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JoVE Journal
Genetics
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JoVE Journal Genetics
Applicazione dell'interferenza CRISPR (CRISPRi) per il silenziamento genico nelle specie patogene di Leptospira
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Applicazione dell'interferenza CRISPR (CRISPRi) per il silenziamento genico nelle specie patogene di Leptospira

Article DOI: 10.3791/62631-v • 14:49 min • August 14th, 2021
August 14th, 2021 •
1,2, 1, *2, *1
1Infectious Bacterial Diseases Research Unit, National Animal Disease Center, Agricultural Research Service, United States Department of Agriculture, 2Laboratório de Desenvolvimento de Vacinas, Instituto Butantan
* These authors contributed equally

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Qui viene descritta l'applicazione dell'interferenza CRISPR (CRISPRi) per un silenziamento genico specifico nelle specie di Leptospira. Le cellule leptospira sono trasformate coniugando con plasmidi che esprimono dCas9 (cas9 cataliticamente "morto") e un RNA a guida singola (sgRNA), responsabile dell'accoppiamento di base al bersaglio genomico desiderato. Vengono presentati metodi per convalidare il silenziamento genico.

Tags

Genetica Numero 174 Leptospira,leptospirosi mutagenesi interferenza CRISPR silenziamento genico coniugazione
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