يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

التحويرات البيئية لعدد من الدماغ المتوسط ​​الدوبامين العصبية في الفئران الكبار

8.4K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/52329

⸱

يناير 20, 2015

 ,  ,  ,  ,  , 
1Florey Institute of Neuroscience and Mental Health, The University of Melbourne

في هذه المقالة

ملخص

يصف هذا البروتوكول تلاعبين بيئيين مختلفين وبروتوكول ضخ الدماغ المتزامن لدراسة تغيرات الدماغ التي يسببها البيئة الكامنة وراء السلوك التكيفي وإصلاح الدماغ في الفئران البالغة.

الملخص

تغييرات طويلة الأمد في الدماغ أو "اللدونة الدماغ تكمن وراء السلوك التكيفي وإصلاح الدماغ بعد مرض أو إصابة. وعلاوة على ذلك، يمكن التفاعل مع بيئتنا لحث اللدونة الدماغ. على نحو متزايد، والبحث هو محاولة لتحديد أي بيئات تحفيز الدماغ اللدونة مفيدة لعلاج المخ والاضطرابات السلوكية. ووصف اثنان من التلاعب البيئية التي تزيد أو تنقص عدد التيروزين هيدروكسيلاز immunopositive (TH +، الانزيم-الحد من معدل الدوبامين في (DA) التوليف) الخلايا العصبية في الدماغ المتوسط ​​الماوس الكبار. تضم أول الاقتران الذكور وإناث الفئران معا بشكل مستمر ل1 أسبوع، مما يزيد TH الدماغ المتوسط ​​+ الخلايا العصبية قبل ما يقرب من 12٪ في الذكور، ولكن يقلل TH الدماغ المتوسط ​​+ الخلايا العصبية قبل ما يقرب من 12٪ في الإناث. وتضم الثانية الفئران الإسكان مستمر لمدة 2 أسابيع في "بيئات المخصب" (EE) التي تحتوي على عجلات الجري واللعب والحبال ومواد التعشيش، الخ، والتي طncreases TH الدماغ المتوسط ​​+ الخلايا العصبية قبل ما يقرب من 14٪ في الذكور. بالإضافة إلى ذلك، يتم وصف بروتوكول للغرس في وقت واحد العقاقير مباشرة في الدماغ المتوسط ​​خلال هذه المناورات البيئية للمساعدة على تحديد الآليات الكامنة التي يسببها للبيئة اللدونة الدماغ. على سبيل المثال، ألغت EE-تحريض المزيد من TH الدماغ المتوسط ​​+ الخلايا العصبية التي كتبها الحصار المتزامن لمدخلات متشابك على الخلايا العصبية الدماغ المتوسط. معا، وهذه البيانات تشير إلى أن المعلومات عن البيئة وترحيل عن طريق إدخال متشابك إلى الخلايا العصبية الدماغ المتوسط ​​لتشغيل أو إيقاف التعبير عن الجينات "DA". وهكذا، والتحفيز البيئي المناسب، أو استهداف الآليات الكامنة وراء المخدرات، قد يكون من المفيد لعلاج اضطرابات الدماغ والسلوكية المرتبطة الاختلالات في الدماغ المتوسط ​​DA (مثل مرض باركنسون، نقص الانتباه وفرط النشاط، والفصام، وإدمان المخدرات).

المقدمة

ويعتقد DArgic إشارات من قبل الخلايا العصبية في المنطقة البطنية السقيفية (VTA) وsubstantia بارس السوداء المكتنزة (SNC) من المخ الأوسط إلى أن تكون مهمة لالسلوكيات المعرفية والانفعالية والحركية لديهم دوافع مكافأة. ومع ذلك، الكثير أو القليل جدا الدماغ المتوسط ​​مما يشير DA يسبب العديد من الأعراض تعطيل في مجموعة متنوعة من الاضطرابات العصبية (مثل مرض باركنسون، نقص الانتباه وفرط النشاط، والفصام، وإدمان المخدرات). الأدوية التي تزيد أو تنقص DA يشير تخفيف هذه الأعراض، إلا أنها تنتج أيضا من الآثار الجانبية التي تعزى إلى إشارات dysregulated وبعيدا عن الهدف الآثار. ينخفض ​​نجاعة الأدوية أيضا بمرور الوقت نتيجة للردود التعويضية من الدماغ. وبالتالي فإن التحدي يكمن في استعادة العادية الدماغ المتوسط ​​مما يشير DA بطريقة أكثر استهدافا والفسيولوجية، واتباع نهج المفضل هو عن طريق زيادة أو خفض عدد الخلايا العصبية DA الدماغ المتوسط.

