القرنية هي فريدة من نوعها من حيث أنها تفتقر إلى أنسجة الأوعية الدموية. ومع ذلك ، يمكن أن يكون ذلك حافزا قويا نمو الاوعية الدموية والبقاء في القرنية بسبب عوامل عائية قوية. لذلك ، يمكن للقرنية توفير معنا أداة قيمة للدراسات عائية. هذا البروتوكول يوضح كيفية تنفيذ نموذج الفأر من مقايسة جيب القرنية وكيفية تقييم الأوعية الدموية التي تسببها عوامل عائية باستخدام هذا النموذج.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
نموذج الفأر من القرنية الفحص جيب للدراسة الأوعية الدموية
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
والقرنية الطبيعي هو واضح للأنسجة الأوعية الدموية. ومع ذلك ، يمكن أن يتسبب الأوعية الدموية على النمو والبقاء على قيد الحياة في القرنية عندما تدار عائية العوامل القوية 1. وقد جعل هذا التفرد في مقايسة القرنية جيب واحد من النماذج الأكثر استخداما للدراسات الأوعية الدموية. القرنية يؤلف عدة طبقات من الخلايا. ولذلك فمن الممكن تضمين بيليه الذي يحتوي على عامل عائية من الاهتمام في القرنية للتحقيق في تأثيره 2،3 عائية. هنا ، ونحن نقدم خطوة خطوة من خلال مظاهرة لكيفية (I) تنتج عامل المحتوية عائية بيليه (II) تضمين بيليه في القرنية (III) تحليل الأوعية الدموية الناجمة عن معامل عائية من الفائدة. ومن المعروف منذ نمو الخلايا الليفية الأساسية عامل (bFGF) باعتباره واحدا من العوامل عائية أقوى 4 ، يتم استخدامه هنا للحث على الأوعية الدموية في القرنية.
البروتوكول
جميع المعدات والكواشف المستخدمة معقمة. وكان البروتوكول التي وافقت عليها رعاية الحيوان واستخدام اللجنة (لاعب) في NEI / المعاهد الوطنية للصحة (الحيوان بروتوكول الدراسة NEI - 553) ، وأجريت وفقا للمبادئ التوجيهية المعاهد الوطنية للصحة واللوائح.
1. إنتاج عامل عائية تحتوي على كريات
في هذا الجزء ، يتم إعداد الكريات تحتوي على عامل عائية من الفائدة.
- جعل 10 ٪ (W / V) حل sucralfate مع برنامج تلفزيوني. مخزن تحت درج....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
وكان أول وصف الجيب القرنية الفأر نموذج الفحص في عام 1979 من قبل VR Muthukkaruppan وأورباخ R 6. وقد نشرت البروتوكولات مفصلة من قبل مختبرات مختلفة 2،3،7،8. عدلت مختبرنا وتستخدم هذه الطريقة في دراساتنا لسنوات عديدة 4. جيب القرنية فحص الفأر هو نموذج بسيط نسبيا مع استنساخ كبير. ميزة أخرى لهذا النموذج هو أنه منذ القرنية تفتقر عادة الأوعية الدموية ، وليس هناك حد أدنى من الخلفية في هذا الاختبار. لذلك ، ويشيع استخدام هذا النموذج من حقل لدراسة تأثير العوامل .......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الإعلان عن أي تضارب في المصالح.
شكر وتقدير
ويدعم بحثنا عن برنامج بحوث جماعية لل، المعاهد الوطنية للصحة المعهد الوطني للعيون.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| معدات | شركة | فهرس العدد | |
| تشريح المجهر | العالم آلات دقيقة | PZMIV - BS | |
| فون سكين الساد غريف (شفرة 1.5x25mm ، شقة) | رهوان الجراحية | 3401E | |
| دومون # 5 ملقط | أدوات العلوم غرامة | 11252-50 | |
| مصباح شقي | زايس | 30 SL - M |
الجدول 1. معدات
| الكاشف | شركة | كتالوج # | تعليقات |
|---|---|---|---|
| bFGF (عامل نمو الخلايا الليفية الأساسية) | PEPROTECH INC. | 100 - 18B | |
| Sucralfate (السكروز octasulfate الألومنيوم المعقدة) | سيغما | S0652 | 10 ٪ في برنامج تلفزيوني |
| HEMA بولي (بولي (2 - هيدروكسي إيثيل ميتاكريليت)) | سيغما | P3932 | 12 ٪ في الإيثانول |
الجدول 2. الكواشف والمواد
المراجع
- Cao, Y., Linden, P., Shima, D., Browne, F., Folkman, J. In vivo angiogenic activity and hypoxia induction of heterodimers of placenta growth factor/vascular endothelial growth factor. The Journal of clinical investigation. 98, 2507-2511 (1996).
- Rogers, M. S., Birsner, A. E., D'Amato, R. J.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
