है। विधि हर सुविधा में लागू करना आसान है और चूहों को मृत्यु दर, दर्द या अत्यधिक असुविधा का कारण नहीं बनता है। प्रोटोकॉल में सबसे महत्वपूर्ण कदम माउस की त्वचा के नीचे ग्लूकोज सेंसर के प्रवेशनी को सम्मिलित करना है। कुछ सीवन के अलावा कैनुला को लंबे समय तक रहने की अनुमति देता है। सेंसर छोटे होते हैं और माउस के हिलने पर अवरुद्ध या गलत हो सकते हैं। सेंसर को आंतरिक सीवन द्वारा सुरक्षित किया जाना चाहिए और माउस के पीछे कुछ सीवन द्वारा जोड़ा जाना चाहिए। प्रोटोकॉल को कई वाणिज्यिक सीजीएम प्रणालियों के लिए अनुकूलित किया जा सकता है।
सर्जरी के बाद चूहों ने वजन कम किया, जो सर्जरी के बाद अपेक्षित है और सर्जरी और संज्ञाहरण के तनाव, डिवाइस को ले जाने के बोझ और इस अध्ययन में उपयोग किए जाने वाले विशिष्ट प्रोटोकॉल द्वारा लगाए गए एकल-आवास से जुड़ा हो सकता है। जैसे-जैसे सीजीएम डिवाइस उत्तरोत्तर हल्के और अधिक सटीक होते जाते हैं, इन प्रभावों के छोटे होने की उम्मीद है। हमने देखा कि सीजीएम ले जाने वाले चूहे पिंजरे में स्वतंत्र रूप से चले गए और भोजन के छर्रों तक पहुंच गए जिन्हें चढ़ने की आवश्यकता थी। विधि समय के साथ कार्य करने के लिए प्रत्येक सीजीएम की क्षमता से सीमित है। शोधकर्ताओं को वजन घटाने के लिए निगरानी करनी चाहिए और मानक विकल्पों की तुलना में इस पद्धति के फायदे और नुकसान पर विचार करना चाहिए, जिनके लिए चूहों के लगातार हैंडलिंग और रक्तस्राव की आवश्यकता होती है, जो मानते हैं कि एक माउस से रक्तस्राव का अपने पड़ोसियों के ग्लाइसीमिया पर बहुत कम प्रभाव पड़ता है और दिन के दौरान तनावपूर्ण स्थिति में ग्लूकोज के स्तर को मापना शामिल होता है।
ऊपर वर्णित प्रोटोकॉल काफी सरल, तेज और स्केलेबल है। इसे पशु सुविधा या महंगे उपकरण में एक विशेष सेटिंग की आवश्यकता नहीं है, इसका उपयोग अन्य प्रक्रियाओं के साथ समानांतर में किया जा सकता है जो प्रयोग का हिस्सा हैं, और किसी भी आनुवंशिक पृष्ठभूमि पर या किसी भी पोषण के साथ उपयोग किया जा सकता है। डेटा विश्लेषण स्क्रिप्ट उन अनुसंधान समूहों द्वारा विश्लेषण की सुविधा के लिए प्रदान की जाती हैं जो डेटा विश्लेषण में कम अनुभवी हैं। उम्मीद है, यह विस्तृत प्रोटोकॉल और डेटा विश्लेषण स्क्रिप्ट अन्य प्रयोगशालाओं को चयापचय और अन्य अनुसंधान क्षेत्रों में अपने प्रयोगों में ग्लूकोज को मापने में सक्षम करेगी।
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Disclosures
लेखकों के पास खुलासा करने के लिए हितों का कोई टकराव नहीं है।
Acknowledgments
हम उपयोगी चर्चा ओं के लिए डीवीर मिंट्ज़ डीवीएम और पशु सुविधा में पशु चिकित्सा और पशुपालन कर्मचारियों के साथ-साथ हमारे समूह के सदस्यों को धन्यवाद देते हैं। इस अध्ययन को इजरायल साइंस फाउंडेशन अनुदान 1541/21 द्वारा समर्थित किया गया था, जो डीबीजेड को दिया गया था।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 2% Chlorhexidine Gluconate and 70% Isopropyl Alcohol | 3M | ID 7000136290 | |
| 5% Dextrose and 0.45% Sodium Chloride Injection, USP | Braun | L6120 | |
| Castroviejo needle holder | FST | 12061-02 | |
| Extra Fine Bonn scissors | FST | 14084-08 | |
| FreeStyle Libre 1 reader | Abbott | ART27543 | |
| FreeStyle Libre sensor | Abbott | ART36687 | |
| FreeStyle Libre sensor applicator | Abbott | ART36787 | |
| Gauze pads | Sion medical | PC912017 | |
| Graefe Forceps | FST | 11052-10 | |
| Hair Removal Cream | Veet | 3116523 | |
| High-fat high-sucrose diet | Envigo Teklad diets | TD.08811 | |
| Isoflurane, USP Terrell | Piramal | 26675-46-7 | |
| Meloxicam 5 mg/mL | Chanelle Pharma | 08749/5024 | |
| MiniARCO Clipper kit | Moser | CL8787-KIT | |
| PROLENE Polypropylene Suture 5-0 | Ethicon | 8725H | |
| Puralube Opthalmic Ointment | Perrigo | 574402511 | |
| Q-tips | B.H.W | 271676 | |
| SomnoSuite Low-Flow Anesthesia System | Kent Scientific | SOMNO |
References
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