تم الأدلة تتراكم لبغازيعقود األطراف أن التعبير عن الجينات والبروتينات المشاركة في التأييض والاتجار DA والكاتيكولامينات أخرى في خلايا بالغة ناضجة للتعديل (مراجعة في 1). في المخ الأوسط، وعدد من التيروزين هيدروكسيلاز immunopositive (TH +، الانزيم معدل الحد في DA التوليف) الخلايا العصبية يقلل ثم الزيادات التالية إدارة عصبي 2،3، في حين أن عدد TH immunonegative (TH-) الخلايا العصبية يظهر نمط المعاكس (أي زيادات ثم يقلل 3). وهذا يتفق مع فقدان ثم كسب من "النمط الظاهري DA" من قبل بعض الخلايا. كما تم عرض عدد من TH + وTH- SNC الخلايا العصبية لتغيير في اتجاهات متساوية ولكن المعاكس التالية العلاجات المختلفة التي تغير النشاط الكهربائي لهذه الخلايا 4،5. على سبيل المثال، والتسريب للتصرف صغير والبوتاسيوم تنشيط الكالسيوم (SK) قناة خصم أبامين في المخ الأوسط لمدة 2 أسابيع يقلل من عدد من TH + وزيادات (بنفس المقدار) للنوmber من TH- SNC الخلايا العصبية 4،5. في المقابل، ضخ SK قناة ناهض 1-EBIO يزيد من عدد TH + والنقصان (بنفس المقدار) عدد الخلايا العصبية TH- SNC 4،5. وشوهدت تغييرات مماثلة التالية مجموعة متنوعة من العلاجات التي تستهدف SNC نشاط الخلايا العصبية، بما في ذلك بعض التي استهدفت المدخلات وارد 4. هذه اللائحة واضح من عدد من الخلايا العصبية SNC DArgic بواسطة نشاط الخلايا العصبية والمدخلات وارد يثير احتمال أن البيئة أو السلوك يمكن أن تؤثر على عدد الخلايا العصبية SNC. في الواقع الفئران البالغة تتعرض لبيئات مختلفة لديها أكثر أو أقل الدماغ المتوسط ​​(SNC وVTA) TH + الخلايا العصبية، وعلى الأقل بعض من هذه التغييرات الناجمة عن البيئة وألغيت من قبل الحصار المتزامن لمدخلات متشابك في المخ الأوسط 6. أهداف هذه الاتصالات هي: (1) تقديم مزيد من التفاصيل حول كيفية تنفيذ التلاعب البيئية لدينا وضخ المخدرات؛ و (2) تقديم المزيد من البيانات الداعمة خلاف في أن البريدnvironment ينظم عدد من الخلايا العصبية DA الدماغ المتوسط، عن طريق إدخال ارد.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

ملاحظة: تمت الموافقة على جميع الإجراءات التجريبية على الحيوانات من قبل معهد فلوري الصحة جنة الأخلاقيات الحيوانية العلوم العصبية والعقلية ومطابقة للمجلس الوطني للبحوث الطبية الصحة واستراليا ونشرت مدونة الممارسات لرعاية واستخدام الحيوانات لأغراض علمية (7 الطبعة، 2004).

