القياس الكمي القائم على الجسيمات النانوية المترافقة بالأجسام المضادة باستخدام المجهر المجهري للمجال المظلم: إجراء لالتقاط وقياس جسيمات خارجية معينة من سوائل الجسم

الإكسوسومات عبارة عن هياكل صغيرة محاطة بالغشاء تفرزها الخلايا في الفضاء خارج الخلية. توجد الإكسوسومات بكثرة في السوائل الحيوية.

لتحديد والتقاط جسيمات خارجية معينة من سوائل الجسم ، ابدأ بأخذ شريحة مقايسة مناعية متعددة الآبار. تعمل هذه الشريحة بالبروتينات التي تعمل كمستضدات وترتبط بأجسام مضادة معينة.

استكمل الشريحة بمحلول الجسم المضاد الأساسي المطلوب واحتضانه. ترتبط هذه الأجسام المضادة بالمستضدات المطلية مسبقا على سطح الشريحة.

استنشق المحلول المتبقي لإزالة أي أجسام مضادة غير مرتبطة. الآن ، أضف حاجزا حاجب يمنع المستضدات الحرة ، وبالتالي يمنع الارتباط غير المحدد للإكسوسومات.

بعد ذلك ، قم بإزالة المخزن المؤقت المانع ، وقم بتحميل الإكسوسومات التي تحتوي على تعليق المصل على الشريحة ، واحتضنها. هذا يسمح بالارتباط الحصري للإكسوسومات الخاصة بالهدف بالأجسام المضادة الأولية التي تم التقاطها.

بعد ذلك ، قم بتحميل تعليق من الأجسام المضادة الثانوية المترافقة بجسيمات الذهب النانوية على سطح الشريحة. ترتبط هذه الأجسام المضادة بالإكسوسومات المرتبطة مسبقا وتشكل مركب كشف.

أخيرا ، باستخدام ماصة ، تخلص من أي أجسام مضادة ثانوية غير مرتبطة. تصور الشرائح تحت مجهر المجال المظلم. جسيمات الذهب النانوية الموجودة على سطح الإكسوسومات تشتت الضوء وتظهر كبقع مضيئة على الخلفية المظلمة.

لبدء تحضير الشريحة ، قم بتخفيف ال