1. التلاعب البيئية

  1. الاقتران بين الجنسين
    1. استخدام ناضجة جنسيا (> 8 أسبوع من العمر)، العمر المتطابقة من الذكور وإناث الفئران.
      ملاحظة: نحن عادة استخدام C57BL / 6 الفئران، ولكن كان لها نفس النتائج باستخدام الفئران السويسرية في هذا البروتوكول. نحن عادة استخدام ن = 8 ذكور و n = 8 إناث لكل تجربة، وتنقسم الى ن = 2 أزواج بين الذكور (ن = 4 ذكور)، ن = 2 أزواج الإناث الإناث (ن = 4 إناث)، و n = 4 أزواج الذكور الإناث (ن = 4 ذكور و n = 4 إناث).
    2. لدى وصوله إلى، بيت جماعة منشأة عقد الحيوان الفئران حسب الجنس ل> 3 أيام إلى التأقلم. هنا وماراالحوت الاقتران بين الجنسين، والحفاظ على المحفزات البيئية دخيلة (مثل درجة الحرارة المحيطة، وعلى ضوء: دورة الظلام، والغذاء، والماء، ومناولة والتنظيف) ثابتة أو توزيع بالتساوي على جميع الفئران.
    3. عشوائيا تعيين كل الماوس إلى الزوج بين الذكور، وزوج والإناث الإناث، أو زوج بين الذكور والإناث. وضع كل زوج في قفص نظيفة في العزلة (2 الفئران / القفص) مع libitum الإعلانية الحصول على الغذاء والماء، وببساطة إيوائهم في هذا الطريق بشكل مستمر لمدة 7 أيام.
      ملاحظة: تربية الحيوانات الروتينية على ما يرام خلال هذه الفترة ولكن يجب أن توزع بالتساوي على جميع الفئران. الحرص على تجنب الاقتران من تتزاحم من الذكور والإناث.
  2. الإثراء البيئي
    1. استخدام ناضجة جنسيا (> 8 أسبوع من العمر)، ذكرا أو أنثى الفئران العمر المتطابقة.
      ملاحظة: نحن عادة استخدام ن = 18 الفئران لكل تجربة، وتنقسم الى مجموعة ن = 6 / العلاج.
    2. لدى وصوله إلى مركز الاحتجاز الحيوان الاحتفاظ بها في مستوى مماثل، يضم مجموعة تؤوي (SH) (على سبيل المثال انظر أدناه) الظروف في هذه المرحلة ل> 3 أيام إلى التأقلم. هنا وكافة مراحل التجربة، والحفاظ على المحفزات البيئية دخيلة (مثل درجة الحرارة المحيطة، وعلى ضوء: دورة الظلام، والغذاء، والماء، ومناولة والتنظيف) ثابتة أو توزيع بالتساوي على جميع الفئران.
    3. لبدء تخصيب البيئي، وتعيين عشوائيا كل فأر إلى واحدة من 3 مجموعات: SH. تشغيل عجلة (RW)، أو البيئة التخصيب (EE)، ووضع كل مجموعة من الفئران معا في قفص نظيفة متطابقة مع libitum الإعلانية الحصول على الغذاء والماء.
      واستخدمت هنا، وأقفاص أكبر قابضة الفئران لجميع الفئات، وقياس 27 سم، 42 سم، 16 سم وعميقة: ملاحظة.
      1. وبالإضافة إلى ذلك، توفر الشروط التالية البيئية لكل مجموعة: SH تضم القمامة فقط (الكريات الورق أو نشارة الخشب) على الأرض. RW SH تضم بالإضافة إلى 2 تشغيل عجلات. EE تضم RW بالإضافة إلى اللعب (الحبال والسلالم، والأنفاق، وأشياء مثل لفات منشفة ورقية فارغة وقطع من المناديل الورقية) التي لالسابق plore واللعب والتسلق، إخفاء، والعش.
      2. إيوائهم في هذا الطريق بشكل مستمر لمدة 14 يوما.
        ملاحظة: تربية الحيوانات الروتينية على ما يرام خلال هذه الفترة ولكن يجب أن توزع بالتساوي على جميع الفئران.
    4. الفئران EE تخضع لالإضافي "سوبر لتخصيب" (SE) عن طريق وضعها معا في قفص أكبر تحتوي على ألعاب جديدة ل1hour / يوم (نفس الساعة كل يوم)، 5Days و/ الأسبوع.
      ملاحظة: وهنا، تم استخدام 46 سم، 69 سم، 40 سم وعمق الحوض البلاستيك.
      1. الحفاظ على الجدة من خلال تقديم مجموعة مختلفة من اللعب كل دورة. اللعب النظيف التي سيتم إعادة عرض على الفئران مع الماء والصابون و 80٪ من الإيثانول لإزالة الروائح.
      2. وبعد كل دورة SE، وعودة الفئران إلى قفص EE بهم. مقبض SH وRW الفئران نفس الفئران SE (باستثناء SE نفسه) طوال هذه الفترة (مثل إزالة ويعود كل SH وRW الماوس من وإلى قفصه).

الحمار = "jove_title"> 2. مضخة ناضح والدماغ تسريب قنية يزرع لتسريب المخدرات

  1. إعداد
    1. استخدام معقم المضخات الأسموزية ومجموعات ضخ الدماغ، وهي متوافرة تجاريا. قبل يوم واحد زرع، وذلك باستخدام تقنية العقيم، ورئيس يزرع عن طريق ملء كل مضخة، وربط أنبوب وقنية مع محلول معقم المخدرات أو مركبة (كما هو موضح في التعليمات المرفقة مع مضخات). ربطها معا واحتضان في المياه المالحة عقيمة بين عشية وضحاها في 37 درجة مئوية. احتضان يزرع بالمخدرات وشغل السيارة بشكل منفصل لتجنب التلوث المتبادل.
  2. الجراحة.
    ملاحظة: اعتمادا على البلد من مجرب، يطلب تصاريح التجارب على الحيوانات خاصة أو علاوات لمتابعة مثل هذه الأنواع من الجراحة والتجارب اللاحقة للعمليات الجراحية.
    1. تعقيم جميع المعدات الجراحية وتوظيف تقنية العقيم طوال الوقت. تخدير ماوس (على سبيل المثال باستخدام 1-2٪ isofluorane في الهواء) ووضعه في الستير متر مكعبheadframe otaxic. تحقق من عمق التخدير في جميع أنحاء الداخلي وإدارة المزيد من مخدر حسب الضرورة (على سبيل المثال غياب الطرف الانسحاب الضارة مخلب قرصة يدل على التخدير الكافي). ضمان العينين محمية من جفاف بواسطة مرهم العين زيوت التشحيم، وأن درجة حرارة الجسم الماوس، لا يزال طبيعي في جميع أنحاء الداخلي.
    2. جعل شق خط الوسط من خلال الجلد بدءا من بين العينين والانتهاء من 2 سم خلفي إلى الحافة الخلفية للجمجمة. بلانت تشريح الجلد بعيدا عن اللفافة الكامنة أسفل الجزء الخلفي من الماوس لخلق "جيب" تحت الجلد واسع بما يكفي لتناسب بشكل مريح المضخة ويربط أنبوب مرة واحدة هو مزروع قنية (لا ينبغي أن تكون عازمة أنبوب يربط عند الانتهاء). كشط مسح لفافة من خلال الجانب الظهري من الجمجمة.
    3. باستخدام ما يقرب من 1.5 مم لدغ الأسنان، انتقل لأسفل في الجمجمة في التجسيمي المناسب ينسق شntil لذلك، طبقة رقيقة مرنة العظام لا يزال قائما. قشر هذه الطبقة بعيدا باستخدام ملقط غرامة (هذا يتجنب الإضرار الكامنة جافية والدماغ مع لدغ الأسنان). يتم تنظيف ضمان الجمجمة من أي شظايا الدم والعظام، وأنه لا يوجد المزيد من النزيف.
    4. مع قنية التي عقدت من قبل صاحب قنية، ووضع مضخة وأنابيب يربط في "جيب" تحت الجلد المغطي الظهر الفأر. التالي، ضع غيض من قنية في الإحداثيات التجسيمي المناسبة وعلى سطح الدماغ. خفض بعناية قنية في الدماغ ولكن توقف حوالي 1 مم قصيرة من العمق المطلوب.
      ملاحظة: سيتم التفاوض عمق المتبقية بعد تطبيق الطبقة الأولى من الاكريليك الأسنان.
    5. ضمان مرة أخرى على سطح الجمجمة نظيف وجاف، ثم إعداد كمية صغيرة من الاكريليك الأسنان واستخدام المسواك لتسهيل ذلك على المنطقة بأكملها المكشوفة من الجمجمة، بما في ذلك في لدغ حفرة من خلال الجمجمة حوالي عشرالبريد قنية. قبل أن يصلب الاكريليك، وانخفاض قنية ترجيح كفة عمق المتبقية إلى الهدف.
    6. إعداد حجم صغير آخر من الاكريليك الأسنان وطبقة هذا خلال أول، وكذلك على دعم من البلاستيك الأبيض للقنية، لإصلاح قنية في المكان. كرر مع طبقات إضافية من الاكريليك عند الضرورة.
    7. مرة واحدة وشددت على الاكريليك، وإزالة بعناية حامل قنية وقطع من البلاستيك الأبيض علامة التبويب قنية القابلة للإزالة باستخدام شفرة مشرط ساخنة مع لهب البوتان. وأخيرا، خياطة الجلد مغلقة خلال زرع بأكمله.
  3. العلاج بعد الجراحة للحيوانات
    1. تطبيق مرهم مطهر إلى هوامش الجلد، وإدارة مضاد للالتهابات إلى الماوس (على سبيل المثال ميلوكسيكام، 3 ملغ / كلغ SC). إزالة الماوس من الإطار، ووضعه تحت مصباح الحرارة، ومراقبة حتى يستعيد وعيه. لا يعودون ماوس أن خضع لعملية جراحية للشركة من الحيوانات الأخرى حتى تعافى تماما.
      ملاحظة: إكسبالتلاعب erimental مثل الاقتران بين الجنسين وإثراء البيئة يمكن أن تبدأ أو تستأنف في اليوم التالي لعملية جراحية في أقرب وقت ممكن.
    2. مراقبة وزن الجسم والسلوك العام والمظهر يوميا. علاج علامات للعدوى (مثل تورم، احمرار، صديد) حول الشقوق الجراحية مع مرهم مطهر موضعي. علاج أي علامات المرض والألم والإجهاد أو عدم الراحة (مثل فقدان> 10٪ من وزن الجسم، والانسحاب الاجتماعي، وعدم الاستمالة، و"النفش"، ضعف الحركة، والمضبوطات) مع المسكنات و / أو المضادات الحيوية الجهازية عند الضرورة.
    3. الموت ببطء الفئران إذا> 15٪ وفقدان الوزن أو أعراض المرض والألم والإجهاد أو عدم الراحة غير قابلة للاسترداد ضمن 1 أسبوع من العلاج العلاجية.

3. الدماغ الأنسجة إعداد وتجهيز المناعى، والتجسيم

  1. نضح
    1. بعد التلاعب / المخدرات البيئية على الفور، وإعداد الدماغ للدراسة.
      ملاحظة: في التجارب ذكرت هنا تم قياس عدد SNC TH + الخلايا العصبية ومقارنة في كل مجموعة من المجموعات معاملة مختلفة.
    2. أولا إدارة جرعة زائدة من مخدر لقتل الفئران (على سبيل المثال 100 ملغ / كغ الملكية الفكرية الصوديوم بنتوباربيتون). مرة واحدة تخدير ولكن قبل توقف القلب النابض، ووضع الماوس على ظهرها وربطة عنق أو ماهيتها سواء الأمامية.
    3. باستخدام مشرط قطع الجلد المغطي القفص الصدري ثم شق طريق العضلات أسفل القفص الصدري في تجويف البطن. وضع المشبك على عملية الخنجري من القفص الصدري ورفع القفص الصدري وحتى بعيدا من الكبد تعريض الحجاب الحاجز.
    4. قطع طريق الحجاب الحاجز وخلال الأضلاع أفقيا على كلا الجانبين باستخدام مقص كبيرة حتى يمكن طيها القفص الصدري إلى الوراء على رأسه لفضح الرئتين والقلب. باستخدام مقص غرامة إجراء شق صغير في الأذين الأيمن كنقطة خروج الدم والحلول perfused ل، ثم قطع طريق قاعدة ventri الأيسرشركة كلي ووضع قنية من خلال البطين الأيسر، الأذين الأيسر، وإلى الشريان الأورطي.
    5. المشبك قنية في مكان دافئ ثم ضخ (37 ° C) heparinized و 0.1 M الفوسفات مخزنة المالحة الفسيولوجية (PBS) من خلال الأوعية الدموية حتى حل الخروج من الأذين الأيمن هي خالية تماما من الدم. وبعد ذلك، ضخ الباردة (4 ° C) تثبيتي الحل (مثل بارافورمالدهيد 4٪ في PBS) من خلال الأوعية الدموية حتى يتم إصلاح الماوس كله أيضا. إزالة الدماغ ومكان في برنامج تلفزيوني مع 30٪ سكروز لمدة 2-3 أيام حتى المصارف الدماغ.
      ملاحظة: يمكن تطبيق أنواع أخرى من إعداد الأنسجة اعتمادا على الخبرة في المختبر المقابل.
  2. إعداد العائمة الحرة Cryosections
    1. قطع الأجزاء المتسلسلة من خلال مناطق الدماغ من الفائدة وجمع هذه في برنامج تلفزيوني.
      ملاحظة: نحن خفض 40 ميكرون أبواب سميكة باستخدام ناظم البرد. قد يتم تطبيق أنواع أخرى من باجتزاء الأنسجة اعتمادا على الخبرة في correspondiنانوغرام المختبر.
  3. المناعية
    1. أداء المناعية قياسية لالبروتينات المثيرة للاهتمام. احتضان المقاطع في 5٪ مصل الماعز العادي و 0.3٪ تريتون X-100 في برنامج تلفزيوني في درجة حرارة الغرفة لمدة 30 دقيقة، ثم immunoreact مع الأرنب بولكلونل مكافحة TH (1: 400) في 4 درجة مئوية لمدة 48 ساعة، ثم بولكلونل المعقدة البيروكسيديز المضادة الماعز -rabbit (1: 1،000) في درجة حرارة الغرفة لمدة 2 ساعة.
    2. وبعد ذلك، في احتضان أفيدين-البيروكسيديز (1: 500) في درجة حرارة الغرفة ل1hr، ثم في الكوبالت والنيكل تكثيف دي أمينو-البنزيدين (0.5 ملغ / مل) في درجة حرارة الغرفة ل18-20 دقيقة. ل3-5 دقائق الأخيرة من الحضانة-دي أمينو البنزيدين إضافة بيروكسيد الهيدروجين (0.01٪) لتحفيز هطول الأمطار chromagen. غسل أقسام ثلاث مرات لمدة 10min كل في برنامج تلفزيوني قبل، وبعد، وبين كل خطوة من الخطوات المذكورة أعلاه.
    3. جبل الأقسام على الشرائح المجهر مهيلم، الهواء الجاف ثم نيسل وصمة عار (أحمر محايد)، يذوى في الكحول، واضحة (X-3B)، وساترة.
    4. التجسيم
    1. تقدير العدد الإجمالي للTH + وTH- SNC (وVTA وLC) الخلايا العصبية باستخدام أساليب stereological متحيزة. تأكد من أن stereologist هو أعمى للعلاج الواردة. استبعاد الدبقية على أساس قطر سوما <5 ميكرون والاعتماد فقط تلك الخلايا مع نواة مرئية.
    2. تحديد SNC (وVTA وLC) من خلال المواقع المكانية للTH + الخلايا والمعالم التشريحية / الحدود وفقا لأطلس الدماغ من Paxinos واتسون 7. عدد TH + الخلايا داخل إطار العد (55 × 55 ميكرون = 3025 ميكرون 2) على فترات محددة مسبقا العادية (س = 140 ميكرون، ذ = 140 ميكرون لSNC؛ العاشر = 100 ميكرون، ذ = 100 ميكرون لVTA وLC) طوال كل نواة في كل قسم الرابع.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

غيرت فئران بالغة تعرض لهذه التلاعبات البيئية أعداد الدماغ المتوسط ​​(SNC وVTA)، ولكن ليس LC، TH + الخلايا العصبية، وEE بالإضافة إلى ضخ الدماغ المتوسط ​​المتزامنة إما بيكروتوكسين أو bicuculline (GABA A مستقبلات) يلغي EE-تحريض أكثر SNC TH + الخلايا العصبية. تم نشر هذه البيانات من قبل في 6. تم تجميع البيانات الحالية في التجارب تكرار تنفيذها كجزء من تلك الدراسة السابقة، ولكن لم تنشر في أي مكان آخر.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

التلاعب البيئية

وكان الدافع وراء تصميم هذه التلاعبات البيئية (مزاوجة بين الجنسين والإثراء البيئي) لتحديد ما إذا كانت البيئة، و / أو السلوك بدافع البيئة، ويرتبط مع التغيرات في عدد الخلايا العصبية DA الدماغ المتوسط. كان التركيز بالتالي على توفير بيئات وتحفيز السلوكيات التي من المحتمل أن تشارك الدماغ المتوسط ​​مما يشير DA. وشملت هذه الاقتران مع الجنس الآخر، والإثراء البيئي تضم الوصول إلى تشغيل العجلات، والح...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

شكر وتقدير

تم دعم هذه الدراسة من قبل منحة مشروع المجلس الوطني للصحة والبحوث الطبية في أستراليا (NHMRC) 1022839. AJH هو زميل FT3 المستقبلي التابع لمجلس البحوث الأسترالي (ARC) (FT100100835). يقر معهد فلوري لعلم الأعصاب والصحة العقلية بالدعم المقدم من منحة دعم البنية التحتية التشغيلية لحكومة فيكتوريا.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
IsofluoraneBaxter Healthcare Pty Ltd ، باكستر درايف ، نيو ساوث ويلز 2146 ، أسترالياAHN3640
ALZET مضخة تناضحية 1002DURECT Corporation ، ص.ب 530 كوبرتينو ، كاليفورنيا 95015-05300004317
طقم تسريب الدماغ ALZET 1DURECT Corporation ، ص.ب 530 كوبرتينو ، كاليفورنيا 95015-05300004760
حامل قنية ALZET 1شركة DURECT ، ص.ب 530 كوبرتينو ، كاليفورنيا 95015-05300008860
Vertex Monomer ذاتي المعالجة (مذيب أكريليك الأسنان)Vertex Dental ، Postbus 10 ، 3700 AA ZEIST ، هولنداغير / أ
Vertex Self Curing (مسحوق أكريليك الأسنان)Vertex Dental ، Postbus 10 ، 3700 AA ZEIST ، هولنداn / a
METACAM (Meloxicam)مختبرات تروي ، 98 لونغ ستريت ، سميثفيلد نيو ساوث ويلز 2164 أسترالياL10100
بنتوباربيتون الصوديومLethabarb ، Virbac ، Milperra ، نيو ساوث ويلز ، أستراليا571177
مصل الماعز العاديchemicon-temecula ، CAS26 لتر
Triton X-100Merck Millipore Headquarters , 290 Concord road, Billerica, MA 018211.08603.1000
الأرانب متعددة النسيلة المضادة للتيروزين هيدروكسيلازMerck Millipore Headquarters , 290 طريق كونكورد, Billerica ، MA 01821AB152
الماعز متعدد النسيلة البيوتينيل المضاد للأرانبDako Australia Pty. Ltd. ، Suite 4 ، المستوى 4 ، 56 شارع بيري ، شمال سيدني ، نيو ساوث ويلز ، أستراليا 2060EO432
Avidin peroxidaseSigma-aldrich ، Castle Hill ، NSW 1765 AUA3151-1mg
Diamino-benzidineSigma-aldrich ، Castle Hill ، NSW 1765 AUD-5637
محقق ستيريوMicroBrightField Bioscience ، 185 Allen Brook Lane ، Suite 101 ، Williston ، VT 05495n / a

المراجع

  1. Aumann, T., Horne, M. Activity-dependent regulation of the dopamine phenotype in substantia nigra neurons. Journal of neurochemistry. 121, 497-515 (2012).
  2. Sauer, H., Oertel, W. H. Progressive degeneration of nigrostriatal dopamine neurons following intrastriatal terminal lesions with 6-hydroxydopamine: a combined retrograde tracing and immunocytochemical study in the rat. Neuroscience. 59, 401-415 (1994).
  3. Stanic, D., Finkelstein, D. I., Bourke, D. W., Drago, J., Horne, M. K. Timecourse of striatal re-innervation following lesions of dopaminergic SNpc neurons of the rat. The European journal of neuroscience. 18, 1175-1188 (2003).
  4. Aumann, T. D., et al. Neuronal activity regulates expression of tyrosine hydroxylase in adult mouse substantia nigra pars compacta neurons. Journal of neurochemistry. 116, 646-658 (2011).
  5. Aumann, T. D., et al. SK channel function regulates the dopamine phenotype of neurons in the substantia nigra pars compacta. Experimental neurology. 213, 419-430 (2008).
  6. Aumann, T. D., Tomas, D., Horne, M. K. Environmental and behavioral modulation of the number of substantia nigra dopamine neurons in adult mice. Brain and behavior. 3, 617-625 (2013).
  7. Paxinos, G., Franklin, K. B. J. The mouse brain in stereotaxic coordinates. , 2nd, Academic Press. (2001).
  8. Schultz, W. Behavioral dopamine signals. Trends in neurosciences. 30, 203-210 (2007).
  9. Sun, P., Smith, A. S., Lei, K., Liu, Y., Wang, Z. Breaking bonds in male prairie vole: long-term effects on emotional and social behavior, physiology, and neurochemistry. Behavioural brain research. 265, 22-31 (2014).
  10. Aponso, P. M., Faull, R. L., Connor, B. Increased progenitor cell proliferation and astrogenesis in the partial progressive 6-hydroxydopamine model of Parkinson's disease. Neuroscience. 151, 1142-1153 (2008).
  11. Frielingsdorf, H., Schwarz, K., Brundin, P., Mohapel, P. No evidence for new dopaminergic neurons in the adult mammalian substantia nigra. Proc Natl Acad Sci U S A. 101, 10177-10182 (2004).
  12. Lie, D. C., et al. The adult substantia nigra contains progenitor cells with neurogenic potential. The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience. 22, 6639-6649 (2002).
  13. Chen, Y., Ai, Y., Slevin, J. R., Maley, B. E., Gash, D. M. Progenitor proliferation in the adult hippocampus and substantia nigra induced by glial cell line-derived neurotrophic factor. Experimental neurology. 196, 87-95 (2005).
  14. Yoshimi, K., et al. Possibility for neurogenesis in substantia nigra of parkinsonian brain. Ann Neurol. 58, 31-40 (2005).
  15. Shan, X., et al. Enhanced de novo neurogenesis and dopaminergic neurogenesis in the substantia nigra of 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine-induced Parkinson's disease-like mice. Stem Cells. 24, 1280-1287 (2006).
  16. Zhao, M., et al. Evidence for neurogenesis in the adult mammalian substantia nigra. Proc Natl Acad Sci U S A. 100, 7925-7930 (2003).
  17. Baker, H., Kawano, T., Margolis, F. L., Joh, T. H. Transneuronal regulation of tyrosine hydroxylase expression in olfactory bulb of mouse and rat. The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience. 3, 69-78 (1983).
  18. Black, I. B., Chikaraishi, D. M., Lewis, E. J. Trans-synaptic increase in RNA coding for tyrosine hydroxylase in a rat sympathetic ganglion. Brain research. 339, 151-153 (1985).
  19. Zigmond, R. E., Chalazonitis, A., Joh, T. Preganglionic nerve stimulation increases the amount of tyrosine hydroxylase in the rat superior cervical ganglion. Neuroscience letters. 20, 61-65 (1980).
  20. Biguet, N. F., Rittenhouse, A. R., Mallet, J., Zigmond, R. E. Preganglionic nerve stimulation increases mRNA levels for tyrosine hydroxylase in the rat superior cervical ganglion. Neuroscience letters. 104, 189-194 (1989).
  21. Richard, F., et al. Modulation of tyrosine hydroxylase gene expression in rat brain and adrenals by exposure to cold. Journal of neuroscience research. 20, 32-37 (1988).
  22. Schalling, M., Stieg, P. E., Lindquist, C., Goldstein, M., Hokfelt, T. Rapid increase in enzyme and peptide mRNA in sympathetic ganglia after electrical stimulation in humans. Proc Natl Acad Sci U S A. 86, 4302-4305 (1989).
  23. Liaw, J. J., He, J. R., Barraclough, C. A. Temporal changes in tyrosine hydroxylase mRNA levels in A1, A2 and locus ceruleus neurons following electrical stimulation of A1 noradrenergic neurons. Brain research. Molecular brain research. 13, 171-174 (1992).
  24. Watabe-Uchida, M., Zhu, L., Ogawa, S. K., Vamanrao, A., Uchida, N. Whole-brain mapping of direct inputs to midbrain dopamine neurons. Neuron. 74, 858-873 (2012).
  25. Tepper, J. M., Lee, C. R. GABAergic control of substantia nigra dopaminergic neurons. Progress in brain research. 160, 189-208 (2007).
  26. Hannan, A. J. Environmental enrichment and brain repair: harnessing the therapeutic effects of cognitive stimulation and physical activity to enhance experience-dependent plasticity. Neuropathology and applied neurobiology. 40, 13-25 (2014).
  27. Nithianantharajah, J., Hannan, A. J. Enriched environments, experience-dependent plasticity and disorders of the nervous system. Nature reviews. Neuroscience. 7, 697-709 (2006).
  28. Chmiel, D. J., Noonan, M. Preference of laboratory rats for potentially enriching stimulus objects. Laboratory animals. 30, 97-101 (1996).
  29. Hanmer, L. A., Riddell, P. M., Williams, C. M. Using a runway paradigm to assess the relative strength of rats' motivations for enrichment objects. Behavior research methods. 42, 517-524 (2010).
  30. Burrows, E. L., McOmish, C. E., Hannan, A. J. Gene-environment interactions and construct validity in preclinical models of psychiatric disorders. Progress in neuro-psychopharmacology & biological psychiatry. 35, 1376-1382 (2011).
  31. Van de Weerd, H. A., Van Loo, P. L. P., Van Zutphen, L. F. M., Koolhaas, J. M., Baumans, V. Strength of preference for nesting material as environmental enrichment for laboratory mice. Applied Animal Behaviour Science. 55, 369-382 (1998).
  32. Rampon, C., et al. Effects of environmental enrichment on gene expression in the brain. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 97, 12880-12884 (2000).
  33. Eckert, M. J., Abraham, W. C. Effects of environmental enrichment exposure on synaptic transmission and plasticity in the hippocampus. Current topics in behavioral neurosciences. 15, 165-187 (2013).
  34. Sztainberg, Y., Chen, A. An environmental enrichment model for mice. Nature protocols. 5, 1535-1539 (2010).
  35. Sale, A., Berardi, N., Maffei, L. Environment and brain plasticity: towards an endogenous pharmacotherapy. Physiological reviews. 94, 189-234 (2014).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم

الإثراء البيئيالاقتران حسب الجنسالعصبونات الموجبة لـ THالتسريب بالمضخة الأسموزيةالجراحة التجسيميةالنقل المشبكي الغابوياللدونة الدماغيةحصار المدخلات المشبكية
التحويرات البيئية لعدد من الدماغ المتوسط ​​الدوبامين العصبية في الفئران الكبار
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.